Pronase E 链霉蛋白酶E

Pronase E 链霉蛋白酶E

货号: MF0206-250MG 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学

描述

Pronase E 链霉蛋白酶E

关键词:

Protease from Streptomyces griseus,灰色链霉菌,蛋白酶混合物,混合蛋白酶,Actinase E,Pronase E,EC No: 3.4.24.31,CAS NO:9036-06-0

产品描述

链霉蛋白酶E(Pronase E),来源于灰色链霉菌的一组蛋白酶(Protease from Streptomyces griseus),至少包含细胞外丝氨酸蛋白酶在内的三种蛋白酶活性。通常情况,丝氨酸蛋白酶具广谱的底物特异性,通过分子上一个天冬氨酸,一个组氨酸,和一个丝氨酸组成的活性位点来调控。本酶选择性偏好水解谷氨酸或天冬氨酸羧基形成的肽键,常见的丝氨酸活性位点抑制剂可抑制其活性,如PJPF和DFP。链霉蛋白酶E(Pronase E),还至少包含三种酪蛋白水解活性和一种氨基肽酶活性,这三种酪蛋白水解酶分别命名为灰色链霉菌来源蛋白酶A(Streptomyces griseus Protease A),蛋白酶B(Streptomyces griseus Protease B)和胰酶(Streptomyces griseus Trypsin)。

因此,本制品可用于蛋白的大量或者完全降解,还可用来研究蛋白酶抑制剂,以及热失活动力学。本制品常用于核酸分离步骤,在添加0.2% SDS和10 mM EDTA的体系内孵育0.5-3h即可达到目的。因其比已知的碱性蛋白酶在更高pH环境下,甚至0.2N NaOH溶液中,活性更强,因此非常适合不溶性蛋白的酶解实验,以及蛋白结构分析。另,还可与胶原酶和胰酶联合使用,以消化组织。也可作用纯化糖蛋白生产糖肽。

产品特性

1)稳定性:pH 5.0-9.0范围内高度稳定,pH 8.8酶活性最强;

2)兼容性:与许多DNA/RNA分离缓冲体系兼容;

3)特异性:广谱底物特异性;由多种非特异性内/外切蛋白酶组成的混合物,可降解蛋白到单个氨基酸。

4)CAS NO:9036-06-0

5)质量控制:约含25%醋酸钙;

6)酶活性:≥3.5 units/mg solid

7)溶解性:在37℃,pH7.5的条件下,溶解于含0.05M醋酸钙的0.01M醋酸钠溶液,溶解体系添加钙离子可防止自发水解。含0.01-0.1M钙离子的稀释酶溶液,中性pH条件于2-8℃能稳定保存24h以上。

8)单位定义:在37℃,pH7.5的条件下,每分钟水解酪蛋白产生的颜色变化等量于1µM酪氨酸(181µg)时需要的酶量,定义为1个活性单位。(颜色变化通过福林-酚试剂检测)

9)失活方法:80 °C以上加热15-20min使其完全失活。

保存与运输方法

保存:冻干粉4℃稳定保存6个月。-20℃干燥冻存,稳定性极其高,至少5年。

运输:冰袋运输。

使用方法

【注意】:本品应用非常广泛,具体的使用方法和工作浓度请根据实验经验或参考文献来调整。

1、储存液制备:溶解于去离子水,配制成5-20mg/ml的储存液,若用于DNA或RNA分离步骤,建议将溶液56℃加热处理15min,之后37℃孵育1h,此步骤能促使酶发生自消化,以去除DNase和RNase污染。之后将储存液分成单次用量,-20℃冻存,通常情况1年稳定。

2、DNA分离:直接加入DNA制备体系(含有0.5-1% SDS以打破DNA-蛋白相互作用),典型工作浓度范围250-500µg蛋白/ml,于37℃孵育1-4h。【注意:建议工作浓度范围在250-2000µg/ml,依照具体情况而定】。

