同仁化学Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号:I291 Iron Assay Kit -Colorimetric-组织铁离子定量试剂盒| 日本DOJINDO

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Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号:I291
Iron Assay Kit -Colorimetric-组织铁离子定量试剂盒
Iron Assay Kit -Colorimetric-
商品信息
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特点:

● 适合组织检测

● 配有标准品,可定量二价、三价铁含量

● 吸光度法

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现货

 
组织/细胞检测

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Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号:I291 Iron Assay Kit -Colorimetric-组织铁离子定量试剂盒

Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号:I291 Iron Assay Kit -Colorimetric-组织铁离子定量试剂盒

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试剂盒内含
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原理
金属离子选择性
加标回收实验
实验例
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凑单关联产品TOP5

NO.1.    FerroOrange    细胞亚铁离子检测   

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试剂盒内含

Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号:I291 Iron Assay Kit -Colorimetric-组织铁离子定量试剂盒

产品概述

铁是生物体内最重要的金属元素之一,生物体内铁元素的含量虽少,但有着重要的生理作用。近年来,随着铁死亡概念的提出,细胞内铁离子的代谢过程的研究逐渐成为了研究热点。同仁化学研究所开发的 Iron Assay Kit-Colorimetric-试剂盒 是一套操作简便的比色法铁离子检测试剂盒。与其他市面上的检测试剂盒 相比 ,可以在更短的时间内进行快速检测。通过比较组织裂解液中的铁离子探针 3-(2-Pyridyl)-5,6-bis(5-sulfo-2-furyl)-1,2,4-triazine, disodium salt的 吸光度与还原成二价铁离子的三价铁标准品的吸光度,即可确定组织样品中的二价铁含量。同时,还可以通过试剂盒中的还原剂将样品中的三价铁还原成二价铁,以确定总铁含量,进而计算出样品中三价铁的含量。

原理

Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号:I291 Iron Assay Kit -Colorimetric-组织铁离子定量试剂盒

金属离子选择性

Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号:I291 Iron Assay Kit -Colorimetric-组织铁离子定量试剂盒

加标回收实验

Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号:I291 Iron Assay Kit -Colorimetric-组织铁离子定量试剂盒

实验例

组织样品中的Fe2+和 Fe3+的检测

1. 称量 100 mg肝脏组织 。

2. 加入 1 ml冷 PBS,移液器吹打 20次, Vortex振荡 10 s 14,000 RPM离心 4 min,去除上清 。

3. 将样品转移至研钵,加入液氮充分研磨成粉末后,加入 1.3 ml Assay Buffer,回收至微管中。

4. 将含有样品的微管置于超声波水浴中 5 min。(为防止样品温度上升,每 1 min间隔置于冰浴上 20 s)。

5. 16,000 g离心 10 min,除去不溶物。

6. 取 1300 μl上清液,每管分别加入 400 μl上清液,制成二价铁样品、总铁样品、样品空白。

7. Standard管 中加入 Reducer solution。 (参考图 2 H管 30 μl、 G~C管 20 μl、 B管 40 μl、 A管 20 μl)。

二价品样品管中加入 20 μl Assay Buffer。

总铁样品管中加入 20 μl Reducer solution。

样品空白管中加入 20 μl Assay Buffer。

将所有的 Standard管、样品管、样品空白管 37 培养 15 min。

8. 参考表 1和表 2,加入至 96孔板中 37 培养 60 min,检测 593 nm处的吸光度。

9. 将酶标仪数据拷贝至 “Iron Assay Kit – Excel表 ”,自动计算 出二价铁和三价铁浓度。

Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号:I291 Iron Assay Kit -Colorimetric-组织铁离子定量试剂盒

Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号:I291 Iron Assay Kit -Colorimetric-组织铁离子定量试剂盒

参考文献

No.       检测对象                                           引用 (含链接) 影响因子
1 组织

(小鼠肿瘤组织)

H.   Ren, J. Yong, Q. Yang, Z. Liu, Y. Xu, H. Wang, X. Jiang, W. Miao, X. Li, “Self-assembled FeS-based cascade   bioreactor with enhanced tumor penetration and synergistic treatments to trigger   robust cancer immunotherapy”, Acta Pharm. Sin. B2021,   doi:10.1016/j.apsb.2021.05.005. 7.097
2 细胞

