同仁化学超氧化物歧化酶检测——SOD Assay Kit货号:S311| 日本DOJINDO

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超氧化物歧化酶检测——SOD Assay Kit货号:S311
超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒-WST
SOD Assay Kit
商品信息
储存条件:0-5度保存
运输条件:室温

特点:

 

● 可以检测细胞、组织等多种样品

● 准确性和灵敏度高

● 可以测定100%SOD抑制率

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氧化应激与自由基检测方案

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超氧化物歧化酶检测——SOD Assay Kit货号:S311

超氧化物歧化酶检测——SOD Assay Kit货号:S311

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产品概述
检测原理
所需设备和材料
操作步骤
抑制曲线
实验例
食品抗氧化能力的检测
常见问题Q&A
参考文献

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凑单关联产品TOP5

NO.1.    Cell Counting Kit-8     细胞增殖毒性检测   

NO.2.    ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-    ROS检测

NO.3.    GSSG/GSH Quantification Kit II    氧化型/还原型谷胱甘肽

NO.4.    Caspase-3 Assay Kit -Colorimetric    细胞凋亡检测

NO.5.    DMPO    超氧阴离子和羟自由基检测

 

产品概述

超氧化物歧化酶 (SOD) 是一种重要的抗氧化酶,它可以催化超氧阴离子 (O2) 的歧化反应,生成过氧化氢和单质氧。目前有很多种直接或间接地测量SOD活性的方法,在这些方法中,使用硝基蓝四唑 (氮蓝四唑NitroblueTetrazolium ,简称NBT) 的一种间接测量方法因其便捷、简单的使用方法而被广泛应用。但是NBT法存在一些缺点,例如生成的甲臜 (Formazan dye) 的水溶性较低,会和黄嘌呤氧化酶的还原型发生反应等问题。SOD检测试剂盒-WST®提供了更为简便的检测SOD的方法,它是利用同仁学研究所研发的高度水溶性四唑盐WST®-1(2-(4-碘苯基)-3-(4-硝基苯)-5-(2,4-二磺酸苯基)-2氢-四唑盐,二钠盐),能与超氧阴离子(O2) 反应生成一种水溶性的染料。WST®-1被超氧阴离子还原的比率与黄嘌呤氧化酶的活性线性相关,并且会被SOD所抑制 (见下图,即红色区域SOD反应优先发生,SOD反应完后蓝色区域WST®-1反应才能发生)。因此SOD或者SOD类似物的IC50(50%的抑制浓度)就能用比色法来测定。

特点
1)可以测定100%SOD抑制率。
2)不需要甲醛溶解操作,操作简单。
3)一次可以进行多样本的测定。
4)由于灵敏度高,可以提高样品的稀释倍率,所以可以抑制干扰物质带来的影响。

检测原理

超氧化物歧化酶检测——SOD Assay Kit货号:S311

所需设备和材料

2-20 µl和20-200 µl的可调式移液器、多通道移液器,酶标仪(450 nm)、96孔板、37℃培养箱

操作步骤

用96孔板,制作样品到检测可在1小时内完成

超氧化物歧化酶检测——SOD Assay Kit货号:S311

抑制曲线

                               Cu,Zn-SOD的抑制曲线

超氧化物歧化酶检测——SOD Assay Kit货号:S311

实验例

高知大学的岛村等人对石茶制作的每一步都测定了其SOD活性。据报道,在制造过程中和微生物相关的需氧发酵和厌氧发酵极大地增加了SOD样活性,并且在发酵过程中抗氧化能力随着茶提取物成分的变化而改变。

“ 石茶生产过程中儿茶素含量和超氧阴离子清除活性的变化”,日本食品科学技术学会学报,55(12),640

超氧化物歧化酶检测——SOD Assay Kit货号:S311

L:    新鲜树叶

SL: 蒸煮的树叶

PFL:预发酵(有氧条件下发酵几天)树叶

FL: 发酵(在厌氧条件下发酵数天)树叶

DL: 晒干(数天)树叶

食品抗氧化能力的检测

我们知道,许多由呼吸和各种外在因素产生的活性氧,会降低机体功能,促进各种疾病的发病和老化。
有越来越多对这此类现象的防御机制(抗氧化能力)的文章出现,关于利用食品所具有的抗氧化能力维持健康、预防疾病的研究也备受关注。

