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NADH-Na2还原型辅酶Ⅰ二钠

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NADH-Na2还原型辅酶Ⅰ二钠

货号： JP0602-25G 品牌： Jinpan 标签： 生化试剂

描述

NADH-Na2 还原型辅酶Ⅰ二钠

产品信息

产品名称 产品编号 CAS NO.        规格              价格（元）  
NADH-Na2 还原型辅酶Ⅰ二钠     JP0602-1G          606-68-8 1g 248
NADH-Na2 还原型辅酶Ⅰ二钠 JP0602-5G 606-68-8 5g 988
NADH-Na2 还原型辅酶Ⅰ二钠 JP0602-25G 606-68-8 25g 4828

产品描述

还原型辅酶I（NADH），学名还原型 β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（β-Nicotinamide adenine dinucleotide, reduced），是一种辅酶，在包括糖酵解、β-氧化和柠檬酸循环（Krebs循环，TCA循环）的分解代谢过程中，用作一种再生电子供体。还参与细胞信号事件，比如，DNA损伤反应中用作聚ADP-核糖聚合酶（PARPs）的一种底物。NAD+/NADH依赖的sirtuins家族蛋白在能量代谢参与的许多生理事件的应激反应（牵涉到肿瘤生物学、糖尿病和神经衰退性疾病）中发挥关键作用。NADH还能用在酶循环实验内，以放大相关酶的活性或提高低浓度代谢物的含量。

本品是二钠盐形式的还原型辅酶I（NADH-Na2），CAS NO. 606-68-8，纯度≥98%（HPLC）。

产品特性

1）   CAS NO：606-68-8

2）   英文同义名：NADH disodium salt; β-Nicotinamide adenine dinucleotide, reduced disodium salt; Reduced Coenzyme-I disodium salt; β-NADH disodium salt;Diphosphopyridine nucleotide, reduced form, disodium salt; β-DPNH disodium salt;

3）   中文同义名：NADH二钠盐；β-NADH二钠盐；还原型 β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸二钠盐；还原型二磷酸吡啶核苷酸二钠盐；

4）   分子式：C21H27N7Na2O14P2

5）   分子量：709.40

6）   纯度：≥98%（HPLC）

7）   外观：白色至黄色粉末

8）   光吸收：Amax260 & 340 nm

9）   溶解性：溶于NaOH（100mg/ml）

10）化学结构式：NADH-Na2还原型辅酶Ⅰ二钠

保存与运输方法

保存：-20℃避光干燥保存，2年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）   不建议直接用水溶液配制溶液，因很可能偏酸，引起NADH降解。

2）   如果溶液必须要保存一段时间，避免使用磷酸缓冲液，因其会加速NADH降解。Trizma(0.01M,pH 8.5)和MES缓冲液是最佳选择。NADH溶液即使在很低的温度下都很容易氧化，因此配制的溶液浓度必须≤5mM，pH 9-11，4℃保存。光和重金属会加速氧化过程。更低的保存温度允许（≤-40℃），可配制更高浓度的溶液，能延长保存周期。

3）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品

货号 名称 规格            
JP0601-5G NAD氧化型辅酶I 5g
JP0602-1G NADH-Na2还原型辅酶Ⅰ二钠 1g
JP0603-100MG          NADP·Na2氧化型辅酶II二钠 100mg
JP0604-100MG NADPH-Na4还原型辅酶Ⅱ四钠 100mg
JP0605-25MG β-Nicotinamide Mononucleotide (β-NMN) β-烟酰胺单核苷酸         25mg
JP0606-50MG FAD-Na2黄素腺嘌呤二核苷酸二钠盐 50mg
JP0607-25MG Coenzyme A (CoA), Free Acid辅酶A（游离酸） 25mg
JP0639-10MG Acetyl Coenzyme A, Tithium Salt乙酰辅酶A锂盐 10mg

 

 

 

 

 

规格信息

品牌：

Jinpan
CAS:

