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![Ab-10 Rapid HiLyte Fluor 647 Labeling Kit试剂盒货号:LK36 HiLyte Fluor 647快速标记试剂盒(微量)](http://www.boykyo.com/wp-content/uploads/2024/06/20240619_6672c0a321f8b.jpg)
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特点:
● 荧光素标记的产品可以在大约2小时内制备。
● 可以标记分子量为50,000或更高的蛋白质。
● 可以标记50至200μg的蛋白质。
● 可以通过使用过滤管的分离操作以高回收率获得标记物质。
● 荧光素标记的物体可以与所附的存储溶液一起存储。
试剂盒内含
产品概述
NH2-reactive HiLyte FluorTM 647是试剂盒的成分之一,它有一个琥珀酰亚胺基(NHS),能与蛋白质或者其它分子的氨基反应。该试剂盒中包含了标记所需的全部试剂。每一管NH2-reactive HiLyte FluorTM 647最多能够标记200 μg的IgG,每个IgG分子可与4-6个HiLyte FluorTM 647分子共价结合。标记过程十分简单,只需要在特制的过滤膜上将NH2-reactive HiLyte FluorTM 647加入到IgG溶液中,然后在37℃下培养10分钟。过量的HiLyte FluorTM 647能够用过滤管除去。被HiLyte FluorTM 647标记后的IgG的激发和发射波长分别为652 nm和673 nm。
* HiLyte FluorTM为AnaSpec,Inc公司的商标
原理
荧光特性
操作步骤
使用注意事项:
1. 用该试剂盒标记的蛋白质的分子量要>50,000。
2. 在标记过程中,IgG或者HiLyte FluorTM 647-IgG标记物始终在Filtration tube的滤膜上。
3. 如果IgG溶液中含有分子量>10,000的其他蛋白质,如BSA或明胶时,在使用该试剂盒标记前,先要纯化IgG溶液。IgG溶液能够用IgG Purification Kits(不包含于本试剂盒 中)来纯化。
4. 如果IgG溶液含有小的不溶物,离心后取上清液来进行标记。
5. 如果长时间不使用,建议您把试剂盒中的标记试剂NH2-reactive HiLyte FluorTM 647放在-20℃冰箱中保存,不需要充氮气,可以更好地保持标记试剂的活性,但请不要把其它试剂和过滤管放到-20℃冰箱中,仍请放在0-5℃冰箱中保存。
标记IgG操作步骤
(1)将100μl WS buffer以及含有100μg IgG的样品溶液加入到过滤管中。a)
(2)8,000-10,000g离心10分钟。b)
(3)将10μl DMSO加入到NH2-reactive HiLyte FluorTM647中并用移液器吹打使其溶解。c)
(4)将100μl Reaction buffer以及8μl NH2-reactive HiLyte FluorTM647溶液加入到过滤管中,吹打使其混合。d)
(5)将过滤管放入培养箱中,37℃培养10分钟。
(6)将100μl WS buffer加入到过滤管中,8,000-10,000g离心10分钟,b)除去滤液。
(7)将200μl WS buffer加入到过滤管中,8,000g离心10分钟,b)重复该步骤一次。
(8)将200μl WS buffer加入到过滤管中吹打10-15次来回收标记产物。e)将该溶液转移到0.5ml试管中,在0-5℃下保存。
a)样品溶液的体积不应超过100μl。如果抗体浓度低于1mg/ml,重复步骤1和2直至总的IgG聚积量达到100μg。如果聚积过程中滤液的体积超过400μl,则在进行后续的离心操作前应除去滤液。
b)如果溶液在离心后仍然残留在膜上,可以再离心5分钟或者适当增加转速。
c)NH2-reactive HiLyte FluorTM647在管子的底部,向管底加入10μl DMSO,吹打数次使其溶解。
d)如果IgG的量为200μg,加入所有的NH2-reactive HiLyte FluorTM647溶液。
e)并不一定要使用WS buffer来回收标记产物,可以选择任何适合于该实验的缓冲液来替代。
产品优势
