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S17-1 λpir Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞

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S17-1 λpir Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 货号： MF2493-5000UL 品牌： Jinpan 标签： 分子生物学

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S17-1 λpir Chemically Competent Cell

大肠杆菌化学感受态细胞

 

产品订购： 更大包装或产品技术问题，请来电/在线咨询，电话：021-50837765 。

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 产品名称 规格 价格（元）

MF2493-1000UL

 S17-1 λpir Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl

408
MF2493-5000UL S17-1 λpir Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 50×100μl

1728

菌株描述

S17-1 λpir菌株的染色体整合了RP4-2质粒，该质粒可携带染色体的部分DNA在接合菌株之间转移。S17- 1 λpir菌株缺失核酸内切酶 （endA1），提高了质粒DNA的产量和质量；重组酶缺陷型 （recA1）减少插入片段的同源重组概率，保证了插入DNA的稳定性。Tn7赋予该菌株弱的链霉素抗性。

S17-1 λpir菌株基因型：RP4-2(Km::Tn7,Tc::Mu-1), pro-82, LAMpir, recA1, endA1, thiE1, hsdR17, creC510

产品描述

本品是大肠杆菌S17-1 λpir菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。经pUC19质粒检测转化效率可达1×108 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。

产品包装

组分编号 组分名称 货号（规格）
MF2493-1000UL MF2493-5000UL
MF2493-A S17-1 λpir Chemically Competent Cell 10×100μl 50×100μl
MF2493-B Control Vector puC19, 10pg/μl 10μl 10μl

保存与运输条件：

保存：-80℃保存，六个月有效。

运输：干冰运输。

注意事项

1） 感受态细胞必须用干冰运输，感受态细胞应在-80℃保存。

2） 感受态细胞最好在冰上融化，不可在冰上放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。

3） 进行转化操作时，需在相应温度及无菌条件下进行。

4） 为防止转化实验不成功，可保留部分连接反应液以重新转化，将损失降到最低。

5） 产品包装内含质粒pUC19 DNA(10pg/μl)，供对照实验用。

6） 后续进行阳性菌落的扩繁和高纯质粒的获取，推荐选用TB培养基（Terrific Broth），优于LB或SOC。

7） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】

1） 从-80℃冰箱取出取感受态细胞，迅速置于冰浴中，5min后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物），用手轻弹管底轻轻混匀（避免用枪吸打），冰浴静置25min。

2） 42℃水浴热激45s，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2min。此过程不要摇动离心管。

3） 向每个离心管中加700 μl无菌的LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃ 摇床，200 rpm振荡培养60min，目的使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。

4） 低速离心收菌（比如5000rpm，1min），留取100μl左右上清，用枪轻轻吹打重悬菌块，之后加到含所选质粒筛选抗生素的LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于室温（或37℃）直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养过夜（12-15h）。

【注意】：

a）涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可不用离心，直接取少量转化产物涂布平板；反之，若转化的DNA总量较少，则通过离心（5000 rpm，1min）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。原则是以在平板上能挑到单克隆菌落为宜。

b）新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。

c）涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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MF2342-1000UL OverExpress C43(DE3) Chemically Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2339-1000UL Rosetta-gami 2(DE3) Chemically Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2340-1000UL Rosetta-gami B(DE3) Chemically Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2334-1000UL BL21 Star (DE3) Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2335-1000UL BL21 Star (DE3) pLysS Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2481-1000UL BL21 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2482-1000UL OverExpress C43(DE3)pLysS Chemically Competent Cell化学感受态细胞 10×100μl
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MF2490-1000UL ArcticExpress(DE3)pRARE2 Chemically Competent Cell化学感受态细胞 10×100μl
MF2491-1000UL NovaBlue(DE3) Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2492-1000UL M15(pREP4) Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2493-1000UL S17-1 λpir Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
JP0021-10G Chloramphenicol, USP Grade氯霉素 10g
JP0019-10G Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 10g
MF2002-1G IPTG异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 1g

