用于干细胞培养的耐热 FGF2介绍

用于干细胞（hESC 或 iPS）培养的耐热 FGF2

干细胞培养中需要 FGF2（也称为 FGF-basic 或 bFGF）来维持干细胞处于未分化和多能状态。然而，FGF basic 不稳定，需要每天更换培养基并添加新的 FGF basic，这是昂贵、乏味且耗时的。为了克服这个问题，开发了 FGF basic 的热稳定版本，以支持 2 天介质更换协议，而不是每日介质更换。为期 2 天的培养基更换方案使干细胞研究人员无需在周末返回实验室，使其成为干细胞研究人员的理想选择。耐热 FGF2 经过精心设计，可增强在培养基中的稳定性，而不影响其生物学功能。

热稳定性 FGF2 (FGFbasic-TS) 在细胞培养基中的稳定性

当在 37° 的典型干细胞培养基中培养时，培养 2 天后，相当数量 (35%) 的热稳定 FGF2 (SPEED SKU# SDP1025) 在培养基中保持完整，而常规 FGF2 (SPEED SKU# YCP1143)第一天后就无法检测到。结果表明，热稳定 FGF2 的降解速度比常规 FGF 碱性慢约 3 倍。

耐热 FGF2 对酶消化的抗性

当暴露于胰蛋白酶时，FGF2 在 4.5 小时后显着降解，而 FGF2-TS（热稳定）水平仅略有降低。值得注意的是，肝素可保护 FGF2 和 FGF2-TS 免受胰蛋白酶消化。与 FGF basic 相比，热稳定 FGF basic 更能抵抗蛋白水解降解。

热稳定性 FGF2 (FGFbasic-TS) 通过 2 天喂养计划维持干细胞的多能性

采用两天喂养方案，无论细胞是人胚胎干细胞（hESC）还是诱导多能干细胞（iPSC），干细胞的多能性在传代10次后都能得到有效维持；使用非酶传代溶液 (XFPS) 或使用胶原基试剂 (CG) 进行传代；在化学成分确定的基质 (XFM) 或基质胶 (MG) 中培养。通过对干细胞标记物（包括 SSEA-4、Tra1-60、Tra1-81 和 Oct3/4）进行细胞计数分析来证实多能性。

热稳定性 FGF2 维持 FGF2 促进干细胞增殖的活性

通过两天的喂养方案，iPSC 细胞培养物即使在传代 10 次后仍保持健康的生长特性。下图分别显示了培养第2天和第6天的iPS细胞。

热稳定 FGF2 (FGFbasic-TS) 不会诱发遗传异常

干细胞培养物在长期培养过程中会出现遗传异常。在使用 10 mg/mL FGFbasic-TS 的 2 天喂养计划中，iPS 细胞系在第 10 次传代后在核型分析中保持正常。