1)荧光素标记的产品可以在大约2小时内制备。
2)可以标记分子量为50,000或更高的蛋白质。
3)可以标记50至200μg的蛋白质。
4)可以通过使用过滤管的分离操作以高回收率获得标记物质。
5)荧光素标记的物体可以与所附的存储溶液一起存储。
常见问题Q&A
Q1:能够用这个试剂盒标记其他蛋白质吗? |
A:可以。只要标记分子的分子量>50,000。 |
Q2:标记蛋白之前是否必须使用过滤管? |
A:如果蛋白溶液中不含有带有活性氨基的小分子且蛋白浓度在10 mg/ml或者70 μM左右时,可以不使用过滤管来过滤,只需要将10 μl 样品溶液和90 μl Reaction Buffer以及8 μl NH2-reactive HiLyte FluorTM 555(由步骤3所得)混合并按照操作说明上的方法做从步骤4开始的后续试验。 |
Q3:能够使用这个试剂盒标记寡核苷酸或者寡肽吗? |
A:不行。寡核苷酸或者寡肽可能因为分子量太小而不能存在于滤膜上。 |
Q4:用该试剂盒所能标记的IgG的最小量是多少? |
A:IgG的最小量为10 μg。IgG的量在10 μg-100 μg之间时,标记比率是相同的。 |
Q5:标记产物能保存多久? |
A:在4℃下能够保存2个月。如果需要保存更久,可以添加等量的丙三醇,并在-20℃下存放。但是,还要注意样品自身是否稳定。 |
参考文献
1) S. Hiroyasu, T. Ozawa, H. Kobayashi, M. Ishii, Y. Aoyama, Y. Kitajima, T. Hashimoto, J.C.R. Jones and D. Tsuruta, “Bullous pemphigoid IgG induces BP180 internalization via a macropinocytic pathway”, Am. J. Pathol.., 2013, 182, (3), 828. |
2) W. Jin, K. Yamada, M. Ikami, N. Kaji, M. Tokeshi, Y. Atsumi, M. Mizutani, A. Murai, A. Okamoto, T. Namikawa, Y. Baba, M. Ohta, “Application of IgY to sandwich enzyme-linked immunosorbent assays, lateral flow devices, and immunopillar chips for detecting staphylococcal enterotoxins in milk and dairy products”, J. Microbiol. Methods., 2013, 92, (3), 323. |
3) Y. Hayashi, M. Okutani, S. Ogawa, T. Tsukahara, R. Inoue, “Generation of anti-porcine CD69 monoclonal antibodies and their usefulness to evaluate early activation of cellular immunity by flow cytometric analysis”, Anim. Sci. J.., 2018, 89, (5), 825. |
4) T. Kojima, J. Hata, H. Oka, K. Hayashi, K. Hitomi and H. Nakano, “Spatial arrangement of proteins using scCro-tag: application for an in situ enzymatic microbead assay.”, Biosci. Biotechnol. Biochem., 2018, 82, (11), 1911. |
5) S. Mawaribuchi, Y. Haramoto, H. Tateno, Y. Onuma, Y. Aiki and Y. Ito, “rBC2LCN lectin as a potential probe of early-stage HER2-positive breast carcinoma.”, FEBS Open Bio., 2020, DOI: 10.1002/2211-5463.12852. |