 

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归金畔生物/JP金畔所有】

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规格：

50×100μl
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大肠杆菌化学感受态细胞

 

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MF2493-1000UL

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MF2493-5000UL S17-1 λpir Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 50×100μl

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菌株描述

S17-1 λpir菌株的染色体整合了RP4-2质粒，该质粒可携带染色体的部分DNA在接合菌株之间转移。S17- 1 λpir菌株缺失核酸内切酶 （endA1），提高了质粒DNA的产量和质量；重组酶缺陷型 （recA1）减少插入片段的同源重组概率，保证了插入DNA的稳定性。Tn7赋予该菌株弱的链霉素抗性。

S17-1 λpir菌株基因型：RP4-2(Km::Tn7,Tc::Mu-1), pro-82, LAMpir, recA1, endA1, thiE1, hsdR17, creC510

产品描述

本品是大肠杆菌S17-1 λpir菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。经pUC19质粒检测转化效率可达1×108 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。

产品包装

组分编号 组分名称 货号（规格）
MF2493-1000UL MF2493-5000UL
MF2493-A S17-1 λpir Chemically Competent Cell 10×100μl 50×100μl
MF2493-B Control Vector puC19, 10pg/μl 10μl 10μl

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保存：-80℃保存，六个月有效。

运输：干冰运输。

注意事项

1） 感受态细胞必须用干冰运输，感受态细胞应在-80℃保存。

2） 感受态细胞最好在冰上融化，不可在冰上放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。

3） 进行转化操作时，需在相应温度及无菌条件下进行。

4） 为防止转化实验不成功，可保留部分连接反应液以重新转化，将损失降到最低。

5） 产品包装内含质粒pUC19 DNA(10pg/μl)，供对照实验用。

6） 后续进行阳性菌落的扩繁和高纯质粒的获取，推荐选用TB培养基（Terrific Broth），优于LB或SOC。

7） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】

1） 从-80℃冰箱取出取感受态细胞，迅速置于冰浴中，5min后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物），用手轻弹管底轻轻混匀（避免用枪吸打），冰浴静置25min。

2） 42℃水浴热激45s，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2min。此过程不要摇动离心管。

3） 向每个离心管中加700 μl无菌的LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃ 摇床，200 rpm振荡培养60min，目的使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。

4） 低速离心收菌（比如5000rpm，1min），留取100μl左右上清，用枪轻轻吹打重悬菌块，之后加到含所选质粒筛选抗生素的LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于室温（或37℃）直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养过夜（12-15h）。

【注意】：

a）涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可不用离心，直接取少量转化产物涂布平板；反之，若转化的DNA总量较少，则通过离心（5000 rpm，1min）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。原则是以在平板上能挑到单克隆菌落为宜。

b）新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。

c）涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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MF2331-1000UL BL21 (DE3) Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
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MF2335-1000UL BL21 Star (DE3) pLysS Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
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MF2482-1000UL OverExpress C43(DE3)pLysS Chemically Competent Cell化学感受态细胞 10×100μl
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MF2491-1000UL NovaBlue(DE3) Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2492-1000UL M15(pREP4) Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2493-1000UL S17-1 λpir Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
JP0021-10G Chloramphenicol, USP Grade氯霉素 10g
JP0019-10G Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 10g
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S17-1 λpir Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞

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S17-1 λpir Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 货号： MF2493-5000UL 品牌： Jinpan 标签： 分子生物学

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S17-1 λpir Chemically Competent Cell

大肠杆菌化学感受态细胞

 

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菌株描述

S17-1 λpir菌株的染色体整合了RP4-2质粒，该质粒可携带染色体的部分DNA在接合菌株之间转移。S17- 1 λpir菌株缺失核酸内切酶 （endA1），提高了质粒DNA的产量和质量；重组酶缺陷型 （recA1）减少插入片段的同源重组概率，保证了插入DNA的稳定性。Tn7赋予该菌株弱的链霉素抗性。

