SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)

SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)

货号: MF0759-500UL 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学

描述

SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)

 

产品标签

SYBR Green I;Evagreen;GelRed;DuRed;GelGreen;溴化乙锭(EB);qPCR;

产品信息

产品名称

产品编号 规格 价格(元) 促销价(元)

SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)  

MF0759-100UL 100µl 780

700

SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)   MF0759-500UL 500µl 3100

2790

SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)   MF0759-1ML 1ml 5400

4860

产品描述

SYBR Green I Nucleic Acid Stain是一种直接与dsDNA结合的荧光染料,是荧光定量PCR最常用的DNA结合染料。定量PCR中,SYBR Green I与dsDNA非特异性结合发出荧光,通过检测反应体系中的荧光强度,进而达到检测PCR产物扩增量的目的。游离状态下SYBR Green I发出微弱荧光,一旦与dsDNA结合后,荧光强度增加1000倍,一个反应发出的荧光信号与dsDNA量成比例,且随扩增产物的增加而增加。因此,通过检测PCR反应液内的荧光信号强度,实现对目的基因的准确定量,同时还能测定扩增DNA片段的熔解温度。本品为10,000×的SYBR Green I核酸染料,达PCR级别。

保存与运输方法

保存:-20°C避光干燥保存,1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1) 独立实验室进行的艾姆斯试验表明SYBR Green I的致突变性明显比EB要低很多。但是,必须警告用户注意,目前尚无关于SYBR Green I对人体的致突变性或毒性的数据。由于该染料与核酸结合,应当被看作潜在诱变剂,使用时要小心谨慎。在处理DJPO储存液时应特别小心,因DJPO能促进有机分子进入组织。染料的废弃处理应当符合当地的规定。

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

配置PCR反应混合液时,将10,000× SYBR Green I加入到PCR反应体系使其终浓度为0.5×(在0.2×~1×之间调整)。以上操作建议冰上进行。

【注意】:1)反应液配制方法和PCR扩增条件请参照DNA聚合酶使用说明;2)荧光定量扩增仪的使用方法,请参照各仪器说明。

【影响荧光定量PCR的一些小细节】:

1) SYBR Green I使用浓度对荧光定量PCR的影响

合适的SYBR Green I使用浓度是保证荧光定量PCR实验成功非常关键的因素。如果SYBR Green I浓度过低使得荧光信号的变化降低,这意味着低拷贝样品可能无法检出;而浓度过高,可能会抑制PCR反应,降低PCR反应效率。因此,初次使用SYBR Green I需根据实际情况优化工作浓度,反应终浓度可在0.2×~1×之间调整。

2) 镁离子浓度对荧光定量PCR的影响

提高镁离子浓度能降低SYBR Green I对PCR反应的抑制作用。建议用SYBR Green I进行荧光定量PCR反应时,镁离子浓度比不含SYBR Green I的普通PCR体系高出0.5~3mM。 

相关产品

产品编号 产品名称 规格
MF0751-100UL SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in DJPO)核酸凝胶染料 100µl
MF0752-100UL SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DJPO) RNA凝胶染料 100µl
MF0753-1ML GoldView Nucleic Acid Gel Stain (10,000×)核酸染料(10,000×) 1ml
MF0759-100UL SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)   100µl
MF0761-500UL SYBR Safe DNA Gel Stain  (10,000× in DJPO)  核酸凝胶染料 500µl

 

 

 

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

N/A

规格:

500μl

货期:

咨询客服

SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)

SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)

货号: MF0759-100UL 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学

描述

SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)

 

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SYBR Green I;Evagreen;GelRed;DuRed;GelGreen;溴化乙锭(EB);qPCR;

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产品编号 规格 价格(元) 促销价(元)

SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)  

MF0759-100UL 100µl 780

700

SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)   MF0759-500UL 500µl 3100

2790

SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)   MF0759-1ML 1ml 5400

4860

产品描述

SYBR Green I Nucleic Acid Stain是一种直接与dsDNA结合的荧光染料,是荧光定量PCR最常用的DNA结合染料。定量PCR中,SYBR Green I与dsDNA非特异性结合发出荧光,通过检测反应体系中的荧光强度,进而达到检测PCR产物扩增量的目的。游离状态下SYBR Green I发出微弱荧光,一旦与dsDNA结合后,荧光强度增加1000倍,一个反应发出的荧光信号与dsDNA量成比例,且随扩增产物的增加而增加。因此,通过检测PCR反应液内的荧光信号强度,实现对目的基因的准确定量,同时还能测定扩增DNA片段的熔解温度。本品为10,000×的SYBR Green I核酸染料,达PCR级别。

