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每天多懂一点骨碱性磷酸酶

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每天多懂一点骨碱性磷酸酶

　　骨碱性磷酸酶（BAP）与骨钙化作用密切相关，此酶的活性在胚胎期和骨骼发育期以及钙化过程中均有一致关系。BAP主要见于骨化的软组织中，不见于无钙化的软骨中。此酶系成骨细胞所产生，当成骨细胞转变为骨细胞时，此酶活性逐渐降低。
　　骨骼的形成是一种有序的，无机矿物质的沉积与骨基质有密切关系。成骨细胞和骨细胞有调节钙、磷和其他例子浓度的作用。不同来源的胶原能够催化这些离子溶液中钙和磷在矿化作用期间的成核现象，即晶核形成—矿化初期沉积于胶原分子特定排列“孔”的特殊部位；
　　而无机焦磷酸则是矿化作用*抑制剂。有于成骨细胞能合并成释放碱性磷酸酶、催化无机磷酸盐水解，从而降低焦磷酸盐浓度，有利于骨的矿化作用。有人认为焦磷酸盐作为BAP的底物，可见此酶在调节矿化作用中能发挥其积极作用；因而在骨形成中成骨细胞在数量和功能增加的同时，也可表现出血清碱性磷酸酶活性的升高。
　　骨碱性磷酸酶可根据所在组织部位分为肝性、骨性、肠性、肾性及胎盘性几种同工酶，而临床上检测的血清ALP则是这几种组织产生的酶的总活性，其特异性和灵敏度较低，并且这几种组织的疾病对其活性影响甚大，故ALP仅能粗略地反映骨代谢情况。本产品来源于成骨细胞，排除了肝、肾、肠道等疾患的影响，能更准确地反映骨代谢情况。
　　骨组织中的成骨细胞和破骨细胞是骨组织代谢的基本功能细胞，二者分别具有骨形成和骨吸收功能，其分化成熟和凋亡影响着骨代谢的动态平衡，成骨细胞和破骨细胞通过彼此间的信息交流影响彼此的功能。其结果使骨形成活动与骨吸收活动相互调节，形成一种特殊的耦联机制，维持正常骨组织结构的生长与发育。当骨吸收作用远大于骨形成作用，破坏骨代谢平衡可引发骨量平衡失调疾病如骨质疏松症，并容易引起骨折。
　　骨质疏松症是一种以骨量减少和异常骨质微结构为特征的代谢性骨病。病因包括：内分泌疾病（甲状腺和甲状旁腺功能亢进）、骨软化、肾衰竭、胃肠道疾病、长期皮质类固醇使用、多发性骨髓瘤、骨转移瘤等。
　　骨碱性磷酸酶升高可由于佩吉特骨病、骨软化等引起。在佩吉特骨病、骨软化、骨质疏松症中抑制骨吸收治疗能降低BAP水平。有研究显示在骨质疏松症患者中使用抑制骨吸收治疗能使BAP水平在3到6月内至少降低25%。

在对骨碱性磷酸酶进行检测的方法及注意细节介绍

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在对骨碱性磷酸酶进行检测的方法及注意细节介绍

　　骨碱性磷酸酶全称叫骨源性碱性磷酸酶即为NBAP.骨碱磷酸酶(NBAP)是成骨细胞的表型标志物之一，它可直接反映成骨细胞的活性或功能状况，是近年来主要用于小儿佝偻病早期诊断和亚临床鉴别的特异性参考指标，也是目前用于评价人体骨矿化障碍的佳指标。
　　碱性磷酸酶与骨钙化作用密切相关，此酶的活性在胚胎期和骨骼发育期以及钙化过程中均有一致关系。骨碱磷酸酶主要见于骨化的软组织中，不见于无钙化的软骨中。此酶系成骨细胞所产生，当成骨细胞转变为骨细胞时，此酶活性逐渐降低。
　　骨碱性磷酸酶进行检测的方法及注意细节如下：
　　1、首先是血球和血浆的分离，这一过程是基于全血样品经过血浆分离器将血球截留在分离器的血球容纳膜上，而血浆渗滤穿过转运膜到达反应膜的特定区域，血浆分离完成后，将血浆分离器从反应装置上取下。
　　2、是本产品与血浆中其它组分，包括其它来源的碱性磷酸酶(ALP)分离达到特异测定骨碱磷酸酶的目的。这一目的实现是根据小儿型骨碱磷酸酶(N骨碱磷酸酶)和成人骨碱磷酸酶(A骨碱磷酸酶)分子结构中糖基类型的不同，分别选择相应的亲和素，我们可称之为N骨碱磷酸酶-结合蛋白和A骨碱磷酸酶-结合蛋白，预先固相在反应膜的特定区域—反应区上。当血浆经过此区域渗滤时，骨碱磷酸酶即被结合，而其它组成滤过或被滴加的洗涤液清洗掉，从而完成特异性亲和反应。
　　3、方可进行骨碱性磷酸酶的活性测定显色反应。反应膜固定在反应滑板上，待亲和反应完成后，将反应滑板推动，使反应膜到达反应孔正中，将显色液滴加到反应孔内的反应膜上，在37℃反应一定时间，酶促反应显色的深浅与骨碱磷酸酶活性成正比，对照说明书上的标准色板目测判读骨碱磷酸酶活性。