Kasumi-1

(人急性白血病细胞)

L.   Zhang, Y. Song, K. Cao, Y. Du, M. Han, Z. Shi, F. Yan and S. Feng, “Hepcidin-Based   Nanocomposites for Enhanced Cancer Immunotherapy by Modulating Iron   Export-Mediated N6-Methyladenosine RNA Transcript”, Adv. Funct.   Mater.2021, doi: 10.1002/adfm.202107195. 18.808
3 细胞

(II型肺泡细胞)

H.   Cheng, D. Feng, X. Li, L. Gao, S. Tang, W. Liu, X. Wu, S. Yue, C. Li, Z. Luo,   “Iron   deposition-induced ferroptosis in alveolar type II cells promotes the   development of pulmonary fibrosis”, Biochim. Biophys. Acta,   Mol. Basis Dis.2021, doi: 10.1016/j.bbadis.2021.166204. 5.187
4 细胞

MV4-11; Kasumi-1; NB4

(白血病细胞)

Y.   Du, M. Han, K. Cao, Q. Li, J. Pang, L. Dou, S. Liu, Z. Shi, F. Yan and S.   Feng, “Gold   Nanorods Exhibit Intrinsic Therapeutic Activity via Controlling N6‑Methyladenosine   Based Epitranscriptomics in Acute Myeloid   Leukemia”, ACS Nano2021, doi:   10.1021/acsnano.1c05547. 15.881
5 组织

(人软骨组织)

H.   Ren, J. Yong, Q. Yang, Z. Yang, Z. Liu, Y. Xu, H. Wang, X. Jiang, W. Miao, X.   Li, “Contribution   of ferroptosis and GPX4’s dual functions to osteoarthritis progression”,   EBioMedicine2022, doi: 10.1016/j.ebiom.2022.103847. 8.143
6 组织

(小鼠肺、肝脏、肾脏)

T.   Wu, X. Wang, M. Chen, X. Zhang, J. Zhang, J. Cheng, L. Kong, M. Tang,”Respiratory exposure to graphene   quantum dots causes fibrotic effects on lung, liver and kidney of mice”,   Food Chem. Toxicol.2022, doi: 10.1016/j.fct.2022.112971. 6.023
7 组织

(小鼠海马组织)

T.   Wu, X. Wang, J. Cheng, X. Liang, Y. Li, M. Chen, L. Kong and M. Tang, “Nitrogen‑doped   graphene quantum dots induce ferroptosis through disrupting calcium   homeostasis in microglia”, Part. Fibre Toxicol.2022,   doi: 10.1186/s12989-022-00464-z. 9.4
8 组织

(宫颈管粘膜)

T.   Wang, M. Gong, Y. Cao, C. Zhao, Y. Lu, Y. Zhou, S. Yao, J. Chen, C. Zhao and   R. Ju, “Persistent   ferroptosis promotes cervical squamous intraepithelial lesion development and   oncogenesis by regulating KRAS expression in patients with high risk-HPV   infection”, 2022Cell Death Discovery, doi:   10.1038/s41420-022-01013-5. 5.241
9 组织

(小鼠肺组织)

M.   Li, L. Fu, B. Lv, Y. Xiang, H. Xiang, D. Xu, H. Zhao, “Arsenic   induces ferroptosis and acute lung injury through mtROS-mediated   mitochondria-associated endoplasmic reticulum membrane dysfunction”,   Ecotoxicol. Environ. Saf.2022, doi: 10.1016/j.ecoenv.2022.113595. 6.291
10 细胞

BEL-7402, SMMC-7721

(人肝癌细胞系)

L.   Guan, F. Wang, M. Wang, S. Han, Z. Cui, S. Xi, H. Xu and S. Li, “Downregulation of HULC   Induces Ferroptosis in Hepatocellular Carcinoma via Targeting of the   miR-3200-5p/ATF4 Axis”, 2022Oxid. Med. Cell.   Longevity, doi: 10.1155/2022/9613095. 6.543
11 组织

(小鼠肺部组织)

