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金纳米粒子产品选择指南

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金纳米粒子产品选择指南

根据您的具体应用选择金纳米颗粒产品

 应用 金纳米颗粒尺寸范围 表面化学 好处
蛋白质缀合 5nm-100nm 标准品（柠檬酸盐） 快的
国民医疗服务体系 与伯胺共价结合，提高结合物稳定性，减少非特异性蛋白质结合。
绘画

与硫醇共价缀合，增强缀合物稳定性，减少非特异性蛋白质结合。
羧基

与伯胺共价结合，提高结合物稳定性，减少非特异性蛋白质结合。
胺 NHS 和羧基配体的缀合。
镍-NTA 与组氨酸标签缀合。也可用于纯化组氨酸标签蛋白和其他配体。
叠氮化物 通过点击化学与炔配体共价结合。
炔烃 通过点击化学与叠氮配体共价结合。
20nm-100nm 二苯并二苯并呋喃 通过点击化学与叠氮配体共价结合，无需铜催化剂。比典型的炔点击化学更具生物相容性。
链霉亲和素 与生物素化配体缀合。
用硫醇化配体进行修饰 5nm-100nm 标准（柠檬酸盐涂层） 经典起始材料，不添加额外的稳定剂。
稳定（表面活性剂） 功能化过程中稳定性增加，但结合动力学降低。
寡核苷酸缀合 5nm-40nm 标准品（柠檬酸盐） 非常适合将硫醇修饰的寡核苷酸缀合至小粒径 (5nm-40nm)。对于较大的颗粒效果不佳。
5nm-100nm 寡核苷酸就绪 非常适合将硫醇修饰的寡核苷酸直接缀合到金表面。 
5nm-100nm 国民医疗服务体系 非常适合胺修饰寡核苷酸的共价缀合。最终的缀合物将在寡核苷酸和金表面之间具有 PEG 连接体。
5nm-100nm 绘画 非常适合硫醇修饰寡核苷酸的共价缀合。 

最终的缀合物 将在寡核苷酸和金表面之间具有 PEG 连接体。
5nm-100nm 叠氮化物 非常适合通过点击化学与炔烃修饰寡核苷酸共价结合。高产率且无非特异性结合。
5nm-100nm 炔烃 非常适合通过点击化学与叠氮修饰寡核苷酸共价结合。高产率且无非特异性结合。
20nm-100nm 二苯并二苯并呋喃 非常适合通过点击化学与叠氮修饰寡核苷酸共价结合。比典型的炔点击化学更适合生物条件。
适体结合 5nm-40nm 标准品（柠檬酸盐） 非常适合将硫醇修饰的适体缀合至小粒径 (5nm-40nm)。对于较大的颗粒效果不佳。
5nm-100nm 适体就绪 非常适合将硫醇修饰的适体直接缀合至金表面。 
5nm-100nm 国民医疗服务体系 非常适合胺修饰适体的共价结合。最终的缀合物将在寡核苷酸和金表面之间具有 PEG 连接体。
5nm-100nm 绘画 非常适合硫醇修饰适体的共价结合。 

最终的缀合物 将在寡核苷酸和金表面之间具有 PEG 连接体。
5nm-100nm 叠氮化物 非常适合通过点击化学与炔烃修饰适体共价结合。高产率且无非特异性结合。
5nm-100nm 炔烃 非常适合通过点击化学与叠氮修饰适体共价结合。高产率且无非特异性结合。
20nm-100nm 二苯并二苯并呋喃 非常适合通过点击化学与叠氮修饰适体共价结合。比典型的炔点击化学更适合生物条件。
免疫印迹/蛋白质印迹 5nm-20nm 二抗金缀合物 比色检测。长期标签
免疫组织化学 5nm-40nm 二抗金缀合物 高对比度标签
流式细胞仪 70nm-400nm
细胞摄取  30nm-80nm 转铁蛋白金结合物 通过内吞作用主动摄取
标准（柠檬酸盐涂层） 非特异性细胞摄取
暗视野显微镜 50nm-100nm 金结合物
侧流/浸棒分析 20nm-80nm 标准（柠檬酸盐涂层） 非常适合通过抗体被动吸附到金纳米粒子表面来生成金缀合物。
国民医疗服务体系 非常适合抗体与金纳米颗粒的共价结合。
绘画 非常适合将硫醇修饰的配体与金纳米粒子缀合。
金结合物 预制二抗偶联物
垂直流 20nm-40nm 标准（柠檬酸盐涂层）