606-68-8
规格：

25g
货期：

咨询客服

NADH-Na2还原型辅酶Ⅰ二钠

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NADH-Na2还原型辅酶Ⅰ二钠

货号： JP0602-5G 品牌： Jinpan 标签： 生化试剂

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NADH-Na2 还原型辅酶Ⅰ二钠

产品信息

产品名称 产品编号 CAS NO.        规格              价格（元）  
NADH-Na2 还原型辅酶Ⅰ二钠     JP0602-1G          606-68-8 1g 248
NADH-Na2 还原型辅酶Ⅰ二钠 JP0602-5G 606-68-8 5g 988
NADH-Na2 还原型辅酶Ⅰ二钠 JP0602-25G 606-68-8 25g 4828

产品描述

还原型辅酶I（NADH），学名还原型 β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（β-Nicotinamide adenine dinucleotide, reduced），是一种辅酶，在包括糖酵解、β-氧化和柠檬酸循环（Krebs循环，TCA循环）的分解代谢过程中，用作一种再生电子供体。还参与细胞信号事件，比如，DNA损伤反应中用作聚ADP-核糖聚合酶（PARPs）的一种底物。NAD+/NADH依赖的sirtuins家族蛋白在能量代谢参与的许多生理事件的应激反应（牵涉到肿瘤生物学、糖尿病和神经衰退性疾病）中发挥关键作用。NADH还能用在酶循环实验内，以放大相关酶的活性或提高低浓度代谢物的含量。

本品是二钠盐形式的还原型辅酶I（NADH-Na2），CAS NO. 606-68-8，纯度≥98%（HPLC）。

产品特性

1）   CAS NO：606-68-8

2）   英文同义名：NADH disodium salt; β-Nicotinamide adenine dinucleotide, reduced disodium salt; Reduced Coenzyme-I disodium salt; β-NADH disodium salt;Diphosphopyridine nucleotide, reduced form, disodium salt; β-DPNH disodium salt;

3）   中文同义名：NADH二钠盐；β-NADH二钠盐；还原型 β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸二钠盐；还原型二磷酸吡啶核苷酸二钠盐；

4）   分子式：C21H27N7Na2O14P2

5）   分子量：709.40

6）   纯度：≥98%（HPLC）

7）   外观：白色至黄色粉末

8）   光吸收：Amax260 & 340 nm

9）   溶解性：溶于NaOH（100mg/ml）

10）化学结构式：NADH-Na2还原型辅酶Ⅰ二钠

保存与运输方法

保存：-20℃避光干燥保存，2年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）   不建议直接用水溶液配制溶液，因很可能偏酸，引起NADH降解。

2）   如果溶液必须要保存一段时间，避免使用磷酸缓冲液，因其会加速NADH降解。Trizma(0.01M,pH 8.5)和MES缓冲液是最佳选择。NADH溶液即使在很低的温度下都很容易氧化，因此配制的溶液浓度必须≤5mM，pH 9-11，4℃保存。光和重金属会加速氧化过程。更低的保存温度允许（≤-40℃），可配制更高浓度的溶液，能延长保存周期。

3）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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JP0602-1G NADH-Na2还原型辅酶Ⅰ二钠 1g
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规格信息

品牌：

Jinpan
CAS:

606-68-8
规格：

5g
货期：

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Glutathione, Reduced (GSH) 还原型谷胱甘肽

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Glutathione, Reduced (GSH) 还原型谷胱甘肽

货号： JP0406-10G 品牌： Jinpan 标签： 生化试剂

描述

Glutathione, Reduced (GSH) 还原型谷胱甘肽

搜索关键词：

Reducing agents 还原剂；DTT；DTE；TCEP-HCl；Antioxidant 抗氧化剂；氧化应激；GSH/GSSG比率；CAS NO：70-18-8；

订购信息：

货号                      

 产品名称                                                          CAS NO.         规格              价格（元）    