常见问题Q&A

Q1:“1 Unit”的定义是什么?
A1:1 Unit是指样品中的还原性染料(如细胞色素C,WST-1,NBT或XTT)与超氧阴离子之间的比色反应,50%被抑制时的点。例如如果不含任何SOD的样品溶液的O.D.值为1.0的话,那么另一个O.D.值为0.5的样品则被定义为具有1个单位的酶活性。可以使用这个单位来确定样品中的

SOD活性。使用不同染料或方法检测SOD活性,它们之间不具有可比性。

Q2:我能使用SOD标准品来确定样品溶液的SOD活性吗?
A2:可以。制备标准曲线,确定样品溶液的SOD活性。SOD Bovine Erythrocytes

(CAS# 9054-89-1,EC 1.15.1.1)能够从Sigma(Catalog# S2525)购得。

Q3:是否可以用动力学法来测定SOD活性?
A3:可以。因为在20分钟内的生色比率是保持一致的,可以测量直线上升阶段5分钟内的斜率来测定SOD活性。
Q4:如果样品自身带有较深的颜色,这样的样品可以使用吗?
A4:可以。稀释样品可以减小干扰,将样品孔的O.D.值减去Blank  2的O.D.值就可以扣除本底的颜色。但是如果样品溶液的SOD活性过低是不能检测出的。
Q5:如何能够制备更多的Dilution Buffer?
A5:Dilution Buffer为PBS。请按以下浓度配制:137 mM NaCl,2.7 mM KCl,

1.47 mM KH2PO4, 8.1 mM Na2HPO4,pH 7.4。

Q6:使用该试剂盒能否分别检测Mn-SOD和Cu/Zn-SOD?
A6:可以。要单独检测Mn-SOD活性,可以添加KCN阻断Cu/Zn-SOD活性。向样品中加入

1 mM的KCN可以完全阻断Cu/Zn-SOD活性。要测定Cu/Zn-SOD的活,可以用总的SOD活性减去Mn-SOD活性,就可以得到。

Q7:怎样保存样品?
A7:在-80℃可以保存1年。
Q8:能否使用该试剂盒检测超氧化物阴离子的水平?
A8:不必用这个试剂盒,可以使用WST-1来检测超氧化物。但是必须有一个检测样品溶液中超氧化物量的标准。因为超氧化物不稳定,而且会和其它物质反应,要确定系统中生成的超氧化物的总量是比较困难的。试剂盒中的黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系可以被用作检测每个样品中超氧化物相对生成量的标准。

参考文献

1. Manganese superoxide dismutase polymorphism affects the oxidized low-density lipoproteininduced apoptosis of

macrophages and coronary artery disease, European Heart Journal, 2008, 29, 1267-1274

2. Extracellular Superoxide Dismutase Accelerates Endothelial Recovery and Inhibits In-Stent Restenosis in Stented

Atherosclerotic Watanabe Heritable Hyperlipidemic Rabbit Aorta,

Journal of the American College of Cardiology, 2007, 50, 2249-2253

3. An Abnormal Mitochondrial–Hypoxia Inducible Factor-1-Kv Channel Pathway Disrupts Oxygen Sensing and Triggers

Pulmonary Arterial Hypertension in Fawn Hooded Rats: Similarities to Human Pulmonary Arterial Hypertension,

Circulation, 2006, 113, 2630-2641

4. Deficient plastidic fatty acid synthesis triggers cell death by modulating mitochondrial reactive oxygen species,

Cell Research, 2015, 25, 621-633

5. A Tau-Targeted Multifunctional Nanocomposite for Combinational Therapy of Alzheimer’s Disease,

ACS Nano, 2018, 12(2), 1321-1338

6. Endothelial Cell Palmitoylproteomic Identifies Novel Lipid-Modified Targets and Potential Substrates for Protein Acyl

Transferases, Circulation Research, 2012, 110(10), 1336-44

7. Lung EC-SOD overexpression attenuates hypoxic induction of Egr-1 and chronic hypoxic pulmonary vascular remodeling,

American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine, 2008, 295, L422-L430

