KPL-辣根过氧化物酶(HRP)底物

TMB/辣根过氧化物酶底物/四甲基联苯胺

DAB/辣根过氧化物酶底物/二氨基联苯胺

酶免技术常应用的酶有辣根过氧化酶和碱性磷酸酶,针对不同的酶,所作用的底物是不同的。 

常用的HRP的底物有邻苯二胺(OPD)、四甲基联苯胺(TMB)和ABTS等。其中OPD主要用于ELISA试验,灵敏度高,比色方便。其缺点是配成应用液后稳定性差,而且具有致癌性。TMB是常用HRP酶的显色底物 western blot、Elisa等实验的显色试剂,是一种优于OPD的新型HRP色原底物,经酶作用后由无色变蓝色,目测对比鲜明;加酸停止酶反应后变黄色,可在比色计中定量;因此应用日见增多。

DAB可用于检测过氧化物酶(peroxidase)活性,是辣根过氧化物酶等过氧化物酶的显色底物。经过氧化物酶催化后可产生不溶性棕色产物。可以用于基于过氧化物酶检测的免疫组化、Western等的显色检测。

ABTS是一种水溶性HRP底物,在过氧化物酶的作用下产生绿色终产物。该绿色产物在410nm及650nm具有两个主要吸收峰。在ELISA应用中,ABTS的灵敏度比OPD和TMB稍差。它会被缓慢氧化并显色。相对于OPD或TMB底物高灵敏度造成的不可接受的高背景,虽然灵敏度不如OPD和TMB,但空白值很低。

KPL-辣根过氧化物酶(HRP)底物

KPL是美国最早实现亲和素纯化二抗商业化的生物公司,同时也是世界上较大的二抗和底物显色系统生产商。KPL可为您提供HRP的底物: DAB、TMB和ABTS等。以及AP常用底物pNPP、BCIP/NBT/4CN等。

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辣根过氧化物酶HRP底物—-TMB

TMB—-四甲基联苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)

TMB即四甲基联苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)是一种脂溶性较强的基团,因此容易进入细胞,与细胞器中的辣根过氧化物酶 (horse radish peroxidase,简称HRP)反应,且由于这种高度的脂溶性,使其易形成多聚体,在HRP活性部位产生粗大的、深蓝色沉淀物,同时反应产物的沉淀,使得HRP的活性部位更加暴露,有利于酶氧化反应的进行。这使得TMB成为细胞免疫学实验中的一种很好的发色团。另外,TMB又有无致癌性等优点,因此在细胞免疫学实验中应用日趋广泛。

TMB性质较稳定,可配成溶液试剂,只需与H2O2溶液混和即成应用液,可直接作底物使用。酶反应用Hcl或H2SO4终止后,TMB产物由蓝色呈黄色,可在比色计中定量,最适吸收波长为405nm。

货号

产品名称

CAS-No

说明书

A3840

3,3’,5,’-Tetramethylbenzidine TMB

54827-17-7

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其他酶联反应底物还有

货号 

产品名称

反应酶 

说明书

A0596

3,3′-Diaminobenzidine tetrahydrochloride   DAB

HRP底物

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A1117

5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl Phosphate     BCIP

AP底物

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A1243

Nitrotetrazolium Blue chloride             NBT

AP底物

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德国AppliChem公司产品,为全世界提供最权威的生化试剂。素有”欧洲Sigma”之称的德国艾普力(AppliChem)是德国知名的跨国公司,专注生产常规生化试剂、化学试剂、符合美国与欧洲药典(Ph. Eur., USP)的试剂。德国艾普力(AppliChem)欧洲”销量第一”,有着“小SIGMA”的美誉,价格低廉。

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