JP0406-5G

 Glutathione,Reduced (GSH) 还原型谷胱甘肽 70-18-8 5g

105
JP0406-10G Glutathione,Reduced (GSH) 还原型谷胱甘肽 70-18-8 10g

189

【温馨提示】：见我司整理的还原剂产品专题，了解目前常用几种还原剂的特征，选择最适合的还原剂，让你的实验顺心开展。

GSH基本描述：

谷胱甘肽（Glutathione），一种小分子巯基多肽，在人体内以两种形式存在，还原型谷胱甘肽（GSH）和氧化型谷胱甘肽（GSSG），两者在相应的生理反应和酶催化下实现转化，GSH/GSSG比率常用作反映细胞和组织氧化应激的一种重要指标。

还原性谷胱甘肽，英文名Glutathione, Reduced，缩写为GSH，CAS NO. 70-18-8，普遍存在于动植物、真菌、一些细菌和古生菌中的一种重要抗氧化剂，保护细胞免受活性氧比如自由基、氧化物和脂质过氧化物造成的损伤。GSH是一种内源性三肽，发现于生物体内最主要的一种非蛋白硫醇，可提供电子还原细胞质蛋白通过半胱氨酸残基连接形成的二硫键，维持蛋白的还原状态。此过程中GSH也被氧化为GSSG。之后，通过谷胱甘肽还原酶（GS）的作用，以NADPH为电子供体，GSSG又被还原为GSH。GSH具有多种代谢、调控和保护功能。还可用作乙二醛酶I的抑制剂。

GSH生理应用：

GSH用作还原剂，主要的功能也体现在细胞培养系统中。见下：

1）保护细胞免受氧化应激带来的损伤，使得胞内和胞内都保持在一种良好的氧化还原状态。提供还原当量再生巯基化合物和抗氧化剂，同时转化过氧化物到水或醇中。氧化型谷光氨肽（GSSG）能被谷胱甘肽还原酶快速还原，在正常的体内或者血清中几乎没有氧化形式的GSSG存在。

2）谷胱甘肽是许多硒化蛋白的首选底物，在胞内和胞外环境起到解毒功能，通过将过氧化氢转化为水，或者将有机过氧化物转化为水和有机醇。若是不能去除，这些氧化物和过氧化氢最终会形成反应性的羟基、过氧和烷氧自由基。

3）谷胱甘肽还原胱氨酸和半胱氨酸混合的二硫化物，产生半胱氨酸。保证半胱氨酸用作一种底物以形成蛋白，以及谷胱甘肽。

4）谷胱甘肽再生抗血酸盐，一种重要的维生素，参与铜离子动员，细胞贴壁，氨基酸代谢和抗氧化。间接有利于维持细胞膜的抗氧化活性。

5）谷胱甘肽通过谷光氨肽S-转移酶的作用，对脂质过氧化和/或糖氧化过程中产生的醛类进行解毒；

6）谷胱甘肽可能用作一种非毒性和稳定的半胱氨酸储存池，以进行蛋白合成；

7）保证胞内蛋白巯基基团的还原态，从而有利于蛋白的分泌表达；

8）某些细胞使用特殊的氨基酸膜转运系统，其活性依赖γ-谷氨酰转移酶。谷胱甘肽是其首选底物，有利于转运其他氨基酸进入细胞。

基本特性：

1）英文同义名：Reduced Glutathione;L-Glutathione Reduced Form; γ-L-Glutamyl-L-cysteinyl-glycine; GSH; γ-Glu-Cys-Gly;

2）中文同义名：L-谷胱甘肽（还原型）；γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酰甘氨酸；5-L-谷氨酰-L-半胱氨酰甘氨酸；