保存与运输方法

保存:-20°C避光干燥保存,1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1) 独立实验室进行的艾姆斯试验表明SYBR Green I的致突变性明显比EB要低很多。但是,必须警告用户注意,目前尚无关于SYBR Green I对人体的致突变性或毒性的数据。由于该染料与核酸结合,应当被看作潜在诱变剂,使用时要小心谨慎。在处理DJPO储存液时应特别小心,因DJPO能促进有机分子进入组织。染料的废弃处理应当符合当地的规定。

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

配置PCR反应混合液时,将10,000× SYBR Green I加入到PCR反应体系使其终浓度为0.5×(在0.2×~1×之间调整)。以上操作建议冰上进行。

【注意】:1)反应液配制方法和PCR扩增条件请参照DNA聚合酶使用说明;2)荧光定量扩增仪的使用方法,请参照各仪器说明。

【影响荧光定量PCR的一些小细节】:

1) SYBR Green I使用浓度对荧光定量PCR的影响

合适的SYBR Green I使用浓度是保证荧光定量PCR实验成功非常关键的因素。如果SYBR Green I浓度过低使得荧光信号的变化降低,这意味着低拷贝样品可能无法检出;而浓度过高,可能会抑制PCR反应,降低PCR反应效率。因此,初次使用SYBR Green I需根据实际情况优化工作浓度,反应终浓度可在0.2×~1×之间调整。

2) 镁离子浓度对荧光定量PCR的影响

提高镁离子浓度能降低SYBR Green I对PCR反应的抑制作用。建议用SYBR Green I进行荧光定量PCR反应时,镁离子浓度比不含SYBR Green I的普通PCR体系高出0.5~3mM。 

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产品编号 产品名称 规格
MF0751-100UL SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in DJPO)核酸凝胶染料 100µl
MF0752-100UL SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DJPO) RNA凝胶染料 100µl
MF0753-1ML GoldView Nucleic Acid Gel Stain (10,000×)核酸染料(10,000×) 1ml
MF0759-100UL SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)   100µl
MF0761-500UL SYBR Safe DNA Gel Stain  (10,000× in DJPO)  核酸凝胶染料 500µl

 

 

 

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Jinpan

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N/A

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100μl

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SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) 核酸凝胶染料

SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DJPO) 核酸凝胶染料

货号: MF0752-500UL 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学

描述

SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DJPO) RNA凝胶染料

产品标签

SYBR Green II;GoldView;Acridine Orange 吖啶橙;GelRed; GelGreen;溴化乙锭(EB);SYBR Green I;

产品信息

产品名称 产品编号 规格            价格(元)  
SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DJPO) RNA凝胶染料    MF0752-100UL    100µl 780
SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DJPO) RNA凝胶染料 MF0752-500UL 500µl 2950

产品描述

SYBR Green II是目前已知电泳凝胶中RNA检测最灵敏的染料之一,在琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶中最低检到100pg RNA或ssDNA的单一条带(使用254nm紫外反射光源照射,并用宝丽来667黑白胶片和SYBR滤光片拍照)。即使用300nm透射光也能检测到500pg RNA的单一条带。SYBR Green II的灵敏度明显强于溴化乙啶(EB)。标准琼脂糖迷你胶EB最低检出1.5ng单链核酸的单一条带(使用300nm透射光照射并用橙-红明胶滤光片拍照)。

SYBR Green II在变性琼脂糖/甲醛凝胶和聚丙烯酰胺/尿素凝胶中的检测灵敏度有点降低,然而仍优于EB。为了获得最大的检测灵敏度,琼脂糖/甲醛凝胶必须在EB染色前清洗数小时。相反,不做任何的清洗或脱色步骤,用SYBR Green II染色的琼脂糖/甲醛凝胶或聚丙烯酰胺/尿素凝胶能检测到1ng RNA单一条带(254nm反射照明)和4ng RNA单一条带(300nm透射照明)。SYBR Green II在RNA检测具备这一卓越灵敏度的特性归因于几个因素,包括优越的荧光量子产量、结合能力和荧光增强。

