Coelenterazine e 腔肠素e

货号： JP4611-1MG 品牌： Jinpan 标签： 细胞生物学研究

描述

Coelenterazine e 腔肠素e

产品关键词：

Coelenterazine e 腔肠素e；Coelenterazine 400 a 腔肠素400a； 海肾荧光素酶（Rluc）；萤火虫荧光素酶（Fluc）；Aequorin 水母发光蛋白；CAS NO：114496-02-5；

产品信息

【温馨提示】：见我司金畔生物（maokangbio）提供的活体成像底物-腔肠素及衍生物产品专题。

产品描述

腔肠素（Coelenterazine）是在水生生物中发现的一种发光基团（luminophore），是许多荧光素酶的作用底物，包括海肾荧光素酶（Renilla reniformis luciferase, Rluc），分泌型膜锚定荧光素酶（Gaussia luciferase, Gluc）和薮枝虫荧光素酶（Obelia luciferase），和发光蛋白包括水母发光蛋白（Aequorin）的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶，在含分子氧的条件下，氧化腔肠素产生高能量的中间产物，在此过程发射蓝色光，光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶（FLuc）系统不同，其在含分子氧的条件下，还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光，光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异，RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究，或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛，包括：1）活细胞或组织的钙离子检测；2）细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子（活性氧，ROS）化学发光检测；3）基因报告基因检测；4）动物活体检测；5）ELISA和生物发光共振能量转移（BRET）用于蛋白相互作用研究；6）药物高通量筛选（HTS）；

图1. 海肾荧光素酶（Rluc）催腔肠素发光的反应流程

天然腔肠素（Coelenterazine Native，CTZ-Native）是自然界中存在最丰富的一种腔肠素，也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白（APO）的底物，也是海肾荧光素酶（Rluc）和分泌型膜锚定荧光素酶（Gluc）等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度，后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET，细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平（ROS）的化学发光检测等。

腔肠素e（Coelenterazine e，CTZ-e），是一种天然腔肠素衍生物，带有一个额外的乙基基团，从而形成一个额外的环形结构，最早由Shimomura进行描述。CTZ-e是一款优秀的海肾荧光素酶（Rluc）底物。CTZ-e产生的荧光接近于CTZ-Native的40%以上，虽然前者的初始荧光强度比后者高7倍多。CTZ-e/海肾荧光素酶的发射光谱有两个峰值，分别为418nm和475nm。

CTZ-e也是一款良好的脱酰基水母发光蛋白（APO）底物，与CTZ-Native相比，CTZ-e形成的水母蛋白复合物具有更快的荧光上升时间，并且呈现两个发射吸收峰（分别在405nm和465nm），吸收峰高度的比值取决于pCa 5-7范围内的钙离子浓度。这一双吸收峰特征使得CTZ-e/APO通过吸收峰强度的比例来测定钙离子成为可能。

产品描述

1）   CAS NO：114496-02-5

2）   化学名：12-Benzyl-8-hydroxy-2-(4-hydroxybenzyl)-5,6-dihydrobenzo[f]imidazo[1,2-a]quinoxalin-3(11H)- one; Benz[f]imidazo[1,2-a]quinoxalin-3(6H)-one,5,11-dihydro-8-hydroxy-2-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-12 -(phenylmethyl);

3）   同义名：e-Coelenterazine; e-CTZ; Coelenterazine-E; CTZ-E; CLZN-e; e-腔肠素；

4）   分子式：C28H23N3O3

5）   分子量：449.5 g/mol

6）   纯度：>95%

7）   外观：黄色至橙色固体

8）   溶解性：溶于甲醇或乙醇，不要溶于DJPO

9）   化学结构式：

保存与运输方法

保存：-20℃干燥避光保存，且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）   腔肠素（Coelenterazine， CTZ）及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内，密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气，也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失，这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2）   腔肠素（Coelenterazine， CTZ）及衍生物不建议以储存液的形式保存，最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃，因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构，即使在低温条件下都会自发降解。

3）   商业化腔肠素的种类繁多，有天然腔肠素，以及各种腔肠素衍生物（比如，腔肠素h，腔肠素400a，腔肠素e，腔肠素f，腔肠素hcp）。它们对钙离子的亲和力，光谱特性，以及应用倾向上会有差异，详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性，附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1.       实验前将CTZ-e从冰箱取出回至室温，之后低速离心使得管内固体（或粉末）落到管底。

