Vero细胞系特性和应用

Vero细胞系是一种源自非洲绿猴肾上皮细胞的永生化哺乳动物细胞模型，站在病毒学、微生物学以及细胞和分子生物学研究的前沿。它们的广泛应用涵盖疫苗开发、药物筛选以及病毒和寄生虫生物学、肿瘤免疫学和免疫治疗策略的探索。

Vero细胞系的建立可以追溯到1962年，起源于非洲绿猴的肾上皮细胞。

Vero细胞克隆及其性质

来自Vero细胞系的不同克隆显示出区别于原始细胞系的特征。其中，两个著名的Vero细胞克隆是:

• Vero E6细胞系:该克隆也称为Vero C1008，来自Vero 76细胞，1979年由P.J. Price在微量滴定板上使用稀释技术分离。Vero E6细胞特别适合培养复制缓慢的病毒。

• Vero 76细胞:这些细胞起源于1968年的一只非洲绿猴的肾脏，保持了Vero细胞的上皮形态特征。

这些Vero细胞变体与亲代细胞系一起，继续有助于推进病毒学研究和医学干预措施的发展，标志着它们在科学界的重要性。

培养猴细胞系Vero细胞需要熟悉特定的参数，如倍增时间、接种密度和合适的生长培养基。

• 人口倍增时间:Vero细胞的倍增时间约为24小时。

• 坚持性:Vero细胞粘附在表面上，培养时通常形成单层。

• 播种密度:建议从1倍10^4 cells/cm^2.的播种密度开始为了培养粘附的Vero细胞，用PBS清洗它们并用Accutase处理它们以分离它们。分离后，离心细胞，将其重新悬浮在新鲜培养基中，并将其转移到新的培养瓶中。

• 生长培养基:哈姆的F12和DMEM都是培养Vero细胞的合适培养基。这些应补充2.5mM L-谷氨酰胺和5%胎牛血清（FBS）以支持最佳生长。培养基应该每周更新两到三次。

• 生长条件:Vero细胞在37°C的温度和5% CO2的潮湿环境中生长旺盛。

• 存储:对于长期储存，Vero电池应保持在低于-150°C的温度下，要么放在超低温冰箱中，要么放在液氮的蒸汽相中。

• 冷冻过程和介质:对于冷冻保存，使用CM-1或CM-ACF或含有FBS和DMSO的生长培养基作为冷冻培养基。采用缓慢冷冻技术，每分钟逐渐降低1°C的温度。

• 解冻过程:将容器浸入37°C水浴中并轻轻搅动40-60秒，解冻Vero细胞。然后，在新鲜培养基中稀释细胞，离心去除冷冻保护剂，重新悬浮在新鲜生长培养基中，并将其置于新的烧瓶中以恢复和生长。

• 生物安全等级:Vero细胞应在符合1级生物安全要求的实验室中处理。

Vero细胞系在研究中的应用

Vero细胞系在细胞生物学和病毒学领域有许多研究应用。在这里，我们讨论了一些具体的问题。

病毒研究和疫苗生产中的Vero细胞

源自非洲绿猴肾细胞的Vero细胞已成为多种病毒疫苗生物过程开发中的主要成分，包括脊髓灰质炎病毒和日本脑炎病毒。它们在贴壁和悬浮培养中的适应性及其广泛的病毒支持能力，包括对小反刍兽疫病毒等病原体的支持能力，突出了它们在病毒分离和疫苗开发中的重要性。

许多研究利用Vero细胞生产人类疫苗。例如，2019年发表的一项引人注目的研究证明了在黄热病病毒灭活疫苗的开发中使用Vero细胞【2】。

Vero细胞通常用于病毒感染研究。

Vero细胞在组织工程和上游生物过程开发中的作用

除了疫苗生产，Vero细胞还有助于组织工程和更广泛的生物过程开发领域，这强调了对其特性和应用进行持续研究的必要性。选择合适的Vero细胞亚系是最大限度地发挥其在生物技术和制药工业中的潜力的关键。

Vero细胞在药物疗效和安全性测试中的应用

Vero细胞经常用于药物测试，以评估药物化合物的有效性和安全性。在研究各种药物和治疗剂的细胞毒性作用时，这些细胞通常被认为是正常肾细胞的标准模型。例如，研究比较了白骨壤植物根提取物对肝癌细胞系HepG2和猴肾上皮细胞Vero细胞的影响，发现提取物对癌细胞的损害比对正常细胞的损害更大。

Vero细胞的局限性

尽管vero细胞被广泛使用，但它们也有其局限性，例如Vero毒素的产生和基因组的改变可能会影响某些应用。了解Vero细胞（包括Vero谱系F6）的特定亚系和基因组特征对于优化其在各种生物过程中的应用至关重要。