磷酸化MAPK兔单抗4370S


磷酸化MAPK兔单抗

简要描述:磷酸化MAPK兔单抗,保存在10 mM sodium HEPES (pH 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA、50% 甘油和低于0.02% 中。-20℃ 保存。切勿分装抗体。

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品牌 其他品牌 供货周期 一个月

磷酸化MAPK兔单抗,产品型号:4370S。

磷酸化MAPK兔单抗保存在10 mM sodium HEPES (pH 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA、50% 甘油和低于0.02% 中。-20℃ 保存。切勿分装抗体。

来源/纯化

使用与人p44 MAP 激酶的Thr202/Tyr204 周围的残基相对应的合成磷酸肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs) 是参与多个细胞程序(如细胞增殖,分化、运动和死亡)的广泛保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族。p44/42 MAPK (Erk1/2) 信号转导通路可以响应于一系列多样的胞外刺激(包括促分裂原、生长因子和细胞因子)被激活(1-3),并且研究人员认定它是癌症诊断和治疗的重要靶标(4)。在受到刺激的情况下,一个连续的蛋白激酶三级联反应被启动,该级联由MAP 激酶激酶激酶(MAPKKK 或MAP3K)、MAP 激酶激酶(MAPKK 或MAP2K)和MAP 激酶(MAPK) 组成。已经鉴定出多种p44/42 MAP3K,包括Raf 家族成员,以及Mos 和Tpl2/COT。MEK1 和MEK2 是这个通路中的主要MAPKK (5,6)。MEK1 和MEK2 通过分别使活化环残基Thr202/Tyr204 和Thr185/Tyr187 磷酸化,从而激活p44 和p42。已经鉴定出p44/42 的几种下游靶标,包括p90RSK (7) 和转录因子Elk-1 (8,9)。p44/42 受双特异性(Thr/Tyr) MAPK 磷酸酶家族(称作DUSP 或MKP) (10) 以及MEK 抑制剂(如U0126 和PD98059)的负向调控。

特异性/灵敏度

Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP ® Rabbit mAb 可检测在Erk1 的Thr202 和Tyr204(Erk2 的Thr185 和Tyr187 )双磷酸化和在Thr202 单磷酸化后的内源水平的p44 和p42 MAP 激酶(Erk1 和Erk2)。该抗体不与JNK/SAPK 或p38 MAP 激酶的相应磷酸化残基发生交叉反应。

物种反应性:

人, 小鼠, 大鼠, 仓鼠, 猴, 貂, 黑腹果蝇, 斑马鱼, 牛, 犬, 猪, 酿酒酵母

产品使用信息

应用 稀释度
蛋白质印迹法 1:2000
免疫沉淀法 1:50
免疫组织化学(石蜡) 1:200 – 1:800
免疫荧光法(免疫细胞化学) 1:200 – 1:400
流式细胞术(固定/通透) 1:800 – 1:1600

支持性数据

反应性 HMR Hm Mk Mi Dm ZB Dg Pg Sc
灵敏度 内源性
MW (kDa) 44, 42
来源/同种型 兔IgG


磷酸化蛋白分析用——Phos-tag™ 系列产品


磷酸化蛋白分析用——Phos-tag™ 系列产品

磷酸化蛋白分析用——Phos-tag™ 系列产品




Phos-tag™是一种可特异性捕获磷酸化Ser、Thr、Tyr等物质的功能分子,由日本广岛大学大学院医齿药学综合研究科医学品分子机能科学研究室开发。以Phos-tag™ 丙烯酰胺(Phos-tag™ Acrylamide)为首开发的多种Phos-tag™ 产品被应用于世界范围内的基础研究,并且在GPCR通路及Wnt通路的信号转导分析方面也取得了优秀成果。

◆分离磷酸化蛋白!