非常适合通过抗体被动吸附到金纳米粒子表面来生成金缀合物。
国民医疗服务体系

非常适合抗体与金纳米颗粒的共价结合。
绘画

非常适合将硫醇修饰的配体与金纳米粒子缀合。
金结合物 预制二抗偶联物。
肿瘤靶向 20nm-80nm 甲基（甲氧基）金纳米粒子 在某些情况下可用于被动靶向体内某些肿瘤。惰性材料，在血清中具有低非特异性蛋白质结合。
光学显微镜 5nm-10nm 金结合物 能够为光学和电子显微镜标记组织切片。替代过氧化物酶和 PAP 染色剂。可以通过银增强技术来增强灵敏度。
酶联免疫吸附试验 5nm-30nm 金结合物 比色检测

genhunter：AP-TAG 试剂盒概述

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genhunter：AP-TAG 试剂盒概述

AP-TAG 技术改变了细胞表面受体和配体的检测和克隆方式。本发明的本质是允许编码受体的任何分泌性多肽配体或胞外结构域的cDNA序列符合读码框地融合至pAPtag克隆载体中的人胎盘分泌性碱性磷酸酶(AP)。所得配体-AP 融合蛋白（称为 AP-body）在 293T 或 CHO 细胞中表达时，可以高水平分泌到培养基中，因此可以通过 AP 活性测定或使用抗 AP 抗体的蛋白质印迹分析轻松检测到。因此，配体-AP或可溶性受体-AP融合蛋白可以像抗体一样充当亲和剂，从而可以方便、安全和灵敏地检测和克隆其相应的细胞表面受体或配体。与传统的放射性125I标记方法不同，AP-TAG是安全的，不需要配体/可溶性受体纯化。

自发明以来，AP-TAG技术已克隆了许多重要的细胞表面受体和配体，包括Leptin、Semaphorin III、Nogo-66、IL-24、Jelly Belly的受体以及Kit、Mek4和Sek受体酪氨酸激酶的配体。

如果您正在使用通过 DD 或其他方法克隆的分泌蛋白或细胞表面分子，AP-TAG 技术可以让您进一步对这些基因进行功能表征。

AP-TAG Kit B

用于受体/配体相互作用的非放射性检测。

 

这种单向量系统是第三代AP-TAG技术。分泌型配体或可溶性受体可以与分泌型碱性磷酸酶(AP)在其N端或C端融合以产生“AP体”。所得的 AP 融合蛋白可以作为分泌蛋白表达，并直接用作高度敏感的亲和剂，就像抗体一样。表位标签（6xHis 和 myc）可以轻松纯化、检测和相互作用测定 (IP) AP 融合蛋白。下面列出了其他改进的功能。

AP-TAG Kit A

用于受体/配体相互作用的非放射性检测。

 

这是使用 pAPtag-2 和 pAPtag-4 载体的第二代 AP-TAG 技术。分泌型配体或可溶性受体可以与分泌型碱性磷酸酶(AP)在其N端或C端融合以产生“AP体”。所得的 AP 融合蛋白可以作为分泌蛋白表达，并直接用作高度敏感的亲和剂，就像抗体一样。

PROTACs简介

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PROTACs简介

PROTACs 技术是一种使用泛素蛋白酶系统 (USP) 靶向特定蛋白质并诱导其在细胞中降解的策略。如图 1 所示，PROTACs 是一种异双功能分子。它包含两种不同的配体，一种是E3泛素连接酶的相应配体，另一种是与目的蛋白（POI）结合的配体。两个配体通过连接体连接形成聚合物：POI配体-连接体-E3连接酶配体。

PROTACs简介

PROTACs简介

PROTAC诱导的蛋白质降解机制如图2所示。进入细胞后，PROTAC分子将POI与E3连接酶结合形成三元复合物，诱导E3连接酶泛素化靶蛋白，并触发降解过程。

PROTACs简介

PROTACs技术的优势

预计PROTACs将克服耐药性

PROTACs无需长期结合即可降解靶蛋白并将其全清除，因此可以有效克服小分子靶向药物的耐药性。

PROTAC 可以提高选择性

通过PROTACs技术可以将泛抑制剂转化为选择性降解剂，从而有效提高选择性和效率。

PROTACs 具有降解不可成药靶标的巨大潜力

市售药物作用于一个或多个特定靶点。统计数据显示，可作为药物治疗的已开发靶点仅占总量的20%，高达80%的蛋白质靶点无法通过传统开发方法进行干预。PROTACs直接介导靶蛋白的降解，因此具有更广泛的作用范围，可以作用于不可成药的靶标。

疗效比其他类型的药物持续时间更长

通常，PROTACs可以被回收并再次使用，除了PROTACs通过共价键与POI结合。因此，它比其他类型的药物具有更长的有效性。


亲和纯化树脂和方法

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亲和纯化树脂和方法

亲和纯化（也称为亲和色谱）被认为是强大的方法 纯化色谱 或从复杂的混合物（如粗细胞裂解物、细胞培养上清液或其他样品）中富集感兴趣的蛋白质。 

虽然选择性沉淀可能在某种程度上有助于分离不同类型的大分子，但大多数纯化方法依赖于溶液中分子与固体、固定材料的物理或化学相互作用的差异来达到预期的结果。 

例如，在亲和纯化中，通过用与所需分子特异性结合的化学固定配体处理固体载体，将目标分子与溶液中的其他组分分离。因此，当复杂的混合物通过色谱柱时，目标分子与配体结合，而溶液中的非结合组分则简单地用适当的缓冲液冲洗掉。 

