TOP10F` Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞
货号: MF2349-5000UL 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学
规格信息
品牌: |
Jinpan |
---|---|
CAS: |
N/A |
规格: |
50×100μl |
货期: |
咨询客服 |
TOP10F` Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞
货号: MF2349-5000UL 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学
品牌: |
Jinpan |
---|---|
CAS: |
N/A |
规格: |
50×100μl |
货期: |
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TOP10F` Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞
货号: MF2349-1000UL 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学
TOP10F` Chemically Competent Cell
大肠杆菌化学感受态细胞
产品标签:
TOP10F`;TOP10;F′附加体(F′ episome);F-TOP10;IPTG;卡那霉素;链霉素;
产品订购: 更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-50837765 。
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格(元) |
MF2349-1000UL | TOP10F` Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 | 10×100μl | 396 |
MF2349-5000UL | TOP10F` Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 | 50×100μl | 1696 |
【好消息】:见我司的感受态细胞促销活动。买感受态细胞得京东卡,发表使用评论,赢红包,双重惊喜,行动起来啦。
产品组分:
组分编号 | 组分名称 | 货号(规格) | |
MF2349-2000UL | MF2349-10000UL | ||
MF2349-A | TOP10F` Chemically Competent Cell | 20×100μl | 100×100μl |
MF2349-B | Control Vector puC19, 10pg/μl | 10μl | 10μ |
菌株描述
TOP10F`菌株来源于TOP10菌株,除了F′附加体(F′ episome)的引入。F′附加体携带四环素抗性基因,使其能从携带f1复制子的载体中纯化单链DNA。F′附加体还携带lacIq抑制子,参与IPTG作为诱导剂对trc,tac和lac启动子的诱导表达。TOP10F`菌株进行蓝白斑筛选,需要IPTG诱导β-半乳糖苷酶基因的表达。recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。适用于高效克隆和质粒扩繁。
TOP10F`菌株基因型:F´{lacIq Tn10 (TetR)} mcrA Δ(mrr-hsdRJP-mcrBC) Φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 araD139 Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL endA1 nupG
产品描述
本品是大肠杆菌TOP10F`菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞,经pUC19载体检测转化效率>108 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。
保存与运输条件:
保存:-80℃保存,六个月有效。
运输:干冰运输。
注意事项
1) 感受态细胞必须用干冰运输。感受态细胞应在-80℃保存,不可反复冻融且放置时间过长,否则会减低感受态细胞的转化效率。
2) 最好在冰上融化感受态细胞。在冰上融化后立即加入目标DNA,不可在冰上放置时间过长。长时间存放会降低转化效率,混入目的DNA时需轻柔操作。
3) 进行转化操作时,需在相应温度及无菌条件下进行。
4) 为防止转化实验不成功,可保留部分连接反应液以重新转化,将损失降到最低。
5) 产品包装内含载体pUC19 DNA(10pg/μl),供对照实验用。
6) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】
1.1 将TOP10F`感受态细胞从-80℃取出,迅速插入冰中,5min后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物),并用手拨打管底轻轻混匀,冰中静置25min。
1.2 42℃水浴热激45s,迅速放回冰上并静置2min。 此过程不要摇动离心管。
1.3 向每个离心管中加入700 μl无菌的2YT或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃ 摇床,200 rpm振荡培养60min,目的使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。
1.4 低速离心收菌(比如4000rpm,2min),留取100μl左右上清,用枪轻轻吹打重悬菌块,之后加到含相应抗生素的2YT或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于室温(或37℃)直至液体被吸收,之后倒置放于37℃过夜培养。如果进行蓝白斑筛选,37℃至少培养13h。
【注意】:
a)涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可不用离心,直接取少量转化产物涂布平板;反之,若转化的DNA总量较少,则通过离心(4,000 rpm,2min)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。
b)新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
c)涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
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货号 | 名称 | 规格 |
MF2311-2000UL | DH5α Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 | 20×100μl |
MF2312-2000UL | TOP10 Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 | 20×100μl |
