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Z-YVAD-FMK (Caspase-1 inhibitor) 凋亡相关蛋白Caspase-1抑制剂

发表于由

Z-YVAD-FMK (Caspase-1 inhibitor) 凋亡相关蛋白Caspase-1抑制剂

货号： JP3271-1MG 品牌： Jinpan 标签： 细胞生物学研究

描述

Z-YVAD-FMK (Caspase-1 inhibitor)

凋亡相关蛋白Caspase-1抑制剂

产品标签

Z-YVAD-FMK；Caspase-1 inhibitor；Z-VAD-FMK；细胞凋亡抑制剂；FCCP解偶联剂；CCCP；

产品信息

产品名称 产品编号 规格 价格（元）
Z-YVAD-FMK (Caspase-1 inhibitor) 凋亡相关蛋白Caspase-1抑制剂 JP3271-1MG 1mg 1950

产品描述

Z-YVAD-FMK，一种细胞膜渗透性、不可逆的caspase-1抑制剂，对caspase-4，caspase-5有较弱的抑制活性，对caspase-2，-3，-6或-7无抑制活性。Caco-2细胞中，Z-YVAD-FMK能显著降低丁酸盐诱导的生长抑制现象，当使用浓度为100μM，可完全消除丁酸盐效应。由此说明caspase-1抑制剂能明显改变caspase级联反应，减少丁酸盐诱导的凋亡效应。

本品Z-YVAD-FMK上的天冬氨酸P1位点进行O-甲基化修饰，即：Z-YVAD(OMe)-FMK，使其稳定性和细胞膜渗透性都得以提高。一旦进入细胞，内源性酯酶水解甲基基团，产生具生物活性的肽。

本品以粉末形式提供，货号：JP3271-1MG，稳定性高，可直接溶于DJPO配制储存液。作为一种不可逆、无细胞毒性的caspase-1抑制剂，是用来研究caspase活性的一种重要工具。

产品特性

1） 化学名：(8S,11S,14S)-methyl 14-(2-fluoroacetyl)-5-(4-hydroxybenzyl)-8-isopropyl-11-methyl-3,6,9,12- tetraoxo-1-phenyl-2-oxa-4,7,10,13-tetraazahexadecan-16-oate

2） 同义名：Z-Tyr-Val-Ala-Asp(OMe)-FMK;Z-Tyr-Val-Ala-Asp(OMe)-CH2F;Z-YVAD(OMe)-FMK;Caspase-1 inhibitor VI;

3） 序列：Z-Tyr-Val-Ala-Asp-fluoromethylketone

4） 分子式：C31H39FN4O9

5） 分子量：630.66 g/mol

6） 纯度：>98%

7） 化学结构式：

Z-YVAD-FMK (Caspase-1 inhibitor) 凋亡相关蛋白Caspase-1抑制剂

保存与运输方法

保存：-20℃干燥保存，2年稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）第一次溶解粉末配制储存液时，请根据单次使用次数分装冻存，一定要避免反复冻融，以保证产品的活性不受影响。

2）-20℃冻存的储存液从冰箱取出后，可在25℃水浴锅温育片刻直到全部融解，离心后待用。

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1）储存液配制：将1mgZ-YVAD-FMK（Mw：630.66 g/mol）溶于159 µl无水DJPO充分溶解后，即得

到10 mM储存液。-20℃分装干燥保存，避免反复冻融。

2）Z-YVAD-FMK在终浓度20µM时可非常有效的抑制大多数凋亡诱导剂诱导的细胞凋亡。常见有效浓度

范围5-20µM。细胞培养体系，DJPO的终浓度>0.2%会产生细胞毒性，进而误导对caspase抑制剂本身活性的分析。

3）Z-YVAD-FMK用于细胞凋亡抑制实验，至少需要和细胞凋亡诱导剂同时加入，或需在细胞凋亡诱导剂加入前10-30min加入细胞中，也可参考相关文献进行。

4）对于caspase激酶实验（如纯化或粗提取的caspase），Z-YVAD-FMK需要与待测样品预孵育10-20min，再进行后续测定。【注意】：本品为经甲基化处理的Z-YVAD-FMK，需先用酯酶（esterase）处理去除甲基化基团后，再进行体外激酶实验。