3、蛋白水解:溶解约0.2µM蛋白到0.2ml 50mM碳酸氢铵缓冲液,pH 8.0(或磷酸盐缓冲液,pH 7.0),之后按照1%(w/w)加入Pronase E,于37℃孵育24h。根据情况,有可能需要添加4%(w/w)氨肽酶M,并于37℃再孵育18h。

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Pronase E 链霉蛋白酶E

MF0206-1000MG 1g -20ºC

2720

Pronase E 链霉蛋白酶E MF0206-250MG 250mg -20ºC

780

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脱氧核糖核酸酶I,来源于牛胰腺

MF0401-15KU 15KU -20ºC /
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MF0203-100MG 100mg -20ºC /
MF0203-500MG 500mg -20ºC /
MF0203-1000MG 1g -20ºC /
Proteinase K, Molecular Biology Grade

蛋白酶K,分子生物学级

MF0201-100MG 100mg +4ºC /
MF0201-500MG 500mg +4ºC /
MF0201-1000MG 1g +4ºC /

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

 

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

9036-06-0

规格:

250mg

货期:

咨询客服

Proteinase K, Molecular Biology Grade 蛋白酶K

Proteinase K, Molecular Biology Grade 蛋白酶K

另提供溶液形式 MF0220

货号: MF0201-1000MG 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学

描述

Proteinase K, Molecular Biology Grade 蛋白酶K

金畔生物(JP)重组蛋白酶K的产品优势一
◇  重组蛋白酶K是突变改造的天然蛋白酶K,具有改善的比活力、更高产量和更宽广的pH/温度优化活性;

◇  大规模重组表达产物能够满足批次一致性、优越纯度和低成本的优点;

◇  重组蛋白酶K不含DNA的天然属性使其非常适用于DNA/RNA模板制备;

◇  重组蛋白酶K广泛适用于分子生物学内常见的蛋白水解和化学-酶法多肽合成,以及分子诊断和生物医药用途;

◇  重组蛋白酶K广谱的温度特征助其用于蛋白去折叠,能够轻易的打断蛋白结构;

金畔生物(JP)重组蛋白酶K的产品优势二
□  高纯度≥95%,经脱色和色谱纯化去除RNA和DNA,检测不到其它杂酶活性;

□  高比活≥34U/mg protein;

□  严格质控,每个批次都做残留杂酶检测,无DNase/RNase残留;

□  冻干粉和储存液(20mg/ml)两种形式,任君选择;

□  具备大规模生产能力,能够批量供货,可达公斤级;

搜索关键词

Proteinase K;蛋白酶K(分子生物学级);Endopeptidase K内肽酶K;DNase I脱氧核糖核酸酶I;RNase A核糖核酸酶A;CAS NO:39450-01-6;

产品描述

蛋白酶K,英文名Proteinase K,一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶,pH 4-12的宽广范围内均有活性,SDS、尿素或EDTA存在条件下也很稳定。相对分子量约29.3kDa,能够切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键,用于生物样品内蛋白质的降解。

蛋白酶K基因来自林伯氏白色念球菌(Tritirachium album limber),通过酵母重组表达所得,达分子生物学级别。蛋白酶K应用广泛,主要用于去除DNA和RNA制备中的核酸酶,也可用于非蛋白组分制备体系内降解蛋白质杂质,比如DNA疫苗制备、肝素制备等。还可用于制备脉冲电泳的染色体DNA和蛋白质印迹实验。本品常用工作浓度为50-100µg/ml,根据缓冲体系是否含SDS、尿素、pH、温度等因素确定具体的工作浓度。

产品特性

1)   CAS NO:39450-01-6

2)   E.C. NO:3.4.21.64

3)   来源:基因来源林伯氏白色念球菌,酵母重组表达

4)   纯度:≥95%,经脱色和色谱纯化去除RNA和DNA,检测不到其它杂酶活性。

5)   pH范围:4.5-12.0,通常使用pH范围是7.5-9.0

6)   温度特征:在70℃活性最大,建议使用温度范围37-70℃

7)   比活力:≥34U/mg protein

8)   单位定义:在37℃,pH7.5的条件下,每分钟水解酪蛋白生成1µM酪氨酸时需要的酶量,定义为1个活性单位。

9)   激活剂:1-5mM Ca2+【为了活化蛋白酶K活性,加入1-5mM Ca2+。用激活剂优化实验条件能明显增加酶活性。当加入EDTA去除体系内Ca2+会降低酶活性。】

