Y1HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞
货号: MF2362-5000UL 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学
规格信息
品牌: |
Jinpan |
---|---|
CAS: |
N/A |
规格: |
50×100μl |
货期: |
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Y1HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞
货号: MF2362-5000UL 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学
品牌: |
Jinpan |
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CAS: |
N/A |
规格: |
50×100μl |
货期: |
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Y1HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞
货号: MF2362-1000UL 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学
Y1HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞
产品关键词:
GAL4-AbA酵母单杂交系统;Y1HGold;pAbAi;pGADT7;Ar Qual;X-α-Gal ;Aureobasidin A (AbA);金担子素;
产品订购:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-50837765 。
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格(元) |
MF2362-1000UL | Y1HGold Chemically Competent Cell酵母菌化学感受态细胞 | 10×100μl | 290 |
MF2362-5000UL | Y1HGold Chemically Competent Cell酵母菌化学感受态细胞 | 50×100μl | 1320 |
产品组分:
组分编号 | 组分名称 | 保存 |
货号(规格) |
|
MF2362-1000UL | MF2362-5000UL | |||
MF2362-A | Y1HGoldCompetent Cell | -80℃ | 10×100μl | 50×100μl |
MF2362-B | pGADT7 Control Vector (10ng/μl) | -80℃ | 10μl | 10μl |
MF2362-C | Carrier DNA (5μg/μl) | -20℃ | 100μl | 500μl |
MF2362-D | PEG/LiAC Solution | +4℃ | 5ml | 25ml |
产品描述
酵母单杂交是在酵母双杂交的基础上发展起来,不同于双杂交用来研究蛋白-蛋白间的相互作用,单杂交主要用于研究蛋白和DNA的相互作用。
Y1HGold是Clontech GAL4-AbA酵母单杂交系统用的菌株,MATα型,能直接转化质粒进行文库筛选。Y1HGold-GAL4酵母单杂交系统需要两种质粒配套使用,分别为pAbAi和pGADT7。前者筛选标志为Ura,用于表达pBait-AbAi构建子(通过将bait-DNA 单拷贝或串联重复序列克隆到pAbAi载体所得);后者筛选标志为Leu,用于表达GAL4 AD与诱捕蛋白(prey)的融合蛋白。Y1HGold-GAL4酵母单杂交系统的工作原理在于:基因组整合有pBait-AbAi的酵母报告菌株,当诱捕蛋白(prey)结合到诱饵序列(bait-DNA),GAL4 AD会激活AUR1-C报告基因的表达,这一表达使得细胞能够在含筛选抗生素金担子素(Aureobasidin A,AbA)的培养基上生长。与传统的营养缺陷报告基因相比,AUR1-C(AbAr)在很低浓度(100-200 ng/ml)下即可以有效杀死非抗性克隆,大大降低背景克隆生长。这一优势也可降低酵母单杂交假阳性发生的概率。
本品为经特殊工艺制备的Y1HGold酵母菌化学感受态细胞,用pGADT7质粒检测转化效率>104cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存三个月。
基因型
MATα, ura3-52, his3-200, ade2-101, trp1-901, leu2-3, 112, gal4Δ, gal80Δ, met-, MEL1
保存与运输方法
保存:其中感受态细胞按标签注明置于-80℃保存,三个月有效。其他组分按照标签注明保存,一年有效。
运输:干冰运输。
注意事项
1) 最好在冰上融化感受态细胞。
2) 转化高浓度质粒可相应减少用于涂板的菌量。同时转化2-3种质粒可适当增加质粒的用量。
3) Y1HGold对高温敏感,最适生长温度为27-30℃,一旦高于31℃,生长速度和转化率都呈指数下降。
4) 菌落变粉红色并不是污染,而是酵母细胞生长中的一种常见现象。当酵母细胞在平板上培养几天,将平板内的腺嘌呤消耗殆尽,那时酵母试图通过自身代谢途径合成腺嘌呤以供利用。然而,某些菌株ADE2基因被破坏,腺嘌呤合成受阻。且ADE4,5,6,7,8基因均正常。由此,造成中间产物P-ribosylamino imidazole(AIR)在细胞的积累使得菌落变为粉红色。
5) 酵母菌在缺陷培养基上生长速度比YPDA培养基慢,营养缺陷成分越多,生长越慢,以转化涂板为例:涂YPDA平板于29℃,48h培养可见直径1mm克隆;涂SD单缺平板于29℃,48-60h培养可见直径1mm克隆;涂SD双缺平板于29℃,60-80h培养可见直径1mm克隆;涂SD三缺或四缺平板于29℃,80-90h培养可见直径1mm克隆;
6) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1) 取100 µl冰上融化的Y1HGold化学感受态细胞,依次加入预冷的目的质粒2-5 µg,Carrier DNA (95-100℃ 孵育5 min,快速冰浴。重复一次。)10 µl,PEG/LiAc 500µl,用枪吹打几次充分混匀,30℃水浴30 min(在15min时翻转6-8次混匀)。
2) 之后将管子放42℃水浴15 min(在7.5min时翻转6-8次混匀)。
3) 5000 rpm离心40s弃上清,用400 µl ddH2O重悬沉淀,离心30s弃上清。
4) 用50 µl ddH2O重悬,涂板,放入恒温培养箱29℃培养48-96 h。
相关产品
货号 | 名称 | 规格 |
MF2352-1000UL | Y2HGold Chemically Competent Cell酵母菌化学感受态细胞 | 10×100μl |
MF2354-1000UL | Y187 Chemically Competent Cell酵母菌化学感受态细胞 | 10×100μl |
MF2356-1000UL | AH109 Chemically Competent Cell酵母菌化学感受态细胞 | 10×100μl |
MF2362-1000UL | Y1HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 | 10×100μl |
MF2364-1000UL | Y190 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 | 10×100μl |
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MF2360-1000UL | NMY51 Chemically Competent Cell酵母菌化学感受态细胞 | 10×100μl |
JP6303-350G | YPDA Agar Medium YPDA琼脂培养基 | 350g |
JP6304-250G | YPDA Medium YPDA液体培养基 | 250g |
JP6311-467G | Minimal SD Agar Base SD琼脂基础培养基 | 467g |
JP6312-267G | Minimal SD Base SD基础培养基 | 267g |
JP6317-10G | DO Supplement -Leu | 10g |
JP6320-10G | DO Supplement -His/-Leu | 10g |
JP6334-10G | DO Supplement -Leu/-Met/-Trp | 10g |
JP6342-10G | DO Supplement -His/-Leu/-Met/-Trp | 10g |
JP0002-1ML | Aureobasidin A (AbA)金担子素A(1 mg/ml) | 1ml |
MF2501-200T | Yeast Transformation Kit酵母转化试剂盒 | 200T |
品牌: |
Jinpan |
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CAS: |
N/A |
规格: |
10×100μl |
货期: |
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Y2HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞
货号: MF2352-5000UL 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学
Y2HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞
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产品标签
Matchmarker GAL4双杂交系统;Y2HGold;pGBKT7;Y187;pGADT7;AUR1-C;Aureobasidin A(AbA);金担子素;
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
Y2HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 | MF2352-1000UL | 10×100μl | 290 |
MF2352-5000UL | 50×100μl | 1320 |
产品包装
组分编号 | 组分名 | 保存 |
货号(规格) |
|
MF2352-1000UL | MF2352-5000UL | |||
MF2352-A | Y2HGold Competent Cell | -80℃ | 10×100μl | 50×100μl |
MF2352-B | pGADT7 Control Vector (10ng/μl) | -80℃ | 10μl | 10μl |
MF2352-C | Carrier DNA (5μg/μl) | -20℃ | 100μl | 500μl |
MF2352-D | PEG/LiAC Solution | +4℃ | 5ml | 25ml |
保存与运输方法
保存:其中感受态细胞按标签注明置于-80℃保存,三个月有效。其他组分按照标签注明保存,一年有效。
运输:干冰运输。
产品描述