8. Inhaled Ethyl Nitrite Prevents Hyperoxia-impaired Postnatal Alveolar Development in Newborn Rats,

American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine, 2007, 176, 291-299

9. In vivo guiding nitrogen-doped carbon nanozyme for tumor catalytic therapy,

Nature Communications, 2018, 9(1), 1440

10. A lytic polysaccharide monooxygenase-like protein functions in fungal copper import and meningitis,

Nature Chemical Biology, 2020, doi.org/10.1038/s41589-019-0437-9

11. Nestin regulates cellular redox homeostasis in lung cancer through the Keap1-Nrf2 feedback loop,

Nature Communications, 2019, 10, 5043

12. Allelopathic interactions of linoleic acid and nitric oxide increase the competitive ability of Microcystis aeruginosa,

The ISME Journal, 2017, 11, 1865-1876

13. Phase I Study of Copper-Binding Agent ATN-224 in Patients with Advanced Solid Tumors,

Clinical Cancer Research, 2008, 14, 7526-7534

14. Chemoprevention of Carcinogenic Progression to Esophageal Adenocarcinoma by the Manganese Superoxide Dismutase

Supplementation, Clinical Cancer Research, 2007, 13, 5176-5182

15. Development of insulin resistance and obesity in mice overexpressing cellular glutathione peroxidase,

线粒体超氧化物染料100-0991


线粒体超氧化物染料

简要描述:线粒体超氧化物染料,产品编码:100-0991。品牌:STEMCELL
Mitochondrial Superoxide Dye
检测线粒体中超氧化物产生的灵敏荧光染料。

详细介绍

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品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合

线粒体超氧化物染料,产品编码:100-0991。品牌:STEMCELL

线粒体超氧化物染料,Mitochondrial Superoxide Dye

产品描述:

使用监测活细胞线粒体中的超氧化物产生。这种荧光染料是检测线粒体超氧化物产生以研究氧化应激的宝贵工具,并且已经过流式细胞术检测验证。活性氧(ROS)和活性氮(RNS)是源自氧和氮分子的自由基。

特点:
• 激发波长:510 nm• 发射波长:580 nm

• 容易被超氧化物氧化,但不太可能被 ROS 或 RNS氧化

• 氧化产物在细胞中具有高荧光• 快速选择性地靶向线粒体

• 高信噪比
• 经验证可使用流式细胞

进行检测选择性地靶向活细胞的线粒体。这种染料在与超氧化物ROS反应时被氧化,产生红色荧光。在没有超氧化物的情况下,没有吸收和可忽略不计的荧光。虽然很容易被超氧化物氧化,但它对其他ROS和RNS的氧化具有抵抗力。高信噪比使成为细胞呼吸等生物系统中超氧化物检测的合适试剂。

海金畔生物科技有限公司

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MCLA (Chemiluminescent Probe) 超氧化物化学发光探针

MCLA (Chemiluminescent Probe) 超氧化物化学发光探针

货号: JP4813-1MG 品牌: Jinpan 标签: 细胞生物学研究

描述

MCLA (Chemiluminescent Probe) 超氧化物化学发光探针

产品标签

MCLA;Chemiluminescence Reagent 化学发光试剂;Superoxide probe 超氧化物探针;Lucigenin 光泽精; CAS:162558-52-3;

产品信息

产品名称 产品编号   规格   CAS NO. 价格(元)    
MCLA (Chemiluminescent Probe) 超氧化物化学发光探针    JP4813-1MG 1mg 162558-52-3    820
MCLA (Chemiluminescent Probe) 超氧化物化学发光探针 JP4813-5MG 5mg 162558-52-3 1820
MCLA (Chemiluminescent Probe) 超氧化物化学发光探针 JP4813-10MG 10mg 162558-52-3 2850

