逆转录病毒载体是常用的病毒载体之一。转入宿主的细胞后，反转录病毒载体随即整合到宿主细胞基因组内，这种整合的位点是随机的。逆转录病毒载体就可利用这些外壳蛋白包装成病毒颗粒在辅助细胞系内大量扩增。当通过纯化提取获得重组逆转录病毒颗粒后，需要对病毒液的浓度或感染活性进行定量检测。

一般来说，对于病毒颗粒进行定量主要是通过检测纯化的病毒液中DNA的OD260来检测其病毒含量（Quantitation）；而对于病毒颗粒的滴度检测（Titer），则需要通过传统的克隆成斑试验或者对病毒特异蛋白的免疫反应试验等检测。Cell Biolabs为逆转录病毒的定量提供了QuickTiter™快速检测方案。

QuickTiter™逆转录病毒快速定量试剂盒采用了专利的捕获胶技术，能专门结合逆转录病毒颗粒，从而大大缩减试验时间，并提高定量的准确度。其定量试剂盒都能对已经纯化的和未纯化的病毒液进行检测。基本的试验大概程序如下：收集病毒上清，使用核酸酶裂解其中的DNA和RNA杂质，剩下的为病毒颗粒、蛋白及蛋白复合物，然后使用捕获胶吸附上病毒颗粒从而分离出来，洗脱下来后，对逆转录病毒颗粒变性分别获得病毒蛋白及病毒核酸，使用荧光染料标记核酸后进行定量分析。

Cell Biolabs独有的QuickTiter™ 逆转录病毒快速定量试剂盒通过检测逆转录病毒DNA含量来测定其滴度，可以快速定量已纯化或未纯化的逆转录病毒，通过480/520 nm滤镜荧光仪下读取数据，对照腺标准曲线得出滴度。可以在45-60min内获得数据，检测灵敏，能有效检测1.5 X 10⁹ Viral Particles (VP)/mL浓度内的逆转录病毒，可做20次。

美国著名细胞产品公司Cell BioLabs为逆转录病毒研究人员提供完备的重组逆转录病毒表达系统及其相关产品和服务，产品包括逆转录病毒的最新一代表达系统，针对逆转录病毒滴度低的软肋而专门设计的逆转录病毒浓缩纯化试剂盒，逆转录病毒的快速定量，以及逆转录病毒高效转染试剂和用于包装重组逆转录病毒的包装细胞系等，几乎覆盖反转录病毒研究中的所有技术环节。如果您对上述逆转录病毒包装细胞系感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

逆转录病毒载体是常用的病毒载体之一。反转录病毒载体可以容纳外源DNA的长度在10kb左右，以很高的转染率感染宿主细胞，特别是分裂中的细胞，如干细胞等。反转录病载体多半用于基因治疗，由于病毒载体在宿主细胞基因组上随机插入，人们担心会引起不安全的后果，这种载体还在不断改进之中。

常规的逆转录病毒纯化一般采用超速密度离心法（利用不同大分子，如DNA、蛋白、病毒颗粒、细胞碎片等具有不同的密度进行梯度离心而分离出来的原理）分离病毒颗粒，但是耗时耗力。而且，逆转录病毒的低滴度一直是其软肋。Cell Biolabs为此研制出的拥有专利技术的ViraBind™ 逆转录病毒纯化试剂，再结合新型的纯化装置，能在4-6小时内，每次能将100ml病毒上清纯化500-1000倍，从而获得10⁹-10¹⁰TU/ml感染滴度的逆转录病毒颗粒。采用该Kit纯化获得的逆转录病毒液，不含有游离的包装蛋白以及转导抑制物，因此非常有利于后继的逆转录病毒操作。

Cell Biolabs提供两种逆转录病毒纯化方案，一种是用纯化柱装置，另一种是PLUS的采用透析柱装置。前者纯化过程快速，只需3小时；后者采用了透析柱装置，时间上要过夜透析，但是纯度很高。具体纯化步骤及大概区别如下图所示：

Cell Biolabs逆转录病毒浓缩纯化试剂盒中普通纯化逆转录病毒Kit每次纯化100ml，分2次/5次/25次三种规格；PLUS纯化Kit分中提（50ml每次）和大提（500ml每次），中提包装可使用2次，大提又分为2次和10次。每次能将100ml病毒上清纯化500-1000倍，从而获得10⁹-10¹⁰TU/ml感染滴度的逆转录病毒颗粒。采用该Kit纯化获得的逆转录病毒液，不含有游离的包装蛋白以及转导抑制物，因此非常有利于后继的逆转录病毒操作。

