什么是生物素化？

生物素化，也称为生物素标记，是将生物素共价连接到蛋白质、核酸或其他分子的过程。生物素化快速、特异，并且由于生物素尺寸小（MW=244.31 g/mol），因此不太可能干扰分子的天然功能。生物素（维生素 H）以高的亲和力、快速的结合速率和高特异性结合链霉亲和素和亲和素，这些相互作用在生物技术的许多领域中用于分离感兴趣的生物素化分子。生物素与链霉亲和素和亲和素的组合可耐受高温、pH 和蛋白水解，这使得在各种环境下捕获生物素化分子成为可能。类似地，多个生物素分子可以与靶蛋白缀合，从而可以组合多个链霉亲和素、亲和素或中性亲和素蛋白分子，提高了检测目的蛋白的灵敏度。有许多生物素化试剂可以利用各种可能的标记方法。由于生物素和链霉亲和素之间的强亲和力，生物素化蛋白质的纯化已广泛用于鉴定蛋白质-蛋白质相互作用和翻译后事件，例如分子生物学中的泛素化。

生物素化试剂和溶解度

生物素化试剂的溶解度极大地影响标记靶蛋白或其他大分子的能力。蛋白质具有基于氨基酸侧链和蛋白质构象的疏水性和亲水性区域，并且这些区域可以基于试剂的溶解度促进或限制生物素化。此外，基于试剂的溶解度，靶蛋白微环境的疏水性可以阻止或允许生物素化。例如，表面生物素化是研究表面分子表达或内体运输的常用方法。它要求生物素化试剂是亲水性的，以防止其穿过疏水性的细胞膜，从而限制生物素标记在细胞表面。所以，合适的生物素化试剂的选择取决于目标氨基酸和蛋白质或大分子的微环境。

生物素化试剂的溶解度基于反应部分、间隔臂或两者的组合的溶解度。一些反应基团本身带电，因此是水溶性的，而不带电的基团则需要进行修饰（例如磺化）。使间隔臂可溶的常见方法是掺入聚乙二醇（PEG），它具有高溶解性和柔韧性。由PEG组成的间隔臂可以使具有不带电反应基团的生物素化试剂变得可溶，或者使具有带电反应基团的生物素化试剂更易溶解。此外，与非生物素化蛋白质相比，含有 PEG 的生物素标签带来的溶解度增加有助于防止生物素化蛋白质在长期储存过程中聚集。

Biochempeg 提供先进的生物素化试剂、用于提高生物稳定性和生物利用度的PEG 生物素、肼化学和点击化学生物素、紫外线可追踪生物素。

重组链霉亲和素| 高纯度介绍

链霉亲和素是由亲和素链霉菌 分泌的同源四聚体蛋白。链霉亲和素因其对生物素高的亲和力而广泛应用于分子生物学。生物素与链霉亲和素的结合是自然界中已知的强的非共价相互作用之一，生物素-链霉亲和素复合物的解离常数(K d )约为10 -14 mol/L。链霉亲和素/生物素复合物在很宽的温度和 pH 范围内都极其稳定。由于链霉亲和素缺乏任何碳水化合物 修饰并且具有接近中性的 pI，因此它具有比亲和素低得多的非特异性结合的优点 。
重组链霉亲和素在大肠杆菌中作为 N 端和 C 端缩短变体（核心链霉亲和素，氨基酸 13-139）产生，并通过专有的色谱技术进行纯化。一条非糖基化的多肽链总共含有 128 个氨基酸，分子量为 13.4 kDa。每个四聚体的分子量约为 53.6 kDa。

链霉亲和素序列：   M AEAGITGTWYNQLGSTFIVTAGADGALTGTYESAVGNAESRYVLTGRYDSAPATDGSGTALGWTVAWKNNYRNAHSATTWSGQYVGGAEARINTQWLLTSGTTEANAWKSTLVGHDTFTKVKPSAAS

链霉亲和素溶液 (5 mg/ml) 含有 0.5XPBS 缓冲液、pH 7.4 和 50% 甘油。

SKU：ST-302-5（5 毫克）、ST-302-25（25 毫克）

活性：大于 16 U/mg，1 单位结合 1 µg d-生物素。
建议在-20°C 下保存较长时间。

国际运输： 产品需要用冰袋运输。

本产品仅供实验室研究使用。

金颗粒和抗体浓度和比例

您的制剂中胶体金颗粒的浓度是多少，每个金颗粒结合多少抗体分子？

通过对新鲜制备的不同尺寸的胶体金溶胶的光谱测量，我们计算了胶体金商业制剂中金颗粒的浓度。这些值假设用于制备的所有四氯金酸盐都转化为胶体金，并且金颗粒由密度为19.31克/mL的金属金组成：

我们还计算了IgG分子和链霉亲和素的顶倍数，它们可以吸附到我们的金颗粒上。这些值基于 IgG 的接触面积为 45 nm²，以及 25 nm 的链霉亲和素²，并假设IgG或链霉亲和素分子覆盖了金颗粒表面积的50%：

请注意：这些值是基于假设的估计值，尚未通过大小、颗粒计数或吸附抗体或链霉亲和素的测定的实验测量得到证实。