S17-1 λpir菌株基因型：RP4-2(Km::Tn7,Tc::Mu-1), pro-82, LAMpir, recA1, endA1, thiE1, hsdR17, creC510

产品描述

本品是大肠杆菌S17-1 λpir菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。经pUC19质粒检测转化效率可达1×108 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。

产品包装

组分编号 组分名称 货号（规格）
MF2493-1000UL MF2493-5000UL
MF2493-A S17-1 λpir Chemically Competent Cell 10×100μl 50×100μl
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注意事项

1） 感受态细胞必须用干冰运输，感受态细胞应在-80℃保存。

2） 感受态细胞最好在冰上融化，不可在冰上放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。

3） 进行转化操作时，需在相应温度及无菌条件下进行。

4） 为防止转化实验不成功，可保留部分连接反应液以重新转化，将损失降到最低。

5） 产品包装内含质粒pUC19 DNA(10pg/μl)，供对照实验用。

6） 后续进行阳性菌落的扩繁和高纯质粒的获取，推荐选用TB培养基（Terrific Broth），优于LB或SOC。

7） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】

1） 从-80℃冰箱取出取感受态细胞，迅速置于冰浴中，5min后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物），用手轻弹管底轻轻混匀（避免用枪吸打），冰浴静置25min。

2） 42℃水浴热激45s，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2min。此过程不要摇动离心管。

3） 向每个离心管中加700 μl无菌的LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃ 摇床，200 rpm振荡培养60min，目的使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。

4） 低速离心收菌（比如5000rpm，1min），留取100μl左右上清，用枪轻轻吹打重悬菌块，之后加到含所选质粒筛选抗生素的LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于室温（或37℃）直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养过夜（12-15h）。

【注意】：

a）涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可不用离心，直接取少量转化产物涂布平板；反之，若转化的DNA总量较少，则通过离心（5000 rpm，1min）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。原则是以在平板上能挑到单克隆菌落为宜。

b）新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。

c）涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

相关产品

货号 名称 规格
MF2331-1000UL BL21 (DE3) Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2332-1000UL BL21 (DE3) pLysS Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2333-1000UL Rosetta (DE3) Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2341-1000UL Rosetta-gami(DE3)pLysS Chemically Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2342-1000UL OverExpress C43(DE3) Chemically Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2339-1000UL Rosetta-gami 2(DE3) Chemically Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2340-1000UL Rosetta-gami B(DE3) Chemically Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2334-1000UL BL21 Star (DE3) Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2335-1000UL BL21 Star (DE3) pLysS Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2481-1000UL BL21 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2482-1000UL OverExpress C43(DE3)pLysS Chemically Competent Cell化学感受态细胞 10×100μl
MF2489-1000UL ArcticExpress(DE3) Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2490-1000UL ArcticExpress(DE3)pRARE2 Chemically Competent Cell化学感受态细胞 10×100μl
MF2491-1000UL NovaBlue(DE3) Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2492-1000UL M15(pREP4) Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2493-1000UL S17-1 λpir Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
JP0021-10G Chloramphenicol, USP Grade氯霉素 10g
JP0019-10G Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 10g
MF2002-1G IPTG异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 1g

 

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归金畔生物/JP金畔所有】

规格信息

规格：

50×100μl
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SHuffle T7 Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞

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SHuffle T7 Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 货号： MF2291-5000UL 品牌： Jinpan 标签： 分子生物学

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SHuffle T7 Chemically Competent Cell

大肠杆菌化学感受态细胞

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GT115化学感受态细胞；TOP10；DH10B；XL1-Blue；pCpG-free质粒；pCpG-mcs；pCpG-LacZ；