相关产品

货号 名称 规格
JP3270-1MG Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK 1mg
JP3271-1MG Z-YVAD-FMK (Caspase-1 inhibitor) 1mg
JP3272-1MG Z-DEVD-FMK (Caspase-3 inhibitor) 1mg
JP3273-1MG Ac-DEVD-CHO (Caspase-3/7 inhibitor) 1mg
JP3258-100UL CCCP (50 mM)凋亡诱导剂/质子载体 100μl
JP3259-100UL FCCP (50 mM)凋亡诱导剂/质子载体 100μl
JP3210-20T Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit细胞凋亡检测试剂盒 20T
JP3211-20T Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit细胞凋亡检测试剂盒 20T

 

规格信息

品牌：

Jinpan
CAS:

N/A
规格：

1mg
货期：

咨询客服

Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK (Powder) 泛Caspase抑制剂

发表于由

Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK (Powder) 泛Caspase抑制剂

货号： JP3270-25MG 品牌： Jinpan 标签： 细胞生物学研究

描述

Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK

产品标签

Z-VAD-FMK 泛caspase抑制剂；Z-VAD(OMe)-FMK；Apoptosis inducer 细胞凋亡诱导剂；Apoptosis inhibitor细胞凋亡抑制剂；FCCP；CCCP；CAS：187389-52-2；

产品信息

产品名称 产品编号 CAS NO. 规格 价格（元）
Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK JP3270-1MG 187389-52-2 1mg 685
Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK JP3270-5MG 187389-52-2 5mg 1875
Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK JP3270-25MG 187389-52-2 25mg 4925

产品描述

Z-VAD-FMK，一种具细胞膜渗透性、不可逆的泛caspase（pan-caspase）抑制剂，体外肿瘤细胞能够抑制caspase加工处理和阻断凋亡发生（IC50= 0.0015-5.8 mM），且具有体内活性。Z-VAD-FMK可降低Fas诱导的小鼠肝脏损伤，保持凋亡率低至＜1%。当使用浓度为50μM，还能提高7-羟基星形孢菌素和依托泊苷对HL60细胞的凋亡诱导效应。Z-VAD-FMK的促凋亡活性具有化合物特异性和ROS非依赖性的特点。

本品不同于传统的Z-VAD-FMK，在其天冬氨酸P1位点进行O-甲基化修饰，即：Z-VAD(OMe)-FMK，使其稳定性和细胞膜渗透性都得以提高。一旦进入细胞，内源性酯酶水解甲基基团，产生具生物活性的肽。

本品是一种不可逆且广谱的caspase抑制剂，且对细胞无毒，是用来研究caspase活性的一种重要工具。

产品特性

1） CAS NO：187389-52-2

2） 化学名：methyl (3S)-5-fluoro-3-[[(2S)-2-[[(2S)-3-methyl-2-(phenylmethoxycarbonylamino)butanoyl]amino] propanoyl]amino]-4-oxopentanoate

3） 同义名：Z-VAD(OMe)-FMK; Z-Val-Ala-Asp(OMe)-FMK; Z-Val-Ala-Asp(OMe)-fluoromethylketone; Benzyloxycarbonyl-Val-Ala-Asp(OMe)-fluoromethylketone; Pan-caspase inhibitor;

4） 分子式：C22H30FN3O7

5） 分子量：467.49 g/mol

6） 纯度：>98%

7） 溶解性：溶于DJPO（≥22mg/ml）【“≥”：表示能溶于标示浓度，但饱和溶解度未知。】

8） 结构式：Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK (Powder) 泛Caspase抑制剂