3）CAS NO：70-18-8

4）分子式：C10H17N3O6S

5）分子量：307.33 g/mol

6）纯度：≥98%

7）外观：白色至类白色结晶粉末

8）溶解性：溶于水（50 mg/ml）

9）化学结构：

       Glutathione, Reduced (GSH) 还原型谷胱甘肽

保存与运输方法

保存：2-8°C保存，5年有效。保持良好密封，不可接触氧化剂。

运输：冰袋运输。

使用方法

称取适量本品，溶于水配制成50 mg/ml的储存液，经0.22μm滤膜过滤除菌后，待用。

【注意】：因本品水溶液在空气中很容易被氧化，建议溶液现配现用，或者分装成小量，保存在含惰性气体的密封瓶内并-20℃冻存，一个月内使用。

相关产品：更大包装或产品技术问题，请来电/在线咨询，电话：021-50837765 。网站：www.maokangbio.com。

货号                        产品名称                                                                  规格          价格（元） 货期        
JP0405-1G Glutathione, Oxydized (GSSG) 氧化型谷胱甘肽 1g 250 现货
JP0405-5G Glutathione, Oxydized (GSSG) 氧化型谷胱甘肽 5g 950 现货
JP5510-10G DL-Dithiothreitol (DTT) 二硫苏糖醇 10g 380 现货
JP5510-100G DL-Dithiothreitol (DTT) 二硫苏糖醇 100g 3000 现货
JP5510-1000G DL-Dithiothreitol (DTT) 二硫苏糖醇 1kg 18000 现货
JP5511-1G DL-Dithioerythritol (DTE) 二硫赤藓糖醇 1g 300 现货
JP5511-5G DL-Dithioerythritol (DTE)二硫赤藓糖醇 5g 900 现货
JP5512-1G TCEP Hydrochloride 三-(2-甲酰乙基)膦盐酸盐 1g 320 现货
JP5512-5G TCEP Hydrochloride 三-(2-甲酰乙基)膦盐酸盐 5g 1380 现货
MP2012-100ML β-Mercaptoethanol  (β-ME) β-巯基乙醇 100ml 178 现货

注意事项

1）粉末保存过程中瓶口需密封，置于低温避光处。储存过程远离氧化剂。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

规格信息

品牌：

Jinpan
CAS:

70-18-8
规格：

10g
货期：

咨询客服

Glutathione, Reduced (GSH) 还原型谷胱甘肽

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Glutathione, Reduced (GSH) 还原型谷胱甘肽

货号： JP0406-5G 品牌： Jinpan 标签： 生化试剂

描述

Glutathione, Reduced (GSH) 还原型谷胱甘肽

搜索关键词：

Reducing agents 还原剂；DTT；DTE；TCEP-HCl；Antioxidant 抗氧化剂；氧化应激；GSH/GSSG比率；CAS NO：70-18-8；

订购信息：

货号                      

 产品名称                                                          CAS NO.         规格              价格（元）    

JP0406-5G

 Glutathione,Reduced (GSH) 还原型谷胱甘肽 70-18-8 5g

105
JP0406-10G Glutathione,Reduced (GSH) 还原型谷胱甘肽 70-18-8 10g

189

【温馨提示】：见我司整理的还原剂产品专题，了解目前常用几种还原剂的特征，选择最适合的还原剂，让你的实验顺心开展。

GSH基本描述：

谷胱甘肽（Glutathione），一种小分子巯基多肽，在人体内以两种形式存在，还原型谷胱甘肽（GSH）和氧化型谷胱甘肽（GSSG），两者在相应的生理反应和酶催化下实现转化，GSH/GSSG比率常用作反映细胞和组织氧化应激的一种重要指标。

还原性谷胱甘肽，英文名Glutathione, Reduced，缩写为GSH，CAS NO. 70-18-8，普遍存在于动植物、真菌、一些细菌和古生菌中的一种重要抗氧化剂，保护细胞免受活性氧比如自由基、氧化物和脂质过氧化物造成的损伤。GSH是一种内源性三肽，发现于生物体内最主要的一种非蛋白硫醇，可提供电子还原细胞质蛋白通过半胱氨酸残基连接形成的二硫键，维持蛋白的还原状态。此过程中GSH也被氧化为GSSG。之后，通过谷胱甘肽还原酶（GS）的作用，以NADPH为电子供体，GSSG又被还原为GSH。GSH具有多种代谢、调控和保护功能。还可用作乙二醛酶I的抑制剂。

GSH生理应用：

GSH用作还原剂，主要的功能也体现在细胞培养系统中。见下：

1）保护细胞免受氧化应激带来的损伤，使得胞内和胞内都保持在一种良好的氧化还原状态。提供还原当量再生巯基化合物和抗氧化剂，同时转化过氧化物到水或醇中。氧化型谷光氨肽（GSSG）能被谷胱甘肽还原酶快速还原，在正常的体内或者血清中几乎没有氧化形式的GSSG存在。