在制备SDS-PAGE预制胶过程中加入Phos-tag™ Acrylamide,即可根据磷酸化水平和磷酸化位点分离磷酸化蛋白与非磷酸化蛋白。

原理


磷酸化蛋白分析用——Phos-tag™ 系列产品


1. 电泳中的磷酸化蛋白捕获2个二价金属离子。

2. 磷酸化水平越高电泳速度越慢。

3. 根据磷酸化水平进行分离。(即使磷酸化位点的数目相同,但只要位置不同就能分离)


特点

● 可检测市售抗磷酸化抗体无法检测的磷酸化蛋白。

● 可检测磷酸化水平及磷酸化位点。

● 可同时检测磷酸化与非磷酸化

Phos-tag™实验指导手册,点击此处查看

从制作Phos-tag™ SDS-PAGE预制胶开始,Phos-tag™ 相关信息一览


◆实验数据


① α-casein去磷酸化反应随时间的变化


磷酸化蛋白分析用——Phos-tag™ 系列产品

使用碱性磷酸酶随时间(孵育时间:0-120 min)处理α-casein(产品编号:038-23221),并使用Phos-tag™ SDS-PAGE和常规SDS-PAGE分离去磷酸化处理的样品。

② 野生型/突变型Noxa表达的MCL-1磷酸化水平变化

磷酸化蛋白分析用——Phos-tag™ 系列产品

使野生型(wt)及突变型(3E,KR,5A)的Noxa在肺小细胞癌细胞株H209细胞中表达,并进行细胞溶质(Cytosol)组分和HM(Heavy Membrane,含线粒体较多)组分分离。通过Phos-tag™ SDS-PAGE分离出样品中的MCL-1(40 kDa),使用抗MCL-1抗体进行Western blotting检测。


【数据提供】

日本医科大学 先进医学研究所 基因控制部门 中嶋亘

③ 二维电泳中的应用: hnRNP K异构体的磷酸化分析

磷酸化蛋白分析用——Phos-tag™ 系列产品

通过免疫沉淀法,从经LPS刺激后的小鼠巨噬细胞J774.1的细胞核提取液中,分离得到hnRNP K。在二维电泳中,一维使用IPG胶(pH 4.7-5.9),二维使用Phos-tag™ SDS-PAGE,分离hnRNP K的异构体(66 kDa,64 kDa)。使用质谱仪可以确认不同的点代表不同的异构体或修饰位点。


【数据提供】

横滨市立大学 生命纳米系统科学研究科 生物体超分子系统科学专业,木村弥生(Dr. Y. Kimura)、平野久(Dr. H. Hirano)理化学研究所RCAI 小原收

产品列表

产品编号

生产商编号

产品名称

包装

304-93521

AAL-107

Phos-tag Acrylamide AAL-107

Phos-tag™ 丙烯酰胺 AAL-107

10 mg

300-93523

AAL-107M

2 mg

304-93526

AAL-107S1

Phos-tag Acrylamide AAL-107 5 mM Aqueous Solution

Phos-tag™ 丙烯酰胺AAL-107 5 mM液体型

0.3 mL

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◆检测磷酸化蛋白!

 

Phos-tag™ Biotin

磷酸化蛋白分析用——Phos-tag™ 系列产品

Phos-tag™ Biotin是Phos-tag™ 分子与生物素结合的产品,无需使用抗磷酸化抗体即可检测与PVDF膜上的磷酸化蛋白。

本产品进需配合“HRP 结合亲和素”进行使用。

特点

● 结合与磷酸化种类无关

● 推荐用于检测无合适的抗磷酸化抗体的蛋白


产品列表

产品编号

生产商编号

产品名称

包装

301-93531

BTL-104

Phos-tag Biotin BTL-104

Phos-tag™ 生物素BTL-104

10 mg

308-97201

BTL-111S1

Phos-tag Biotin BTL-111 1 mM Aqueous Solution

Phos-tag™ 生物素1 mM水溶液

0.1 mL

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Phos-tag™ 凝胶荧光染料

Phos-tag™ 凝胶荧光染料,是一种可在生理 pH 范围内,对凝胶中的磷酸化蛋白进行染色的荧光染料。进行SDS-PAGE后,用本产品处理聚丙烯酰胺凝胶,可以对磷酸化蛋白进行特异性染色。本系列有波长不同的Yellow(黄)、Magenta(品红)、Cyan(蓝绿)、Aqua(浅绿)四种颜色。每管规格为0.2 mg,可对约20个迷你凝胶进行染色。