MF2313-2000UL | JM109 Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 | 20×100μl |
MF2314-1000UL | DH10B Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 | 10×100μl |
MF2315-1000UL | XL10-Gold Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 | 10×100μl |
MF2320-1000UL | JM110 Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 | 10×100μl |
MF2331-1000UL | BL21 (DE3) Competent Cell 大肠杆菌感受态细胞 | 10×100μl |
MF2332-1000UL | BL21 (DE3) pLysS Competent Cell 大肠杆菌感受态细胞 | 10×100μl |
MF2333-1000UL | Rosetta (DE3) Competent Cell 大肠杆菌感受态细胞 | 10×100μl |
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MF2335-1000UL | BL21 Star (DE3) pLysS Competent Cell 大肠杆菌感受态细胞 | 10×100μl |
MF2349-1000UL | TOP10F` Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 | 10×100μl |
JP0021-10G | Chloramphenicol, USP Grade 氯霉素 | 10g |
JP0018-10G | Ampicillin, Sodium Salt 氨苄青霉素钠 | 10g |
JP0017-5G | Carbenicillin, Disodium Salt 羧苄青霉素二钠盐 | 5g |
JP0019-10G | Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素 | 10g |
JP0014-1G | Rifampicin, USP Grade 利福平 | 1g |
MF2001-1G | X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷 | 1g |
MF2002-1G | IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 | 1g |
品牌: |
Jinpan |
---|---|
CAS: |
N/A |
规格: |
10×100μl |
货期: |
咨询客服 |
F-DH5aChemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞
货号: MF2348-10000UL 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学
F-DH5a Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞
产品标签:
F-DH5a;F-TOP10;DH10B;JM109;EPI400;羧苄青霉素钠;卡那霉素;链霉素;
产品订购:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-50837765 。
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格(元) |
MF2348-2000UL | F-DH5a Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 | 20×100μl | 280 |
MF2348-10000UL | F-DH5a Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 | 100×100μl | 1280 |
【好消息】:见我司的感受态细胞促销活动。买感受态细胞得京东卡,发表使用评论,赢红包,双重惊喜,行动起来啦。
产品组分:
组分编号 |
组分名称 |
货号(规格) |
|
MF2348-2000UL |
MF2348-10000UL |
||
MF2348-A | F-DH5a Competent Cell | 20×100μl | 100×100μl |
MF2348-B | Control Vector puC19, 10pg/μl | 10μl | 10μl |
菌株描述
DH5α是实验室最常用的一种质粒克隆用菌株,其φ80lacZ△M15基因的产物可与载体编码的 β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补,可用于蓝白斑筛选。recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。特别适用于高效的质粒DNA克隆并能保证高拷贝质粒的稳定复制。
DH5a菌株基因型:F-φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi-1 gyrA96 relA1 phoA
产品描述
本品是大肠杆菌DH5a菌株经特殊工艺制作所得的快速转化感受态细胞,无需42℃热激,37℃孵育步骤,只需冰浴,10min内能完成转化、涂板步骤。经pUC19质粒检测转化效率可达1~5×108 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。
保存与运输条件:
保存:-80℃保存,六个月有效。
运输:干冰运输。
注意事项
1) 感受态细胞必须用干冰运输。感受态细胞应在-80℃保存,不可反复冻融且放置时间过长,否则会减低感受态细胞的转化效率。
2) 最好在冰上融化感受态细胞。在冰上融化后立即加入目标DNA,不可在冰上放置时间过长。长时间存放会降低转化效率,混入目的DNA时需轻柔操作。
3) 进行转化操作时,需在相应温度及无菌条件下进行。
4) 为防止转化实验不成功,可保留部分连接反应液以重新转化,将损失降到最低。
5) 产品包装内含质粒pUC19 DNA(10pg/μl),供对照实验用。
6) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】
一、 快速转化操作(10min)
1.1 提前15min将用到的筛选培养平板拿到37℃预热。
1.2 取F-DH5a感受态细胞从-80℃取出,迅速插入冰中,5min后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物),并用手拨打管底轻轻混匀,冰中静置5min。
1.3 用移液枪将感受态细胞-DNA混合物转移到37℃预热的LB筛选培养平板上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,表面无水渍。
1.4 将平板倒置于37℃过夜培养。如果进行蓝白斑筛选,至少培养15h。