2.       用酸化、脱气体的无水乙醇溶解固体（或粉末），混匀，使其浓度为1mg/ml。

3.       最好于实验前才对乙醇储存液进行稀释，再用于所有的鲁米诺分析或实验。根据具体的工作体系选择合适的水溶性缓冲液对乙醇储存液进行稀释。（比如，100μM 用于荧光计分析）

4.       将未用完的CTZ-e溶液保存在-80℃，尽快用完。不可将水溶性工作液进行保存（会被氧化从而降解）。

表1 腔肠素e与天然腔肠素的差异

附录1 天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异

相关产品

规格信息

Coelenterazine e 腔肠素e

货号： JP4611-500UG 品牌： Jinpan 标签： 细胞生物学研究

描述

Coelenterazine e 腔肠素e

产品关键词：

Coelenterazine e 腔肠素e；Coelenterazine 400 a 腔肠素400a； 海肾荧光素酶（Rluc）；萤火虫荧光素酶（Fluc）；Aequorin 水母发光蛋白；CAS NO：114496-02-5；

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【温馨提示】：见我司金畔生物（maokangbio）提供的活体成像底物-腔肠素及衍生物产品专题。

产品描述

腔肠素（Coelenterazine）是在水生生物中发现的一种发光基团（luminophore），是许多荧光素酶的作用底物，包括海肾荧光素酶（Renilla reniformis luciferase, Rluc），分泌型膜锚定荧光素酶（Gaussia luciferase, Gluc）和薮枝虫荧光素酶（Obelia luciferase），和发光蛋白包括水母发光蛋白（Aequorin）的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶，在含分子氧的条件下，氧化腔肠素产生高能量的中间产物，在此过程发射蓝色光，光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶（FLuc）系统不同，其在含分子氧的条件下，还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光，光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异，RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究，或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛，包括：1）活细胞或组织的钙离子检测；2）细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子（活性氧，ROS）化学发光检测；3）基因报告基因检测；4）动物活体检测；5）ELISA和生物发光共振能量转移（BRET）用于蛋白相互作用研究；6）药物高通量筛选（HTS）；

图1. 海肾荧光素酶（Rluc）催腔肠素发光的反应流程

天然腔肠素（Coelenterazine Native，CTZ-Native）是自然界中存在最丰富的一种腔肠素，也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白（APO）的底物，也是海肾荧光素酶（Rluc）和分泌型膜锚定荧光素酶（Gluc）等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度，后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET，细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平（ROS）的化学发光检测等。

腔肠素e（Coelenterazine e，CTZ-e），是一种天然腔肠素衍生物，带有一个额外的乙基基团，从而形成一个额外的环形结构，最早由Shimomura进行描述。CTZ-e是一款优秀的海肾荧光素酶（Rluc）底物。CTZ-e产生的荧光接近于CTZ-Native的40%以上，虽然前者的初始荧光强度比后者高7倍多。CTZ-e/海肾荧光素酶的发射光谱有两个峰值，分别为418nm和475nm。

CTZ-e也是一款良好的脱酰基水母发光蛋白（APO）底物，与CTZ-Native相比，CTZ-e形成的水母蛋白复合物具有更快的荧光上升时间，并且呈现两个发射吸收峰（分别在405nm和465nm），吸收峰高度的比值取决于pCa 5-7范围内的钙离子浓度。这一双吸收峰特征使得CTZ-e/APO通过吸收峰强度的比例来测定钙离子成为可能。

产品描述

1）   CAS NO：114496-02-5

2）   化学名：12-Benzyl-8-hydroxy-2-(4-hydroxybenzyl)-5,6-dihydrobenzo[f]imidazo[1,2-a]quinoxalin-3(11H)- one; Benz[f]imidazo[1,2-a]quinoxalin-3(6H)-one,5,11-dihydro-8-hydroxy-2-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-12 -(phenylmethyl);

