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BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞

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BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞

货号： MF2337-5000UL 品牌： Jinpan 标签： 分子生物学

描述

BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞

 

产品订购：更大包装或产品技术问题，请来电/在线咨询，电话：021-50837765 。

货号 产品名称 规格              价格（元）   
MF2337-1000UL     BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL Competent Cell化学感受态细胞    10×100μl 396
MF2337-5000UL BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL Competent Cell化学感受态细胞 50×100μl 1696

产品组分：

组分编号       组分名称

货号（规格）
MF2337-1000UL       MF2337-5000UL     
MF2337-A BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL Competent Cell       10×100μl 50×100μl
MF2337-B Control Plasmid puC19, 10 pg/μl 10μl 10μl

菌株描述

BL21-CodonPlus菌株来源于Stratagene公司高性能的BL21-Gold菌株，特别适合在大肠杆菌内高水平表达异源蛋白。由于异源蛋白来源宿主大量存在的某些tRNA在大肠杆菌内很是稀少，因此，想在大肠杆菌内有效表达异源蛋白通常受到限制。外力驱动下的高水平表达异源蛋白会耗尽已有的稀有tRNA，导致翻译中止。BL21-CodonPlus菌株正是根据此缺陷而基因改造后的菌株，额外添加在大肠杆菌内最常见限制异源蛋白表达的几种tRNA的基因拷贝。这些tRNA的存在使得许多原来在传统BL21菌株内表达很弱的异源蛋白能够在BL21-CodonPlus菌株内大量表达。BL21-CodonPlus-RIPL补充大肠杆菌缺乏的4种稀有密码子（AGA, AUA, CCC, CUA）对应的tRNA（argU, ileY, proL, leuW），显著提高外源基因，尤其是富含AT-或GC-基因的异源蛋白在大肠杆菌内的表达。

BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL菌株染色体还整合了λ噬菌体DE3溶原体（其上携带lacUV5启动子调控的T7 RNA聚合酶基因），可用于pET系列、pGEX、pMAL等载体的蛋白表达，同时具有四环素，氯霉素，链霉素和壮观霉素抗性。

BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL菌株基因型：F–ompT hsdS(rB–mB–)dcm+ TetRgal λ(DE3) endA Hte [argU proL CamR] [argU ileY leuW Strep/SpecR]

产品描述

本品是大肠杆菌BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞，可用于DNA的热激转化。经pUC19质粒检测转化效率可达108 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。

 

保存与运输条件

保存：-80℃保存，六个月有效。

运输：干冰运输。

 

注意事项

1）   感受态细胞必须用干冰运输。感受态细胞应在-80℃保存，不可反复冻融且放置时间过长，否则会减低感受态细胞的转化效率。

2）   最好在冰上融化感受态细胞。

3）   进行转化操作时，需在相应温度及无菌条件下进行。

4）   为防止转化实验不成功，可保留部分连接反应液以重新转化，将损失降到最低。

5）   产品包装内含质粒pUC19 DNA(10pg/μl)，供对照实验用。

6）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】

1）  从-80℃冰箱取出取感受态细胞，迅速置于冰浴中，5min后待菌块融化，加入目的DNA，用手轻弹管底轻轻混匀，冰浴静置25min。

2）   42℃热激45s，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3min。此过程不要摇动离心管。

3）   向每个离心管中加700 μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃ 摇床，200 rpm振荡培养60min，目的使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。

4）   低速离心收菌（比如4000rpm，2min），留取100μl左右上清，用枪轻轻吹打重悬菌块，之后加到含氯霉素（34μg/ml）以及所选质粒筛选抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于室温（或37℃）直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16h。

【注意】：

a）涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可不用离心，直接取少量转化产物涂布平板；反之，若转化的DNA总量较少，则通过离心（4,000 rpm，2min）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。

b）新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。

c）涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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JP0023-25G Streptomycin Sulfate, USP Grade硫酸链霉素 25g
JP0021-10G Chloramphenicol, USP Grade氯霉素 10g
JP0018-10G Ampicillin, Sodium Salt氨苄青霉素钠 10g
JP0017-5G Carbenicillin, Disodium Salt羧苄青霉素二钠盐 5g
JP0019-10G Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 10g
JP0014-1G Rifampicin, USP Grade利福平 1g