【注意】:F-DH5a感受态细胞涂含氨苄或羧苄筛选培养平板时效率最高,若涂卡那霉素或其他抗生素平板,转化效率会下降(由于没有孵育步骤,卡那霉素等对菌体毒性较大)。若要提高卡那霉素或其他抗性质粒的转化效率,按照快速热激转化操作。
二、 快速热激转化操作(25min,能提高转化效率)
2.1 取F-DH5a感受态细胞从-80℃取出,迅速插入冰中,5min后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物),并用手拨打管底轻轻混匀,冰中静置5min。
2.2 42℃水浴热激45s,迅速放回冰上并静置2min。 此过程不要摇动离心管。
2.3 加入700μl 无菌的LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃ 摇床,200 rpm振荡培养10min。
2.4 用移液枪将感受态细胞-DNA混合物转移到37℃预热的LB培养平板(含抗生素)上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,表面无水渍。
2.5 将平板倒置于37℃过夜培养。如果进行蓝白斑筛选,至少培养15h。
【注意】:当质粒>7kb,通过以下热激转化操作:取F-DH5a感受态细胞从-80℃取出,迅速插入冰中,5min后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物),并用手拨打管底轻轻混匀,冰中静置20min。
42℃水浴热激45s,迅速放回冰上并静置2min。加入700μl 无菌的LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃ 摇床,200 rpm振荡培养30min。之后涂板。
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MF2311-2000UL | DH5α Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 | 20×100μl |
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MF2314-1000UL | DH10B Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 | 10×100μl |
MF2315-1000UL | XL10-Gold Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 | 10×100μl |
MF2347-2000UL | F-TOP10 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 | 20×100μl |
MF2348-2000UL | F-DH5a Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 | 20×100μl |
MF2349-1000UL | TOP10F` Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 | 10×100μl |
MF2350-1000UL | EPI400 Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 | 10×100μl |
JP0021-10G | Chloramphenicol, USP Grade氯霉素 | 10g |
JP0018-10G | Ampicillin, Sodium Salt氨苄青霉素钠 | 10g |
JP0017-5G | Carbenicillin, Disodium Salt羧苄青霉素二钠盐 | 5g |
JP0019-10G | Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 | 10g |
JP0014-1G | Rifampicin, USP Grade利福平 | 1g |
品牌: |
Jinpan |
---|---|
CAS: |
N/A |
规格: |
100×100μl |
货期: |
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F-DH5aChemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞
货号: MF2348-2000UL 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学
F-DH5a Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞
产品标签:
F-DH5a;F-TOP10;DH10B;JM109;EPI400;羧苄青霉素钠;卡那霉素;链霉素;
产品订购:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-50837765 。
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格(元) |
MF2348-2000UL | F-DH5a Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 | 20×100μl | 280 |
MF2348-10000UL | F-DH5a Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 | 100×100μl | 1280 |
【好消息】:见我司的感受态细胞促销活动。买感受态细胞得京东卡,发表使用评论,赢红包,双重惊喜,行动起来啦。
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组分编号 |
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货号(规格) |
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MF2348-2000UL |
MF2348-10000UL |
||
MF2348-A | F-DH5a Competent Cell | 20×100μl | 100×100μl |
MF2348-B | Control Vector puC19, 10pg/μl | 10μl | 10μl |
菌株描述
DH5α是实验室最常用的一种质粒克隆用菌株,其φ80lacZ△M15基因的产物可与载体编码的 β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补,可用于蓝白斑筛选。recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。特别适用于高效的质粒DNA克隆并能保证高拷贝质粒的稳定复制。
DH5a菌株基因型:F-φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi-1 gyrA96 relA1 phoA
产品描述