保存与运输方法

保存：-20℃干燥保存，至少2年稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

1） 第一次使用请将本品置于室温回温至少20min，低速离心后，加入适量的溶剂比如DJPO配制储存液，混匀后根据单次用量，分装冻存（-20℃保存约3个月有效，-80℃保存约6个月有效）。一定要避免反复冻融，以保证产品的活性不受影响。

2） 低温冻存的储存液从冰箱取出后，可在25℃水浴锅温育片刻直到全部融解，离心后待用。

3） 本品仅用作科研用途，不得用作临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，绝对禁止用在人身上。

4） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

配制储存液

质量

溶剂体积

浓度

 1mg 5mg 10mg
1mM 2.1391 mL 10.6954 mL 21.3908 mL
5mM 0.4278 mL 2.1391 mL 4.2782 mL
10mM 0.2139 mL 1.0695 mL 2.1391 mL
50mM 0.0428 mL 0.2139 mL 0.4278 mL

使用方法

1）Z-VAD-FMK在终浓度20µM时可非常有效的抑制大多数凋亡诱导剂诱导的细胞凋亡，比如抗Fas单克隆抗体处理的Jurkat细胞。本品的常见有效浓度范围5-100µM，处理时间1h。具体的工作浓度和处理时间请根据所需效果来调整。细胞培养体系，DJPO的终浓度>0.2%会产生细胞毒性，进而误导对caspase抑制剂本身活性的分析。

2）Z-VAD-FMK用于细胞凋亡抑制实验，至少需要和细胞凋亡诱导剂同时加入，或需在细胞凋亡诱导剂加入前10-30min加入细胞中，也可参考相关文献进行。

3）对于caspase激酶实验（如纯化或粗提取的caspase），Z-VAD-FMK需要与待测样品预孵育10-20min，再进行后续测定。【注意】：本品为经甲基化处理的Z-VAD-FMK，需先用酯酶（esterase）处理去除甲基化基团后，再进行体外激酶实验。

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货号 名称 规格
JP3270-1MG Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK 1mg
JP3271-1MG Z-YVAD-FMK (Caspase-1 inhibitor) 1mg
JP3272-1MG Z-DEVD-FMK (Caspase-3 inhibitor) 1mg
JP3273-1MG Ac-DEVD-CHO (Caspase-3/7 inhibitor) 1mg
JP3258-100UL CCCP (50 mM)凋亡诱导剂/质子载体 100μl
JP3259-100UL FCCP (50 mM)凋亡诱导剂/质子载体 100μl
JP3210-20T Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit细胞凋亡检测试剂盒 20T
JP3211-20T Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit细胞凋亡检测试剂盒 20T

。

规格信息

品牌：

Jinpan
CAS:

187389-52-2
规格：

25mg
货期：

咨询客服

Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK (Powder) 泛Caspase抑制剂

发表于由

Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK (Powder) 泛Caspase抑制剂

货号： JP3270-5MG 品牌： Jinpan 标签： 细胞生物学研究

描述

Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK

产品标签

Z-VAD-FMK 泛caspase抑制剂；Z-VAD(OMe)-FMK；Apoptosis inducer 细胞凋亡诱导剂；Apoptosis inhibitor细胞凋亡抑制剂；FCCP；CCCP；CAS：187389-52-2；

产品信息

产品名称 产品编号 CAS NO. 规格 价格（元）
Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK JP3270-1MG 187389-52-2 1mg 685
Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK JP3270-5MG 187389-52-2 5mg 1875
Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK JP3270-25MG 187389-52-2 25mg 4925

产品描述

Z-VAD-FMK，一种具细胞膜渗透性、不可逆的泛caspase（pan-caspase）抑制剂，体外肿瘤细胞能够抑制caspase加工处理和阻断凋亡发生（IC50= 0.0015-5.8 mM），且具有体内活性。Z-VAD-FMK可降低Fas诱导的小鼠肝脏损伤，保持凋亡率低至＜1%。当使用浓度为50μM，还能提高7-羟基星形孢菌素和依托泊苷对HL60细胞的凋亡诱导效应。Z-VAD-FMK的促凋亡活性具有化合物特异性和ROS非依赖性的特点。