Z.   Zeng, H. Huang, J. Zhang, Y. Liu, W. Zhong, W. Chen, Y. Lu, Y. Qiao, H. Zhao,   X. Meng, F. Zou, S. Cai, H. Dong, “HDM induce airway   epithelial cell ferroptosis and promote inflammation by activating ferritinophagy in asthma”,   FASEB J.2022, doi: 10.1096/fj.202101977RR. 5.191
12 组织

(大豆叶片)

Y.   Cheng, H. Zhang, W. Zhu, Q. Li, R. Meng, K. Yang, Z. Guo, Y. Zhai, R. Ji, H.   Peng, D. Dou, M. Jing, “Ferroptosis   induced by the biocontrol agent Pythium oligandrum enhances   soybean resistance to Phytophthora sojae”,   Environ. Microbiol., doi: 10.1111/1462-2920.16248. 5.476
13 组织

(小鼠睾丸组织)

Y.   Zhao, H. Zhang, J. Cui, J. Wang, M. Chen, H. Wang, X. Li, J. Li, “Ferroptosis is   critical for phthalates driving the blood-testis barrier dysfunction via   targeting transferrin receptor”, Redox Biol.2022,   doi: 10.1016/j.redox.2022.102584. 10.787
14 组织

(小鼠结肠组织)

F.   Yang, Y. Chen, Y. Xiao, H. Jiang, Z. Jiang, M. Yang, M. Li, Y. Su, Z. Yan, Y.   Lin, D. Li, “pH-sensitive   Molybdenum (Mo)-based polyoxometalate nanoclusters have therapeutic efficacy   in Inflammatory Bowel disease by counteracting ferroptosis”, Pharmacol.   Res.2023, doi: 10.1016/j.phrs.2023.106645. 10.334
15 组织

(小鼠肺部组织)

W.   Tang, J. Qin, Y. Zhou, W. Wang, F. Teng, J. Liu, L. Yi, J. Cui, X. Zhu, S.   Wang, J. Dong, Y. Wei, “Regulation of   ferroptosis and ACSL4-15LO1 pathway contributed to the anti-asthma effect of   acupuncture”, Int. Immunopharmacol.2023, doi:   10.1016/j.intimp.2022.109670. 5.714
16 组织

(小鼠心脏组织)

H.   Hu, L. Li, H. Zhang, Y. Zhang, Q. Liu, M. Chen, J. Ning, Y. Pang, W. Hu, Y. Niu,   R. Zhang, “Mechanism   of YY1 mediating autophagy dependent ferroptosis in PM2.5 induced cardiac fibrosis”, Chemosphere2023,   doi: 10.1016/j.chemosphere.2023.137749. 8.943
17 细胞

(HK-2, 人肾皮质近曲小管上皮细胞)

L.   Kang, D. Wang, T. Shen, X. Liu, B. Dai, D. Zhou, H. Shen, J. Gong, G. Li, Y.   Hu, P. Wang, X. Mi, Y. Zhang, X. Tan, “PDIA4 confers   resistance to ferroptosis via induction of ATF4/SLC7A11 in renal cell   carcinoma”, Cell Death Dis.2023, doi:   10.1038/s41419-023-05719-x. 9.685
18 细胞

(HK-2, 人肾皮质近曲小管上皮细胞)

C.   Dong, C. Song, Z. He, Q. Song, T. Song, J. Liu, Y. Xiong, X. Su, J. Zhou, X.   Yang, W. Liao, “Protective   efficacy of Schizandrin B on ameliorating   nephrolithiasis via regulating GSK3β/Nrf2 signaling-mediated ferroptosis in vivo   and in vitro”, 2023Int. Immunopharmacol.,   doi:10.1016/j.intimp.2023.110042. 5.714
19 组织

(小鼠肺部组织)

B.   Guo, Z. Zuo, X. Di, Y. Huang, G. Gong, B. Xu, L. Wang, X. Zhang, Z. Liang, Y.   Hou, X. Liu, Z. Hu, “Salidroside   attenuates HALI via IL-17A-mediated ferroptosis of alveolar   epithelial cells by regulating Act1-TRAF6-p38 MAPK pathway”, 2022,   Cell Commun. Signaling, doi: 10.1186/s12964-022-00994-1. 7.525
20 组织