本品是大肠杆菌DH5a菌株经特殊工艺制作所得的快速转化感受态细胞,无需42℃热激,37℃孵育步骤,只需冰浴,10min内能完成转化、涂板步骤。经pUC19质粒检测转化效率可达1~5×108 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。
保存与运输条件:
保存:-80℃保存,六个月有效。
运输:干冰运输。
注意事项
1) 感受态细胞必须用干冰运输。感受态细胞应在-80℃保存,不可反复冻融且放置时间过长,否则会减低感受态细胞的转化效率。
2) 最好在冰上融化感受态细胞。在冰上融化后立即加入目标DNA,不可在冰上放置时间过长。长时间存放会降低转化效率,混入目的DNA时需轻柔操作。
3) 进行转化操作时,需在相应温度及无菌条件下进行。
4) 为防止转化实验不成功,可保留部分连接反应液以重新转化,将损失降到最低。
5) 产品包装内含质粒pUC19 DNA(10pg/μl),供对照实验用。
6) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】
一、 快速转化操作(10min)
1.1 提前15min将用到的筛选培养平板拿到37℃预热。
1.2 取F-DH5a感受态细胞从-80℃取出,迅速插入冰中,5min后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物),并用手拨打管底轻轻混匀,冰中静置5min。
1.3 用移液枪将感受态细胞-DNA混合物转移到37℃预热的LB筛选培养平板上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,表面无水渍。
1.4 将平板倒置于37℃过夜培养。如果进行蓝白斑筛选,至少培养15h。
【注意】:F-DH5a感受态细胞涂含氨苄或羧苄筛选培养平板时效率最高,若涂卡那霉素或其他抗生素平板,转化效率会下降(由于没有孵育步骤,卡那霉素等对菌体毒性较大)。若要提高卡那霉素或其他抗性质粒的转化效率,按照快速热激转化操作。
二、 快速热激转化操作(25min,能提高转化效率)
2.1 取F-DH5a感受态细胞从-80℃取出,迅速插入冰中,5min后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物),并用手拨打管底轻轻混匀,冰中静置5min。
2.2 42℃水浴热激45s,迅速放回冰上并静置2min。 此过程不要摇动离心管。
2.3 加入700μl 无菌的LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃ 摇床,200 rpm振荡培养10min。
2.4 用移液枪将感受态细胞-DNA混合物转移到37℃预热的LB培养平板(含抗生素)上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,表面无水渍。
2.5 将平板倒置于37℃过夜培养。如果进行蓝白斑筛选,至少培养15h。
【注意】:当质粒>7kb,通过以下热激转化操作:取F-DH5a感受态细胞从-80℃取出,迅速插入冰中,5min后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物),并用手拨打管底轻轻混匀,冰中静置20min。
42℃水浴热激45s,迅速放回冰上并静置2min。加入700μl 无菌的LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃ 摇床,200 rpm振荡培养30min。之后涂板。
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货号 | 名称 | 规格 |
MF2311-2000UL | DH5α Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 | 20×100μl |
MF2312-2000UL | Top10 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 | 20×100μl |
MF2313-2000UL | JM109 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 | 20×100μl |
MF2314-1000UL | DH10B Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 | 10×100μl |
MF2315-1000UL | XL10-Gold Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 | 10×100μl |
MF2347-2000UL | F-TOP10 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 | 20×100μl |
MF2348-2000UL | F-DH5a Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 | 20×100μl |
MF2349-1000UL | TOP10F` Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 | 10×100μl |
MF2350-1000UL | EPI400 Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 | 10×100μl |
JP0021-10G | Chloramphenicol, USP Grade氯霉素 | 10g |
JP0018-10G | Ampicillin, Sodium Salt氨苄青霉素钠 | 10g |
JP0017-5G | Carbenicillin, Disodium Salt羧苄青霉素二钠盐 | 5g |
JP0019-10G | Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 | 10g |
JP0014-1G | Rifampicin, USP Grade利福平 | 1g |
品牌: |
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CAS: |
N/A |
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20×100μl |
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F-TOP10 Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞
货号: MF2347-10000UL 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学
品牌: |
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CAS: |
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100×100μl |
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