本品不同于传统的Z-VAD-FMK，在其天冬氨酸P1位点进行O-甲基化修饰，即：Z-VAD(OMe)-FMK，使其稳定性和细胞膜渗透性都得以提高。一旦进入细胞，内源性酯酶水解甲基基团，产生具生物活性的肽。

本品是一种不可逆且广谱的caspase抑制剂，且对细胞无毒，是用来研究caspase活性的一种重要工具。

产品特性

1） CAS NO：187389-52-2

2） 化学名：methyl (3S)-5-fluoro-3-[[(2S)-2-[[(2S)-3-methyl-2-(phenylmethoxycarbonylamino)butanoyl]amino] propanoyl]amino]-4-oxopentanoate

3） 同义名：Z-VAD(OMe)-FMK; Z-Val-Ala-Asp(OMe)-FMK; Z-Val-Ala-Asp(OMe)-fluoromethylketone; Benzyloxycarbonyl-Val-Ala-Asp(OMe)-fluoromethylketone; Pan-caspase inhibitor;

4） 分子式：C22H30FN3O7

5） 分子量：467.49 g/mol

6） 纯度：>98%

7） 溶解性：溶于DJPO（≥22mg/ml）【“≥”：表示能溶于标示浓度，但饱和溶解度未知。】

8） 结构式：Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK (Powder) 泛Caspase抑制剂

保存与运输方法

保存：-20℃干燥保存，至少2年稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

1） 第一次使用请将本品置于室温回温至少20min，低速离心后，加入适量的溶剂比如DJPO配制储存液，混匀后根据单次用量，分装冻存（-20℃保存约3个月有效，-80℃保存约6个月有效）。一定要避免反复冻融，以保证产品的活性不受影响。

2） 低温冻存的储存液从冰箱取出后，可在25℃水浴锅温育片刻直到全部融解，离心后待用。

3） 本品仅用作科研用途，不得用作临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，绝对禁止用在人身上。

4） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

配制储存液

质量

溶剂体积

浓度

 1mg 5mg 10mg
1mM 2.1391 mL 10.6954 mL 21.3908 mL
5mM 0.4278 mL 2.1391 mL 4.2782 mL
10mM 0.2139 mL 1.0695 mL 2.1391 mL
50mM 0.0428 mL 0.2139 mL 0.4278 mL

使用方法

1）Z-VAD-FMK在终浓度20µM时可非常有效的抑制大多数凋亡诱导剂诱导的细胞凋亡，比如抗Fas单克隆抗体处理的Jurkat细胞。本品的常见有效浓度范围5-100µM，处理时间1h。具体的工作浓度和处理时间请根据所需效果来调整。细胞培养体系，DJPO的终浓度>0.2%会产生细胞毒性，进而误导对caspase抑制剂本身活性的分析。

2）Z-VAD-FMK用于细胞凋亡抑制实验，至少需要和细胞凋亡诱导剂同时加入，或需在细胞凋亡诱导剂加入前10-30min加入细胞中，也可参考相关文献进行。

3）对于caspase激酶实验（如纯化或粗提取的caspase），Z-VAD-FMK需要与待测样品预孵育10-20min，再进行后续测定。【注意】：本品为经甲基化处理的Z-VAD-FMK，需先用酯酶（esterase）处理去除甲基化基团后，再进行体外激酶实验。

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货号 名称 规格
JP3270-1MG Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK 1mg
JP3271-1MG Z-YVAD-FMK (Caspase-1 inhibitor) 1mg
JP3272-1MG Z-DEVD-FMK (Caspase-3 inhibitor) 1mg
JP3273-1MG Ac-DEVD-CHO (Caspase-3/7 inhibitor) 1mg
JP3258-100UL CCCP (50 mM)凋亡诱导剂/质子载体 100μl
JP3259-100UL FCCP (50 mM)凋亡诱导剂/质子载体 100μl
JP3210-20T Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit细胞凋亡检测试剂盒 20T
JP3211-20T Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit细胞凋亡检测试剂盒 20T