10)抑制剂:PJPF或DFP(酶可用DFP或PJPF失活,PJPF终浓度5mM。)

11)质量控制:a)以λ DNA为底物,37ºC消化4小时以上,未检测到脱氧核糖核酸酶活性。b)以λ DNA为底物,25ºC消化16小时以上,未检测到核糖核酸酶活性。

12)消光系数:E1%= 14.2 (280 nm, 10 mM NaCl and 5 mM CaCl2, pH 8.0)

13)稀释缓冲液:推荐 20 mM Tris-HCl (pH 7.4),1mM CaCl2

14)储存缓冲液:20 mM Tris-HCl (pH 7.4),1mM CaCl2,50% Glycerol

保存与运输方法

保存:冻干粉+4℃密封干燥保存,一年有效;-20℃密封干燥保存,三年有效。

运输:冻干粉室温运输。

注意事项

1)   本蛋白酶K是现有蛋白酶中活性最高的品种,pH活性范围4-12,温度范围为0-75℃,甚至在SDS、尿素或EDTA存在的情况下依旧保持活性。

2)   蛋白酶K粉末并非无菌,需要长期保存后使用或要求实验必须无菌,请务必过滤除菌处理。

3)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

配制方法

1)   先将蛋白酶K粉末溶于稀释缓冲液【20 mM Tris-HCl (pH 7.4),1mM CaCl2】或其他缓冲液配制成40-80mg/ml原液,用0.22 µm低蛋白吸附的PES或PVDF滤膜过滤除菌。

2)   加入等体积高温高压灭菌的分子生物学级甘油,混匀。

3)   根据一定用量分装,置于-20℃冻存。一年有效。

订购信息【现货供应,产品质量可媲美Merck 1.24568.0100(124568)】

产品名称 产品编号 规格 储存              价格(元)    

Proteinase K, Molecular Biology Grade    

蛋白酶K(分子生物学级别)

MF0201-100MG  100mg +4ºC 280
MF0201-500MG 500mg +4ºC 1200
MF0201-1000MG 1g +4ºC 2300

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脱氧核糖核酸酶I,来源于牛胰腺

15KU
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脱氧核糖核酸酶I,来源于牛胰腺

10MG
MP1509-25KU Benzonase Nuclease 全能核酸酶 25KU

 

 

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

39450-01-6

规格:

1g

货期:

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Proteinase K, Molecular Biology Grade 蛋白酶K

Proteinase K, Molecular Biology Grade 蛋白酶K

另提供溶液形式 MF0220

货号: MF0201-500MG 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学

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Proteinase K, Molecular Biology Grade 蛋白酶K

金畔生物(JP)重组蛋白酶K的产品优势一
◇  重组蛋白酶K是突变改造的天然蛋白酶K,具有改善的比活力、更高产量和更宽广的pH/温度优化活性;

◇  大规模重组表达产物能够满足批次一致性、优越纯度和低成本的优点;

◇  重组蛋白酶K不含DNA的天然属性使其非常适用于DNA/RNA模板制备;

◇  重组蛋白酶K广泛适用于分子生物学内常见的蛋白水解和化学-酶法多肽合成,以及分子诊断和生物医药用途;

◇  重组蛋白酶K广谱的温度特征助其用于蛋白去折叠,能够轻易的打断蛋白结构;

金畔生物(JP)重组蛋白酶K的产品优势二
□  高纯度≥95%,经脱色和色谱纯化去除RNA和DNA,检测不到其它杂酶活性;

□  高比活≥34U/mg protein;

