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jenabioscience：酵母多聚(A)聚合酶介绍

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jenabioscience：酵母多聚(A)聚合酶介绍

酵母多聚(A)聚合酶：重组、过表达酿酒酵母Poly(A) 聚合酶的大肠杆菌

适合一般实验室使用。

单位定义： 1个单位定义为在37℃下1分钟内催化1pmol AMP结合成酸不溶形式所需的酶量。

运输：通过凝胶包运输

储存条件： -20°C 储存，
避免冷冻/解冻循环

保质期： 12个月

纯度： ≥95%（SDS-PAGE）

形式：液体

浓度： 600单位/μl

描述：
酵母Poly(A) 聚合酶催化 AMP 转移至 RNA 分子的 3'-羟基末端。该反应不依赖于模板，需要 ATP 作为底物和 Mg 2+或 Mn 2+作为辅因子。在某些 Poly(A) 加尾和 RNA 标记反应中，它比大肠杆菌Poly(A) 聚合酶更有效（例如，更短的孵育时间、更广泛地接受 RNA 模板大小）。

多聚腺苷酸化可提高 (m)RNA 稳定性，从而提高真核细胞转染和显微注射实验中的翻译效率。

有关使用体外转录反应混合物作为模板的 (m)RNA 聚腺苷酸化的信息，请参阅 Poly(A) Tailing Enzyme Testkit (#RNT-004)。

含量：
酵母 Poly(A) 聚合酶
#RNT-006-S：1x 50 μl（600 单位/μl）
#RNT-006-L：3x 50 μl（600 单位/μl）
20 mM Tris-HCl（pH 8.0）， 50 mM KCl、0.5 mM DTT、50% 甘油 (v/v)

酵母 Poly(A) 聚合酶反应缓冲液
1x 1.2 ml (5x)
100 mM Tris-HCl (pH 7.0)、3 mM MnCl 2、0.1 mM EDTA、1 mM DTT、0.5 mg/ml 乙酰化 BSA、50% 甘油 (v/五）

ATP – 溶液
1x 100 μl (100 mM)


Jena Bioscience 由马克斯普朗克分子生理学研究所（多特蒙德）的科学家团队于 1998 年成立，利用超过 25 年的学术知识为来自 100 多个国家的研究和工业客户开发创新试剂。迄今为止，耶拿生物科学仍然是一家所有者经营的企业。

protean：BstI DNA 聚合酶(BstI-LF Exo-)描述

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protean：BstI DNA 聚合酶(BstI-LF Exo-)描述

Bst DNA 聚合酶，大片段是来自克隆到大肠杆菌的嗜热脂肪芽孢杆菌的中等热稳定性酶。它具有嗜热逆转录酶活性，并且在各种反应缓冲液条件和镁离子浓度下均具有活性。该聚合酶表现出强大的链置换能力，使其成为等温扩增 (LAMP)、全基因组扩增 (WGA) 和多重置换扩增 (MDA) 的理想候选者。

Bst DNA 聚合酶（减去核酸外切酶）是一种 67 kDa 嗜热脂肪芽孢杆菌 DNA 聚合酶蛋白，具有 5'-3' 聚合酶活性、链置换活性和逆转录活性。没有可检测到的 3'-5' 核酸外切酶活性。浓度为10 U/ul。

应用

等温 DNA 扩增、LAMP、DNA 链置换扩增、全基因组扩增、对具有高 CG 含量和有问题的二级结构的 DNA 进行测序、从极少量的 DNA 模板 (10 fg) 进行快速测序和扩增。 LAMP 测定：2.5 ul 10x BST 缓冲液、0.8 ul MgSO4 (25 mM)、dNTP (10 mM)、4 ul 甜菜碱 (5M)、1.6 ul mecA FIP 引物 (10 mM)、1.6 ul mecA BIP 引物 (10 mM)、0.2 ul mecA F3 引物 (10 mM)、0.2 ul mecA B3 引物 (10 mM)、0.1 mg/ml BSA、1 ul BST 聚合酶、1 ul 模板 DNA，10， 5 ul 水。参考文献：Changguo Chen、Qiangyuan Zhu、Jianwei Mao、Yanjun Li (2017)：通过环介导等温扩增 (LAMP) 同时检测 mecA、nuc 和 femB 来鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)。

纯化方法

亲和层析。 Protean Ltd. 提供的酶是在符合 ISO 9001 和 ISO 13485 国际标准的认证环境中生产的，符合下游 GMP 认证流程的使用条件。

公式

储存缓冲液：10mM Tris (pH 7.5)、50mM KCl、1mM DTT、0.1mM EDTA、0.1% Triton、50% 甘油。 10x 反应缓冲液：专有优化缓冲液，含有 100mM Tris-HCl (pH 8,8)、(NH4)2SO4、KCl、MgSO4 和 1% Triton X-100。