3）   同义名：e-Coelenterazine; e-CTZ; Coelenterazine-E; CTZ-E; CLZN-e; e-腔肠素；

4）   分子式：C28H23N3O3

5）   分子量：449.5 g/mol

6）   纯度：>95%

7）   外观：黄色至橙色固体

8）   溶解性：溶于甲醇或乙醇，不要溶于DJPO

9）   化学结构式：

保存与运输方法

保存：-20℃干燥避光保存，且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）   腔肠素（Coelenterazine， CTZ）及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内，密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气，也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失，这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2）   腔肠素（Coelenterazine， CTZ）及衍生物不建议以储存液的形式保存，最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃，因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构，即使在低温条件下都会自发降解。

3）   商业化腔肠素的种类繁多，有天然腔肠素，以及各种腔肠素衍生物（比如，腔肠素h，腔肠素400a，腔肠素e，腔肠素f，腔肠素hcp）。它们对钙离子的亲和力，光谱特性，以及应用倾向上会有差异，详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性，附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1.       实验前将CTZ-e从冰箱取出回至室温，之后低速离心使得管内固体（或粉末）落到管底。

2.       用酸化、脱气体的无水乙醇溶解固体（或粉末），混匀，使其浓度为1mg/ml。

3.       最好于实验前才对乙醇储存液进行稀释，再用于所有的鲁米诺分析或实验。根据具体的工作体系选择合适的水溶性缓冲液对乙醇储存液进行稀释。（比如，100μM 用于荧光计分析）

4.       将未用完的CTZ-e溶液保存在-80℃，尽快用完。不可将水溶性工作液进行保存（会被氧化从而降解）。

表1 腔肠素e与天然腔肠素的差异

附录1 天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异

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规格信息

Coelenterazine 400 a 腔肠素400a

货号： JP4610-1MG 品牌： Jinpan 标签： 细胞生物学研究

描述

Coelenterazine 400 a 腔肠素400a

产品关键词：

Coelenterazine 400 a 腔肠素400a；DeepBlue C；海肾荧光素酶（Rluc）；萤火虫荧光素酶（Fluc）；BRET2 生物发光共振能量转移 ；CAS NO：70217-82-2；

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【温馨提示】：见我司金畔生物（maokangbio）提供的活体成像底物-腔肠素及衍生物产品专题。

产品描述

腔肠素（Coelenterazine）是在水生生物中发现的一种发光基团（luminophore），是许多荧光素酶的作用底物，包括海肾荧光素酶（Renilla reniformis luciferase, Rluc），分泌型膜锚定荧光素酶（Gaussia luciferase, Gluc）和薮枝虫荧光素酶（Obelia luciferase），和发光蛋白包括水母发光蛋白（Aequorin）的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶，在含分子氧的条件下，氧化腔肠素产生高能量的中间产物，在此过程发射蓝色光，光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶（FLuc）系统不同，其在含分子氧的条件下，还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光，光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异，RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究，或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛，包括：1）活细胞或组织的钙离子检测；2）细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子（活性氧，ROS）化学发光检测；3）基因报告基因检测；4）动物活体检测；5）ELISA和生物发光共振能量转移（BRET）用于蛋白相互作用研究；6）药物高通量筛选（HTS）；

图1. 海肾荧光素酶（Rluc）催腔肠素发光的反应流程

天然腔肠素（Coelenterazine Native，CTZ-Native）是自然界中存在最丰富的一种腔肠素，也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白（APO）的底物，也是海肾荧光素酶（Rluc）和分泌型膜锚定荧光素酶（Gluc）等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度，后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET，细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平（ROS）的化学发光检测等。

腔肠素400a（Coelenterazine 400a，CTZ 400a），常称为DeepBlue C，是一种天然腔肠素衍生物，是一款良好的海肾荧光素酶（Rluc）底物，但不适合用作分泌型膜锚定荧光素酶（Gluc）底物。可用来实时监测钙离子浓度，报告基因分析，以及用作生物发光共振能量转移（BRET）的首选底物。腔肠素400a的最大射波峰值约在400nm，从而对GFP受体的发射峰干扰最小。腔肠素400a用在BRET2体系，该体系通常用来评估蛋白-蛋白相互作用，包括涉及G蛋白偶联受体介导的药物细胞信号通路分析，是一种有效的药物开发和筛选工具。

