Nanopartz 抗体功能化金纳米颗粒应用

Nanopartz 抗体功能化金纳米颗粒应用

Nanopartz 金纳米粒子,专门用于 体外缀合 应用,利用通过多种不同方法功能化的全系列精确球形金纳米粒子和金纳米棒,包括吸收、短碳共价桥、PEG 和我们自己专有的体外共价聚合物桥 – 所有这些都适用于流行的一抗和二抗。该产品采用我们的体外共价聚合物桥,以其耐温、耐盐和耐 pH 性以及负载能力而闻名。该产品使用我们的体内共价聚合物桥,以其长循环时间和负载能力而闻名。这些共轭颗粒可用于多种应用,包括诊断、成像,特别是在不利环境中。这些颗粒保证不会聚集。每批次均具有完整的特征,包括尺寸、单分散性、聚集、残留化学物质和浓度。浓度为 50 OD 时的典型体积为 1 mL。为每个订单提供分析证书 (COA),展示 TEM 和 UV-VIS 图像和数据以及 DLS 数据。在所有情况下,都会测量抗体的负载。

CAS11 Nanopartz 二抗功能化球形金纳米颗粒

CAS12 Nanopartz 二抗功能化金纳米棒

CAS13 Nanopartz 二抗功能化 Microgold

CAS14 Nanopartz 二抗功能化金纳米线

这些纳米粒子在 18MEG 去离子水(默认溶液)中运输,没有可测量的残留反应物。

该产品有 1mL 或更大容量。

功能化

该产品具有多种不同的共价选项。

保质期/储存温度

该产品在冷藏箱中运输。本产品保质期为六个月,开封后应于4°C保存。使用本产品时必须注意仅使用无菌玻璃器皿。

毒性

已知该产品无细胞毒性。该产品已经过灭菌且不含生物成分。

消毒

本产品已灭菌。

对于灭菌后测试,请选择灭菌认证。

对于内毒素纯化,请选择 Endotoxin Purified。

认证证书

每份订单均附有分析证明,其中包含以下信息。我们使用可追溯的校准:

UV-VIS (Agilent 8453) 用于消光和浓度测量

NIR (Cary 500) 用于 NIR 消光和浓度测量

用于测量 zeta 电位的 DLS (Malvern Nano ZS)

用于金质量测量的 ICP-MS (Varian 820-MS)

TEM (Phillips CM-100 100KV) 用于定径

Nanopartz 抗体功能化金纳米颗粒应用Nanopartz 抗体功能化金纳米颗粒应用

技术比较:

Nanopartz™  Ab缀合金纳米颗粒 其他的
稳定性(盐、pH、化学品) 高的 中等的
单价选项 是的
非特异性结合 非常低 中等的
消毒 是的

优点:

  • 共价键确保特异性、稳定性和长保质期

  • 缓冲液稳定性 – pH 值 4-9 范围内稳定

  • 无叠氮hua钠

  • 无牛血清白蛋白

  • 聚合物涂层确保高盐中不会聚集,减少非特异性结合

  • 稳定的

  • 特点鲜明

  • 客户可以选择缓冲液

  • 客户可以选择金纳米颗粒类型、尺寸和/或 SPR

  • 所有配体的加载均经过优化


nanopartz抗体负荷估计

nanopartz抗体负荷估计

nanopartz抗体负荷估计

具有 Nanopartz™ 共价键合聚合物的功能化金纳米颗粒

下表显示了使用 PEG 作为共价聚合物桥的金纳米颗粒上 IgG 的典型负载量。我们的体外聚合物是原来的 2 倍。我们的体内聚合物含量高出约 50%。

球体吸收

部分

直径(纳米)

峰值SPR(纳米)

NPS/毫升

摩尔浓度 (pM)