。

规格信息

品牌：

Jinpan
CAS:

187389-52-2
规格：

5mg
货期：

咨询客服

Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK (Powder) 泛Caspase抑制剂

发表于由

Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK (Powder) 泛Caspase抑制剂

货号： JP3270-1MG 品牌： Jinpan 标签： 细胞生物学研究

描述

Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK

产品标签

Z-VAD-FMK 泛caspase抑制剂；Z-VAD(OMe)-FMK；Apoptosis inducer 细胞凋亡诱导剂；Apoptosis inhibitor细胞凋亡抑制剂；FCCP；CCCP；CAS：187389-52-2；

产品信息

产品名称 产品编号 CAS NO. 规格 价格（元）
Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK JP3270-1MG 187389-52-2 1mg 685
Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK JP3270-5MG 187389-52-2 5mg 1875
Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK JP3270-25MG 187389-52-2 25mg 4925

产品描述

Z-VAD-FMK，一种具细胞膜渗透性、不可逆的泛caspase（pan-caspase）抑制剂，体外肿瘤细胞能够抑制caspase加工处理和阻断凋亡发生（IC50= 0.0015-5.8 mM），且具有体内活性。Z-VAD-FMK可降低Fas诱导的小鼠肝脏损伤，保持凋亡率低至＜1%。当使用浓度为50μM，还能提高7-羟基星形孢菌素和依托泊苷对HL60细胞的凋亡诱导效应。Z-VAD-FMK的促凋亡活性具有化合物特异性和ROS非依赖性的特点。

本品不同于传统的Z-VAD-FMK，在其天冬氨酸P1位点进行O-甲基化修饰，即：Z-VAD(OMe)-FMK，使其稳定性和细胞膜渗透性都得以提高。一旦进入细胞，内源性酯酶水解甲基基团，产生具生物活性的肽。

本品是一种不可逆且广谱的caspase抑制剂，且对细胞无毒，是用来研究caspase活性的一种重要工具。

产品特性

1） CAS NO：187389-52-2

2） 化学名：methyl (3S)-5-fluoro-3-[[(2S)-2-[[(2S)-3-methyl-2-(phenylmethoxycarbonylamino)butanoyl]amino] propanoyl]amino]-4-oxopentanoate

3） 同义名：Z-VAD(OMe)-FMK; Z-Val-Ala-Asp(OMe)-FMK; Z-Val-Ala-Asp(OMe)-fluoromethylketone; Benzyloxycarbonyl-Val-Ala-Asp(OMe)-fluoromethylketone; Pan-caspase inhibitor;

4） 分子式：C22H30FN3O7

5） 分子量：467.49 g/mol

6） 纯度：>98%

7） 溶解性：溶于DJPO（≥22mg/ml）【“≥”：表示能溶于标示浓度，但饱和溶解度未知。】

8） 结构式：Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK (Powder) 泛Caspase抑制剂

保存与运输方法

保存：-20℃干燥保存，至少2年稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

1） 第一次使用请将本品置于室温回温至少20min，低速离心后，加入适量的溶剂比如DJPO配制储存液，混匀后根据单次用量，分装冻存（-20℃保存约3个月有效，-80℃保存约6个月有效）。一定要避免反复冻融，以保证产品的活性不受影响。

2） 低温冻存的储存液从冰箱取出后，可在25℃水浴锅温育片刻直到全部融解，离心后待用。

3） 本品仅用作科研用途，不得用作临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，绝对禁止用在人身上。

4） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

配制储存液

质量

溶剂体积

浓度

 1mg 5mg 10mg
1mM 2.1391 mL 10.6954 mL 21.3908 mL
5mM 0.4278 mL 2.1391 mL 4.2782 mL
10mM 0.2139 mL 1.0695 mL 2.1391 mL
50mM 0.0428 mL 0.2139 mL 0.4278 mL