(小鼠睾丸组织)

J.   Ding, B. Lu, L. Liu, Z. Zhong, N. Wang, B. Li, W. Sheng, Q. He, “Guilu-Erxian-Glue   alleviates Tripterygium wilfordii polyglycoside-induced oligoasthenospermia in rats by   resisting ferroptosis via the Keap1/Nrf2/GPX4 signaling pathway”, Pharm.   Biol.2023, doi:10.1080/13880209.2023.2165114. 3.889
21 细胞

(人髓核细胞)

X.   Yang, Y. Chen, J. Guo, J. Li, P. Zhang, H. Yang, K. Rong, T. Zhou, J. Fu, J.   Zhao, “Polydopamine   Nanoparticles Targeting Ferroptosis Mitigate Intervertebral Disc Degeneration   Via Reactive Oxygen Species Depletion, Iron Ions Chelation, and GPX4   Ubiquitination Suppression”, Adv. Sci., 2023, doi:10.1002/advs.202207216. 17.521
22 组织

(小鼠心脏组织)

J.   Pan, W Xiong, A. Zhang, H. Zhang, H. Lin, L. Gao, J. Ke, S. Huang, J. ZHang,   J. Gu, A. Chang, C. Wang, “The   Imbalance of p53–Park7 Signaling Axis Induces Iron Homeostasis Dysfunction in   Doxorubicin-Challenged Cardiomyocytes”, Adv. Sci, 2023,   doi:10.1002/advs.202206007. 17.521
23 细胞

(H9c2, 4T1)

T.   Chen, Y. Qin, Y. Li, Y. Li, J. Luo, L. Fan, M. Feng, Z. Wang and Y. Zhao, “Chiral Polymer Micelles   Alleviate Adriamycin Cardiotoxicity via Iron Chelation and Ferroptosis   Inhibition”, Adv. Funct. Mater., 2023, doi:10.1002/adfm.202300689. 19.923
24 细胞

(乳腺癌细胞)

Z.   ZHu, H. Shen, J. Xu, Z. Fang, G. Wo, Y. Ma, K. Yang, Y. Wang, Q. Yu, J.   Tang., “GATA3   mediates doxorubicin resistance by inhibiting CYB5R2-catalyzed iron reduction   in breast cancer cells”, Drug Resistance Updates, 2023,   doi:10.1016/j.drup.2023.100974. 22.841
25 组织

(the brains of 3 × Tg-AD mice)

Xinlu Li, Jianfeng Chen, Wennuo Feng ,Chao Wang, Minyu Chen, Yifan Li, Jinghong Chen, Xinwei Liu, Qiong Liu, Jing Tian,“Berberine ameliorates iron levels and ferroptosis in the brain of 3 × Tg-AD mice”2023, PHYTOMEDICINE, doi:10.1016/j.phymed.2023.154962

 

7.9
26 组织

(Testicular tissues)

Lipeng Li , Zijie Pei , Ruiting Wu , Yaling Zhang , Yaxian Pang , Huaifang Hu , Wentao Hu , Zihan Geng , Tengfei Feng , Yujie Niu , Guimin Hao , Rong Zhang“FDX1 regulates leydig cell ferroptosis mediates PM2.5-induced testicular dysfunction of mice”,Ecotoxicology and Environmental Safety,2023,doi.org/10.1016/j.ecoenv.2023.115309 6.8
27 细胞(macrophage) Wenlin Yuan , Yuting Yang , Yingming Wei , Xufei Yu , Jiaqi Bao , Jiahui Zhong , Zhongxiu Wang , Lili Chen“Macrophage ferroptosis promotes MMP2/9 overexpression induced by hemin in hemorrhagic plaque”,Thromb Haemost2023,doi.org/10.1016/j.intimp.2023.110916 6.7
28 细胞(HT-22) Zixuan Yuan,ORCID,Xiaoming Zhou ,Yan Zou ,Bingtao Zhang ,Yao Jian ,Qi Wu ,Shujuan Chen and Xin Zhang“Hypoxia Aggravates Neuron Ferroptosis in Early Brain Injury Following Subarachnoid Hemorrhage via NCOA4-Meditated Ferritinophagy”,Antioxidants2023,doi.org/10.3390/antiox12122097 7.0