产品描述

1）   CAS NO：70217-82-2

2）   化学名：2,8-Dibenzyl-6-phenyl-imidazo[1,2a]pyrazin-3-(7H)-one; 6-phenyl-2,8-bis(phenylmethyl)-imidazo [1,2-a]pyrazin-3(7H)-one;

3）   同义名：CTZ 400a; 1-bisdeoxycoelenterazine; di-dehydrocoelenterazine; DeepBlueCTM; 腔肠素400a；

4）   分子式：C26H21N3O

5）   分子量：391.5 g/mol

6）   纯度：>97%

7）   外观：黄色至橙色固体

8）   溶解性：溶于甲醇或乙醇，不要溶于DJPO

9）   化学结构式：

保存与运输方法

保存：-20℃干燥避光保存，且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）   腔肠素（Coelenterazine， CTZ）及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内，密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气，也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失。

2）   腔肠素（Coelenterazine， CTZ）及衍生物不建议以储存液的形式保存，最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃，因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构，即使在低温条件下都会自发降解。

3）   商业化腔肠素的种类繁多，有天然腔肠素，以及各种腔肠素衍生物（比如，腔肠素h，腔肠素400a，腔肠素e，腔肠素f，腔肠素hcp）。它们对钙离子的亲和力，光谱特性，以及应用倾向上会有差异，详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性，附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4）   腔肠素400a（Coelenterazine 400a）的另一个通用名DeepBlueCTM是BioSignal Packard公司的商标名。

5）   不同的BRET系统对底物的选择上会有差异（附录3—用于PPI研究的BRET系统汇总表），腔肠素400a 主要用在BRET2系统。

6）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、 腔肠素400a的溶解事项

1）   腔肠素400a不溶于水，接触到空气，水分或任何氧化剂都不稳定。溶于甲醇或乙醇，千万不要溶于DJPO，因会发生未知反应引起腔肠素400a的快速降解并生成未知的代谢产物。

2）   毒性最小的溶剂是无水乙醇，可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液，之后加入需要的缓冲液，尽量保持缓冲液pH小于7.0，因碱性条件会快速降解腔肠素400a，有时沉淀会立即产生。

二、 腔肠素400a的保存事项

最好在使用前，才用无水乙醇溶解腔肠素400a粉末，然后用所选的缓冲液稀释并混匀。此时配好的工作缓冲液需静置20-30min使其稳定（因部分底物会发生自氧化）后才进行体外实验。该工作液能稳定保存几个小时（室温3-4h），仅微弱的信号衰减可能发生。

不建议将腔肠素400a的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存，因天然腔肠素及任何衍生物含有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构，即使在低温条件下都会自发降解。

附录1 天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异

附录3 用于PPI研究的BRET系统汇总表

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归金畔生物/JP金畔所有】

规格信息

Coelenterazine 400 a 腔肠素400a

货号： JP4610-500UG 品牌： Jinpan 标签： 细胞生物学研究

描述

Coelenterazine 400 a 腔肠素400a

产品关键词：

Coelenterazine 400 a 腔肠素400a；DeepBlue C；海肾荧光素酶（Rluc）；萤火虫荧光素酶（Fluc）；BRET2 生物发光共振能量转移 ；CAS NO：70217-82-2；

产品信息

【温馨提示】：见我司金畔生物（maokangbio）提供的活体成像底物-腔肠素及衍生物产品专题。

产品描述

腔肠素（Coelenterazine）是在水生生物中发现的一种发光基团（luminophore），是许多荧光素酶的作用底物，包括海肾荧光素酶（Renilla reniformis luciferase, Rluc），分泌型膜锚定荧光素酶（Gaussia luciferase, Gluc）和薮枝虫荧光素酶（Obelia luciferase），和发光蛋白包括水母发光蛋白（Aequorin）的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶，在含分子氧的条件下，氧化腔肠素产生高能量的中间产物，在此过程发射蓝色光，光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶（FLuc）系统不同，其在含分子氧的条件下，还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光，光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异，RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究，或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛，包括：1）活细胞或组织的钙离子检测；2）细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子（活性氧，ROS）化学发光检测；3）基因报告基因检测；4）动物活体检测；5）ELISA和生物发光共振能量转移（BRET）用于蛋白相互作用研究；6）药物高通量筛选（HTS）；