APDye Fluors 647 简介
APDye Fluor 647 在结构上与 Alexa Fluor 647(AF647) 相似,在光谱上与 Cy5 Dye、Alexa Fluor 647、CF 647 Dye 或任何其他基于 Cyanine5 的荧光染料几乎相同。APDye Fluor 647是一种明亮的绿色荧光染料,适合与 633、650 nm 氩激光一起使用。该染料是水溶性的,并且在 pH 4 至 pH 10 范围内对 pH 值不敏感。该染料具有 4 个磺酸盐基团,使其水溶性高,在水溶液中聚集较少。 APDye Fluor 647 用于蛋白质和抗体标记,或高标记密度的核酸应用。
具有高荧光量子产率和高光稳定性的探针可以以高的灵敏度检测低丰度的生物结构。 APDye Fluor 647 染料分子可以高摩尔比附着到蛋白质上,而不会发生明显的自猝灭,从而产生更亮的缀合物和更灵敏的检测。
我们提供与各种抗体、肽、蛋白质、示踪剂和扩增底物缀合的 APDye Fluor 647 染料,针对细胞标记和检测进行了优化。此外,活性染料形式和蛋白质标记试剂盒可让您生成自己的抗体缀合物或探针。
APDye Fluor 647 Hydrazide
APDye™ Fluor 647 Hydrazide(Alexa Fluor® 647 Hydrazide 替代品)是一种明亮的远红色荧光染料,通常用于标记多糖或糖蛋白中的醛或酮。 APDye™ Fluor 488 Hydrazide 可用作低分子量、膜不可渗透、醛可固定的细胞示踪剂,与源自其他光谱相似荧光团的细胞示踪剂相比,表现出更明亮的荧光和更高的光稳定性。
APDye™ Fluor 647(Alexa Fluor ® 647 类似物)是一种水溶性、明亮的远红荧光染料,具有激发功能,非常适合 633 nm 或 647 nm 激光线。与其他荧光团相比,使用 Cy5 或 APDye™ Fluor 647 染料等长波长染料的一个显着优势是生物样本在该光谱区域的自发荧光较低。
APDye™ Fluor 647 在结构上与 Alexa Fluor® 647 相似,并且光谱与 Cy5 Dye、Alexa Fluor® 647、CF® 647 Dye 或任何其他基于 Cyanine5 的荧光染料几乎相同。
APDye Fluor 647 Alkyne
APDye 647 Alkyne(Alexa Fluor 647 Alkyne 类似物)是一种水溶性、明亮的远红荧光染料,具有激发功能,非常适合 633 nm 或 647 nm 激光线。与其他荧光团相比,使用 Cy5 或 APDye™ Fluor 647 染料等长波长染料的一个显着优势是生物样本在该光谱区域的自发荧光较低。
APDye™ Fluor 647 Alkyne 是一种明亮的远红荧光、pH 不敏感的炔烃激活探针,通常用于含叠氮生物分子的成像。 APDye™ Fluor 647 Alkyne 通过铜催化点击反应 (CuAAC) 与叠氮化物反应,形成稳定的三唑连接体。用于无铜检测的探头 (APDye™ Fluor 647 DBCO) 也可用于不可接受铜存在的应用。
APDye™ Fluor 647 在结构上与 Alexa Fluor® 647 相似,并且光谱与 Cy5 Dye、Alexa Fluor® 647、CF® 647 Dye 或任何其他基于 Cyanine5 的荧光染料几乎相同。
APDye Fluor 647 Azide
APDye™ Fluor 647 Azide(Alexa Fluor 647 Azide 类似物)是一种水溶性、pH 值不敏感(pH 4 至 pH 10)的明亮远红荧光探针,具有激发功能,非常适合 633 nm 或 647 nm 激光线。与其他荧光团相比,使用 Cy5 或 APDye™ Fluor 647 染料等长波长染料的一个显着优势是生物样本在该光谱区域的自发荧光较低。
APDye™ Fluor 647 叠氮化物可通过铜催化点击反应 (CuAAC) 与末端炔烃发生反应。它还通过无铜“点击化学”反应与应变环辛炔反应,形成稳定的三唑,并且不需要铜催化剂或高温。这种染料的亮度和光稳定性适合低丰度目标的直接成像。
对于低丰度目标的检测或需要显着增加信号强度的情况,请考虑使用含有内部铜螯合基序的下一代叠氮化物探针。