本品为溶于DJPO 的10,000×的SYBR Green II RNA核酸染料,可用于:1)Northern Blot、起始位点作图或cDNA制备前对RNA产物的小量分析;2)高分辨率变性梯度凝胶电泳(DGGE)后对5S rRNA迁移方式的观察;3)单链构象多态性(SSCP)中的DNA染色;4)PCR扩增前对DNA染色。

保存与运输方法

保存:-20°C避光干燥保存,1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   必须警告用户注意,目前尚无关于SYBR Green II 对人体的致突变性或毒性的数据。由于该染料与核酸结合,应当被看作潜在诱变剂,使用时要小心谨慎。在处理DJPO储存液时应特别小心,因DJPO能促进有机分子进入组织。强烈建议处理DMO储存液需戴双层手套。和所有的核酸染料一样,含SYBR Green II RNA核酸染料的溶液需先穿过活性炭再丢弃。活性炭之后必须焚烧来破坏染料。

2)   SYBR Green II可通过乙醇沉淀法从核酸中去除。异丙醇沉淀法去除效果稍差些。正丁醇萃取、氯仿萃取和酚萃取法无法有效去除该染料。

3)   先用EB染色的凝胶可接下来用SYBR Green II染色,根据电泳后染色(post-staining)的标准步骤操作。与直接用SYBR Green II染色相比较可能灵敏度有些降低。

4)   不要在玻璃器皿中稀释SYBR Green II储存液,因其会结合到玻璃上。在聚丙烯器皿中稀释储存液。

5)   SYBR Green II不会干扰酶反应。

6)   当用SYBR Green II染Northern或Southern Blot凝胶,建议在预杂交液和杂交液内加入0.1%-0.3% SDS。

7)   不建议用254nm紫外透射仪对凝胶拍照,因紫外光源的轮廓会出现在照片上。需要使用允许525nm光透过且排斥其他波长光的滤光片。

8)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

光谱特征

SYBR Green II RNA核酸染料可用常见的紫外反射和透射激发光源,以及手持式紫外灯检测。SYBR Green II的最大激发波长为497nm,但还有一个二级激发峰集中在254nm附近。与RNA结合的SYBR Green II的荧光发射集中在520nm。这些光谱特性让SYBR Green II适用于多种凝胶检测仪,从紫外反射(上紫外)和透射仪(下紫外)到氩离子激光器和水银灯激发的凝胶扫描仪。

使用方法

一、使用前准备工作

使用前将本品取出并回温至室温,使DJPO彻底解冻、溶液均一。于离心机上短暂离心确保所有溶液到管底。第一次使用时可将本品分装成多个小份后冻存,小份染料能更快溶解。

二、染色方法

1.电泳后染色(后染,推荐)

1)在非变性凝胶或变性聚丙烯酰胺/尿素或琼脂/甲醛凝胶上进行电泳。

【注】:其他凝胶基质未做测试,不确定染色效果如何。

2)稀释SYBR Green II储存液:对于非变性凝胶和变性聚丙烯酰胺/尿素凝胶,建议用TBE做1:10,000倍

稀释;对于变性琼脂糖/甲醛凝胶,建议用TBE做1:5,000倍稀释。

【注】:SYBR Green II染色对pH敏感,为获得最佳的灵敏度,应确认在染色温度下染色液的pH值在7.5-

8.0之间(pH8.0更佳)。

3)将凝胶小心的放入合适的容器中,比如聚丙烯容器。缓慢加入足量的SYBR Green II染色工作液浸没凝胶。用铝箔等盖住容器或将容器置于黑暗处使得染料避光。染色前没有必要洗掉凝胶上的尿素或甲醛。

4)室温轻摇凝胶。聚丙烯酰胺凝胶的最佳染色时间通常为10-40min,琼脂糖凝胶的通常为20-40min。凝胶厚度及琼脂糖或聚丙烯酰胺的比例不同,染色时间将有所不同。不需要脱色。染色液需保存在暗处(最好是冷藏)和重复使用3-4次。