□  严格质控,每个批次都做残留杂酶检测,无DNase/RNase残留;

□  冻干粉和储存液(20mg/ml)两种形式,任君选择;

□  具备大规模生产能力,能够批量供货,可达公斤级;

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Proteinase K;蛋白酶K(分子生物学级);Endopeptidase K内肽酶K;DNase I脱氧核糖核酸酶I;RNase A核糖核酸酶A;CAS NO:39450-01-6;

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蛋白酶K基因来自林伯氏白色念球菌(Tritirachium album limber),通过酵母重组表达所得,达分子生物学级别。蛋白酶K应用广泛,主要用于去除DNA和RNA制备中的核酸酶,也可用于非蛋白组分制备体系内降解蛋白质杂质,比如DNA疫苗制备、肝素制备等。还可用于制备脉冲电泳的染色体DNA和蛋白质印迹实验。本品常用工作浓度为50-100µg/ml,根据缓冲体系是否含SDS、尿素、pH、温度等因素确定具体的工作浓度。

产品特性

1)   CAS NO:39450-01-6

2)   E.C. NO:3.4.21.64

3)   来源:基因来源林伯氏白色念球菌,酵母重组表达

4)   纯度:≥95%,经脱色和色谱纯化去除RNA和DNA,检测不到其它杂酶活性。

5)   pH范围:4.5-12.0,通常使用pH范围是7.5-9.0

6)   温度特征:在70℃活性最大,建议使用温度范围37-70℃

7)   比活力:≥34U/mg protein

8)   单位定义:在37℃,pH7.5的条件下,每分钟水解酪蛋白生成1µM酪氨酸时需要的酶量,定义为1个活性单位。

9)   激活剂:1-5mM Ca2+【为了活化蛋白酶K活性,加入1-5mM Ca2+。用激活剂优化实验条件能明显增加酶活性。当加入EDTA去除体系内Ca2+会降低酶活性。】

10)抑制剂:PJPF或DFP(酶可用DFP或PJPF失活,PJPF终浓度5mM。)

11)质量控制:a)以λ DNA为底物,37ºC消化4小时以上,未检测到脱氧核糖核酸酶活性。b)以λ DNA为底物,25ºC消化16小时以上,未检测到核糖核酸酶活性。

12)消光系数:E1%= 14.2 (280 nm, 10 mM NaCl and 5 mM CaCl2, pH 8.0)

13)稀释缓冲液:推荐 20 mM Tris-HCl (pH 7.4),1mM CaCl2

14)储存缓冲液:20 mM Tris-HCl (pH 7.4),1mM CaCl2,50% Glycerol

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保存:冻干粉+4℃密封干燥保存,一年有效;-20℃密封干燥保存,三年有效。

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注意事项

1)   本蛋白酶K是现有蛋白酶中活性最高的品种,pH活性范围4-12,温度范围为0-75℃,甚至在SDS、尿素或EDTA存在的情况下依旧保持活性。

2)   蛋白酶K粉末并非无菌,需要长期保存后使用或要求实验必须无菌,请务必过滤除菌处理。

3)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

配制方法

1)   先将蛋白酶K粉末溶于稀释缓冲液【20 mM Tris-HCl (pH 7.4),1mM CaCl2】或其他缓冲液配制成40-80mg/ml原液,用0.22 µm低蛋白吸附的PES或PVDF滤膜过滤除菌。

2)   加入等体积高温高压灭菌的分子生物学级甘油,混匀。

3)   根据一定用量分装,置于-20℃冻存。一年有效。

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蛋白酶K(分子生物学级别)

MF0201-100MG  100mg +4ºC 280
MF0201-500MG 500mg +4ºC 1200
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MF0401-15KU Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas,≥2,000 units/mg protein     

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10MG
MP1509-25KU Benzonase Nuclease 全能核酸酶 25KU

 

 

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Jinpan

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39450-01-6

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500mg

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Proteinase K, Molecular Biology Grade 蛋白酶K