IgG抗体/np

总(和)IgG

CA11-1.8

1.8

不适用

4.25E+16

7.10E+07

7.09E-08

0.1

1,379

CA11-2.2

2.2

不适用

2.33E+16

3.90E+07

3.88E-08

0.2

1,128

CA11-3

3

不适用

9.19E+15

1.50E+07

1.53E-08

0.4

827

CA11-4

4

不适用

3.88E+15

6.50E+06

6.46E-09

0.6

620

CA11-5

5

512

1.99E+15

3.30E+06

3.31E-09

1

496

CA11-10

10

516

2.48E+14

4.10E+05

4.14E-10

4

248

CA11-15

15

518

7.35E+13

1.20E+05

1.23E-10

9

165

CA11-20

20

520

3.10E+13

5.20E+04

5.17E-11

16

124

CA11-25

25

521

1.59E+13

2.60E+04

2.65E-11

25

99

CA11-30

30

523

9.19E+12

1.50E+04

1.53E-11

36

83

CA11-35

35

526

5.79E+12

9.60E+03

9.65E-12

49

71

CA11-40

40

527

3.88E+12

6.50E+03

6.46E-12

64

62

CA11-45

45

529

2.72E+12

4.50E+03

4.54E-12

81

55

CA11-50

50

531

1.99E+12

3.30E+03

3.31E-12

100

50

CA11-55

55

533

1.49E+12

2.50E+03

2.49E-12

121

45

CA11-60

60

536

1.15E+12

1.90E+03

1.91E-12

144

41

CA11-65

65

539

9.04E+11

1.50E+03

1.51E-12

169

38

CA11-70

70

542

7.23E+11

1.20E+03

1.21E-12

196

35

CA11-75

75

545

5.88E+11

9.80E+02

9.80E-13

225

33

CA11-80

80

549

4.85E+11

8.10E+02

8.08E-13

256

31

CA11-85

85

553

4.04E+11

6.70E+02

6.73E-13

289

29

CA11-90

90

558

3.40E+11

5.70E+02

5.67E-13

324

28

CA11-95

95

563

2.89E+11

4.80E+02

4.82E-13

361

26

CA11-100

100

569

2.48E+11

4.10E+02

4.14E-13

400

25

CA11-150

150

612

7.35E+10

1.20E+02

1.23E-13

900

17 号

CA11-200

200

不适用

3.10E+10

5.20E+01

5.17E-14

1600

12

CA11-500

500

不适用

1.99E+09

3.30E+00

3.31E-15

10000

5

CA11-1000

1000

不适用

2.48E+08

4.10E-01

4.14E-16

40000

2

CA11-1500

1500

不适用

7.35E+07

1.20E-01

1.23E-16

90000

2

纳米棒抗体加载

部分

直径(纳米)

长度(纳米)

峰值 SPR 波 (nm)