2）谷胱甘肽是许多硒化蛋白的首选底物，在胞内和胞外环境起到解毒功能，通过将过氧化氢转化为水，或者将有机过氧化物转化为水和有机醇。若是不能去除，这些氧化物和过氧化氢最终会形成反应性的羟基、过氧和烷氧自由基。

3）谷胱甘肽还原胱氨酸和半胱氨酸混合的二硫化物，产生半胱氨酸。保证半胱氨酸用作一种底物以形成蛋白，以及谷胱甘肽。

4）谷胱甘肽再生抗血酸盐，一种重要的维生素，参与铜离子动员，细胞贴壁，氨基酸代谢和抗氧化。间接有利于维持细胞膜的抗氧化活性。

5）谷胱甘肽通过谷光氨肽S-转移酶的作用，对脂质过氧化和/或糖氧化过程中产生的醛类进行解毒；

6）谷胱甘肽可能用作一种非毒性和稳定的半胱氨酸储存池，以进行蛋白合成；

7）保证胞内蛋白巯基基团的还原态，从而有利于蛋白的分泌表达；

8）某些细胞使用特殊的氨基酸膜转运系统，其活性依赖γ-谷氨酰转移酶。谷胱甘肽是其首选底物，有利于转运其他氨基酸进入细胞。

基本特性：

1）英文同义名：Reduced Glutathione;L-Glutathione Reduced Form; γ-L-Glutamyl-L-cysteinyl-glycine; GSH; γ-Glu-Cys-Gly;

2）中文同义名：L-谷胱甘肽（还原型）；γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酰甘氨酸；5-L-谷氨酰-L-半胱氨酰甘氨酸；

3）CAS NO：70-18-8

4）分子式：C10H17N3O6S

5）分子量：307.33 g/mol

6）纯度：≥98%

7）外观：白色至类白色结晶粉末

8）溶解性：溶于水（50 mg/ml）

9）化学结构：

       Glutathione, Reduced (GSH) 还原型谷胱甘肽

保存与运输方法

保存：2-8°C保存，5年有效。保持良好密封，不可接触氧化剂。

运输：冰袋运输。

使用方法

称取适量本品，溶于水配制成50 mg/ml的储存液，经0.22μm滤膜过滤除菌后，待用。

【注意】：因本品水溶液在空气中很容易被氧化，建议溶液现配现用，或者分装成小量，保存在含惰性气体的密封瓶内并-20℃冻存，一个月内使用。

相关产品：更大包装或产品技术问题，请来电/在线咨询，电话：021-50837765 。网站：www.maokangbio.com。

货号                        产品名称                                                                  规格          价格（元） 货期        
JP0405-1G Glutathione, Oxydized (GSSG) 氧化型谷胱甘肽 1g 250 现货
JP0405-5G Glutathione, Oxydized (GSSG) 氧化型谷胱甘肽 5g 950 现货
JP5510-10G DL-Dithiothreitol (DTT) 二硫苏糖醇 10g 380 现货
JP5510-100G DL-Dithiothreitol (DTT) 二硫苏糖醇 100g 3000 现货
JP5510-1000G DL-Dithiothreitol (DTT) 二硫苏糖醇 1kg 18000 现货
JP5511-1G DL-Dithioerythritol (DTE) 二硫赤藓糖醇 1g 300 现货
JP5511-5G DL-Dithioerythritol (DTE)二硫赤藓糖醇 5g 900 现货
JP5512-1G TCEP Hydrochloride 三-(2-甲酰乙基)膦盐酸盐 1g 320 现货
JP5512-5G TCEP Hydrochloride 三-(2-甲酰乙基)膦盐酸盐 5g 1380 现货
MP2012-100ML β-Mercaptoethanol  (β-ME) β-巯基乙醇 100ml 178 现货

注意事项

1）粉末保存过程中瓶口需密封，置于低温避光处。储存过程远离氧化剂。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归JP金畔所有】

 上海金畔生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作，主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本，以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持”品质保障”的原则为广大客户提供优质产品。