Proteinase K, Molecular Biology Grade 蛋白酶K

货号: MF0201-100MG 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学

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Proteinase K, Molecular Biology Grade 蛋白酶K

金畔生物(JP)重组蛋白酶K的产品优势一
◇  重组蛋白酶K是突变改造的天然蛋白酶K,具有改善的比活力、更高产量和更宽广的pH/温度优化活性;

◇  大规模重组表达产物能够满足批次一致性、优越纯度和低成本的优点;

◇  重组蛋白酶K不含DNA的天然属性使其非常适用于DNA/RNA模板制备;

◇  重组蛋白酶K广泛适用于分子生物学内常见的蛋白水解和化学-酶法多肽合成,以及分子诊断和生物医药用途;

◇  重组蛋白酶K广谱的温度特征助其用于蛋白去折叠,能够轻易的打断蛋白结构;

金畔生物(JP)重组蛋白酶K的产品优势二
□  高纯度≥95%,经脱色和色谱纯化去除RNA和DNA,检测不到其它杂酶活性;

□  高比活≥34U/mg protein;

□  严格质控,每个批次都做残留杂酶检测,无DNase/RNase残留;

□  冻干粉和储存液(20mg/ml)两种形式,任君选择;

□  具备大规模生产能力,能够批量供货,可达公斤级;

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Proteinase K;蛋白酶K(分子生物学级);Endopeptidase K内肽酶K;DNase I脱氧核糖核酸酶I;RNase A核糖核酸酶A;CAS NO:39450-01-6;

产品描述

蛋白酶K,英文名Proteinase K,一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶,pH 4-12的宽广范围内均有活性,SDS、尿素或EDTA存在条件下也很稳定。相对分子量约29.3kDa,能够切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键,用于生物样品内蛋白质的降解。

蛋白酶K基因来自林伯氏白色念球菌(Tritirachium album limber),通过酵母重组表达所得,达分子生物学级别。蛋白酶K应用广泛,主要用于去除DNA和RNA制备中的核酸酶,也可用于非蛋白组分制备体系内降解蛋白质杂质,比如DNA疫苗制备、肝素制备等。还可用于制备脉冲电泳的染色体DNA和蛋白质印迹实验。本品常用工作浓度为50-100µg/ml,根据缓冲体系是否含SDS、尿素、pH、温度等因素确定具体的工作浓度。

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1)   CAS NO:39450-01-6

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3)   来源:基因来源林伯氏白色念球菌,酵母重组表达

4)   纯度:≥95%,经脱色和色谱纯化去除RNA和DNA,检测不到其它杂酶活性。

5)   pH范围:4.5-12.0,通常使用pH范围是7.5-9.0

6)   温度特征:在70℃活性最大,建议使用温度范围37-70℃

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8)   单位定义:在37℃,pH7.5的条件下,每分钟水解酪蛋白生成1µM酪氨酸时需要的酶量,定义为1个活性单位。

9)   激活剂:1-5mM Ca2+【为了活化蛋白酶K活性,加入1-5mM Ca2+。用激活剂优化实验条件能明显增加酶活性。当加入EDTA去除体系内Ca2+会降低酶活性。】

10)抑制剂:PJPF或DFP(酶可用DFP或PJPF失活,PJPF终浓度5mM。)

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12)消光系数:E1%= 14.2 (280 nm, 10 mM NaCl and 5 mM CaCl2, pH 8.0)

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注意事项

1)   本蛋白酶K是现有蛋白酶中活性最高的品种,pH活性范围4-12,温度范围为0-75℃,甚至在SDS、尿素或EDTA存在的情况下依旧保持活性。

2)   蛋白酶K粉末并非无菌,需要长期保存后使用或要求实验必须无菌,请务必过滤除菌处理。

3)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

配制方法

1)   先将蛋白酶K粉末溶于稀释缓冲液【20 mM Tris-HCl (pH 7.4),1mM CaCl2】或其他缓冲液配制成40-80mg/ml原液,用0.22 µm低蛋白吸附的PES或PVDF滤膜过滤除菌。