【注】:用缓冲液制备的染色液置于4℃避光能放置1周或更久,置于室温避光能放3-4天。用水制备的染色液比缓冲液制备的稳定性差很多,建议24h内用完保证最大灵敏度。另外,用缓冲液(pH>8.0或pH<7.5)的缓冲液制备的染色液稳定性差很多,染色效率也会降低。

2.电泳前染色(预染)

1)配制成SYBR Green II预制凝胶

临灌胶前,按照每100ml凝胶中加入3-5µl SYBR Green II储存液(10,000× in DJPO)的比例加量。需注意到SYBR Green II热稳定性较差,不能在过热胶溶液中直接添加,需要等溶液冷却至50℃左右才能加染料。摇晃,震荡或翻转以保证染料充分混匀。

2)按照常规方法进行电泳。

三、观察和凝胶成像

3.1 使用300nm紫外透射光或254nm紫外反射光(灵敏度更高)照射染色凝胶。

3.2 为了最佳灵敏度,建议使用黑白胶片,可用专用的SYBR Green照相滤光片(Thermo fisher, #S7569)拍照。许多其他的黄色或绿色明胶或玻璃纸滤光片也能用来拍照,但绝大多数可能会减低灵敏度。EB染色凝胶拍照用的橙-红滤光片不适合于SYBR Green II染色凝胶。

3.3 用专用的SYBR Green照相滤光片(Thermo fisher, #S-7569)和Polaroid 667黑白胶片对凝胶进行拍照。染色凝胶基本无背景荧光,当检测少量RNA,允许长期胶片曝光。对于300nm透射,通常F-stop设置4.5时曝光1-2s足够。对于254nm反射(特别是手持灯),大约需要曝光1-1.5min以得到最大灵敏度。

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货号 名称 规格         
MF0751-100UL     SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in DJPO) 核酸凝胶染料 100µl
MF0752-100UL SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DJPO) RNA凝胶染料 100µl
MF0753-1ML GoldView Nucleic Acid Gel Stain (10,000×) 核酸染料(10,000×) 1ml
MF0754-500UL MKRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) 核酸凝胶染料(效果同GelRed) 500µl
MF0755-500UL MKGreen Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) 核酸凝胶染料(效果同GelGreen)    500µl
MF0756-1G Ethidium Bromide (EB)溴化乙锭(EB,粉末) 1g

 

 

 

 

规格信息

品牌:

Jinpan

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N/A

规格:

500μl

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SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) 核酸凝胶染料

SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DJPO) 核酸凝胶染料

货号: MF0752-100UL 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学

描述

SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DJPO) RNA凝胶染料

产品标签

SYBR Green II;GoldView;Acridine Orange 吖啶橙;GelRed; GelGreen;溴化乙锭(EB);SYBR Green I;

产品信息

产品名称 产品编号 规格            价格(元)  
SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DJPO) RNA凝胶染料    MF0752-100UL    100µl 780
SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DJPO) RNA凝胶染料 MF0752-500UL 500µl 2950

产品描述

SYBR Green II是目前已知电泳凝胶中RNA检测最灵敏的染料之一,在琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶中最低检到100pg RNA或ssDNA的单一条带(使用254nm紫外反射光源照射,并用宝丽来667黑白胶片和SYBR滤光片拍照)。即使用300nm透射光也能检测到500pg RNA的单一条带。SYBR Green II的灵敏度明显强于溴化乙啶(EB)。标准琼脂糖迷你胶EB最低检出1.5ng单链核酸的单一条带(使用300nm透射光照射并用橙-红明胶滤光片拍照)。

SYBR Green II在变性琼脂糖/甲醛凝胶和聚丙烯酰胺/尿素凝胶中的检测灵敏度有点降低,然而仍优于EB。为了获得最大的检测灵敏度,琼脂糖/甲醛凝胶必须在EB染色前清洗数小时。相反,不做任何的清洗或脱色步骤,用SYBR Green II染色的琼脂糖/甲醛凝胶或聚丙烯酰胺/尿素凝胶能检测到1ng RNA单一条带(254nm反射照明)和4ng RNA单一条带(300nm透射照明)。SYBR Green II在RNA检测具备这一卓越灵敏度的特性归因于几个因素,包括优越的荧光量子产量、结合能力和荧光增强。