APDye™ Fluor 647 在结构上与 Alexa Fluor® 647 相似,并且光谱与 Cy5 Dye、Alexa Fluor® 647、CF® 647 Dye 或任何其他基于 Cyanine5 的荧光染料几乎相同。
APDye Fluor 647 NHS Ester
APDye Fluor 647 NHS Ester(Alexa Fluor ® 647 类似物)是一种水溶性、明亮的远红荧光染料,具有激发功能,非常适合 633 nm 或 647 nm 激光线。与其他荧光团相比,使用 Cy5 或 APDye™ Fluor 647 染料等长波长染料的一个显着优势是生物样本在该光谱区域的自发荧光较低。
NHS 酯(或琥珀酰亚胺酯)是常用的胺反应基团,用于标记蛋白质的伯胺 (Lys)、胺修饰的寡核苷酸和其他含胺分子。蛋白质可以用 APDye™ Fluor 647 NHS Ester 以高摩尔比进行标记,而不会发生明显的自猝灭,从而产生更亮的缀合物和更灵敏的检测。 APDye™ Fluor 647 缀合物通常是检测低丰度靶标的优选探针。 APDye™ Fluor 647 在结构上与Alexa 647 nhs 酯
相似,在光谱上与 Cy5 Dye、Alexa Fluor® 647、CF® 647 Dye 或任何其他基于 Cyanine5 的荧光染料几乎相同。
APDye Fluor 647 马来酰亚胺
APDye™ Fluor 647 马来酰亚胺是一种水溶性远红荧光染料,其光谱与用于流式细胞术、显微镜和其他应用的其他 650 染料相似。 APDye™ Fluor 647 结合物非常适合 633 nm 或 647 nm 激光线。与其他荧光团相比,使用 Cy5 或 APDye™ Fluor 647 等长波长染料的一个显着优势是生物样本在该光谱区域的自发荧光较低。
马来酰亚胺是常用的巯基反应基团,用于将染料与蛋白质、寡核苷酸硫代磷酸酯或低分子量配体上的硫醇基团缀合。马来酰亚胺基团在 pH 6.5 至 7.5 下与还原硫醇(巯基,-SH)特异性、高效地反应,形成稳定的硫醚键。与许多其他光谱相似的荧光团的缀合物相比,所得缀合物表现出更亮的荧光和更高的光稳定性。
APDye™ Fluor 647 在结构上与 Alexa Fluor® 647 相似,并且光谱与 Cy5 Dye、Alexa Fluor® 647、CF® 647 Dye 或任何其他基于 Cyanine5 的荧光染料几乎相同。
APDye Fluor 647 TFP Ester
APDye™ Fluor 647 TFP Ester(Alexa Fluor ® 647 类似物)是一种水溶性、明亮的远红荧光染料,具有激发功能,非常适合 633 nm 或 647 nm 激光线。与其他荧光团相比,使用 Cy5 或 APDye™ Fluor 647 染料等长波长染料的一个显着优势是生物样本在该光谱区域的自发荧光较低。
TFP(四氟苯基)酯是一种胺反应性活化酯,与琥珀酰亚胺酯(SE或NHS-酯)相同的方式与生物分子的伯胺反应,形成稳定的酰胺键。与琥珀酰亚胺酯相比,TFP 酯的主要优点是大大提高了缀合反应过程中对自发水解的抵抗力,从而提高了生物聚合物的效率和更好的可重复性标记。 TFP 酯在通常用于反应的碱性 pH 值下可稳定数小时,其稳定性远远超过琥珀酰亚胺酯。
APDye™ Fluor 647 在结构上与 Alexa Fluor® 647 相似,并且光谱与 Cy5 Dye、Alexa Fluor® 647、CF® 647 Dye 或任何其他基于 Cyanine5 的荧光染料几乎相同。
APDye Fluor 647 Picolyl Azide
APDye Fluor 647 Picolyl Azide(Alexa Fluor 647 Picolyl Azide 类似物)是一种先进的荧光探针,包含铜螯合基序,可提高反应位点 Cu(I) 的有效浓度。 CuAAC反应速率取决于包括铜在内的所有试剂的浓度,因此反应位点有效铜浓度的提高可显着提高CuAAC反应速率,而无需增加叠氮化物试剂和铜的浓度。
此外,使用吡啶甲基叠氮化物代替传统的叠氮化物可以使铜催化剂的浓度至少降低十倍,而不会牺牲标记效率。
总之,将吡啶甲基部分引入叠氮化物探针可显着提高炔烃检测的灵敏度。这对于检测低丰度目标或需要显着增加信号强度的情况具有特殊价值。
APDye™ Fluor 647 在结构上与 Alexa Fluor® 647 相似,并且光谱与 Cy5 Dye、Alexa Fluor® 647、CF® 647 Dye 或任何其他基于 Cyanine5 的荧光染料几乎相同。