规格信息

品牌：

Jinpan
CAS:

70-18-8
规格：

5g
货期：

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Reduced Glutathione Assay Kit 还原型谷胱甘肽（GSH）检测试剂盒

发表于由

Reduced Glutathione Assay Kit 还原型谷胱甘肽（GSH）检测试剂盒

货号： JP8013-100T 品牌： Jinpan 标签： 生化试剂

描述

Reduced Glutathione Assay Kit

还原型谷胱甘肽（GSH）检测试剂盒

产品信息

产品名称

 产品编号 规格 价格（元）
Reduced Glutathione Assay Kit 还原型谷胱甘肽检测试剂盒 JP8013-100T 100T

558

产品描述

谷胱甘肽（Glutathione, Glutathione）是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成的一种三肽。是最小的细胞内蛋白巯基分子，能够预防活性氧比如自由基和过氧化物引起的细胞损伤。谷胱甘肽以还原型（GSH）和氧化型（GSSG）两种状态存在。还原型谷胱甘肽（GSH）是主要的组织抗氧化剂，为谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）催化脂质氢过氧化物还原生成醇化合物和过氧化氢生成水提供还原当量物。谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）催化反应中，两个GSH之间二硫键的形成使生成氧化型谷胱甘肽（GSSG）。而谷胱甘肽还原酶（GR）同时在β-NADPH2的氧化下将GSSG再循环生成GSH。当细胞暴露于逐渐提高的氧化应激下，GSSG累积，引起GSSG/GSH水平增加。GSSG/GSH增加程度可用作氧化应激水平的指示剂。因此，监测生物样本内GSH和GSSG的水平至关重要，能够用于评估细胞和组织应对氧化应激和自由基介导的细胞损伤上的氧化还原和解毒状态。

本还原型谷胱甘肽检测试剂盒（Reduced Glutathione Assay Kit, GSH Assay Kit）是一款简单便捷的还原型谷胱甘肽测定试剂盒，检测原理是：待测样本内的还原型谷胱甘肽（GSH）与二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）反应，生成稳定的黄色的TNB和GSSG，通过酶标仪测定410nm处的吸光度，并且与相应处理的GSH标准做比较，得到样品中的GSH含量。本试剂盒适用于测定血浆、血清、动植物组织、细胞等样本内的GSH含量。

试剂盒组分

组分编号 组分名称 规格 储存方法
JP8013-A GSH Standard 还原型谷胱甘肽标准 10mg 4℃避光保存
JP8013-B GSH Assay Buffer 反应缓冲液 100ml 室温保存
JP8013-C DNTB 反应底物 10mg 室温避光保存
JP8013-D Protein Precipitation Solution 蛋白沉淀剂 2.5g 室温避光保存
JP8013-E NADPH  10mg -20℃避光保存
JP8013-F DJPO 1.5ml 室温避光保存
JP8013-G ddH2O 100ml 室温保存

保存与运输方法

保存：-20℃保存，6个月稳定。推荐根据各组分的保存方法归位保存。

运输：冰袋运输。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

  1. 试剂准备

1.1 配制 GSH 标准储存液

将低温保存的还原型谷胱甘肽标准（GSH Standard）回温至室温。往10mg 还原型谷胱甘肽标准加入3.25ml ddH2O，溶解并混匀，即得到：还原型 GSH 标准储存液（10mM）。一部分立即使用，剩下的请根据单次用量适当分装后，-20℃保存，避免反复冻融。

1.2 配制 DTNB储存液

往10mg DTNB 中加入1ml DJPO，溶解并混匀，即得到：DTNB 储存液（10mg/ml）。一部分立即使用，剩下的请根据单次用量适当分装后，-20℃保存，避免反复冻融。

1.3 配制 GSH检测工作液：按下表配制本工作液。

加入组分 1个样品 10个样品 50个样品
GSH Assay Buffer 0.2ml 2ml 10ml
DTNB 储存液（10mg/ml） 2.5µl 25µl 125µl