本品为溶于DJPO 的10,000×的SYBR Green II RNA核酸染料,可用于:1)Northern Blot、起始位点作图或cDNA制备前对RNA产物的小量分析;2)高分辨率变性梯度凝胶电泳(DGGE)后对5S rRNA迁移方式的观察;3)单链构象多态性(SSCP)中的DNA染色;4)PCR扩增前对DNA染色。

保存与运输方法

保存:-20°C避光干燥保存,1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   必须警告用户注意,目前尚无关于SYBR Green II 对人体的致突变性或毒性的数据。由于该染料与核酸结合,应当被看作潜在诱变剂,使用时要小心谨慎。在处理DJPO储存液时应特别小心,因DJPO能促进有机分子进入组织。强烈建议处理DMO储存液需戴双层手套。和所有的核酸染料一样,含SYBR Green II RNA核酸染料的溶液需先穿过活性炭再丢弃。活性炭之后必须焚烧来破坏染料。

2)   SYBR Green II可通过乙醇沉淀法从核酸中去除。异丙醇沉淀法去除效果稍差些。正丁醇萃取、氯仿萃取和酚萃取法无法有效去除该染料。

3)   先用EB染色的凝胶可接下来用SYBR Green II染色,根据电泳后染色(post-staining)的标准步骤操作。与直接用SYBR Green II染色相比较可能灵敏度有些降低。

4)   不要在玻璃器皿中稀释SYBR Green II储存液,因其会结合到玻璃上。在聚丙烯器皿中稀释储存液。

5)   SYBR Green II不会干扰酶反应。

6)   当用SYBR Green II染Northern或Southern Blot凝胶,建议在预杂交液和杂交液内加入0.1%-0.3% SDS。

7)   不建议用254nm紫外透射仪对凝胶拍照,因紫外光源的轮廓会出现在照片上。需要使用允许525nm光透过且排斥其他波长光的滤光片。

8)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

光谱特征

SYBR Green II RNA核酸染料可用常见的紫外反射和透射激发光源,以及手持式紫外灯检测。SYBR Green II的最大激发波长为497nm,但还有一个二级激发峰集中在254nm附近。与RNA结合的SYBR Green II的荧光发射集中在520nm。这些光谱特性让SYBR Green II适用于多种凝胶检测仪,从紫外反射(上紫外)和透射仪(下紫外)到氩离子激光器和水银灯激发的凝胶扫描仪。

使用方法

一、使用前准备工作

使用前将本品取出并回温至室温,使DJPO彻底解冻、溶液均一。于离心机上短暂离心确保所有溶液到管底。第一次使用时可将本品分装成多个小份后冻存,小份染料能更快溶解。

二、染色方法

1.电泳后染色(后染,推荐)

1)在非变性凝胶或变性聚丙烯酰胺/尿素或琼脂/甲醛凝胶上进行电泳。

【注】:其他凝胶基质未做测试,不确定染色效果如何。

2)稀释SYBR Green II储存液:对于非变性凝胶和变性聚丙烯酰胺/尿素凝胶,建议用TBE做1:10,000倍

稀释;对于变性琼脂糖/甲醛凝胶,建议用TBE做1:5,000倍稀释。

【注】:SYBR Green II染色对pH敏感,为获得最佳的灵敏度,应确认在染色温度下染色液的pH值在7.5-

8.0之间(pH8.0更佳)。

3)将凝胶小心的放入合适的容器中,比如聚丙烯容器。缓慢加入足量的SYBR Green II染色工作液浸没凝胶。用铝箔等盖住容器或将容器置于黑暗处使得染料避光。染色前没有必要洗掉凝胶上的尿素或甲醛。

4)室温轻摇凝胶。聚丙烯酰胺凝胶的最佳染色时间通常为10-40min,琼脂糖凝胶的通常为20-40min。凝胶厚度及琼脂糖或聚丙烯酰胺的比例不同,染色时间将有所不同。不需要脱色。染色液需保存在暗处(最好是冷藏)和重复使用3-4次。

【注】:用缓冲液制备的染色液置于4℃避光能放置1周或更久,置于室温避光能放3-4天。用水制备的染色液比缓冲液制备的稳定性差很多,建议24h内用完保证最大灵敏度。另外,用缓冲液(pH>8.0或pH<7.5)的缓冲液制备的染色液稳定性差很多,染色效率也会降低。

2.电泳前染色(预染)