产品描述

MCLA,又称为6-(4-Methoxyphenyl)-2-methyl-3,7-dihydroimidazo[1,2-a]pyrazin-3(7H)-one hydrochloride,能够与超氧化物阴离子(O2–)或单线态氧(1O2)反应产生化学发光。MCLA与超氧化物可逆反应形成一加合物,该加合物的不可逆衰变产生冷光(~465nm),此反应表观速率常数是~105M–1s–1。MCLA化学发光是灵敏的超氧化物检测手段,最显著的应用是白细胞功能研究。

产品特性

1)   CAS NO.:162558-52-3

2)   同义名:2-Methyl-6-(4-methoxyphenyl)-3,7-dihydroimidazo[1,2-a]pyrazin-3(7H)-one hydrochloride, 6-(4-Methoxyphenyl)-2-methyl-3,7-dihydroimidazo[1,2-a]pyrazin-3(7H)-one hydrochloride, Cypridina Luciferin methoxy-analogue, MCLA

3)   分子式:C14H13N3O2· HCl 

4)   分子量:291.73

5)   纯度:≥98.0%

6)   Emmax:~465 nm (Chemiluminescence: in 0.1 M Tris pH 8.5; after addition of H2O2)

7)   外观:白色至浅黄色固体

8)   溶解性:溶于水,DJPO,DMF

9)   化学结构式:MCLA (Chemiluminescent Probe) 超氧化物化学发光探针

保存与运输方法

保存:-20ºC避光干燥保存,至少1年有效。

运输:冰袋运输。

使用方法(For reference only)

– Prepare reaction buffer: 5 µM MCLA + buffer

Buffer examples:  

for Cytochrome C: 50 mM Tris-Cl, pH 7.8, 0.1 mM EDTA, 7 mM sodium succinate .

for mitochondria proteins: 125 mM KCl, 10 mM HEPES, 5 mM MgCl2, 2 mM K2HPO4

– Conduct reaction in 100 µl of reaction buffer – Light emission is detected and quantified using a microplate luminometer with opaque (white) 96-well plates. The photomultiplier can be set to default with an integration time of 1000 ms. The MCLA signal is quantified as an integral of 20 s to 60 s of continuous measurement. – A positive control can be prepared with the xanthine/xanthine oxidase system: 1 mM xanthine + 0.1 unit/ml xanthine oxidase causes a ~100-fold increase in chemiluminescent signal as compared with xanthine or xanthine oxidase alone, which did not differ significantly from reaction buffer alone. Addition of SOD (CuZn-SOD from erythrocytes) decreases the MCLA signal by over 98%.

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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货号 名称 规格              目录价(元) 
MM0706-1G         Luminol 鲁米诺 1g 120
MM0751-1G Luminol Sodium Salt 鲁米诺钠盐 1g 350
MM0753-1G Isoluminol 异鲁米诺 1g 736
JP4811-10MG Lucigenin 光泽精 10mg 460
JP4813-1MG MCLA (Superoxide Probe) 超氧化物探针     1mg 1350

 

 

 

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

162558-52-3 

规格:

1mg

货期:

咨询客服

MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator 红色线粒体超氧化物荧光探针

MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator 红色线粒体超氧化物荧光探针

货号: JP4313-50UG 品牌: Jinpan 标签: 细胞生物学研究

描述

MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator

红色线粒体超氧化物荧光探针

产品标签

MitoSOX Red;线粒体超氧化物探针;二氢乙啶DHE;Reactive oxygen species, ROS;DCFH-DA;超氧化物歧化酶(SOD);

产品信息

产品名称

产品编号 规格 价格(元)

MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator 红色线粒体超氧化物荧光探针

JP4313-50UG

50µg

745

JP4313-250UG 5×50µg

3655

 

 

 

 

 

 

产品描述

红色线粒体超氧化物荧光探针(MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator,以下简称:MitoSOX Red)是二氢乙啶(DHE,JP4812-5MG)的一种阳离子衍生物,特别设计高度特异性检测活细胞内线粒体超氧化物。