图1. 海肾荧光素酶（Rluc）催腔肠素发光的反应流程

天然腔肠素（Coelenterazine Native，CTZ-Native）是自然界中存在最丰富的一种腔肠素，也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白（APO）的底物，也是海肾荧光素酶（Rluc）和分泌型膜锚定荧光素酶（Gluc）等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度，后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET，细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平（ROS）的化学发光检测等。

腔肠素400a（Coelenterazine 400a，CTZ 400a），常称为DeepBlue C，是一种天然腔肠素衍生物，是一款良好的海肾荧光素酶（Rluc）底物，但不适合用作分泌型膜锚定荧光素酶（Gluc）底物。可用来实时监测钙离子浓度，报告基因分析，以及用作生物发光共振能量转移（BRET）的首选底物。腔肠素400a的最大射波峰值约在400nm，从而对GFP受体的发射峰干扰最小。腔肠素400a用在BRET2体系，该体系通常用来评估蛋白-蛋白相互作用，包括涉及G蛋白偶联受体介导的药物细胞信号通路分析，是一种有效的药物开发和筛选工具。

产品描述

1）   CAS NO：70217-82-2

2）   化学名：2,8-Dibenzyl-6-phenyl-imidazo[1,2a]pyrazin-3-(7H)-one; 6-phenyl-2,8-bis(phenylmethyl)-imidazo [1,2-a]pyrazin-3(7H)-one;

3）   同义名：CTZ 400a; 1-bisdeoxycoelenterazine; di-dehydrocoelenterazine; DeepBlueCTM; 腔肠素400a；

4）   分子式：C26H21N3O

5）   分子量：391.5 g/mol

6）   纯度：>97%

7）   外观：黄色至橙色固体

8）   溶解性：溶于甲醇或乙醇，不要溶于DJPO

9）   化学结构式：

保存与运输方法

保存：-20℃干燥避光保存，且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）   腔肠素（Coelenterazine， CTZ）及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内，密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气，也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失。

2）   腔肠素（Coelenterazine， CTZ）及衍生物不建议以储存液的形式保存，最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃，因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构，即使在低温条件下都会自发降解。

3）   商业化腔肠素的种类繁多，有天然腔肠素，以及各种腔肠素衍生物（比如，腔肠素h，腔肠素400a，腔肠素e，腔肠素f，腔肠素hcp）。它们对钙离子的亲和力，光谱特性，以及应用倾向上会有差异，详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性，附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4）   腔肠素400a（Coelenterazine 400a）的另一个通用名DeepBlueCTM是BioSignal Packard公司的商标名。

5）   不同的BRET系统对底物的选择上会有差异（附录3—用于PPI研究的BRET系统汇总表），腔肠素400a 主要用在BRET2系统。

6）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、 腔肠素400a的溶解事项

1）   腔肠素400a不溶于水，接触到空气，水分或任何氧化剂都不稳定。溶于甲醇或乙醇，千万不要溶于DJPO，因会发生未知反应引起腔肠素400a的快速降解并生成未知的代谢产物。

2）   毒性最小的溶剂是无水乙醇，可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液，之后加入需要的缓冲液，尽量保持缓冲液pH小于7.0，因碱性条件会快速降解腔肠素400a，有时沉淀会立即产生。

二、 腔肠素400a的保存事项

最好在使用前，才用无水乙醇溶解腔肠素400a粉末，然后用所选的缓冲液稀释并混匀。此时配好的工作缓冲液需静置20-30min使其稳定（因部分底物会发生自氧化）后才进行体外实验。该工作液能稳定保存几个小时（室温3-4h），仅微弱的信号衰减可能发生。

不建议将腔肠素400a的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存，因天然腔肠素及任何衍生物含有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构，即使在低温条件下都会自发降解。

附录1 天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异

附录3 用于PPI研究的BRET系统汇总表

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规格信息

Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h

货号： JP4609-10MG 品牌： Jinpan 标签： 细胞生物学研究

描述

Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h

产品关键词：

Coelenterazine (CTZ) 腔肠素；CTZ h 天然腔肠素h；海肾荧光素酶（Rluc）；分泌型膜锚定荧光素酶（Gluc）；萤火虫荧光素酶（Fluc）；In vivo bioluminescence imaging 活体动物体内成像技术；CAS NO：50909-86-9；