APDye Fluor 647 Azide Plus
APDye Fluor 647 Azide Plus 试剂是 Click Chemistry Tools 科学家开发的改进复杂介质中 CuAAC 反应的最新举措。 APDye Fluor 647 Azide Plus 试剂的结构中包含完整的铜螯合系统,可形成强效、活性的铜络合物,在 CuAAC 反应中同时充当反应物和催化剂。这种叠氮化物-铜络合物在稀释条件下几乎立即与炔烃发生反应。 CuAAC 反应中这种反应性对于检测低丰度目标、提高生物相容性具有特殊价值,并且对于任何其他需要大幅提高信噪比的应用也很有价值。
APDye Fluor 647 DBCO
APDye Fluor 647 DBCO 是一种水溶性、pH 不敏感(pH 4 至 pH 10)的明亮远红荧光探针,具有激发功能,非常适合 633 nm 或 647 nm 激光线。与其他荧光团相比,使用 Cy5 或 APDye™ Fluor 647 染料等长波长染料的一个显着优势是生物样本在该光谱区域的自发荧光较低。
APDye™ Fluor 647 DBCO 是一种明亮的远红荧光探针,通常用于含叠氮化物生物分子的成像,无需铜催化剂。 APDye™ Fluor 647 DBCO 通过无铜“点击化学”反应与叠氮化物反应,形成稳定的三唑,不需要铜催化剂或高温。在需要考虑铜存在的应用中,APDye™ Fluor 647 DBCO 是需要荧光炔烃的铜的理想替代品。
APDye™ Fluor 647 在结构上与 Alexa Fluor® 647 相似,并且光谱与 Cy5 Dye、Alexa Fluor® 647、CF® 647 Dye 或任何其他基于 Cyanine5 的荧光染料几乎相同。
简要描述:nanocs Alexa fluor 647 PEG Biotin近红外荧光PE生物素 产品型号:PG2-AF647BN-3k。贮存: 储存在-20℃。干燥。避光。避免频繁解冻和冷冻。
详细介绍
产品咨询
品牌 | 其他品牌 | 供货周期 | 一个月 |
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应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合 |
nanocs Alexa fluor 647 PEG Biotin近红外荧光PE生物素
Alexa Fluor 647 标记的 PEG 生物素 (AF647 聚乙二醇生物素 是一种近红外荧光PE生物素衍生物,激发/发射波长约为651 nm/672 nm。Alexa fluor 647是一种近红外荧光染料,具有高荧光强度和出色的光稳定性。Nanocs提供的Alexa Fluor 647 PEG生物素是一种水溶性荧光生物素PEG,可直接用于水性缓冲液中,无需添加有毒有机溶剂。
物理性质:
Bule/深蓝色固体或粘稠液体取决于分子量;
溶于常规非QEOUS溶液以及大多数有机溶剂;
储存条件:
储存在 -20 0C,干燥。避光。避免频繁解冻和冷冻。
上海金畔生物科技有限公司
国内试剂耗材经销代理。
国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。
提供加急物流处理,进口货物,最快交期1-2周。
进出口货物代理服务。
公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。
质量保证,所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式,为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源,加强网络建设,提高公司内部运作效率,为客户提供方便、快捷的服务。
Bodi Fluor 488-Cephaeline Conjugate
Bodi Fluor 488-Cephaeline Conjugate
货号: 32000 品牌: AAT Bioquest 标签: 有机试剂
品牌: |
AAT Bioquest |
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CAS: | |
规格: |
1 mg |
货期: |
5-7天(参考) |