2)   加入等体积高温高压灭菌的分子生物学级甘油,混匀。

3)   根据一定用量分装,置于-20℃冻存。一年有效。

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蛋白酶K(分子生物学级别)

MF0201-100MG  100mg +4ºC 280
MF0201-500MG 500mg +4ºC 1200
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10MG
MP1509-25KU Benzonase Nuclease 全能核酸酶 25KU

 

 

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Jinpan

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39450-01-6

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100mg

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蛋白酶抑制剂混合物II(通用/广谱)——Protease Inhibitor Cocktail 2 MultiPurpose

从细胞或组织中提取纯化蛋白时需要破碎细胞,此时蛋白酶就会被释放出来或被激活,降解蛋白质,最终影响试验结果。为了避免这些情况的出现,建议在样品制备时尽可能在低温下进行。此外,许多蛋白酶在pH9以上就失活了,因此Tris碱,碳酸钠或碱性载体两性电蛋白酶抑制剂混合物II(通用/广谱)——Protease Inhibitor Cocktail 2 MultiPurpose解质往往能抑制蛋白水解。但是有些蛋白酶在上述条件下仍然保持着活性,此时应当使用蛋白酶抑制剂。因此,选择有效的蛋白酶抑制剂对于蛋白纯化路线设计来讲显得尤为重要。

蛋白酶抑制剂种类繁多,通常使用许多化学物质作为蛋白酶抑制剂,如PMSF 和Leupeptin。而且由于一种蛋白酶抑制剂只对某一类蛋白酶起作用,因此通常建议复合使用蛋白酶抑制剂,如广谱蛋白酶抑制剂“鸡尾酒”,即Protease Inhibitor Cocktail。德国AppliChem提供一系列的蛋白酶抑制剂Protease Inhibitor Cocktail产品,适用于细胞裂解,蛋白提取和多种生化反应。根据不同的样本来源和实验要求,又分为5种Cocktail套装供您选择。这包括了专门用于细胞蛋白提取的Cocktail 1,多用途的蛋白提取Cocktail 2,专用于细菌蛋白提取的Cocktail 3,适用于组织、细胞核细菌蛋白提取的Cocktail 4,通用的细胞组织蛋白提取的Cocktail 5以及专用于细胞中His标签蛋白的提取纯化的Cocktail 6。

上海金畔生物科技有限公司提供的原装进口Protease Inhibitor Cocktail 2 MultiPurpose(蛋白酶抑制剂混合物2)是一种通用/广谱的蛋白酶抑制剂混合物,适用于各种样本的裂解液的制备,如细胞裂解液、组织裂解液等。由AEBSF、Aprotinin、E-64、EDTA及Leupeptin等组成,可以广泛抑制各种蛋白酶,如丝氨酸蛋白酶、金属蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、类胰蛋白酶以及酯酶等。可以广泛抑制各种蛋白酶,如丝氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、金属蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶以及类胰蛋白酶等。 其中AEBSF是AppliChem独有的蛋白酶抑制剂,其通过磺酰化蛋白酶活性中心的一个基团,不可逆地抑制凝血酶thrombin和其他一些丝氨酸蛋白酶(chymotrypsin, kallikrein, plasmin, proteinase K, trypsin)。AEBSF是PMSF和DFP的低毒替代品,具有较高的水溶性,溶液状态的pH为酸性,且稳定性较高。EDTA能很好的通过螯合作用抑制金属蛋白酶的活性。

产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
Protease Inhibitor Cocktail 2 MultiPurpose(蛋白酶抑制剂混合物2) A7719_0001 冻干粉形式,用1ml H2O复溶后可得100×浓缩液

上海金畔生物科技有限公司向您推荐德国AppliChem原装进口的Protease Inhibitor Cocktail 2 MultiPurpose(蛋白酶抑制剂混合物2)产品-20°C稳定保存3年以上。用1ml H2O复溶后可得100X浓缩液,溶解后于冷冻保存一个月。

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