定量质粒DNA-卡那霉素耐药性基因盒介绍

定量质粒DNA-卡那霉素耐药性基因盒介绍

定量质粒DNA卡那霉素耐药性基因盒是一种定量PCR(QPCR)系统,用于检测用于基因疗法、细胞基疫苗和类似生物治疗药物的残留卡那霉素耐药性质粒。该系统可靠而快速,能够敏感而特异地量化卡那霉素抵抗质粒DNA。这种性能有助于确保对从广泛的样品类型获得的量化数据的高度信心,从不同样品基质的过程中样品到散装药物物质。


定量质粒DNA卡那霉素耐药基因盒的特点包括:
*设计用于用卡那霉素耐药基因的任何共同等位基因量化残余质粒DNA
*通过创新的无DNA主组合进行高度敏感的量化
*使用经过验证的塔克曼实时PCR技术进行高度敏感的量化
*包括主混合物、塔克曼底漆/探针混合物、卡那霉素抗质粒DNA标准和样品制剂试剂

这种试剂盒有或没有样品制备试剂,其形式为一种筹委会以后残余DNA样品制备试剂盒,它是为从蛋白质、缓冲剂和盐的复杂混合物中高效回收残余DNA而优化的。

综合工作流程解决方案
定量质粒DNA-卡那霉素耐药性基因盒及其后续残留DNA样本制备盒是生物制药生产过程中杂质和污染物检测的综合工作流程的一部分。其中包括筹备委员会后续残余DNA样本准备包提供了一个手动和自动的样本准备工作流程。在应用的生物系统7500快速实时PCR系统和第五工作室实时PCR系统上,对该系统进行了验证。使用实时PCR检测软件简化数据分析,该软件提供准确的量化和安全性、审计和电子签名功能,以帮助实现21CFRCT11的合规性。

易用
通过测定质粒DNA-卡那霉素耐药基因盒,您进行了QPCR分析,将测试样品中卡那霉素耐药质粒DNA的数量与已知数量卡那霉素耐药质粒DNA标准生成的标准曲线进行比较。该工具包包括你需要执行这些步骤的组件,从主混合物到塔克曼引物/探针混合物到DNA标准,以及逐步指令。

bayoubiolabs pUC和M13 DNA简介

bayoubiolabs pUC和M13 DNA简介

用于分子生物学研究的质粒和噬菌体DNA

高度纯化:纯度适用于所有分子生物学应用。无RNA、蛋白质、核苷酸、核糖核酸酶和脱氧核糖核酸酶污染。pUC质粒实际上是纯的超螺旋形式,含有最少的切口质粒和染色体DNA污染。M13双链质粒被进一步纯化以去除所有残留的单链噬菌体DNA,这些DNA会干扰转化。  

折纸:M13mp18 ssDNA和M13mp19 ssDNA适用于DNA折纸应用。  

不贵:我们的M13mp18 ssDNA比New England Biolabs便宜15倍。我们的pUC19质粒比新英格兰生物实验室便宜8倍。  

提供:pUC质粒和M13 ssDNA以1.0微克/微升的浓度在TE缓冲液中提供。M13 dsDNA质粒以0.50微克/微升的浓度提供。  

散装数量:从100毫克到100克的大批量产品价格低廉。请联系我们了解价格和大批量供货情况。  

免费送货:在环境温度下通过一级航空邮件运送到。

目录        描述 

P-101pUC18质粒,1000微克 

P-102        pUC19质粒,1000微克 

P-103pUC118质粒,1000微克 

P-104pUC119质粒,1000微克 

P-105M13mp18质粒,100微克 

P-106M13mp19质粒,100微克 

P-107M13mp18单链噬菌体DNA,500微克 

P-108M13mp19单链噬菌体DNA,500微克 

P-109p8064单链噬菌体DNA,500微克

β-内酰胺如何对您的细胞和基因治疗造成风险

β-内酰胺如何对您的细胞和基因治疗造成风险

β-内酰胺是一类抗生素,包括青霉素和氨苄青霉素。它们含有β-内酰胺环和可变侧链。细菌细胞质膜相关酶和青霉素结合蛋白与 β-内酰胺共价结合。随后,抗生素抑制细菌细胞壁合成的最后一步,导致自溶

除了用作抗生素药物外,β-内酰胺还被用作 DNA 克隆的选择工具。当创建新的质粒时,会添加 β-内酰胺抗性盒。将质粒插入细菌宿主后,向培养基中添加相应的β-内酰胺将有效杀死不含目的质粒的细菌菌落。

尽管β-内酰胺有很多好处,但它们会给患者带来危及生命的过敏反应的风险。不幸的是,很难确定引起过敏反应所需的最小量的β-内酰胺,并且用目前可用的标准分析方法很难检测微量的β-内酰胺。因此,避免使用β-内酰胺以防止最终药品受到污染至关重要。