同仁化学DPPP试剂货号:D350 二苯基-1-芘基膦 DPPP| 日本DOJINDO

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DPPP试剂货号:D350
二苯基-1-芘基膦
DPPP
商品信息
储存条件:室温,避光
运输条件:室温
分子式:

C28H19P

分子量:

386.42

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10mg

 期货

 
氧化应激检测

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ROS检测

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二价铁离子检测探针—FerroOrange
细胞亚铁离子检测荧光探针

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Liperfluo-细胞脂质过氧化物检测
细胞脂质过氧化物检测试剂盒

同仁化学DNA损伤定量试剂盒 DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting货号:DK02| 日本DOJINDO

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DNA损伤定量试剂盒——DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting货号:DK02
DNA损伤定量试剂盒
DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting
商品信息
储存条件:0-5度保存
运输条件:室温

特点:

•可以检测基因组DNA样品的碱基位点数量

•采用方便的比色法检测

•检测范围:40个碱基位点/ 1×105 碱基对DNA

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产品文献
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DNA损伤思维导图

选择规格:
20 samples

现货

 
DNA损伤检测方案

DNA损伤定量试剂盒 DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting货号:DK02

DNA损伤定量试剂盒 DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting货号:DK02

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试剂盒内含
产品概述
原理
技术信息
操作方法
常见问题Q&A
参考文献

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DNA损伤丨从实验思路到检测指标  PDF下

指标 关联指标干货参(点击查看) 检测指标(点击查看)
DNA损伤检测
γ-H2AX DNA损伤检测试剂盒- γH2AX(绿、红、深红)
AP位点 DNA损伤检测试剂盒(AP位点法)
核小体 Nucleolus Bright (绿、红)
细胞周期 Cell Cycle Assay Kit – PI/RNase Staining
DNA损伤关联指标 氧化损伤 DMPO
BMPO
TEMP
SOD Assay Kit
DPPH Antioxidant Assay Kit
凋亡 Annexin V, FITC Apoptosis Detection Kit/PI
Annexin V, 633 Apoptosis Detection Kit/PI
Cell Cycle Assay Solution Deep Red/Blue
JC-1 MitoMP Detection Kit
Caspase-3 Assay Kit
铁死亡 Lipid Peroxidation Probe -BDP 581/591 C11
Liperfluo
GSSG/GSH Quantification Kit II
Iron Assay Kit
Mito-FerroGreen
衰老 Cellular Senescence Detection Kit – SPiDER-βGal
Cellular Senescence Plate Assay Kit – SPiDER-βGal
SPiDER-βGal
自噬 Mitophagy Detection Kit
DALGreen – Autophagy Detection
DAPGreen – Autophagy Detection
DAPRed – Autophagy Detection

*点击即可跳转至详情页

试剂盒内含

DNA损伤定量试剂盒 DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting货号:DK02

产品概述

DNA的氧化损伤是由于DNA与活性氧 (ROS) 尤其是羟自由基之间的相互作用造成的。由超氧阴离子和过氧化氢通过Fenton反应产生的羟自由基在DNA中产生多重修饰。羟自由基对脱氧核糖基团的氧化攻击将导致DNA释放自由碱基,产生链断裂、各种糖修饰以及单个无碱基位点 (AP位点) 。事实上AP位点是由ROS产生的损伤的主要类型。醛反应性探针 (ARP;N’-氨氧基甲基羰基肼-D-生物素) 特异性地与AP位点的开环上的醛基反应。通过这个反应可以检测到导致醛基形成的DNA修饰。用过量ARP试剂反应后,DNA上的所有AP位点均用生物素做了标签。可以用亲和素-生物素法,用连接到亲和素上的过氧化物酶或碱性磷酸酶做比色法检测来对这些带有生物素标签的AP位点进行计数。DNA损伤定量试剂盒包含用于检测每1×105个碱基对中1-40个AP位点的所有必需溶液。