酵母双杂交系统是用于体内研究蛋白相互作用的一种非常便利的工具,常用的如GAL4为基础的双杂交系统,使用酵母转录因子GAL4来检测转录激活后的蛋白相互作用。工作原理为:一个完整的酵母转录因子GAL4由两个可以分开,功能上相互独立的结构域组成,N端有一个147个氨基酸组成的DNA结合域(DNA- BD),C端有一个由113个氨基酸组成的转录激活域(AD)。DB可以识别并结合上游激活序列(UAS),而AD能激活UAS下游基因进行转录,单独的BD或AD不能激活基因转录。正常情况,BD和AD不会结合,将待检测的蛋白质分别与BD和AD融合,形成诱饵融合蛋白(bait-DNA)和诱捕融合蛋白(prey-DNA),只有当诱饵和诱捕蛋白发生相互作用,促使BD和AD的相互接近,形成完整的GAL4,从而激活报告基因的转录。
Y2HGold是GAL4系统酵母双杂交用实验菌株,能直接转化质粒或与MATα型酵母菌株Y187通过接合(mating)操作进行蛋白相互作用验证或双杂交文库筛选和构建。Y2HGold-GAL4酵母双杂交系统需要两种质粒配套使用,分别为pGBKT7和pGADT7。前者筛选标志为Trp1,用于表达DNA-BD与诱饵蛋白(bait)的融合蛋白;后者筛选标志为Leu,用于表达AD与诱捕蛋白(prey)的融合蛋白。Y2HGold有四个报告基因:AUR1-C,HIS3, ADE2, MEL1,分别由三个完全异源的Gal4反应启动元件-G1,G2,M1操控,这三种启动子只有GAL4识别的17bp核心区相同,其余部分都不同,因此大大降低了酵母双杂交假阳性发生的概率。此外,新报告基因AUR1-C与以往的营养缺陷报告基因相比,具有更低背景,这一优势也可降低酵母双杂交假阳性发生的概率。
本品为经特殊工艺制备的Y2HGold酵母菌化学感受态细胞,用pGADT7质粒检测转化效率>104cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存三个月。
基因型
MATa, trp1-901, leu2-3, 112, ura3-52, his3-200, gal4Δ, gal80Δ, LYS2::GAL1UAS-Gal1TATA-His3, GAL2UAS-Gal2TATA-Ade2 URA3::MEL1UAS-Mel1TATAAUR1-C MEL1
注意事项
1. 最好在冰上融化感受态细胞。
2. 转化高浓度质粒可相应减少用于涂板的菌量。同时转化2-3种质粒可适当增加质粒的用量。
3. Y2HGold对高温敏感,最适生长温度为27-30℃,一旦高于31℃,生长速度和转化率都呈指数下降。
4. 菌落变粉红色并不是污染,而是酵母细胞生长中的一种常见现象。当酵母细胞在平板上培养几天,将平板内的腺嘌呤消耗殆尽,那时酵母试图通过自身代谢途径合成腺嘌呤以供利用。然而,某些菌株ADE2基因被破坏,腺嘌呤合成受阻。且ADE4,5,6,7基因均正常。由此,造成中间产物P-ribosylamino imidazole(AIR)在细胞的积累使得菌落变为粉红色。
5. 酵母菌在缺陷培养基上生长速度比YPDA培养基慢,营养缺陷成分越多,生长越慢,以转化涂板为例:涂YPDA平板于29℃,48h培养可见直径1mm克隆;涂SD单缺平板于29℃,48-60h培养可见直径1mm克隆;涂SD双缺平板于29℃,60-80h培养可见直径1mm克隆;涂SD三缺或四缺平板于29℃,80-90h培养可见直径1mm克隆;
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 取100 µl冰上融化的Y2HGold化学感受态细胞,依次加入预冷的目的质粒2-5 µg,Carrier DNA(95-100℃孵育5 min,快速冰浴。重复一次。)10 µl,PEG/LiAc 500µl,用枪吹打几次充分混匀,30℃水浴30 min(在15min时翻转6-8次混匀)。
2. 之后将管子放42℃水浴15 min(在7.5min时翻转6-8次混匀)。
3. 5000 rpm离心40s弃上清,用400 µl ddH2O重悬沉淀,离心30s弃上清。
4. 用50 µl ddH2O重悬,涂板,放入29℃培养48-96 h。
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MF2351-300UL | Y2HGold Yeast Strain酵母双杂交用甘油菌 | 300μl |
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MF2353-300UL | Y187 Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 | 300μl |
MF2354-1000UL | Y187 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 | 10×100μl |
MF2501-200T | Yeast Transformation Kit酵母转化试剂盒 | 200T |
品牌: |
Jinpan |
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CAS: |
N/A |
规格: |
50×100μl |
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Y2HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞
货号: MF2352-1000UL 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学
Y2HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞
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Matchmarker GAL4双杂交系统;Y2HGold;pGBKT7;Y187;pGADT7;AUR1-C;Aureobasidin A(AbA);金担子素;
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产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