 

 

 

规格信息

品牌：

Jinpan
CAS:

N/A
规格：

50×100μl
货期：

咨询客服

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BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞

 

产品订购：更大包装或产品技术问题，请来电/在线咨询，电话：021-50837765 。

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菌株描述

BL21-CodonPlus菌株来源于Stratagene公司高性能的BL21-Gold菌株，特别适合在大肠杆菌内高水平表达异源蛋白。由于异源蛋白来源宿主大量存在的某些tRNA在大肠杆菌内很是稀少，因此，想在大肠杆菌内有效表达异源蛋白通常受到限制。外力驱动下的高水平表达异源蛋白会耗尽已有的稀有tRNA，导致翻译中止。BL21-CodonPlus菌株正是根据此缺陷而基因改造后的菌株，额外添加在大肠杆菌内最常见限制异源蛋白表达的几种tRNA的基因拷贝。这些tRNA的存在使得许多原来在传统BL21菌株内表达很弱的异源蛋白能够在BL21-CodonPlus菌株内大量表达。BL21-CodonPlus-RIPL补充大肠杆菌缺乏的4种稀有密码子（AGA, AUA, CCC, CUA）对应的tRNA（argU, ileY, proL, leuW），显著提高外源基因，尤其是富含AT-或GC-基因的异源蛋白在大肠杆菌内的表达。

BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL菌株染色体还整合了λ噬菌体DE3溶原体（其上携带lacUV5启动子调控的T7 RNA聚合酶基因），可用于pET系列、pGEX、pMAL等载体的蛋白表达，同时具有四环素，氯霉素，链霉素和壮观霉素抗性。

BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL菌株基因型：F–ompT hsdS(rB–mB–)dcm+ TetRgal λ(DE3) endA Hte [argU proL CamR] [argU ileY leuW Strep/SpecR]

产品描述

本品是大肠杆菌BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞，可用于DNA的热激转化。经pUC19质粒检测转化效率可达108 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。

 

保存与运输条件

保存：-80℃保存，六个月有效。

运输：干冰运输。

 

注意事项

1）   感受态细胞必须用干冰运输。感受态细胞应在-80℃保存，不可反复冻融且放置时间过长，否则会减低感受态细胞的转化效率。

2）   最好在冰上融化感受态细胞。

3）   进行转化操作时，需在相应温度及无菌条件下进行。

4）   为防止转化实验不成功，可保留部分连接反应液以重新转化，将损失降到最低。

5）   产品包装内含质粒pUC19 DNA(10pg/μl)，供对照实验用。

6）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】

1）  从-80℃冰箱取出取感受态细胞，迅速置于冰浴中，5min后待菌块融化，加入目的DNA，用手轻弹管底轻轻混匀，冰浴静置25min。

2）   42℃热激45s，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3min。此过程不要摇动离心管。

3）   向每个离心管中加700 μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃ 摇床，200 rpm振荡培养60min，目的使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。

4）   低速离心收菌（比如4000rpm，2min），留取100μl左右上清，用枪轻轻吹打重悬菌块，之后加到含氯霉素（34μg/ml）以及所选质粒筛选抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于室温（或37℃）直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16h。

【注意】：

a）涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可不用离心，直接取少量转化产物涂布平板；反之，若转化的DNA总量较少，则通过离心（4,000 rpm，2min）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。

b）新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。

c）涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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Jinpan
CAS:

N/A
规格：

10×100μl
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BL21-AI Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞

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货号： MF2336-5000UL 品牌： Jinpan 标签： 分子生物学

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BL21-AI Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞

 

产品标签：

BL21 Star (DE3) pLysS；Rosetta (DE3)；BL21 (DE3)；表达感受态细胞；pET表达载体；IPTG诱导；非毒性蛋白表达；

 