最后，改变缓冲条件以破坏配体和目标分子之间的结合相互作用，并在此过程中洗脱高度纯化的目标分子。

亲和纯化功能非常强大，因为通过亲和柱一次，可以将样品纯化一千倍以上。

亲和纯化的坚实支撑

基本上，亲和色谱中使用两种类型的固体载体：多孔凝胶载体或树脂和磁珠。但是，在本文中，我们将主要关注亲和纯化树脂。

树脂或凝胶载体通常是基于糖或丙烯酰胺的聚合物树脂，在溶液中产生 直径50-150μm的珠子。除了极其多孔之外，珠子还足够大，允许生物分子在磁珠表面周围以及通过和在珠子之间畅通无阻地移动。此外，串珠形式也使实验室的工作更容易、更方便，因为它们可以很容易地分配以包装任何尺寸的色谱柱。

此外，由于配体共价连接到珠状聚合物的外表面和内表面，因此允许样品分子自由流动通过固定配体的高表面积。

目前，大多数实验室使用交联珠状琼脂糖进行蛋白质亲和纯化，因为它是重力流、低压程序和低速离心的理想选择。珠状琼脂糖树脂也可以进行额外的交联和化学硬化，以提高其承受高压的能力，但要预先警告，这会显着降低结合能力。

该基质通常具有4%（CL-4B）和6%（CL-6B）密度，均具有培养基偶联能力，适用于相同的应用（蛋白质印迹、高通量筛选、相互作用研究、突变分析、功能测定、结构分析）。磁珠的尺寸通常在 45 至 165 μm 之间，它们都具有 0.35 MPa 的压力限制。它们仅在排除限制方面有所不同（CL-4B 为 20，000 kDa，CL-6B 为 4，000 kDa）。

除琼脂糖凝胶外，聚丙烯酰胺基树脂也可用于柱亲和色谱。虽然这两种介质都具有较低的非特异性结合特性，但聚丙烯酰胺基树脂不易压缩，可以承受中压应用。

G-Biosciences 提供广泛的亲和纯化试剂盒和树脂，以适应各种应用。这里有一些 例子 这可以帮助您解决亲和纯化挑战。  

  • 用于亲和素-链霉亲和素和中性粒蛋白纯化的固定化生物素和亚胺生物素树脂

  • 钙调蛋白树脂用于纯化钙调蛋白结合蛋白 （CBP）

  • 固定化对氨基苯基磷酸胆碱和更具成本效益的固定化O-磷酸乙醇胺用于C反应蛋白纯化

  • GST 标记或 His 标记的蛋白质纯化试剂盒或树脂

  • 固定化肝素和凝集素，用于分离脂蛋白、生长激素、止血蛋白和其他生理标志物

  • 硫丙基树脂 用于纯化含蛋白质的硫醇基团。

G-Biosciences提供含大量用于纯化蛋白质、核酸和其他生物分子的树脂和磁珠。 几种树脂通常用于在纯化过程中去除干扰剂。 该手册首先介绍了预活化的树脂，以便研究人员可以通过各种基团偶联蛋白质和其他生物分子。接下来的部分是用于纯化特定标签和基序的树脂，包括6X组氨酸、生物素等。 主要色谱树脂包括用于离子交换色谱和体积排阻色谱的树脂。 最后，大量树脂旨在去除常见的有问题的化学物质和生物分子，包括洗涤剂、内毒素等。

《纯化树脂手册》包括以下部分：

  • 亲和纯化树脂

    • 用于偶联巯基、胺、羧基、碳水化合物和活性氢的预活化树脂

  • 亲和素和链霉亲和素纯化树脂

    • 固定化生物素和低亲和力的伊尼博汀

  • 用于纯化生物素和生物素标记分子的树脂

    • 固定化亲和素和单体亲和素以及低亲和力链霉亲和素

  • 用于CBP标签的钙调蛋白树脂

  • C-反应蛋白纯化树脂

  • GST标记的蛋白质纯化

    • 用于酵母和细菌重组蛋白的谷胱甘肽树脂和蛋白质纯化试剂盒

  • 组氨酸标记蛋白纯化

    • IDA 和 NTA 树脂、色谱柱、板和磁珠

    • 提供镍、钴、铜和锌版本

  • 固定化肝素

  • 用于碳水化合物分离的固定化凝集素

  • 凝集素纯化树脂

  • 核酸纯化树脂

    • 固定化硼酸和二氧化硅磁珠

  • 蛋白酶纯化树脂

  • 抗体纯化树脂

    • 蛋白 A、蛋白 G 和蛋白 A/G 树脂和色谱柱

    • IgA纯化树脂

    • 亲硫吸附

  • 凝胶过滤/体积排阻色谱

  • 疏水作用色谱

  • 离子交换色谱

    • 阴阳离子交换器

  • 除污树脂

    • 去污树脂

    • 内毒素去除树脂

    • 脱盐和缓冲液交换离心柱

    • 还原剂树脂，包括TCEP

    • 去除白蛋白

  • 多种一次性色谱柱可供选择