Y2HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 | MF2352-1000UL | 10×100μl | 290 |
MF2352-5000UL | 50×100μl | 1320 |
产品包装
组分编号 | 组分名 | 保存 |
货号(规格) |
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MF2352-1000UL | MF2352-5000UL | |||
MF2352-A | Y2HGold Competent Cell | -80℃ | 10×100μl | 50×100μl |
MF2352-B | pGADT7 Control Vector (10ng/μl) | -80℃ | 10μl | 10μl |
MF2352-C | Carrier DNA (5μg/μl) | -20℃ | 100μl | 500μl |
MF2352-D | PEG/LiAC Solution | +4℃ | 5ml | 25ml |
保存与运输方法
保存:其中感受态细胞按标签注明置于-80℃保存,三个月有效。其他组分按照标签注明保存,一年有效。
运输:干冰运输。
产品描述
酵母双杂交系统是用于体内研究蛋白相互作用的一种非常便利的工具,常用的如GAL4为基础的双杂交系统,使用酵母转录因子GAL4来检测转录激活后的蛋白相互作用。工作原理为:一个完整的酵母转录因子GAL4由两个可以分开,功能上相互独立的结构域组成,N端有一个147个氨基酸组成的DNA结合域(DNA- BD),C端有一个由113个氨基酸组成的转录激活域(AD)。DB可以识别并结合上游激活序列(UAS),而AD能激活UAS下游基因进行转录,单独的BD或AD不能激活基因转录。正常情况,BD和AD不会结合,将待检测的蛋白质分别与BD和AD融合,形成诱饵融合蛋白(bait-DNA)和诱捕融合蛋白(prey-DNA),只有当诱饵和诱捕蛋白发生相互作用,促使BD和AD的相互接近,形成完整的GAL4,从而激活报告基因的转录。
Y2HGold是GAL4系统酵母双杂交用实验菌株,能直接转化质粒或与MATα型酵母菌株Y187通过接合(mating)操作进行蛋白相互作用验证或双杂交文库筛选和构建。Y2HGold-GAL4酵母双杂交系统需要两种质粒配套使用,分别为pGBKT7和pGADT7。前者筛选标志为Trp1,用于表达DNA-BD与诱饵蛋白(bait)的融合蛋白;后者筛选标志为Leu,用于表达AD与诱捕蛋白(prey)的融合蛋白。Y2HGold有四个报告基因:AUR1-C,HIS3, ADE2, MEL1,分别由三个完全异源的Gal4反应启动元件-G1,G2,M1操控,这三种启动子只有GAL4识别的17bp核心区相同,其余部分都不同,因此大大降低了酵母双杂交假阳性发生的概率。此外,新报告基因AUR1-C与以往的营养缺陷报告基因相比,具有更低背景,这一优势也可降低酵母双杂交假阳性发生的概率。
本品为经特殊工艺制备的Y2HGold酵母菌化学感受态细胞,用pGADT7质粒检测转化效率>104cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存三个月。
基因型
MATa, trp1-901, leu2-3, 112, ura3-52, his3-200, gal4Δ, gal80Δ, LYS2::GAL1UAS-Gal1TATA-His3, GAL2UAS-Gal2TATA-Ade2 URA3::MEL1UAS-Mel1TATAAUR1-C MEL1
注意事项
1. 最好在冰上融化感受态细胞。
2. 转化高浓度质粒可相应减少用于涂板的菌量。同时转化2-3种质粒可适当增加质粒的用量。
3. Y2HGold对高温敏感,最适生长温度为27-30℃,一旦高于31℃,生长速度和转化率都呈指数下降。
4. 菌落变粉红色并不是污染,而是酵母细胞生长中的一种常见现象。当酵母细胞在平板上培养几天,将平板内的腺嘌呤消耗殆尽,那时酵母试图通过自身代谢途径合成腺嘌呤以供利用。然而,某些菌株ADE2基因被破坏,腺嘌呤合成受阻。且ADE4,5,6,7基因均正常。由此,造成中间产物P-ribosylamino imidazole(AIR)在细胞的积累使得菌落变为粉红色。
5. 酵母菌在缺陷培养基上生长速度比YPDA培养基慢,营养缺陷成分越多,生长越慢,以转化涂板为例:涂YPDA平板于29℃,48h培养可见直径1mm克隆;涂SD单缺平板于29℃,48-60h培养可见直径1mm克隆;涂SD双缺平板于29℃,60-80h培养可见直径1mm克隆;涂SD三缺或四缺平板于29℃,80-90h培养可见直径1mm克隆;
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 取100 µl冰上融化的Y2HGold化学感受态细胞,依次加入预冷的目的质粒2-5 µg,Carrier DNA(95-100℃孵育5 min,快速冰浴。重复一次。)10 µl,PEG/LiAc 500µl,用枪吹打几次充分混匀,30℃水浴30 min(在15min时翻转6-8次混匀)。
2. 之后将管子放42℃水浴15 min(在7.5min时翻转6-8次混匀)。
3. 5000 rpm离心40s弃上清,用400 µl ddH2O重悬沉淀,离心30s弃上清。
4. 用50 µl ddH2O重悬,涂板,放入29℃培养48-96 h。
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MF2351-300UL | Y2HGold Yeast Strain酵母双杂交用甘油菌 | 300μl |
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MF2354-1000UL | Y187 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 | 10×100μl |