1)配制成SYBR Green II预制凝胶

临灌胶前,按照每100ml凝胶中加入3-5µl SYBR Green II储存液(10,000× in DJPO)的比例加量。需注意到SYBR Green II热稳定性较差,不能在过热胶溶液中直接添加,需要等溶液冷却至50℃左右才能加染料。摇晃,震荡或翻转以保证染料充分混匀。

2)按照常规方法进行电泳。

三、观察和凝胶成像

3.1 使用300nm紫外透射光或254nm紫外反射光(灵敏度更高)照射染色凝胶。

3.2 为了最佳灵敏度,建议使用黑白胶片,可用专用的SYBR Green照相滤光片(Thermo fisher, #S7569)拍照。许多其他的黄色或绿色明胶或玻璃纸滤光片也能用来拍照,但绝大多数可能会减低灵敏度。EB染色凝胶拍照用的橙-红滤光片不适合于SYBR Green II染色凝胶。

3.3 用专用的SYBR Green照相滤光片(Thermo fisher, #S-7569)和Polaroid 667黑白胶片对凝胶进行拍照。染色凝胶基本无背景荧光,当检测少量RNA,允许长期胶片曝光。对于300nm透射,通常F-stop设置4.5时曝光1-2s足够。对于254nm反射(特别是手持灯),大约需要曝光1-1.5min以得到最大灵敏度。

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MF0751-100UL     SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in DJPO) 核酸凝胶染料 100µl
MF0752-100UL SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DJPO) RNA凝胶染料 100µl
MF0753-1ML GoldView Nucleic Acid Gel Stain (10,000×) 核酸染料(10,000×) 1ml
MF0754-500UL MKRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) 核酸凝胶染料(效果同GelRed) 500µl
MF0755-500UL MKGreen Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) 核酸凝胶染料(效果同GelGreen)    500µl
MF0756-1G Ethidium Bromide (EB)溴化乙锭(EB,粉末) 1g

 

 

 

 

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N/A

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100μl

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SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in DMSO) 核酸凝胶染料

SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in DJPO) 核酸凝胶染料

货号: MF0751-500UL 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学

描述

SYBR Green I (10,000×in DJPO) 核酸凝胶染料

 

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GoldView;Acridine Orange 吖啶橙;GelRed;DuRed;GelGreen;溴化乙锭(EB);SYBR Green I;

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SYBR Green I (10,000× in DJPO) 核酸凝胶染料

MF0751-100UL 100µl 780 650
SYBR Green I (10,000× in DJPO )核酸凝胶染料 MF0751-500UL 500µl 2950 2655
SYBR Green I (10,000× in DJPO )核酸凝胶染料 MF0751-1ML 1ml 4750 4250

产品描述

SYBR Green I,是目前检测琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶中dsDNA最灵敏的染料之一,最低检出限为20pg DNA(254nm紫外发射光),60pg DNA(300nm透射光);还可用于寡核苷酸检测(1-2ng,300nm透射光),比溴化乙锭EB的灵敏度高50-100倍。

SYBR Green I检测凝胶中核酸的非凡灵敏度归因其独特的染料特性:①SYBR Green I具有超强的DNA结合力,与DNA结合后荧光显著增强—至少比EB高出一个数量级;②DNA/SYBR Green I复合物的荧光量子产率(~0.8)比DNA/EB(~0.15)高5倍多;③SYBR Green I在琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中迅速渗透,在缺乏DNA时背景荧光可忽略,让染色步骤快速,且成像之前无需脱色。

SYBR Green I因与DNA结合能力强,既能在电泳前(预染),也能在电泳后(后染)对DNA进行染色。还可对毛细管电泳分离的DNA进行染色。SYBR Green I与DNA的结合不会抑制多种常见的限制性内切酶活性,包括Hind III和EcoR I,可直接进行消化或连接。用于琼脂糖凝胶电泳检测DNA后,还可直接将DNA转移到膜上,进行后续的核酸印迹杂交分析。

本品为溶于DJPO的10,000×的SYBR Green I核酸染料,电泳级。

保存与运输方法

保存:-20°C避光干燥保存,1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1. 独立实验室进行的艾姆斯试验表明SYBR Green I的致突变性明显比EB要低很多。但是,必须警告用户注意,目前尚无关于SYBR Green I对人体的致突变性或毒性的数据。由于该染料与核酸结合,应当被看作潜在诱变剂,使用时要小心谨慎。在处理DJPO储存液时应特别小心,因DJPO能促进有机分子进入组织。染料的废弃处理应当符合当地的规定。