实验数据

磷酸化蛋白分析用——Phos-tag™ 系列产品

使用Phos-tag™ 荧光凝胶染色,筛选组氨酸激酶抑制剂。结果表明,激酶抑制剂对磷酸化存在浓度依赖性抑制。


【数据提供】

广岛大学大学院 医学科学研究科 医药分子机能科学研究室 木下惠美子,木下英司,小池透

产品列表

产品编号

生产商编号

产品名称

包装

382-15201

nPGS-A01

Phos-tag™ Aqua

Phos-tag™ 浅绿荧光染料

0.2 mg

389-15211

nPGS-C01

Phos-tag™ Cyan

Phos-tag™ 蓝绿荧光染料

0.2 mg

380-15241

nPGS-Y01

Phos-tag™ Yellow

Phos-tag™ 黄色荧光染料

0.2 mg

386-15221

nPGS-M01

Phos-tag™ Magenta

Phos-tag™ 品红荧光染料

0.2 mg

383-15231

nPGS-MR1

Mixed reagents for Phos-tag™ Common Solution 5×

Phos-tag™ 5×染色通用混合溶液

1个

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◆纯化磷酸化蛋白!


磷酸化蛋白分析用——Phos-tag™ 系列产品



产品列表

产品编号

生产商编号

产品名称

包装

385-20061

nMG-303

Phos-tag™ MG-Bead

100 μL

387-07321

AG2-103

Phos-tag™ Tip

Phos-tag™ 琼脂糖吸管

8支

302-93561

AG-501

Phos-tag™ Agarose*

Phos-tag™ 琼脂糖

0.5 mL

308-93563

AG-503

3 mL

*此产品由Manac Inc.生产并销售。

◆质谱分析磷酸化蛋白

Phos-tag™ 质谱分析用试剂盒(产品编号:305-93551)通过与MALDI-TOF/MS的样品进行混合,即用于磷酸化蛋白的质谱分析。本产品包含三种不同的分子量的Phos-tag™ 分子。

磷酸化蛋白分析用——Phos-tag™ 系列产品

产品列表

产品编号

生产商编号

产品名称

包装

305-93551

MS-101KIT

Phos-tag Mass Analytical Kit

Phos-tag™ 质谱分析试剂盒

1套


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※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。

磷酸化α- 突触核蛋白抗体(pSyn#64)

  • 产品特性
  • 相关资料
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  • 参考文献

磷酸化α- 突触核蛋白抗体(pSyn#64)磷酸化α- 突触核蛋白抗体(pSyn#64)


在帕金森病和路易小体痴呆(DLB)等神经系统变性病患者的神经细胞中发现的路易小体,含有丝氨酸 129 位残基被特异性磷酸化的 α-突触核蛋白。磷酸化α- 突触核蛋白抗体(pSyn#64)(Code No.:015-25191和正常的 α- 突触核蛋白不发生反应,只识别聚集的磷酸化 α- 突触核蛋白。另可提供生物素标记的抗体(010-26481)。

 


◆基本信息


溶液:含有血清的培养基上清、0.05% Sodium Azide

克隆号:pSyn#64

亚型:Mouse IgG

抗原:丝氨酸126被磷酸化的人 α- 突触核蛋白的 124-134 残基

保存条件:-20℃

特异性:人,大鼠,小鼠

稀释倍数:免疫组织染色(1:1,000~10,000)Western blot (1:1,000~10,000)



◆特点

 ● 已标记,无需二抗

 ● 低背景

 ● 免疫染色应用



使用案例(免疫染色)


磷酸化α- 突触核蛋白单抗(pSyn#64)

磷酸化α- 突触核蛋白抗体(pSyn#64)

使用本产品进行的路易小体痴呆的脑切片免疫组织染色。病变部位的路易小体被特异性染色。


磷酸化α- 突触核蛋白单抗(pSyn#64),生物素结合


磷酸化α- 突触核蛋白抗体(pSyn#64) 磷酸化α- 突触核蛋白单抗(pSyn#64)生物素结合
磷酸化α- 突触核蛋白抗体(pSyn#64)

酸化α- 突触核蛋白单抗(pSyn#64)(Code No.:015-25191)+生物素标记2抗


→与使用2抗相比,背景更低,染色更清晰。


 实验条件
 ○ 样品:6月龄的野生型小鼠,已注入聚集的α-突触核蛋白的大脑纹状体
 ○ 切片:50 μm 厚
振动切片
 ○ 染色法:ABC法 + DAB 染色
 ○ 抗体浓度:1/1,000 

◆特性

磷酸化 α-突触蛋白单抗(pSyn#64),
  生物素结合

标记物

生物素

抗原

合成肽(S129 磷酸化的人 α-突出核蛋白的 124-134 序列)

缓冲液

PBS,含0.05%叠氮化钠

类别

小鼠IgG

物种交叉反应性

小鼠、大鼠、人

应用

免疫组织染色(1:200-5,000)