纵横比

SPR(澳大利亚)出发

IgG抗体/纳米棒

总(和)IgG

CA12-5-808

5

21

808

4.2

50

4

251

CA12-5-780

5

19

780

3.8

50

4

253

CA12-5-700

5

15

700

3

50

3

260

CA12-10-2100

10

175

2100

17.5

50

70

118

CA12-10-1400

10

102

1400

10.2

50

41

120

CA12-10-1200

10

81

1200

8.1

50

33

121

CA12-10-1064

10

67

1064

6.7

50

27

122

CA12-10-980

10

59

980

5.9

50

23

123

CA12-10-950

10

55

950

5.5

50

22

123

CA12-10-900

10

50

900

5

50

20

124

CA12-10-850

10

45

850

4.5

50

18

125

CA12-10-808

10

41

808

4.1

50

16

126

CA12-10-780

10

38

780

3.8

50

15

127

CA12-10-750

10

35

750

3.5

50

14

128

CA12-10-700

10

29

700

2.9

50

12

130

CA12-10-650

10

24

650

2.4

50

10

134

CA12-10-600

10

19

600

1.9

50

8

140

CA12-25-1400

25

245

1400

9.8

50

245

68

CA12-25-1064

25

137

1064

5.5

50

137

70

CA12-25-980

25

119

980

4.8

50

119

71

CA12-25-950

25

102

950

4.1

50

102

72

CA12-25-900

25

96

900

3.8

50

96

72

CA12-25-850

25

93

850

3.7

50

93

73

CA12-25-808

25

90

808

3.6

50

90

73

CA12-25-780

25

87

780

3.5

50

87

73

CA12-25-750

25

85

750

3.4

50

85

73

CA12-25-700

25

75

700

3

50

75

74

CA12-25-650

25

71

650

2.8

50

71

75

CA12-25-600

25

57

600

2.3

50

57

77

CA12-25-550

25

34

550

1.4

50

34

87

CA12-40-1064

40

208

850

5.2

50

333

44

CA12-40-980

40

180

850

4.5

50

288

45

CA12-40-850

40

148

850

3.7

50

237

45

CA12-40-808

40

134

808

3.4

50

214

46

CA12-40-780

40

124

780

3.1

50

198

46

CA12-40-750

40

112

750

2.8

50

179

47

CA12-40-700

40

92

700

2.3

50

147

48

CA12-40-650

40

80

650

2

50

128

50

CA12-40-600

40

68

600

1.7

50

109

51

CA12-40-550

40

60

550

1.5

50

96

53

CA12-50-1064

50

245

1064

4.9

50

490

35

CA12-50-808

50

145

808

2.9

50

290

37

CA12-50-700

50

110

700

2.2

50

220

39

CA12-50-600

50

100

600

2

50

200

40

CA12-70-750

70

120

750

1.7

50

336

29

CA12-70-650

70

105

650

1.5

50

294

30

CA12-70-550

70

91

550

1.3

50

255

32

Nanopartz Oligo 功能化金纳米粒子应用

Nanopartz Oligo 功能化金纳米粒子应用

Nanopartz Oligo 和 DNA 功能化金纳米颗粒,专门用于 体外 和体内缀合应用中,利用全系列的精确球形金纳米粒子、金纳米棒、微金和金纳米线,通过专有的共价聚合物桥与您选择的寡核苷酸序列结合。该系列产品以其耐温、耐盐、耐 pH 值以及好的负载能力而闻名。这些共轭颗粒可用于多种应用,包括诊断、成像,特别是在不利环境中。这些颗粒保证不会聚集。每批次均具有完整的特征,包括尺寸、单分散性、聚集、残留化学物质和浓度。浓度为 50 OD 时的典型体积为 1 mL。为每个订单提供分析证书 (COA),展示 TEM 和 UV-VIS 图像和数据以及 DLS 数据。在所有情况下,确定目标的负载。

规格:

CO11 Nanopartz Oligo 功能化球形金纳米颗粒

CO12 Nanopartz Oligo Functionalized Gold Nanorods

CO13 Nanopartz oligo 功能化 Microgold

CO14 Nanopartz oligo 功能化金纳米线

Nanopartz Oligo 功能化金纳米粒子应用

这些纳米粒子在无 DNA 酶的 18MEG 去离子水(默认溶液)中运输,没有可测量的残留反应物。

该产品有 1mL 或更大容量。寡核苷酸限制为 70 nmole。对于较小尺寸的金纳米颗粒,根据是否购买单价选项,金纳米颗粒的量将受到寡核苷酸上限的限制。例如,对于 1.8nm 产品,如果购买单价选项,您将收到 70nmol 的金纳米粒子。

功能化

该产品具有多种不同的共价长度选项,从 4 个碳到 30KDa。

保质期/储存温度

本产品保质期为六个月,开封后应于4°C保存。使用本产品时必须注意仅使用无菌玻璃器皿。

毒性

已知该产品无细胞毒性。该产品已经过灭菌且不含生物成分。

消毒

本产品已灭菌。

对于灭菌后测试,请选择灭菌认证。

对于内毒素纯化,请选择 Endotoxin Purified。

认证证书

每份订单均附有分析证明,其中包含以下信息。我们使用可追溯的校准:

UV-VIS (Agilent 8453) 用于消光和浓度测量

NIR (Cary 500) 用于 NIR 消光和浓度测量

用于测量 zeta 电位的 DLS (Malvern Nano ZS)

