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neuvitro纤连蛋白涂层方案

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neuvitro纤连蛋白涂层方案

Neuvitro公司提供专业涂层，覆盖广泛的基材，如PDL、PLL、PLO、胶原蛋白、明胶、层粘连蛋白、纤连蛋白、PDL+层粘连蛋白、PDL+纤连蛋白、PLO+层粘连蛋白、PLO+纤连蛋白、PDL +层粘连蛋白+纤连蛋白等。Electron Microscopy Science、ThermoFisher Scientific 和 VWR 提供的大多数带涂层德国盖玻片实际上是由 Neuvitro Corporation 制造的。

纤连蛋白是细胞外基质 (ECM) 的糖蛋白之一，可与跨膜受体和其他细胞外基质成分（如胶原蛋白、纤维蛋白、多聚糖等）结合。纤连蛋白在细胞粘附、生长、迁移和分化中发挥重要作用。它对于其他过程也很重要，例如伤口愈合和胚胎发育。

Sigma 的纤连蛋白涂层方案

必须针对每种细胞系和应用确定最佳贴壁条件。

  1. 用 0.5 mL 无菌水重新配制。不要搅动。让溶液静置 30 分钟以溶解。可能会残留少量未溶解的物质。这不会影响产品性能。

  2. 在无菌平衡盐溶液中稀释纤连蛋白，并以最小体积包被培养物表面。

  3. 在室温下风干至少 45 分钟。多余的纤连蛋白可以通过抽吸去除，但这不是必需的。

 

ABIF 的纤连蛋白涂层方案

  1. 库存纤连蛋白（Sigma F-0895，来自人血浆的 1 mg/ml 纤连蛋白）应分装冷冻（-80oC），可在大约一个月内使用。在冰箱中大约一个月后，蛋白质会降解，细胞不再能很好地扩散。

  2. 对于 MEF 或 3T3 细胞，用 PBS++ 将 1mg/ml 纤连蛋白原液稀释至 1 µg/ml；对于 CHO 细胞，稀释至 2 µg/ml。 （1 µl/ml PBS 或 2 µl/ml PBS）

  3. 将 1 ml 纤连蛋白溶液放在玻璃底皿的盖玻片上，并在冰箱中放置过夜。

  4. 用 PBS（含或不含钙和镁）冲洗 3 次，并置于冰箱中，两周内使用

Jacobs 的纤连蛋白涂层方案

程序

第 1 天（约 1 小时，等待 1 小时）

  1. 载玻片准备

  2. 将载玻片浸泡在 100% EtOH 中至少五分钟（通常 20 分钟是比较好的流动时间）。

  3. 在引擎盖中打开 20 个培养皿。

  4. 将载玻片和乙醇放入通风柜中。

  5. 用同样的 100% 乙醇对平头钳进行消毒。

  6. 将载玻片倾斜在培养皿边缘晾干（面朝上）

  7. 将载玻片全部放下后翻转，以便另一面可以干燥，并且盖子上聚集的任何乙醇都可以干燥。

  8. 一旦所有乙醇蒸发（载玻片上不应有潮湿发亮的地方），将载玻片平放在培养皿底部。

  9. 将盖子盖在盘子上。

纤连蛋白溶液

  1. 每 1 mL PBS 溶液 (1:100) 制备 10 ul 纤连蛋白。每张载玻片需要 1 mL 的溶液。

    • 纤连蛋白溶液的体积 = [载玻片数量] x 1 ml/载玻片

  2. 4°C 下可保存长达 6 个月

  3. 对于 20 张载玻片，这意味着将 200 ul 纤连蛋白加入到 19.8 ml PBS 中。

  4. 搅拌均匀。

涂层

  1. 小心地将 1 ml 纤连蛋白溶液移至每个载玻片顶部。这是一个微妙的过程，要小心，慢慢来

  2. 不要让溶液掉落到载玻片的边缘。如果发生这种情况，您需要收集液体，对载玻片进行消毒，干燥并重试。任何从侧面落下的液体都会将剩余的液体吸出并吸到载玻片下方，这是我们不希望的。