细胞和基因疗法开发商和制造商需要认识到β-内酰胺风险,并需要制定强有力的策略来防止最终药品受到污染。药品制造商在欧盟销售时必须遵守 EMA GMP 法规,在美国销售时必须遵守 21 CFR 210/211 – 不符合 cGMP 生产的药品将被视为掺假。在其 2022 年更新指南2中,FDA 建议采取严格控制措施来防止污染,包括将加工 β-内酰胺和非 β-内酰胺药物的设施分开,以及进行程序控制以防止受 β-内酰胺污染的原材料进入非β-内酰胺加工设施。

除非得到缓解,否则在使用某些抗生素(例如作为重组蛋白生产中的选择标记)的设施中生产的原材料可能会污染细胞或基因治疗药物产品。尽管在重组蛋白的下游纯化步骤中努力去除抗生素,但残留量可能仍然存在。如果在细胞疗法制造过程中将重组蛋白用于培养方案,则最终产品中残留的β-内酰胺可能会导致过敏反应。

为了您的研究药物开发和制造的最大利益,FUJIFILM Irvine Scientific 放弃在 Shenandoah 重组蛋白中使用 β-内酰胺,现在使用卡那霉素或其他非 β-内酰胺抗生素作为选择标记。青霉素和链霉素(通常称为“pen-strep”)的使用也已被淘汰,取而代之的是庆大霉素。此外,FUJIFILM Irvine Scientific 仅对用于 cGMP 制造的原材料进行资格认证,这些原材料不是在加工或含有 β-内酰胺的设施中生产的。

当您考虑培养过程中重组蛋白的来源时,请确保不存在存在 β-内酰胺抗生素的风险。询问您的重组蛋白供应商,它们是否是在使用或加工含有 β-内酰胺材料的设施中生产的,这样您就更有信心做出了正确的选择。


ApexPrep DNA 质粒小量制备试剂盒简述

ApexPrep DNA 质粒小量制备试剂盒简述

ApexPrep DNA 质粒小量制备试剂盒,货号:A5001

用于分离质粒DNA

APEXPREP DNA质粒微型胶片试剂盒基于碱性裂解技术,该技术可以在高盐存在下裂解细胞,然后在吸附膜上吸附到吸附膜。随后的步骤,例如洗涤杂质,可以有效地提取高达30μg质粒DNA。该试剂盒采用特殊缓冲液配方,最大限度地去除蛋白质杂质和其他有机化合物,每次可处理1-5 mL菌液。质粒提取的产率和质量与宿主细菌和培养条件的类型,细胞裂解,质粒拷贝数,质粒稳定性,抗生素和其他因素有关。

ApexPrep DNA 质粒小量制备试剂盒制备的质粒 DNA 适用于各种常规应用,包括限制性酶消化、测序、文库筛选、连接和转化、体外翻译以及健壮细胞的转染。

化学性质

贮存 在室温下存放一年
运输条件 小分子用蓝冰,修饰核苷酸用干冰。
一般提示 我们不建议长期存放溶液,请尽快用完。

组件和存储

成分 50 次测试 300 次测试
缓冲区BL 30毫升 160毫升
缓冲区A1 20毫升 100毫升
缓冲区A2 20毫升 100毫升
缓冲区A3 30毫升 120毫升
缓冲区AP 12毫升 50毫升
缓冲AE 15毫升 30毫升
核糖核酸酶A 200μL(10mg/ml) 1毫升(10mg/ml)
旋转柱 50 300
收集管 50 300

在室温下存放一年。带有RNase A的缓冲液A1应在2-8°C下存储。

描述

用于纯化高达20μg分子生物学级质粒DNA

  • 在几分钟内可用的质粒DNA

  • 分子生物学级质粒 DNA 的可重复产量

  • 高拷贝向量的单一协议

ApexPrep Spin Miniprep 试剂盒设计用于分离高达 20 μg 的高纯度质粒或粘粒 DNA,用于荧光和放射性测序和克隆等常规分子生物学应用。

大肠杆菌(含pARO181质粒)介绍

大肠杆菌(含pARO181质粒)介绍

大肠杆菌(含pARO181质粒)

形式:冻干粉


大肠杆菌(含pARO181质粒)基本信息

培养基

酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)

传代方法

①准备1支含有5~10mL液体培养基的试管和2个平板;②安全柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上无菌水使之破裂,随后用镊子将其敲碎;③吸取0.5mL液体培养基打入冻干管,充分溶解后重新打回液体试管中,混匀;④吸取0.2mL菌悬液打入平板中,涂布均匀,重复两次获得两个平板;⑤将液体试管和平板全部置于上述培养条件下培养,菌种长出即可使用。

生长条件

37°C;18-24h;好氧

存储条件

2-8℃

安全等级

1

形态

大小:1-2mm 形状:圆形 边缘:整齐 透明度:不透明 颜色:白色 隆起度:中间凸起 表面:明亮光滑 质地:湿润易挑起

应用领域

expression vector
vector containing primer sites useful for sequencing
vector permitting visual detection of recombinants
vector useful for insertional mutagenesis