产品订购： 更大包装或产品技术问题，请来电/在线咨询，电话：021-50837765 。

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MF2291-1000UL

 SHuffle T7 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl

429
MF2291-5000UL SHuffle T7 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 50×100μl

1799

菌株描述

SHuffle T7菌株是一款基因工程改造的K12衍生菌株，特别设计改进含二硫键蛋白在细胞质内的表达，适合于T7启动子驱动的蛋白表达。

该菌株染色体中整合一个拷贝的二硫键异构酶基因—DsbC，促进错误氧化的蛋白转化为正确形式。另外，细胞质中的DsbC也是一个分子伴侣，能协助不含二硫键蛋白的正确折叠。SHuffle T7菌株染色体中整合一个拷贝的T7 RNAP基因，可以表达噬菌体T7 TNA聚合酶，从而适用于T7启动子诱导的蛋白表达。LacIq基因的严格控制表达允许毒性基因得以克隆。SHuffle T7菌株具抵抗噬菌体T1（fhuA2）感染的特点，具链霉素和壮观霉素抗性。

SHuffle T7菌株基因型：F´ lac, pro, lacIq / Δ(ara-leu)7697 araD139 fhuA2 lacZ::T7 gene1 Δ(phoA)PvuII phoR ahpC* galE (or U) galK λatt::pNEB3-r1-cDsbC (SpecR, lacIq) ΔtrxB rpsL150(StrR) Δgor Δ(malF)3

产品描述

本品是大肠杆菌SHuffle T7菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。经pUC19载体检测转化效率可达>1×108cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。

产品包装

组分编号 组分名称 货号（规格）
MF2291-1000UL MF2291-5000UL
MF2291-A SHuffle T7Chemically Competent Cell 10×100μl 50×100μl
MF2291-B Control Vector puC19,10pg/μl 10μl 10μl

保存与运输条件：

保存：-80℃保存，六个月有效。

运输：干冰运输。

注意事项

1） 感受态细胞必须用干冰运输。感受态细胞应在-80℃保存，不可反复冻融且放置时间过长，否则会减低感受态细胞的转化效率。

2） 最好在冰上融化感受态细胞。

3） 进行转化操作时，需在相应温度及无菌条件下进行。

4） 为防止转化实验不成功，可保留部分连接反应液以重新转化，将损失降到最低。

5） 产品包装内含载体pUC19 DNA(10pg/μl)，供对照实验用。

6） SHuffle T7菌株具链霉素、壮观霉素抗性，不可用于具链霉素、壮观霉素抗性质粒的转化。

7） 为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间、温度、IPTG浓度（0.1~2mM）都需进行优化。

8） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】

1） 从-80℃冰箱取出取感受态细胞，迅速置于冰浴中，5min后待菌块融化，加入目的质粒，用手轻弹管底轻轻混匀（避免用枪吹打），冰浴静置25min。

2） 42℃水浴热激45s，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2min。此过程不要摇动离心管。

3） 向每个离心管中加入700 μl无菌的LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床，200 rpm振荡培养60min，目的使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。

4） 低速离心收菌（比如5000rpm，1min），留取50-100μl左右上清，用枪轻轻吹打重悬菌块，之后加到含相应抗生素的LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于室温（或37℃）直至液体被吸收，之后倒置放于37℃过夜培养。

【注意】：

a）涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可不用离心，直接取少量转化产物涂布平板；反之，若转化的DNA总量较少，则通过离心（5,000 rpm，1min）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。

b）新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。

c）涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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货号 名称 规格
MF2291-1000UL SHuffle T7 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2292-1000UL Stbl4 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2293-1000UL T1 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2311-2000UL DH5α Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 20×100μl
MF2312-2000UL TOP10 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 20×100μl
MF2313-2000UL JM109 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 20×100μl
MF2314-1000UL DH10B Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2315-1000UL XL10-Gold Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2320-1000UL JM110 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2331-1000UL BL21 (DE3) Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2332-1000UL BL21 (DE3) pLysS Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2333-1000UL Rosetta (DE3) Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2334-1000UL BL21 Star (DE3) Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
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MF2318-1000UL BJ5183 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2319-1000UL BJ5183-AD-1 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl

 

 

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其他信息

规格：

10×100μl
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SHuffle T7 Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞

发表于由

SHuffle T7 Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 货号： MF2291-1000UL 品牌： Jinpan 标签： 分子生物学

描述

SHuffle T7 Chemically Competent Cell

大肠杆菌化学感受态细胞

​

产品标签

GT115化学感受态细胞；TOP10；DH10B；XL1-Blue；pCpG-free质粒；pCpG-mcs；pCpG-LacZ；

产品订购： 更大包装或产品技术问题，请来电/在线咨询，电话：021-50837765 。

货号

 产品名称 规格 价格（元）

MF2291-1000UL

 SHuffle T7 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl

429
MF2291-5000UL SHuffle T7 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 50×100μl

1799

菌株描述

SHuffle T7菌株是一款基因工程改造的K12衍生菌株，特别设计改进含二硫键蛋白在细胞质内的表达，适合于T7启动子驱动的蛋白表达。

该菌株染色体中整合一个拷贝的二硫键异构酶基因—DsbC，促进错误氧化的蛋白转化为正确形式。另外，细胞质中的DsbC也是一个分子伴侣，能协助不含二硫键蛋白的正确折叠。SHuffle T7菌株染色体中整合一个拷贝的T7 RNAP基因，可以表达噬菌体T7 TNA聚合酶，从而适用于T7启动子诱导的蛋白表达。LacIq基因的严格控制表达允许毒性基因得以克隆。SHuffle T7菌株具抵抗噬菌体T1（fhuA2）感染的特点，具链霉素和壮观霉素抗性。

SHuffle T7菌株基因型：F´ lac, pro, lacIq / Δ(ara-leu)7697 araD139 fhuA2 lacZ::T7 gene1 Δ(phoA)PvuII phoR ahpC* galE (or U) galK λatt::pNEB3-r1-cDsbC (SpecR, lacIq) ΔtrxB rpsL150(StrR) Δgor Δ(malF)3

产品描述

本品是大肠杆菌SHuffle T7菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。经pUC19载体检测转化效率可达>1×108cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。

产品包装

组分编号 组分名称 货号（规格）
MF2291-1000UL MF2291-5000UL
MF2291-A SHuffle T7Chemically Competent Cell 10×100μl 50×100μl
MF2291-B Control Vector puC19,10pg/μl 10μl 10μl

保存与运输条件：

保存：-80℃保存，六个月有效。

运输：干冰运输。

注意事项

1） 感受态细胞必须用干冰运输。感受态细胞应在-80℃保存，不可反复冻融且放置时间过长，否则会减低感受态细胞的转化效率。

2） 最好在冰上融化感受态细胞。

3） 进行转化操作时，需在相应温度及无菌条件下进行。

4） 为防止转化实验不成功，可保留部分连接反应液以重新转化，将损失降到最低。

5） 产品包装内含载体pUC19 DNA(10pg/μl)，供对照实验用。

6） SHuffle T7菌株具链霉素、壮观霉素抗性，不可用于具链霉素、壮观霉素抗性质粒的转化。

7） 为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间、温度、IPTG浓度（0.1~2mM）都需进行优化。

8） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】

1） 从-80℃冰箱取出取感受态细胞，迅速置于冰浴中，5min后待菌块融化，加入目的质粒，用手轻弹管底轻轻混匀（避免用枪吹打），冰浴静置25min。

2） 42℃水浴热激45s，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2min。此过程不要摇动离心管。

3） 向每个离心管中加入700 μl无菌的LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床，200 rpm振荡培养60min，目的使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。

4） 低速离心收菌（比如5000rpm，1min），留取50-100μl左右上清，用枪轻轻吹打重悬菌块，之后加到含相应抗生素的LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于室温（或37℃）直至液体被吸收，之后倒置放于37℃过夜培养。

【注意】：

a）涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可不用离心，直接取少量转化产物涂布平板；反之，若转化的DNA总量较少，则通过离心（5,000 rpm，1min）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。

b）新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。

c）涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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