使用方法

1）Z-VAD-FMK在终浓度20µM时可非常有效的抑制大多数凋亡诱导剂诱导的细胞凋亡，比如抗Fas单克隆抗体处理的Jurkat细胞。本品的常见有效浓度范围5-100µM，处理时间1h。具体的工作浓度和处理时间请根据所需效果来调整。细胞培养体系，DJPO的终浓度>0.2%会产生细胞毒性，进而误导对caspase抑制剂本身活性的分析。

2）Z-VAD-FMK用于细胞凋亡抑制实验，至少需要和细胞凋亡诱导剂同时加入，或需在细胞凋亡诱导剂加入前10-30min加入细胞中，也可参考相关文献进行。

3）对于caspase激酶实验（如纯化或粗提取的caspase），Z-VAD-FMK需要与待测样品预孵育10-20min，再进行后续测定。【注意】：本品为经甲基化处理的Z-VAD-FMK，需先用酯酶（esterase）处理去除甲基化基团后，再进行体外激酶实验。

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货号 名称 规格
JP3270-1MG Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK 1mg
JP3271-1MG Z-YVAD-FMK (Caspase-1 inhibitor) 1mg
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JP3273-1MG Ac-DEVD-CHO (Caspase-3/7 inhibitor) 1mg
JP3258-100UL CCCP (50 mM)凋亡诱导剂/质子载体 100μl
JP3259-100UL FCCP (50 mM)凋亡诱导剂/质子载体 100μl
JP3210-20T Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit细胞凋亡检测试剂盒 20T
JP3211-20T Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit细胞凋亡检测试剂盒 20T

品。

规格信息

品牌：

Jinpan
CAS:

187389-52-2
规格：

1mg
货期：

咨询客服

Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit 细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒

发表于由

Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit 细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒

货号： JP3234-100T 品牌： Jinpan 标签： 细胞生物学研究

描述

Caspase-9 Activity Assay Kit (Fluorometric)

 Caspase-9活性检测试剂盒（荧光法）

 

产品信息

产品名称

 产品编号 规格 价格（元）

Caspase-9活性检测试剂盒（荧光法）

 JP3234-20T 20T

930
Caspase-9活性检测试剂盒（荧光法） JP3234-100T 100T

2980

​

产品描述

Caspases（Cysteine-requiringAspartate Proteases）是一个高度保守的半胱氨酸蛋白酶家族，特异性识别底物中的天冬氨酸残基，在介导细胞凋亡的过程中发挥着非常重要的作用。Caspases以潜在酶原的形式表达，通过自发蛋白分解机制或经其他蛋白酶（通常是其他caspases）加工处理的方式被活化。人caspases可细分为三大功能组：细胞因子活化（caspase-1，-4，-5和-13），凋亡启动（caspase-2，-8，-9和-10）和凋亡执行（caspase-3，-6和-7）。

Caspase-9（Caspase9），也称为Mch6，ICE LAP6和Apaf3，作为caspases家族的成员之一，含CARD结构域（caspase募集结构域），是细胞凋亡信号转导过程中比较上游的一个caspase。Caspase-9酶原分子量约47kDa，存在于胞浆内，一旦活化，转移到线粒体。Caspase-9参与caspase活化级联，负责凋亡执行，和切割/活化下游的caspase-3和caspase-6。当募集到Apaf1/细胞色素c复合物后，caspase-9被激活。Caspase-9的激活可通过磷酸化进行调控。

Caspase-9活性检测试剂盒（荧光法）（Caspase-9 Activity Assay Kit, Fluorometric or Caspase-9 Fluorometric Assay Kit）以偶联上发色基团AFC的caspase-9序列特异性的多肽为底物。当底物被caspase-9剪切后，发色基团被释放出来，进而用荧光酶标仪或荧光光度计来测定其荧光强度（激发波长=485nm，发射波长=535nm）。通过计算RFU凋亡诱导组/RFU阴性对照组的比值来确定凋亡诱导组caspase-9的活化程度。