MF2501-200T | Yeast Transformation Kit酵母转化试剂盒 | 200T |
品牌: |
Jinpan |
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CAS: |
N/A |
规格: |
10×100μl |
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Y2HGold Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌
货号: MF2351-300UL 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学
Y2HGold Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌
温馨提示
见我司(金畔生物)整理的酵母双杂交(Yeast two-hybrid assay)产品专题。
产品标签
Matchmarker GAL4双杂交系统;Y2HGold;pGBKT7;Y187;pGADT7;AUR1-C;Aureobasidin A(AbA);金担子素;
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
Y2HGold Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 | MF2351-300UL | 300μl |
750 |
产品描述
酵母双杂交系统是用于体内研究蛋白相互作用的一种非常便利的工具,常用的如GAL4为基础的双杂交系统,使用酵母转录因子GAL4来检测转录激活后的蛋白相互作用。工作原理为:一个完整的酵母转录因子GAL4由两个可以分开,功能上相互独立的结构域组成,N端有一个147个氨基酸组成的DNA结合域(DNA- BD),C端有一个由113个氨基酸组成的转录激活域(AD)。DB可以识别并结合上游激活序列(UAS),而AD能激活UAS下游基因进行转录,单独的BD或AD不能激活基因转录。正常情况,BD和AD不会结合,将待检测的蛋白质分别与BD和AD融合,形成诱饵融合蛋白(bait-DNA)和诱捕融合蛋白(prey-DNA),只有当诱饵和诱捕蛋白发生相互作用,促使BD和AD的相互接近,形成完整的GAL4,从而激活报告基因的转录。
Y2HGold是GAL4系统酵母双杂交用实验菌株,能直接转化质粒或与MATα型酵母菌株Y187通过接合(mating)操作进行蛋白相互作用验证或双杂交文库筛选和构建。Y2HGold-GAL4酵母双杂交系统需要两种质粒配套使用,分别为pGBKT7和pGADT7。前者筛选标志为Trp,用于表达DNA-BD与诱饵蛋白(bait)的融合蛋白;后者筛选标志为Leu,用于表达AD与诱捕蛋白(prey)的融合蛋白。Y2HGold有四个报告基因:AUR1-C,HIS3, ADE2, MEL1,分别由三个完全异源的Gal4反应启动元件-G1,G2,M1调控,这三种启动子只有GAL4识别的17bp核心区相同,其余部分都不同。这一特征有效缩减假阳性发生的概率。因为,任何诱捕蛋白单独结合引起假阳性都需要识别3个不同序列,激活4个报告基因表达。另外,新报告基因AUR1-C与以往的营养缺陷报告基因相比,其筛选抗生素-金担子素(Aureobasidin A,AbA)可以有效杀死非抗性克隆,大大降低背景克隆的生长。具有更低背景,这一优势也可降低酵母双杂交假阳性发生的概率。
基因型
MATa, trp1-901, leu2-3, 112, ura3-52, his3-200, gal4Δ, gal80Δ, LYS2::GAL1UAS-Gal1TATA-His3, GAL2UAS-Gal2TATA-Ade2 URA3::MEL1UAS-Mel1TATAAUR1-C MEL1
基本信息
培养基:YPDA
培养条件:28℃,YPDA,有氧培养
保存方式:30%甘油,-20℃保存
转化方式:PEG/LiAC;电激;
基本应用:酵母双杂交实验
保存与运输方法
保存:-20℃保存,一年有效。
运输:干冰运输。
使用说明
金畔生物提供的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品三个月内通知我司。收到甘油菌后,请及时在固体平板上划线培养,挑取单菌落接种到液体培养基中,震荡培养后使用并保存新的甘油菌。
注意事项
1.使用甘油菌时可不完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂布固体琼脂平板即可;也可完全融解后使用,但随着冻融次数的增加,菌株的活力会逐渐下降。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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货号 | 名称 | 规格 |
MF2351-300UL | Y2HGold Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 | 300μl |
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MF2355-300UL | AH109 Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 | 300μl |
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JP6304-250G | YPDA Medium YPDA液体培养基 | 250g |
品牌: |
Jinpan |
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CAS: |
N/A |
规格: |
300μl |
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