特异性

脱氧核糖核酸、核糖核酸

贮存

储存在-20℃

OmniTaq300

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OmniTaq

简要描述：OmniTaq，产品型号： 300 。
酶特性：
更快的PCR
抑制抗性
灵敏度
兼容 TaqMan
抑制抗性
临床/法医样本
⁠— 全血
⁠— FTA 血斑
⁠— 等离子
⁠— 血清
⁠— 唾液/拭子
更多法医样本
⁠— 土壤/腐植酸
⁠— 黑色素
⁠— 单宁
⁠— 靛蓝染料

详细介绍

产品咨询

品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合

OmniTaq，产品型号：300 。

OmniTaq，描述：

聚合酶是 Taq 聚合酶的三重突变体，使该酶能够抵抗血液、土壤等的抑制作用。它在高达 20-25% 的全血中保持功能，特别是在存在我们的增强剂产品的情况下，或者在其他商业酶失效的某些浓度的粗土壤提取物或抑制性食物基质中。 极其灵敏，能够在样本反应中检测到痕量的 DNA。成功地从 5 pg 输入 DNA 中扩增出一个单拷贝的人类基因靶标，另一个特点是它的快速运行能力。以 1ng DNA 模板开始，用 5 秒的延伸时间和 35 个循环扩增 600bp 的细菌目标。

材料安全数据表
文件
数量
125 微升（500 X 25 微升反应）
文件

上海金畔生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理，进口货物，最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式，为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源，加强网络建设，提高公司内部运作效率，为客户提供方便、快捷的服务。

jembio DNA 聚合酶—— KlenTaq1

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jembio DNA 聚合酶—— KlenTaq1

简要描述：jembio专注于DNA修饰酶，特别是TAQ DNA聚合酶。KlenTaq1和KlenTaq-S是我们的主要销售产品。
jembio产品供应 jembio DNA 聚合酶—— KlenTaq1

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品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,化工,生物产业,制药

jembio DNA 聚合酶—— KlenTaq1

jembio产品供应

KlenTaq1是一种热稳定性 DNA 聚合酶，由编码栖热菌 DNA 聚合酶的基因的 5' 缺失表达，从而具有高度活性且热稳定性更高的 DNA 聚合酶活性。在反应缓冲液 PC2 中重复暴露于 980°C 似乎不会降低酶活性。即使暴露于 990°C 后仍保留显着的活性。全长酶不能耐受这些处理。                KlenTaq1    ™ 酶缺少野生型全长 Taq DNA 聚合酶的 N 末端部分。该蛋白的这一部分与大肠杆菌 DNA 聚合酶 1 的 5' 核酸外切酶区域同源。  因此， KlenTaq1 ™ 与 Hoffman LaRoche 的 Stoffel 片段相似但又不同。                对于不含甘油的KlenTaq1 （目录号 1001 NGKT）：将酶和缓冲液储存在 4°C 下。储存缓冲液为 50 mM 硫酸铵、20 mM Tris-HCl pH 8.55、0.1 mM EDTA、10mM 巯基乙醇、无明胶和 0.5% Thesit。                对于50% 甘油中的KlenTaq1 （目录号 1001）：将酶储存在 -200°C 下，将缓冲液储存在 40°C 下。储存缓冲液中的甘油可防止在 -20°C 下冻结，但 Thesit 在此温度下会导致一些稠化。可以选择，但建议在分配前在冰上加热至 0°C。对于长期储存，可以使用 -70°C 或 -80°C，但我们建议酶不要冷冻多次。重新冷冻和解冻会导致酶活性降低。储存缓冲液为 50% 甘油（v/v；63% w/v）、50 mM 硫酸铵、20 mM Tris-HCl pH 8.55、0.1 mM EDTA、10 mM 巯基乙醇、无明胶和 0.5% Thesit。                 浓度：5   KlenTaq1™单位（72°C 下 30 分钟内掺入 60 nmole）。以活化的鲑鱼精子DNA为模板； PC2（见下文）是缓冲区。请注意，这些单位比标准单位大 6 倍。以标准单位（10 nmole/30 分钟）计算，此处的酶浓度约为 30 单位/ml。                    尽管该酶在多种条件下都能良好发挥作用，但推荐的反应缓冲液 PC2 为：50 mM Tris-HCl pH 9.1、16 mM 硫酸铵、3.5 mM MgCl2 和 150 mg/ml BSA（随订单提供） 。请注意，与其他热稳定性 DNA 聚合酶缓冲液相比，不含 KC1 和明胶。 dNTP 浓度可以从每个 50 µM 到每个 1.2 mM 不等，但通常使用 200 µM。如果 DNA 掺入超过 500 bp，您将需要比 Taq 蛋白更多的KlenTaq1™蛋白。 KlenTaq1™ 的运输浓度为 25-30 u/μl，因此如果使用与全长 Taq DNA 聚合酶相同的数量（罗氏推荐），它可以轻松掺入 2000 bp。