1.4 配制蛋白沉淀工作液

往2.5g 蛋白沉淀剂中加入 50ml ddH2O，配制成 50ml 5%的水溶液，即得到：蛋白沉淀工作液，置于4℃保存。

1.5 配制标准品

把还原型 GSH 标准储存液（10mM）用蛋白沉淀工作液稀释成 50μM 标准溶液，然后依次稀释成 25、 15、 10、5、2μM GSH 溶液，取 50、 25、 15、 10、 5、 2μM GSH 标准溶液 6 个点做标准曲线。【注意：由于 GSH 标准在蛋白沉淀工作液中不是很稳定，用蛋白沉淀工作液配制的 GSH 溶液必须新鲜配制，不可冻存后再使用。】

1.6配制 NADPH 工作液

往10mg NADPH 中加入 1ml ddH2O，溶解并混匀，即得到：NADPH 储存液（10mg/ml）。一部分立即使用，剩下的请根据单次用量适当分装后，-20℃保存，避免反复冻融。按 0.1ml NADPH 储存液（10mg/ml）加入 8.23ml GSH assay buffer的比例加量，充分混匀，即得到：NADPH 工作液（0.12mg/ml）。

  1. 样本准备

2.1 红细胞或血浆样品

取新鲜血液，600g离心10min，沉淀为红细胞，上清为血浆。对于红细胞，用 PBS 洗涤两次，取约 50μl 红细胞沉淀或血浆，加入50μl 蛋白沉淀工作液，充分涡旋振匀。4℃或冰浴放置10min， 4℃ 10000g 离心10min，取上清，用于GSH测定，样品需暂时4℃保存备用，不立即测定的样品可以-70℃保存，但不宜超过10天。对于处理好的红细胞样品最后需用蛋白沉淀工作液稀释 10倍后再进行后续的测定，而对于血浆样品，应直接取10μl 进行测定。

2.2 动植物组织样品

取组织用液氮速冻，迅速研磨，按每40mg加入100μl 蛋白沉淀工作液（亦可不用液氮，而是直接加入蛋白沉淀工作液至组织后匀浆或研磨），充分涡旋振匀，再加入300μl 蛋白沉淀工作液，用匀浆器充分匀浆。4℃孵育 10min，4℃ 10000g离心10min，取上清，用于GSH测定。样品需暂时 4℃保存备用，不立即测定的样品可以-70℃保存，但不宜超过10 天。对于处理好的组织样品通常需用蛋白沉淀工作液进行适当稀释后再进行测定，稀释倍数通常为 5-20倍。

 

2.3 细胞样品

PBS洗涤细胞1次，离心收集细胞，吸尽上清，加入细胞沉淀 3倍体积的蛋白沉淀工作液，充分涡旋振匀（收集细胞前后分别对离心管进行称重，从而就可以计算出细胞沉淀的重量，10mg细胞沉淀的体积可以粗略看做10ml）。对样品进行快速的冻融后， 4℃或冰上孵育5min，4℃ 10000g 离心10min，取上清，用于 GSH测定。样品需暂时4℃保存备用，不立即测定的样品可以-70℃保存，但不宜超过10天。对于处理好的细胞样品通常需用蛋白沉淀工作液进行适当稀释后再进行测定，稀释倍数通常为 5-20 倍。

  1. GSH加样

取 96 孔板，按照下表设置空白孔、标准孔、测定孔，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的GSH 浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。

加入组分（µl） 空白孔 标准孔 测定孔
蛋白沉淀工作液 10 — — — —
系列GSH标准溶液

（50、 25、 15、 10、 5、 2μM）

 — — 10 — —
待测样本 — — — — 10
GSH检测工作液 200 200 200
室温或25℃孵育5min
NADPH工作液（0.12mg/ml） 50 50 50
  1. GSH检测

立即用酶标仪或自动生化分析仪测定 410nm处吸光度，每隔 2min 检测 1次，空白孔调零，共检测 6min（亦可加入 NADPH 工作液反应 6min 后检测，只检测 1次），以检测其反应速率ΔA/min。如果酶标仪不能检测 410nm，可测定 405-420nm处吸光度。

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规格信息

品牌：

Jinpan
CAS:

N/A
规格：

100T
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