产品信息

【温馨提示】：见我司金畔生物（maokangbio）提供的活体成像底物-腔肠素及衍生物产品专题。

产品描述

腔肠素（Coelenterazine）是在水生生物中发现的一种发光基团（luminophore），是许多荧光素酶的作用底物，包括海肾荧光素酶（Renilla reniformis luciferase, Rluc），分泌型膜锚定荧光素酶（Gaussia luciferase, Gluc）和薮枝虫荧光素酶（Obelia luciferase），和发光蛋白包括水母发光蛋白（Aequorin）的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶，在含分子氧的条件下，氧化腔肠素产生高能量的中间产物，在此过程中发射蓝色光，光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶（FLuc）系统不同，其在含分子氧的条件下，还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光，光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异，RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究，或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛，包括：1）活细胞或组织的钙离子检测；2）细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子（活性氧，ROS）化学发光检测；3）基因报告基因检测；4）动物活体检测；5）ELISA和生物发光共振能量转移（BRET）用于蛋白相互作用研究；6）药物高通量筛选（HTS）；

图1. 海肾荧光素酶（Rluc）催腔肠素发光的反应流程

腔肠素h（Coelenterazine h，CTZ-h）是天然腔肠素（Coelenterazine native，CTZ-native）的脱羟基衍生物。CTZ-h形成的水母发光蛋白复合物比CTZ-native形成的水母发光蛋白复合物的荧光强度高10倍以上（最大发射波长~466nm，半衰期为0.6-1.2sec）。CTZ-h形成的水母发光蛋白复合物比天然发光复合物对钙离子灵敏度更高，是一种检测钙离子浓度微小变化的实用探针。另外，CTZ-h是海肾荧光素酶（Renilla luciferase，Rluc）的底物，适用于体内外报告基因分析。

本品为专供体内成像研究的注射用腔肠素h（Injectable h-Coelenterazine），不仅含有超纯的腔肠素h（＞99%），还提供特别设计的Inject-Diluent溶剂，能够最大程度的溶解腔肠素h，从而最小化体内注射体积。另外，与传统乙醇溶解的腔肠素h相比，用Inject-Diluent溶解的腔肠素h能得到更好的荧光信号。

产品组分

保存与运输方法

保存：-20℃干燥避光保存，且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）   本品特别开发适用于体内实验。若仅做体外实验，可使用我司提供的天然腔肠素（Coelenterazine Native）（#JP4606-1MG）或腔肠素h（Coelenterazine h）（#JP4608-1MG）。

2）   发光蛋白与荧光素酶是完全不同的，比如腔肠素h（CTZ-h）适合用作海肾荧光素酶（Rluc）的底物，但不适合用作分泌型膜锚定荧光素酶（Gluc）的底物。天然腔肠素（CTZ-native）是唯一适合分泌型膜锚定荧光素酶的一种报告基因底物。

3）   商业化腔肠素的种类繁多，有天然腔肠素，以及各种腔肠素衍生物（比如，腔肠素h，腔肠素400a，腔肠素e，腔肠素f，腔肠素hcp）。它们对钙离子的亲和力，光谱特性，以及应用倾向上会有差异，详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性，附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤

1．   使用装有23 gauge或更小针头的0.5-1.0ml注射器，吸取150μl 温热（35-50℃）的Inject-Diluent。

2．  将150μl Inject-Diluent打入Native Coelenterazine瓶内，使用针头和注射器上下吸打或低速涡旋，直至看到完全透明溶液，此时得到腔肠素溶液浓度为3.33mg/ml。如果溶液没有完全透明，用水浴锅或加热板在60-80℃加热几分钟，检查完全透明。

3．   按下表1，用胰岛素注射器吸取15-75μl充分溶解的腔肠素h溶液（3.33mg/ml），通过尾静脉注射到动物体内。检查，排气，冲洗针头。使用胰岛素注射器的优势在于很低的液体滞留体积（＜2μl）。缓慢注射。

建议按照表1单只小鼠（25g体重）的腔肠素h溶液（3.33mg/ml）注射剂量表

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规格信息