用于金质量测量的 ICP-MS (Varian 820-MS)

TEM (Phillips CM-100 100KV) 用于定径

紫外可见分光光度计

Nanopartz Oligo 功能化金纳米粒子应用

Nanopartz Oligo 功能化金纳米粒子应用

技术比较

Nanopartz™ 体外 金纳米颗粒 PEG金纳米粒子
稳定性(盐、pH、化学品) 高的 中等的
单价 是的
非特异性结合 非常低 中等的
消毒 是的

特点

  • 共价键确保特异性、稳定性和长保质期

  • 缓冲液稳定性 – pH 值 4-9 范围内稳定

  • 无叠氮hua钠

  • 无牛血清白蛋白

  • 聚合物涂层确保高盐中不会聚集,减少非特异性结合

  • 稳定的

  • 特点鲜明

  • 客户可以选择缓冲液

  • 客户可以选择金纳米颗粒类型、尺寸和/或 SPR

  • 所有配体的加载均经过优化

静脉内磁性纳米粒子癌症热疗

静脉内磁性纳米粒子癌症热疗

通过交变磁场加热的磁性纳米颗粒可单独用于治疗癌症,也可与放疗或化疗结合使用。然而,直接瘤内注射会受到肿瘤不一致和侵袭性的影响,通常会留下治疗不足的区域,从而导致癌症再生。静脉注射更忠实地负载肿瘤,但迄今为止,在发生全身毒性之前很难在肿瘤中达到必要的浓度。在这里,我们描述了磁性纳米颗粒的使用,在皮下鳞状细胞癌小鼠模型中,以耐受良好的静脉剂量,达到了 1.9 mg Fe/g 肿瘤的肿瘤浓度,肿瘤与非肿瘤的比率 > 16。通过在 980 kHz 下施加 38 kA/m 的磁场,肿瘤可以在 2 分钟内加热到 60°C,以毫米 (mm) 精度持久消融它们,使周围组织完好无损。

蛋白质如何与羧化金纳米颗粒的共价结合

蛋白质如何与羧化金纳米颗粒的共价结合

金纳米颗粒缀合物已广泛应用于生物研究和生物传感应用。例如,金纳米颗粒可以用作光学或电子显微镜、侧流免疫测定和免疫印迹方案(例如斑点印迹和蛋白质印迹)中的探针。 

制备金缀合物有两种方法,即被动吸附和通过连接体的共价偶联。尽管制备过程相对简单,但蛋白质对金纳米颗粒的被动吸附并不能提供涂层的附着,因为随着时间的推移,分子可能会从表面解吸。此外,在某些情况下,蛋白质在吸附到表面后会失去其特性,这可能是由于三级结构的变化或活性位点/抗原结合位点与金表面的结合使其难以接近而引起的。

尽管存在这些缺点,蛋白质被动吸附到金纳米颗粒上仍然很受欢迎,并且是生成蛋白质金缀合物的简单方法。通过被动吸附到标准球形金纳米粒子来制备金纳米粒子蛋白缀合物,可以使用我们方便的被动吸附金缀合优化套件进行优化。

与被动吸附相比,共价偶联将感兴趣的分子固定在功能化金纳米颗粒上(例如带有NHS、羧基或胺基团)。与被动吸附方法相比,这种方法大大提高了蛋白质涂层的稳定性。共价偶联使用与待缀合分子上的特定化学基团反应的化学接头。因此,该方法比被动吸附方法更具特异性和可控性,并且可以针对特定应用优化共价缀合配体的数量。通过接头的共价偶联还具有最小化空间位阻和对缀合蛋白三级结构的影响的优点。总而言之,这对缀合蛋白的性质产生的有害影响较小。 

我们的羧基金纳米粒子、羧基金纳米海胆和羧基金纳米棒均依赖于 EDC/NHS 化学进行结合。 EDC 和 NHS“激活”颗粒表面的羧基,形成中间体,随后与特定蛋白质或其他待缀合配体上的伯胺基团反应。EDC 缀合的效率通常较低,并且对 pH 值和共价键敏感耦合协议需要一定程度的优化才能实现所需的性能或稳定性。 