*本试剂盒仅适用于基因组DNA中无碱基位点 (Abasic Sites)的检测。

原理

DNA损伤在除了复制过程中的DNA聚合酶错误外,保留有机体遗传信息的DNA在体内还受到环境辐射,紫外线,化学物质(如烷基化剂)和代谢物(如活性氧)的破坏,接收。如果这些错误和伤害得不到适当的修复,它们将导致突变,从而导致癌症和衰老。

DNA损伤部位有修复结构,其中之一就是去除碱修复。此时,将出现一个称为AP位点的基础位点(apurinic/apyrimidinic位点)。换句话说,AP位点的检测是可以测量DNA损伤位点的有效方法。

ARP(N’-氨基氧基甲基羰基肼基-D-生物素)是已知可以与该AP位点进行生物素特异结合的试剂。-Nucleostain-DNA Damage Quantification Kit-AP Site Counting-是一种可以通过使用ARP将DNA生物素化并固定在96孔微板上,可以简单地定量样品DNA中的AP 位点的试剂盒。

该试剂盒包含具有与AP位点的标准DNA,并且可以使用HRP标记的链霉亲和素通过生物素检测方法对AP位点进行定量。

使用方法请看实验例。

*冷藏保存中或恢复到室温时,有时会在管状管中看到水滴状的液粒。

这是由干燥防止剂液粒化而成的,产品的性能没有问题。

*本套装中含有加入了溶液的试剂组件。

溶液可能会粘附在试管或瓶盖的内壁上,因此在打开前应先摇匀

DNA损伤定量试剂盒 DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting货号:DK02

技术信息

除试剂盒以外必要的物品

・10μl,200μl,1 ml微量移液器(可变型)

・200μl多通道移液器(可变型)

・培养箱(37℃)

・酶标仪

・0.5 ml,1.5 ml离心管

・离心机

・DNA纯化试剂盒

・纸巾

本公司出售各种DNA纯化试剂盒。

Get pureDNA Kit-Cell, Tissue(Code:GK03)

关于DNA提纯的问题,请咨询同仁化学。

操作方法

DNA损伤定量试剂盒 DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting货号:DK02

常见问题Q&A

Q1: 是否可以创建40个以上AP位点/ 100,000个标准溶液?
A1:该试剂盒的标准DNA是0-40个AP位点/ 100,000ARP-DNA。但我们已经准备了多达50个AP站点/ 100,000个的ARP-DNA(暂时没有做到更多)。从理论上讲,可以制备更多的ARP-DNA,但这么做的话我们无法保证和保持校准线的线性程度。

如果要检测更高浓度的碱基损伤,但样品DNA没有相同浓度的损伤,您可以用0AP 位点-DNA(测定范围内稀释)后再进行测定,之后再换算实际AP数比较好。

Q2: AP位点是DNA的一个基本损伤位点,被用作氧化应激的指标,除了AP位点之外,还有其他氧化应激指标吗?
A2:我们创建了一个文档,概述了氧化应激的各种标记物。

从实验者的角度,描述了每种氧化应激标记的特性和检测样品的处理方法,因此请参考以下文档(日文)。

https://www.dojindo.co.jp/technical/beginner/stressmarker.pdf

Q3:建议在DNA的纯度为吸光度为1.8以上进行检测。是否能够测量至1.5?
A3:因为吸光度在1.5内没有做过类似实验,所以暂时无法确认。

我们用吸光度为1.6~1.7的DNA进行检测,但不能看到很大的变化。

所以推荐1.8或更高。

纯度低的话可能意味着蛋白质污染。低纯度蛋白质具有阻断作用,可能使DNA粘附在板上。

请使用尽可能高的纯度,因为它可能会阻止这种情况

Q4:是否可以存储提取的DNA而无需将其转换为ARP?
A4:存储是不可取的,因为这会增加AP位点的数量。 (冷藏和冷冻)