MitoSOX Red是一种特异性靶向活细胞线粒体的新型荧光探针,具细胞膜渗透性,且能快速和选择性结合线粒体。一旦进入线粒体,被超氧化物氧化,与核酸结合后产生很强的红色荧光(见Fig 1)。MitoSOX Red能够立即被超氧化物,而不是其它ROS-或RNS生成系统所氧化。超氧化物歧化酶(SOD)能够预防MitoSOX Red被氧化。

MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator 红色线粒体超氧化物荧光探针MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator 红色线粒体超氧化物荧光探针

 Fig 1. MitoSOX Red与超氧化物阴离子(•O2)的反应机理图

MitoSOX Red由于能直接检测活细胞线粒体超氧化物,从而避免因分离纯化线粒体再进行检测可能存在人为操作引起的误差。MitoSOX Red是一种有价值的工具,能用来筛选多种疾病中调节氧化应激的药物。

产品特征

1) 分子式:C43H43N3IP

1) 分子量:759.71

2) 外观:固体

3) Ex/Em:~510/580 nm

4) 溶解性:溶于DJPO(5mM)

5)化学结构式:MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator 红色线粒体超氧化物荧光探针MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator 红色线粒体超氧化物荧光探针

保存与运输方法

保存:≤-20°C避光干燥保存,收到货至少12个月有效。 

运输:冰袋运输。

注意事项

1) 整个操作过程中注意避光。

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1. 储存液的配制

使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简单低速离心使溶液降至管底。之后用13µl高质量无水DJPO溶解MitoSOX Red(50µg/管),混匀后即得到5mM储存液。储存液可根据单次用量分装,≤-20°C避光保存,尽量避免反复冻融。

2. 真核活细胞标记步骤

以下实验步骤是专门开发用于爬片培养的牛肺上皮细胞(BPAE)、MRC5人肺成纤维细胞和小鼠3T3成纤维细胞,其他细胞类型可做适当调整。建议以下步骤仅作起始条件,根据实际需求做优化调整。

2.1 制备5µM MitoSOX Red工作液:用HBSS/Ca/Mg(货号:JP3501-500ML)或适当缓冲液稀释储存液到5µM工作液。

【注意】:MitoSOX Red工作浓度不要超过5µM,否则可能产生细胞毒性效应,包括改变线粒体形态和荧光素重新分配到细胞核和细胞质。

2.2 细胞加载:取1-2ml 5µM MitoSOX Red工作液以覆盖爬片培养的细胞为准。37℃避光孵育10min。

2.3 细胞清洗:用预热的缓冲液轻轻清洗细胞3次。

2.4 准备观察:按需加入复染剂染细胞,之后封片,进行荧光成像(Ex/Em=510/580nm)。

附录I 活性氧检测探针汇总表

货号

名称 规格
JP4307-50UG MitoTracker Red CJPRos 红色线粒体荧光探针 50µg
JP4308-50UG MitoTracker Red CM-H2XRos 红色线粒体荧光探针 50µg
JP4309-50UG MitoTracker Green FM 绿色线粒体荧光探针 50µg
JP4310-50UG MitoTracker Deep Red FM 深红色线粒体荧光探针 50µg
JP4313-50UG MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide红色线粒体超氧化物荧光探针 50µg
JP4307-50UG MitoTracker Red CJPRos 红色线粒体荧光探针 50µg
JP4801-1KIT Reactive Oxygen Species (ROS) Assay Kit 活性氧检测试剂盒 100~500T
JP4812-5MG Dihydroethidium (DHE) 二氢乙锭 5mg
JP4601A-100ML Dimethyl Sulfoxide (DJPO), Cell Culture Tested 二甲基亚砜 100ml
JP3505-500ML 1×Hanks平衡盐溶液(含钙镁,无酚红)

500ml

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归金畔生物/JP金畔所有】

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

N/A

规格:

50μg

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超氧化物歧化酶(SOD)活性分析——Cell BioLabs氧化损伤系列