骨碱性磷酸酶偏低的原因有哪些？

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骨碱性磷酸酶偏低的原因有哪些？

　　骨碱性磷酸酶可根据所在组织部位分为肝性、骨性、肠性、肾性及胎盘性几种同工酶，而临床上检测的血清ALP则是这几种组织产生的酶的总活性，其特异性和灵敏度较低，并且这几种组织的疾病对其活性影响甚大，故ALP仅能粗略地反映骨代谢情况。
　　碱性磷酸酶（BAP）来源于成骨细胞，排除了肝、肾、肠道等疾患的影响，能更准确地反映骨代谢情况。碱性磷酸酶与骨钙化作用密切相关，此酶的活性在胚胎期和骨骼发育期以及钙化过程中均有一致关系。
　　骨碱性磷酸酶偏低的原因有：
　　1、贫血引起的碱性磷酸酶偏低。
　　2、儿童甲状腺性能不全引起的碱性磷酸酶偏低。
　　3、重症慢性肾炎引起的碱性磷酸酶偏低。
　　4、病毒性感染时其活性在正常范围或略低引起的碱性磷酸酶偏低。
　　5、营养不良、呆小症，缺乏症坏血病、乳糜泻、恶病质，遗传性低磷酸酶血症引起的碱性磷酸酶偏低。
　　骨源性碱性磷酸酶是由骨质中分泌出来，当骨头中钙盐沉淀不足时，该酶分泌增多，骨中钙盐充足时就分泌减少，所以用来帮助检查有无钙吸收不足。碱性磷酸酶低更多出现于儿童和孕妇身上。
　　需要注意的是，任何检查项目都不是孤立来看待的。需要与症状表现、其他检查化验综合分析才有意义。婴幼儿体内碱性磷酸酶水平都有些偏高，此指标反映新生组织增长状况。婴幼儿本身就处于生长旺盛阶段，偏高的骨碱性磷酸酶不能作为佝偻病的诊断依据，并以此考虑补充鱼肝油。

Alkaline Phosphatase from E.Coli 碱性磷酸酶，来自大肠杆菌

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Alkaline Phosphatase from E.Coli 碱性磷酸酶，来自大肠杆菌

货号： MP0101-10MG 品牌： Jinpan 标签： 蛋白研究

描述

Alkaline Phosphatase from E. Coli. 碱性磷酸酶，来自大肠杆菌

产品信息

 产品名称  产品编号  规格  价格（元）

 Alkaline Phosphatase from E. Coli 

 碱性磷酸酶，来自大肠杆菌

  MP0101-10MG  10mg  900

【温馨提示1】：见碱性磷酸酶（Alkaline Phosphatase，ALP）产品专题，了解更多相关产品信息。

【温馨提示2】：见碱性磷酸酶（Alkaline Phosphatase，ALP）活性检测试剂盒产品。

【温馨提示3】：见碱性磷酸酶（Alkaline Phosphatase，ALP）染色试剂盒产品。

产品描述

碱性磷酸酶（Phosphatase, Alkaline，ALP，EC 3.1.3.1），是一种含两个相同亚基的二聚体，也是一种约含12%碳水化合物（6%己糖和6%其他中性糖）的糖蛋白，每个ALP分子含4个锌离子和4个二硫键。镁离子存在情况下，ALP可达到最高酶活。AP能催化磷酸单酯水解，比如对硝基苯酚磷酸盐（pNPP）、磷酸苯酯、酚酞磷酸、α-甘油磷酸、β-甘油磷酸、2- 磷酸甘油酸、磷酸丙糖、葡萄糖-6-磷酸、葡萄糖-1-磷酸、果糖-6-磷酸、腺苷-5-磷酸、腺苷-3-磷酸、磷酸烯醇式丙酮酸和β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸等。