产品订购：更大包装或产品技术问题，请来电/在线咨询，电话：021-50837765 。

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MF2336-1000UL     BL21-AI Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞      10×100μl 396
MF2336-5000UL BL21-AI Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 50×100μl 1696

【好消息】：见我司的感受态细胞促销活动。买感受态细胞得京东卡，发表使用评论，赢红包，双重惊喜，行动起来啦。

【好消息】：见我司整理的BL21系列表达感受态细胞常见问题。 

 

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MF2336-A      BL21-AI Competent Cell 10×100μl 50×100μl
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菌株描述

BL21-AI菌株来源于BL21菌株，是一种大肠杆菌B/r菌株（E. Coli B/r）。含有一个染色体整合的编码T7 RNA聚合酶（T7 RNAP）的基因到araBAD操纵子的araB位点，通过操控araBAD启动子来调节T7 RNA聚合酶的表达。此菌株已经敲除araB基因。tetA基因赋予四环素抗性，允许用四环素来验证菌株。

由于T7 RNAP基因位于araBAD操纵子的araB位点，因此，可通过糖类（L-阿拉伯糖和葡萄糖）来调节T7 RNA聚合酶的表达。在培养基内加入L-阿拉伯糖，能够诱导araBAD启动子下游T7 RNA聚合酶表达，进而促进目的蛋白表达；而在培养基加入葡萄糖，能够抑制araBAD启动子下游T7 RNA聚合酶表达，进而抑制目的蛋白表达。BL21-AI菌株适用于任何以T7启动子为基础的表达载体，进行高水平的重组蛋白表达。由于T7 RNA聚合酶的表达水平能被高度调控，该菌株特别适用于表达对其他BL21菌株有毒或抑制生长的蛋白。

BL21-AI菌株缺乏lon蛋白酶和外膜蛋白酶OmpT的基因，这两种酶的缺失能够降低外源重组蛋白在菌体内的降解，从而增加了蛋白表达量。最终，BL21-AI菌株表达所得的重组蛋白产量与其他BL21菌株相近。

BL21-AI菌株基因型：F-ompT hsdSB (rB-mB-) gal dcm araB::T7RNAP-tetA

需求条件

建议在以下几个情况下选择BL21-AI菌株来表达您的目的基因：

a）   正在使用T7启动子为基础的表达载体（高拷贝或低拷贝皆可）

b）   当使用其他BL21菌株发现生长抑制现象（比如毒性）

c）   正要表达一种已知的毒性蛋白

产品描述

本品是大肠杆菌BL21-AI菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞，可用于DNA的热激转化。特别适合任何以T7启动子为基础的表达载体系统，且要求严格调控和大量表达毒性蛋白的应用。经pUC19质粒检测转化效率可达108 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。

 

保存与运输条件：

保存：-80℃保存，六个月有效。

运输：干冰运输。

 

注意事项

1）   感受态细胞必须用干冰运输。感受态细胞应在-80℃保存，不可反复冻融且放置时间过长，否则会减低感受态细胞的转化效率。

2）   最好在冰上融化感受态细胞。

3）   进行转化操作时，需在相应温度及无菌条件下进行。

4）   为防止转化实验不成功，可保留部分连接反应液以重新转化，将损失降到最低。

5）   产品包装内含质粒pUC19 DNA(10pg/μl)，供对照实验用。

6）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】

1）  从-80℃冰箱取出取感受态细胞，迅速置于冰浴中，5min后待菌块融化，加入目的DNA，用手轻弹管底轻轻混匀，冰浴静置25min。

2）   42℃热激45s，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3min。此过程不要摇动离心管。

3）   向每个离心管中加700 μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃ 摇床，200 rpm振荡培养60min，目的使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。

4）   低速离心收菌（比如4000rpm，2min），留取100μl左右上清，用枪轻轻吹打重悬菌块，之后加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于室温（或37℃）直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16h。

【注意】：

a）涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可不用离心，直接取少量转化产物涂布平板；反之，若转化的DNA总量较少，则通过离心（4,000 rpm，2min）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。

b）新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。

c）涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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