数据来源:东京大学大学院医学系研究课 桑原先生、岩坪先生。


◆产品列表


产品编号 产品名称 规格 包装
015-25191 Anti Phosphorylated α-Synuclein, Monoclonal Antibody (pSyn#64)
抗磷酸化α-突触核蛋白单克隆抗体 (pSyn#64)
免疫化学用 50 μL
010-26481 Anti Phosphorylated α-Synuclein, Monoclonal Antibody(pSyn#64), Biotin-conjugated
磷酸化α-突触核蛋白单克隆抗体(pSyn#64),生物素
免疫化学用 50 μL


◆相关产品


产品编号 产品名称 规格 包装
190-17941 α-Synuclein, Human, recombinant
    α-突触核蛋白,人,重组体
细胞生物学用 0.5 mg
197-17951 β-Synuclein, Human, recombinant
    β-突触核蛋白,人,重组体
细胞生物学用 0.5 mg
194-17961 γ-Synuclein, Human, recombinant
    γ-突触核蛋白,人,重组体
细胞生物学用 0.5 mg
019-19741 Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)
小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(免疫组化)
免疫化学用 50 μg
016-20001 Anti Iba1, Rabbit (for Western Blotting)
    小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(免疫印迹)
免疫化学用 50 μg
016-26461 Anti Iba1, Rabbit, Biotin-conjugated
    小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(结合生物素)
免疫化学用 100 μL
013-26471 Anti Iba1, Rabbit, Red Fluorochrome(635)-conjugated
    小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(结合红色荧光素635)
免疫化学用 100 μL

 

 

 ※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。

磷酸化α- 突触核蛋白抗体(pSyn#64)

磷酸化α- 突触核蛋白抗体(pSyn#64)

产品编号

品名

应用/级别

规格

描述

015-25191

磷酸化α- 突触核蛋白 抗体(pSyn#64)

免疫化学用

50 μL

017-15881

ABC 溶液

免疫组织染色用

10 mL

本产品不需要ABC 的配制,经稳定化处理,可短时间内进行免疫组织染色。并且使用来源于微生物的链霉抗生物素蛋白,可有效抑制非特异性反应。

161-20141

4% Paraformaldehyde Phosphate Buffer

Solution

4%多聚甲醛磷酸盐缓冲液

组织固定用

100 mL

酵素组织化学、免疫组织化学用,并且可以作为电子显微镜检测用固定液使用。在进行免疫染色时,用于蛋白质抗原的固定。

163-20145

500 mL

066-00461

Formic Acid

甲酸

特级

100 mL

作为制作显微镜切片脱钙剂使用。作为1~10% 或50% 的乙醇溶液或3~5% 左右的水溶液使用。

143-06561

山羊血清

免疫化学用

10 mL

用于组织染色的封闭。使用浓度:10%山羊血清 溶于PBS/TBS 中。

049-22831

DAB 片

生化学用

50 块

作为免疫组织染色时的HRP 显色基质使用。本产品把具有致癌性和不易操作的DAB・4HCl 制成片剂,只需要放入水中便可使用。

045-22833

100 块

136-16381

1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine

Hydrochloride

细胞生物学用

10 mg

细胞生物学用

132-16981

Memantine Hydrochloride

细胞生物学用

25 mg

谷氨酸受体拮抗剂,可以阻断谷氨酸浓度病理性升高。

138-16983 

100 mg

028-14511

Benserazide Hydrochloride

盐酸苄丝肼

生化学用

1 g

多巴脱羧酶抑制剂

024-14513

5 g

022-14771

Biperiden Hydrochloride

盐酸安克痉

生化学用

500 mg

有中枢抗胆碱作用。

028-14773

5 g

  

  [1]  

Fujiwara, H., Hasegawa, M., Dohmae, N., Kawashima, A.,Masliah, E., Goldberg, S. M., Shen, J., Takio,K.  and Iwatsubo,T. : Nature Cell Biology, 4, 160, (2002)


 [2]  

Saito, Y., Kawashima, A., Ruberu, N. N., Fujiwara, H.,Koyama, S. , Sawabe, M. , Arai , T. , Nagura, H., Yamanouchi, H., Hasegawa, M., Iwatsubo, T. and Murayama,S. : Journal of  Neuropathology and Experimental Neurology,62, 644 (2003)

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级