在生产蛋白和纯化过程中,如果能实现表达蛋白的可视化,不仅仅能大大提高蛋白表达条件的优化效率,而且在后期的纯化分离中也是优势明显。另外,原核细菌的包涵体表达也是一件很头痛的事情,在后继的蛋白功能鉴定过程中,获得可溶性表达的蛋白更受人青睐。Delphi Genetics最新的Cherry标签系统便是基于此需求,而投放市场的新型表达表达系统。使用该Cherry标签能够在不需要其他任何试剂的情况下使表达的蛋白可视化,并且能大大提高目的蛋白的溶解性。
插入到Staby™系统中的红色Cherry标签同时保证了Staby™系统的高水平表达和菌株的稳定性,以及Cherry标签的可视化和高溶解特点。当使用Cherry标签系统时,在目的基因的末端加入了一段编码红色多肽的序列(即细胞色素的血红素结合域),这样表达出的融合蛋白会带有Cherry的红色标签,从而为估测蛋白表达量以及溶解性提供一种可视化的帮助。
使用Cherry标签可视化蛋白表达系统时,当菌体表达的融合蛋白是可溶性,蛋白也显示为红色。这样在整个蛋白纯化过程中,显示为红色的蛋白也能成为一种可视化的标记,表达出的融合蛋白的浓度可以通过光谱分析很容易被测定出。另外,由于Cherry标签的高溶解性也能提高目的蛋白的溶解性。纯化后,标签可通过肠激酶被剪切掉。
除此之外,贴附在柱子上的蛋白很容易被观察到,并且也能够看出剩余目的蛋白何时停止流出。在洗脱的过程中,无需通过搜集大量蛋白来分析和定位目标蛋白,只需要肉眼目测即可。使用该系统,能够使您在任何阶段定量蛋白浓度,在413nm处光谱吸收测定即可精确的定量目标蛋白的浓度。
通过在StabyExpress™ T7载体以及Staby™ CodonT7载体中都插入了Cherry标签,组成了Cherry Express和Cherry Codon Kit,这两种表达系统包含了许多优点:T7启动子表达、质粒的稳定性、稀有tRNA的充足供应、蛋白的可视化。Delphi Genetics也根据您的需要,为您设计出N末端的Cherry标签表达系统以及位于目的蛋白C末端的Cherry标签表达系统。
Cherry标签可视化蛋白表达系统内包含了pSCherry1 、pSCherry2载体DNA;电转或钙转感受态细菌(克隆菌株CYS21、表达菌株SE1)、培养基、定序引物、产品说明书。感受态细菌可以单独购买:
产品名称 | 货号 |
Cherry Express (electrocompetent 5RXN) N-terminal Cherry | GE-CET7-05 |
Cherry Express (chemically-competent 5RXN) N-terminal Cherry | GE-CET7-07 |
Cherry Express (electrocompetent 10RXN) N-terminal Cherry | GE-CET7-10 |
Cherry Express (chemically-competent 10RXN) N-terminal Cherry | GE-CET7-12 |
Cherry Express (electrocompetent 5RXN) C-terminal Cherry | GE-CET7-06 |
Cherry Express (chemically-competent 5RXN) C-terminal Cherry | GE-CET7-08 |
Cherry Express (electrocompetent 10RXN) C-terminal Cherry | GE-CET7-11 |
Cherry Express (chemically-competent 10RXN) N-terminal Cherry | GE-CET7-13 |
更详细信息请点击查看:https://www.delphigenetics.com/product-details-67.html |
Cherry标签可视化蛋白表达系统(Cherry Tag System)的特点:
- 无需无需其他特殊设备或试剂,即可实现目的蛋白的直接可视化;
- 能实现蛋白表达条件的快速筛选和优化以及可溶性的增加;
- 目的蛋白的定量非常简单和方便;
- 在无抗生素的条件下使用Staby™系统能够得到高效的蛋白产量
上海金畔生物科技有限公司公司作为Delphi包括澳门、香港在内的中国地区独家一级代理商。将其优秀的表达系统推荐给国内的科研以及生物制药生产用户。如果您对Delphi Genetics的Staby® 技术以及其独特的StabyCloning™、StabyExpress™、Staby™Codon、Cherry™ Express等系统感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询这一新颖的Staby® 基因克隆及蛋白表达实验解决方案,或索取最新的Delphi Genetics产品资料。