  3. 确保溶液覆盖整个幻灯片。您可以使用无菌移液器吸头将液体涂抹到任何裸露的点上。表面张力将使液体留在载玻片上，但不要将其推到侧面。

  4. 盖上玻片并让玻片在细胞培养罩中于室温下不受干扰地静置 1 小时。

  5. 平板细胞

GG-12-fibronectin：直径12毫米，#1厚度，60片CE认证晶莹剔透德国玻璃盖玻片，两面涂有聚-D-赖氨酸+纤连蛋白涂层，用于细胞培养和共焦荧光显微镜，每袋密封15片，已灭菌，可立即使用 $88.65

GG-12-1.5-fibronectin：直径12毫米，#1.5厚度，60片CE认证晶莹剔透的德国玻璃盖玻片，两面涂有聚-D-赖氨酸+纤连蛋白涂层，用于细胞培养和共聚焦荧光显微镜，每片密封15片袋子，已消毒，可立即使用 $98.65

GG-14-fibronectin：直径14毫米，#1厚度，60片CE认证晶莹剔透的德国玻璃盖玻片，两面涂有聚-D-赖氨酸+纤连蛋白涂层，用于细胞培养和共焦荧光显微镜，每袋密封15片，已灭菌，可立即使用 $93.65

GG-15-fibronectin：直径15毫米，#1厚度，60片CE认证晶莹剔透的德国玻璃盖玻片，两面涂有聚-D-赖氨酸+纤连蛋白涂层，用于细胞培养和共焦荧光显微镜，每袋密封15片，已灭菌，可立即使用 $98.65

GG-18-fibronectin：直径18毫米，#1厚度，60片CE认证晶莹剔透的德国玻璃盖玻片，两面涂有聚-D-赖氨酸+纤连蛋白涂层，用于细胞培养和共聚焦荧光显微镜，每袋密封15片，已灭菌，可立即使用 $113.65

GG-18-1.5-fibronectin：直径18毫米，#1.5厚度，60片CE认证晶莹剔透的德国玻璃盖玻片，两面涂有聚-D-赖氨酸+纤连蛋白涂层，用于细胞培养和共聚焦荧光显微镜，每片密封15片袋子，已消毒，可立即使用 $123.65

GG-20-fibronectin：直径20毫米，#1厚度，60片CE认证晶莹剔透的德国玻璃盖玻片，两面涂有聚-D-赖氨酸+纤连蛋白涂层，用于细胞培养和共焦荧光显微镜，每袋密封15片，已灭菌，可立即使用 $120.65

GG-22-fibronectin：直径22毫米，#1厚度，60片CE认证晶莹剔透的德国玻璃盖玻片，两面涂有聚-D-赖氨酸+纤连蛋白涂层，用于细胞培养和共焦荧光显微镜，每袋密封15片，已灭菌，可立即使用 $124.65

GG-22-1.5-fibronectin：直径22毫米，#1.5厚度，60片CE认证晶莹剔透的德国玻璃盖玻片，两面涂有聚-D-赖氨酸+纤连蛋白涂层，用于细胞培养和共聚焦荧光显微镜，每片密封15片袋子，已消毒，可立即使用 $134.65

GG-24-fibronectin：直径24毫米，#1厚度，60片CE认证晶莹剔透的德国玻璃盖玻片，两面涂有聚-D-赖氨酸+纤连蛋白涂层，用于细胞培养和共焦荧光显微镜，每袋密封15片，已灭菌，可立即使用 $134.65

GG-25-fibronectin：直径25毫米，#1厚度，60片CE认证晶莹剔透的德国玻璃盖玻片，两面涂有聚-D-赖氨酸+纤连蛋白涂层，用于细胞培养和共聚焦荧光显微镜，每袋密封15片，已灭菌，可立即使用 $144.65

GG-25-1.5-fibronectin：直径25毫米，#1.5厚度，60片CE认证晶莹剔透的德国玻璃盖玻片，两面涂有聚-D-赖氨酸+纤连蛋白涂层，用于细胞培养和共聚焦荧光显微镜，每片密封15片袋子，已消毒，可供使用 $174.65