在细胞由于自由基非常活泼,化学反应性极强,参与一系列的连锁反应,能引起细胞生物膜上的脂质过氧化,破坏了膜的结构和功能。它能引起蛋白质变性和交联,使体内的许多酶及激素失去生物活性,同时还能破坏核酸结构和导致整个机体代谢失常等,最终使机体发生病变。虽然自由基会对机体产生诸多危害,但是在一般的条件下人体细胞内也存在着清除自由基、抑制自由基反应的体系,它们有的属于抗氧化酶类,有的属于抗氧化剂。如超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)、过氧化氢酶(Catalase, CAT)等。

在细胞氧化损伤的研究中,对于细胞内活性氧基团和抗氧化剂的检测常常是一个非常重要的指标,因其直接反应细胞的状态。上海金畔生物科技有限公司向您推荐美国著名细胞试剂专家Cell Biolabs的相关产品,对于抗氧化酶和抗氧化剂的检测,其OxiSelect™ Superoxide Dismutase Activity Assay(过氧化物歧化酶活性分析)和OxiSelect™ Catalase Activity Assay Kit(过氧化氢酶活性分析)试剂盒为氧化应激研究中,细胞内两种重要的过氧化物酶的检测提供了快捷的检测方案。另外,在细胞分子水平上检测细胞内生物大分子的抗氧化能力,可由OxiSelect™ ORAC and超氧化物歧化酶(SOD)活性分析——Cell BioLabs氧化损伤系列 HORAC Activity Assay Kits通过ORAC指标(氧基抗氧化能力)和HORAC指标(羟基抗氧化能力)反应出来。

超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)又称过氧化物歧化酶。SOD属于金属酶,按照结合金属离子种类不同,该酶有以下三种:含铜与锌超氧化物歧化酶(CUZNSOD)、含锰超氧化物歧化酶(MN—SOD)和含铁超氧化物歧化酶(Fe—SOD)。SOD主要存在于胞液和线粒体基质中,是防御生物体氧化损伤的一种十分重要的酶。它的作用底物是超氧阴离子自由基O2-·,可将其催化歧化为氧气和过氧化氢。这种酶在保护生物细胞免受超氧自由基和由其形成的活性氧类(例如H2O2,·OH)的毒害方面起着重要作用。

该超氧化物歧化酶(SOD)活性分析试剂盒(货号:STA-340)通过使用黄嘌呤(Xanthine)/黄嘌呤氧化酶(XOD)体系生成超氧化物阴离子。加入发色基团,发色基团可被由上述体系产生的氧化物阴离子还原成为水溶性的黄色甲染料,这样SOD活性通过抑制发生基团的还原来测定。OxiSelect™ Superoxide Dismutase Activity Assay超氧化物歧化酶活性分析试剂盒(货号:STA-340)通过一个可信的方案快速检测,细胞裂解液、血浆、血清以及组织匀浆中的SOD活性。每个试剂盒内包含空白样、SOD标准对照,能完成100次检测。

产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
OxiSelect™ Superoxide Dismutase Activity Assay STA-340 比色法检测,100次分析

上海金畔生物科技有限公司向您推荐Cell BioLabs完整的细胞氧化损伤检测方案,其产品覆盖上述最重要的DNA/RNA损伤分析产品,为您提供最优的检测方案。除了常见的AP位点分析以及8-OHdG/8-OHG定量分析,还有基于单细胞水平的彗星分析和DNA双链断裂分析等。除了DNA/RNA损伤,还包括脂质过氧化过程中壬烯(HNE)、丙二醛(MDA)以及8-异前列腺素F2a(8-Isoprostane)ELISA分析检测试剂盒;对于蛋白质的羰基化、硝基化以及终末氧化蛋白产物分析等蛋白氧化损伤检测方案;针对活性氧基团和抗氧化剂的活力检测,也有多种试剂和试剂盒供您选择。如果您对以上产品感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询氧化应激及损伤相关的实验解决方案,或索取最新的Cell BioLabs产品资料。