jembio专注于DNA修饰酶，特别是TAQ DNA聚合酶。KlenTaq1和KlenTaq-S是我们的主要销售产品。

上海金畔生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

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多聚(A)聚合酶详细说明

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多聚(A)聚合酶详细说明

多聚(A)聚合酶

用于制作 PolyA 加尾 RNA 和 3' 末端 RNA 标记


1000 U 的 Poly(A) 聚合酶 (5000 U/mL) 和 10x Poly(A) 聚合酶反应缓冲液。

Poly(A) 聚合酶适用于分子生物学应用。该产品既不用于疾病的诊断、预防或治疗，也未经过验证可单独使用或与其他产品结合使用。

特征

  • 催化 ATP 中的 AMP 添加到 RNA 的 3' 羟基上

产品详情

Poly(A) 聚合酶将 ATP（由 AMP 催化）附着到 RNA 的 3ʹ 羟基上，这对于制备带有 Poly(A) 尾的 RNA 非常有用。

该酶以 25 mM Tris-HCl、500 mM NaCl、1 mM MgCl 2、0.1 mM DTT、0.1 mM EDTA 和 50% 甘油的形式提供；25°C 时 pH 8.0。

10 倍浓度的 Poly(A) 聚合酶反应缓冲液包含 500 mM Tris-HCl、2.5 M NaCl 和 100 mM MgCl 2，25°C 时 pH 为 7.9。

表现

Poly(A) 聚合酶催化 ATP 中的 AMP 添加到 RNA 的 3ʹ 羟基上。该反应需要 Mg 2+并且与模板无关。

  • 存储温度：–25°C 至 –15°C

  • 分子量：53,870 道尔顿

测试 测试单位 规格
纯度 >95%
具体活性 >20,000 U/毫克
单链核酸外切酶 200U <5% 释放
双链核酸外切酶 200U 释放<1%
双链核酸内切酶 200U 无转换
大肠杆菌DNA 污染 100U <10份
核糖核酸酶污染 200U 未检测到非特异性 RNase

原则

 该蛋白质由表达质粒 Poly(A) 聚合酶基因的 大肠杆菌菌株产生。

1 个单位定义为在 37°C 下 10 分钟内将 1 nmol ATP 结合到酸不溶性物质中的酶量。

程序

使用说明

1. 按所列顺序配制总体积为 20 µL 的以下反应混合物：

  • 15 µL 无核酸酶水中的 1-10 µg 纯化 RNA

  • 2 µL 10x Poly(A) 聚合酶反应缓冲液 (B7460)

  • 2 µL 10mM ATP (N2070-10)

  • 1 µL Poly(A) 聚合酶 (P7460L)

2. 将反应混合物在 37°C 下孵育 30 分钟。

3. 通过添加 EDTA（终浓度 10mM）终止反应或继续进行净化步骤。 

质量控制

使用两倍系列稀释法测量比活性。在 1x 反应缓冲液（50 mM Tris-HCl、250 mM NaCl、10 mM MgCl 2、pH 7.9、25°C 下）中稀释酶，并添加到含有 15-mer RNA 寡核苷酸、1x 反应缓冲液的 50 µL 反应液中、1 mM ATP、2.5 mM MnCl 2和 3H-ATP。反应在 37°C 下孵育 10 分钟，置于冰上，并使用 Sambrook 和 Russell 的方法进行分析（分子克隆，v3，2001，第 A8 页）。 25-A8.26）。

蛋白质浓度由 OD 280吸光度确定。

通过浓缩和稀释酶溶液的 SDS-PAGE，然后进行银染检测来评估物理纯度。通过将浓缩样品中污染物条带的总质量与稀释样品中目标蛋白质对应的条带质量进行比较来评估纯度。

单链核酸外切酶在 50 µL 反应液中测定，其中含有放射性标记的单链 DNA 底物和 10 µL 酶溶液，并在 37°C 下孵育 4 小时。

双链核酸外切酶活性在 50 µL 反应液中测定，其中含有放射性标记的双链 DNA 底物和 10 µL 酶溶液，并在 37°C 下孵育 4 小时。

双链核酸内切酶活性在含有 0.5 µg 质粒 DNA 和 10 µL 酶溶液的 50 µL 反应液中测定，并在 37°C 下孵育 4 小时。

使用 5 µL 酶溶液重复样品评估大肠杆菌污染，这些样品已变性，并使用与 16S rRNA 基因座相对应的寡核苷酸引物  在 TaqMan qPCR 测定中筛选污染大肠杆菌基因组 DNA 的存在 。 

使用 RNAse Alert 试剂盒（Integrated DNA Technologies）按照制造商的指南评估非特异性 RNAse 污染。

应用领域

该产品可用于分子生物学应用，例如：

  • 制备多聚A尾RNA

  • 3'端RNA标记

  • mRNA疗法