本品适用于培养细胞以及新鲜组织的caspase-9活性检测。

产品包装

编号 组分名称 保存方法 货号（规格）
JP3234-20T JP3234-100T
JP3234-A Lysis Buffer裂解缓冲液 2-8℃ 5ml 20ml
JP3234-B 2× Reaction Buffer 2×反应缓冲液 2-8℃ 2ml 10ml
JP3234-C Caspase-9 Substrate Caspase-9底物 -20℃避光 6μl 30μl
JP3234-D 0.1M DTT -20℃避光 60μl 250μl

保存与运输方法

保存：-20℃保存，1年有效。开盒后置Lysis Buffer和2× Reaction Buffer于2-8℃保存。Caspase-9 Substrate和0.1M DTT需要避光冻存。

运输：冰袋运输。

注意事项

1） Caspase-9 Substrate需避光保存和使用。

2） 某些凋亡诱导剂诱导的凋亡可能通过caspase-9非依赖的方式进行，此种情况使用本品检测的caspase-9活性无明显变化，则，需要考虑凋亡机制中的其他信号通路。

3） 起始细胞数量需达3~5×106个或新鲜组织量达50~100mg，以保证达到测定所需的100~200μg蛋白量。Caspase-9的活性与细胞裂解后的蛋白含量有关，如测定的RFU值偏低，可通过适当延长反应时间来操作。但如果测定的RFU值依然不高，则要通过增加细胞数量或组织量的方法来提高蛋白量。

4） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1.需要的其他试剂和材料

仪器：低温高速离心机、荧光酶标仪、微量移液器、玻璃匀浆器（组织样本）

耗材：1.5ml微量离心管、白色或黑色（不透明、平底）的96孔酶标板

试剂：PBS、蛋白定量试剂（比如：Bradford法蛋白浓度测定试剂盒）、ddH2O

2.试剂准备

2.1 Lysis Buffer（含DTT）

于实验前，按每50μl Lysis Buffer 加入0.5μl DTT的比例准备足量的裂解工作液，置于4℃或冰上待用。

2.2 2×Reaction Buffer（含DTT）

于使用前，按每50μl 2×Reaction Buffer 加入0.5μl DTT的比例准备足量的反应工作液。

2.3 Caspase-9 Substrate工作液

将Caspase-9 Substrate从冰箱内取出，置于室温（或25℃水浴）使其充分融化，低速离心使其沉至管底。于使用前，按照19.5μl 2×Reaction Buffer 加入0.5μl Caspase-9 Substrate的比例准备足量的Caspase-9 Substrate工作液。

3.样本准备

3.1 细胞裂解

a）用合适方法诱导细胞凋亡，同时设立阴性对照组（不加诱导剂），收集3~5×106个细胞。

b）PBS洗涤细胞2次（2000rpm，离心5min），尽量吸尽PBS上清。

c）往离心的沉淀细胞中加入100μl预冷的Lysis Buffer（含DTT），吹打混匀。

d）置冰上裂解20~60min，其间涡旋振荡3~4次，每次10s；或冻融2~3次。

e）4℃，10,000rpm离心1min。

f）小心吸取上清（含裂解释放的蛋白质）转移到新的EP管内，置于冰上待用。

g）取少量上清（1~2μl），用常规方法（Bradford法）测定蛋白浓度。

3.2 组织裂解

a）取50~100mg组织置于培养皿内，用手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入150~200μl预冷的Lysis Buffer（含DTT），用玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作。

b）将组织匀浆液转移到1.5ml预冷的离心管，10,000rpm，4℃离心5min。

c）小心吸取上清（含裂解释放的蛋白质）转移到新的EP管内，置于冰上待用。

d）取少量上清（1~2μl），用常规方法（Bradford法）测定蛋白浓度。

4.Caspase-9活性检测

 

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规格信息

品牌：

Jinpan
CAS:

N/A
规格：

100T
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