以下方案提供了将生物分子与我们的羧化金纳米颗粒偶联的一般指南,以标准 IgG 与我们的 20 nm 羧基金纳米颗粒的偶联为例。对于其他生物分子或纳米粒子类型的缀合,最佳缀合条件可能会有所不同。为了获得与颗粒表面的最大结合,用于结合的蛋白质的量比全覆盖所需的理论量多大约1至10倍。 

所需材料和设备

  • 20nm羧基金纳米粒子 

  • 甲基金纳米粒子(阴性对照)

  • 1-乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳二亚胺盐酸盐 (EDC)(Sigma,目录号 E1769)

  • N-羟基磺基琥珀酰亚胺 (Sulfo-NHS)(Sigma,目录号 56485)

  • 阳性对照蛋白:辣根过氧化物酶 (HRP) 或来自人血清的 IgG(Sigma,目录号 I4506)

  • 阻断剂:牛血清白蛋白 (BSA)(Sigma,目录号 A3059)

  • 激活缓冲液:2-(N-吗啉代)乙磺酸 (MES) 缓冲液(10 mM,pH 5.5)

  • 偶联缓冲液:1X 磷酸盐缓冲盐水 (PBS)

  • 洗涤缓冲液:1X 磷酸盐缓冲盐水 + 0.05% Tween 20 (PBST)

  • 紫外可见分光光度计

  • 待缀合的目标蛋白

注意:待缀合的蛋白质必须是纯净的且不含污染蛋白质(例如 BSA)和其他含胺成分。任何其他含有伯胺的分子都可能与待缀合的蛋白质竞争,并可能导致缀合效率显着降低。该蛋白质还应该具有足够的可接近的伯胺基团用于缀合。赖氨酸残基是 EDC 缀合的主要靶位点。 

程序

  1. 如果金纳米粒子的浓度低于OD 50,则通过离心浓缩它们。如果缓冲液中有颗粒,则通过离心在纯水中清洗它们。有关说明,请参阅“金纳米颗粒处理和储存”。

  2. 在 MES 缓冲液中制备浓度分别为 30 和 36 mg/mL 的新鲜 EDC/NHS 混合溶液。请注意,EDC/NHS 在水溶液中会迅速水解,应在结合前新鲜制备。

  3. 取 10 µL 20 nm 金纳米粒子(水中 OD 50)并与步骤 2 中制备的 10 µL EDC/NHS 混合溶液混合。

  4. 室温孵育 30 分钟

  5. 添加 1 mL PBST 并涡旋 

  6. 6,500 g 离心 30 分钟

  7. 除去大部分上清液

  8. 添加 10 µL 抗体(1 X PBS 中 1 mg/mL)*

  9. 在水浴超声仪中超声 10 秒

  10. 室温下搅拌孵育 2 至 4 小时

  11. 添加 1 mL PBST 并涡旋

  12. 6,500 g 离心 30 分钟

  13. 除去大部分上清液

  14. 添加 50 µL PBS 和 1% BSA

  15. 储存于 4 度即可使用

* 蛋白质的浓度可能会根据颗粒大小和要结合的蛋白质而变化。一般来说,蛋白质的量应比全表面覆盖的量多 1 至 10 倍。应估计颗粒的总表面积和对接面积,以计算最佳的蛋白质含量。下表是将 IgG 与不同尺寸的羧基金颗粒结合的一般参考。其他蛋白质的计算类似,但需要计算您感兴趣的蛋白质的对接面积。

表 I.  EDC 缀合期间不同尺寸的羧基金纳米颗粒的 IgG 的建议量。 IgG 分子的对接面积估计为 45 nm2。 “NX全覆盖量”是指孵育量与颗粒表面全覆盖所需量之间的过量比。

蛋白质如何与羧化金纳米颗粒的共价结合