2. SYBR Green I对dsDNA的检测灵敏度非常高(20pg,254nm紫外发射光),但对ssDNA和RNA的灵敏度稍低(100-300pg,254nm紫外发射光),使之成为复杂溶液中检测dsDNA的理想选择。尤其是复杂溶液中的ssDNA和RNA可能会掩盖结果的时候,如凋亡特有的连续梯度条带apoptosis ladders。

3. SYBR Green I的最大激发波长为497nm,但在~290nm和~380nm处有二级激发峰。与DNA结合的SYBR Green I的荧光发射集中在520nm。这些光谱特性让SYBR Green I适用于多种凝胶检测仪,从紫外反射(上紫外)和透射仪(下紫外)到氩离子激光器和水银灯激发的凝胶扫描仪。

4. 预染色方法,电泳时间不要超过2h,否则SYBR Green I会从DNA上脱离出来,产生弥散状条带。

5. 紫外照射透视下,与dsDNA结合的SYBR Green I呈绿色荧光。如果胶中含ssDNA,则荧光颜色为橘黄色而不是绿色。

6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、使用前准备工作

使用前将本品取出并回温至室温,使DJPO彻底解冻、溶液均一。于离心机上短暂离心确保所有溶液到管底。第一次使用时可将本品分装成多个小份后冻存,小份染料能更快溶解。

二、染色方法

1.电泳后的DNA染色(后染)

1)在琼脂糖或非变性聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳。

【注】:TBE和TAE缓冲液均适合于SYBR Green I染色。

2)用TE、TAE或TBE缓冲液将SYBR Green I储存液进行1:10,000倍稀释。

【注】:

①SYBR Green I染色对pH敏感,为获得最佳的灵敏度,应确认在染色温度下染色液的pH值在7.5- 8.0之间(pH8.0更佳)。

②用水配制的染色液不如用缓冲液配制的稳定,为确保最大的染色灵敏度,必须在24h内使用。此外,用pH低于7.5或高于8.0的缓冲液配制的染色液也不太稳定,染色效率有所下降。

3)染液要充分覆盖凝胶,室温轻摇孵育10-40min。

【注】:

①推荐用塑料而不是玻璃容器来储存染色液,因染料会吸附到玻璃表面。

②染色过程避光进行,建议在容器上加盖铝箔或置于暗处。

③凝胶厚度及琼脂糖或聚丙烯酰胺的比例不同,染色时间将有所不同。

④无需脱色。

⑤染色液可置暗处(最好是冷藏)放置1周或更久,重复使用最多4次。

2.电泳前的DNA染色(预染)

1)配制成SYBR Green I预制凝胶

临灌胶前将SYBR Green I储存液按照1:10,000倍稀释到凝胶溶液中,预制成含有SYBR Green I染料的琼脂糖或非变性聚丙烯酰胺凝胶。电泳结束后即可在适合的凝胶成像仪下检测。【预染推荐用此法】

预制的SYBR Green I凝胶的DNA检测下限(大约为30-40pg/条带),可能略高于电泳后染色(<20pg/条带)。此外,在SYBR Green I凝胶中的DNA片段迁移率明显比无染料凝胶中的相同片段慢。

2)作为DNA模板预染标记

一般而言,DNA在电泳前与染料工作液(1:10,000倍稀释)至少孵育15min。

三、凝胶成像(紫外或蓝光透射仪或紫外顶置光源直射)

可在紫外或蓝光光源下轻松观察到用SYBR Green I染色的DNA。

四、从dsDNA中去除SYBR Green I

使用简单的乙醇沉淀能从dsDNA中去除99%以上的SYBR Green I染料。

将SYBR Green I染色的DNA移至100mM NaCl,加入2.5倍体积的无水或95%的乙醇。在冰上孵育约20min,4℃离心至少10min。去除乙醇,并用70%乙醇洗涤沉淀。让乙醇挥发,并用TE重悬双链DNA。

 

 — — Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/JP金畔所有】

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

N/A

规格:

500μl

货期:

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