如果要在不进行ARP化的情况下进行存储,请使用乙醇沉淀,制粒并冷冻保存。AP站点确实是容易发生剪切的部位。

但是,如果以catallist free的状态保存的话,即使在3’侧有断开也不会影响ARP的检测。

相反,如果提取的DNA储存在非冷冻状态的环境中,

由自然产生的去除碱形成的AP位点是一个更重要的问题。

所以在这种情况下,如果你的样品在正确存储标准DNA是可以进行修饰的。

ARP修饰后AP位点稳定,建议提取后迅速进行APR处理。

Q5:这个试剂盒可以检测什么?
A5:您可以定量DNA中的AP位点。AP位点是[apurinic / appyrimidinic site]的缩写,作用于受损的DNA。一般在去除碱修复过程中会出现。DNA的损伤除了复制时DNA polymerase的错误之外,还受到紫外线,化学物质(如烷基化剂)和代谢物(如活性氧)的影响。

通过测定AP位点可以检测DNA损伤。

Q6:这个试剂盒能测定的样品数量是多少?
A6:20samples为20个样品。

每个Filtration Tube都有20个samples。

因为一个样品一般使用一个Filtration Tube,所以这个Tube的数量即是可测定的样品数。

20samples的测定用的板也是1块板。

Q7:96孔板和过滤管中有溶液剩余,请告诉我废弃的方法
A7:多余的溶液请在确认以下成分信息后,按照政策规定的废弃规则废弃。

<配套试剂成分>

・ARP-DNA standard solution(稀释水后废弃,不含有害成分)

・ARP solution(稀释后作废,不含有害成分)

・DNA binding solution(稀释水后废弃,不含有害成分)

・Washing buffer(稀释水后废弃,不含有害成分)

・HRP-Striptavidin(稀释水后废弃,不含有害成分)

・TE buffer(可溶于水,EDA・2NA 0.1%以下)

・Substrate solution(稀释水后废弃,不含有害成分)

参考文献

1) A. Sancar and G. B. Sancar, “DNA Repair Enzymes”, Annu. Rev. Biochem., 1988, 57, 29.

2) T. Lindahl and B. Nyberg, “Rate of Depurination of Native Deoxyribonucleic Acid”, Biochemistry, 1972, 11, 3610.

3) M. Liuzzi and M. Talpaert-Borle, “A New Approach to the Study of the Base-excision Repair Pathway Using Methoxyamine”, J. Biol. Chem., 1985, 260, 5252.

4) M. Weinfeld, M. Liuzzi and M. C. Paterson, “Response of Phage T4 Polynucleotide Kinase Toward Dinucleotides Containing Apurinic Sites: Design of a 32P-postlabeling Assay for Apurinic Sites in DNA”, Biochemistry, 1990, 29, 1737.

5) B. X. Chen, K. Kubo, H. Ide, B. F. Erlanger, S. S. Wallace and Y. W. Kow, “Properties of a Monoclonal Antibody for the Detection of Abasic Sites, a Common DNA Lesion”, Mutat. Res., 1992, 273, 253.

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7) J. W. Pippin, R. Durvasula, A. Petermann, K. Hiromura, W. G. Couser and S. J. Shankland, “DNA Damage is a Novel Response to Sublytic Complement C5b-9 Induced Injury in Podocytes”, J. Clin. Invest., 2003, 111, 877.

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9) M. Endres, M. Ahmadi, I. Kruman, D. Biniszkiewicz, A. Meisel and K. Gertz, “Folate Deficiency Increases Postischemic Brain Injury”, Stroke, 2005, 36, 321.

10) J.-M. Li, M. Mogi, K. Tsukuda, H. Tomochika, J. Iwanami, L.-J. Min, C. Nahmias, M. Iwai and M. Horiuchi, “Angiotensin II-Induced Neural Differentiation via Angiotensin II Type 2 (AT2) Receptor-MMS2 Cascade Involving Interaction between AT2 Receptor-Interacting Protein and Src Homology 2 Domain-Containing Protein-Tyrosine Phosphatase 1”, Mol. Endocrinolo., 2007, 21(2):499.

11) D. R. McNeill and D. M. Wilson III, “A Dominant-Negative Form of the Major Human Abasic Endonuclease Enhances Cellular Sensitivity to Laboratory and Clinical DNA-Damaging Agents”, Mol. Cancer Res., 2007, 5(1), 61.

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