碱性磷酸酶（ALP）常用来偶联抗体和其他蛋白，从而满足ELISA、WB和组织化学检测上的应用。通常用来蛋白的去磷酸化实验，比如酪蛋白和核酸等。当需要高检测灵敏度时也能用来蛋白标记。还可用在DNA或RNA 的5′-末端去磷酸以防止自连。经碱性磷酸酶的去磷酸化作用后，DNA 或 RNA 还可被放射性标记磷酸盐标记（通过 T4 多核苷酸激酶）。

本品为大肠杆菌重组表达纯化所得，以硫酸铵悬液形式提供，比活力≥10U/mg protein。

产品特性

1）CAS NO：9001-78-9

2）英文同义名：Phosphatase, Alkaline; Orthophosphoric-monoester phosphohydrolase (alkaline optimum); Phosphomonoesterase; Alkaline Phosphomonoesterase;

3）中文同义名：磷酸酶（碱性）；碱性磷酸单酯酶；大肠杆菌来源碱性磷酸酶；碱性磷酸酶（大肠杆菌）

4）来源：大肠杆菌（E. Coli）

5）纯化方式：盐分馏（Partially purified salt fraction）

6）外观：2.5M硫酸铵悬液，pH 8.0

7）抑制剂：螯合剂和无机磷酸盐

8）最佳pH：8.0

8）比活力：≥10 units/mg protein (25℃, pH 8.0)

9）活性单位定义：在25℃，pH8.0反应条件，每min内水解对硝基苯磷酸盐(p-nitrophenyl phosphate, pNPP)生成1 μmol对硝基苯酚(p-nitrophenol)所需的酶量定义为1个活性单位(unit)。 

保存与运输方法

保存：2-8℃保存，1年稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）本品稳定性高，反应需Zn2+，Mg2+可提高酶活。在螯合剂存在条件下，100℃加热可导致酶暂时性失活，但恢复至室温酶活会恢复，必须进行苯酚处理，才能引起酶完全失活。本品最适pH约8.0，Tris等醇类化合物可提高酶活。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

附录1 纯化酶产品（硫酸铵悬浮液形式）使用指导

1）当硫酸铵可能会干扰酶反应，操作如下：

1.1 从冰箱内取出酶。【注：硫酸铵悬浮液产品不可冻存！！】

1.2 确保盖子拧紧，然后颠倒混匀数次得到乳白色悬浮液，此过程可能需要一分钟左右。不可涡旋或超声，因如此强烈的处理可能会引起某些酶的变性。

1.3 使用宽口枪头，吸取一部分悬浮液转移到一干净的离心管内。

1.4 约10,000~15,000x g离心10min。若是条件允许，低温（2-8℃）设置下离心。

1.5 小心吸取尽可能透明的上清液，并保留到一干净的离心管内。没有必要完全吸掉所有的硫酸铵溶液。

1.6 用适量的反应缓冲液加入沉淀中并使其溶解。

1.7 对上述得到的上清液，以及用反应缓冲液溶解的酶溶液进行蛋白含量和/或酶活力检测。

【注：具体酶的活力检测方法可见我司官网或与我们联系索取相关资料。】

2）当硫酸铵不会干扰酶反应，操作如下：

2.1 从冰箱内取出酶。【注：硫酸铵悬浮液产品不可冻存！！】

2.2 确保盖子拧紧，然后颠倒混匀数次得到乳白色悬浮液，此过程可能需要一分钟左右。不可涡旋或超声，因如此强烈的处理可能会引起某些酶的变性。

2.3 使用宽口枪头，吸取一部分悬浮液直接加入反应缓冲液中即可。

【注意：对于硫酸铵悬浮液，绝大部分的酶都是以固体形式存在。很有可能仅仅可忽略量的酶以溶于硫酸铵溶液的形式存在。】

 

规格信息

品牌：

Jinpan
CAS:

9001-78-9
规格：

10mg
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