美国著名细胞产品公司Cell BioLabs为逆转录病毒研究人员提供完备的重组逆转录病毒表达系统及其相关产品和服务，产品包括逆转录病毒的最新一代表达系统，针对逆转录病毒滴度低的软肋而专门设计的逆转录病毒浓缩纯化试剂盒，逆转录病毒的快速定量，以及逆转录病毒高效转染试剂和用于包装重组逆转录病毒的包装细胞系等，几乎覆盖反转录病毒研究中的所有技术环节。如果您对上述逆转录病毒包装细胞系感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

逆转录（也成为反转录病毒，Retrovirus）病毒载体是常用的病毒载体之一。转入宿主的细胞后，反转录病毒载体随即整合到宿主细胞基因组内，这种整合的位点是随机的。反转录病毒载体就可利用这些外壳蛋白包装成病毒颗粒在辅助细胞系内大量扩增。反转录病毒载体可以容纳外源DNA的长度在10 kb左右，以很高的转染率感染宿主细胞，特别是分裂中的细胞。

逆转录病毒通过整合进目的细胞基因组，能实现持久的表达，而且几乎没有免疫原性，因此很受欢迎。特别是和腺病毒相比，其能整合进基因组的优势导致逆转录病毒也被广泛应用，然后逆转录病毒系统也存在一定的缺陷，首先是安全性比较低，因为所有包装所需的基因都放到一个载体上，还有就是基因能整合进目的细胞也可能会导致细胞基因组的紊乱，而且其滴度比较低。由于逆转录病毒表达系统的特殊性，其包装细胞的种类较多，表达载体的种类也较多，因此需要根据不同的实际来选择合适的表达系统。Cell Biolabs的逆转录病毒表达产品包括包装细胞系、表达系统（同时包括了包装细胞和表达质粒载体）、逆转录病毒表达质粒以及插入了目的基因的重组逆转录病毒表达质粒。

Cell Biolabs提供三种铂金版逆转录病毒包装细胞系：单嗜性（Ecotropic）Plat-E包装细胞系、双嗜性（Amphotropic）Plat-A包装细胞系及泛嗜性（Pantropic）Plat-GP包装细胞系。它们对不同的细胞具有不同的侵染性。

Plat-E包装细胞系（Ecotropic）是一种来源于人胚肾(Human Embryonic Kidney, HEK)293细胞系,主要用于快速、短暂地产生高滴度逆转录病毒，同时也能用于稳定地产生逆转录病毒。由Plat-E包装细胞系产生的病毒表达一种单嗜性的被膜，因而只能感染小鼠和大鼠细胞。Plat-GP包装细胞系（Pantropic）也来源于HEK293，但却是一种泛嗜性的包装细胞系，其包装产生的逆转录病毒颗粒既能感染哺乳动物细胞，也能感染非哺乳动物细胞。在使用过程中, Plat-GP细胞需要用逆转录病毒载体和pVSV-G来共转染。VSV-G是泡状口炎病毒(Vesicular Stomatitis Virus) 的被膜糖蛋白，能通过脂质结合及质膜融合来介导病毒进入细胞。因此在使用Plat-GP细胞系时，还需要额外的使用pVSV-G完成包装。Plat-A包装细胞系（Amphotropic）也是一种来源于HEK293细胞的细胞，在将病毒env 基因导入该细胞时利用嘌呤霉素作为选择标记，因而对于一些使用嘌呤霉素作为筛选标记的载体无法使用。

一般来说，Plat-E是最常用的逆转录病毒包装细胞；Plat-GP则是适用性最广的逆转录包装细胞（但是需要多增加一个表达载体pVSV-G Packaging Vector提供外壳蛋白VSV-G，该外壳蛋白宿主范围非常广）；Plat-A用的比较少，但是其宿主范围比Plat-E要多一些，比如可应用于人、猴、狗来源的细胞等。

美国著名细胞产品公司Cell BioLabs为逆转录病毒研究人员提供完备的重组逆转录病毒表达系统及其相关产品和服务，产品包括逆转录病毒的最新一代表达系统，针对逆转录病毒滴度低的软肋而专门设计的逆转录病毒浓缩纯化试剂盒，逆转录病毒的快速定量，以及逆转录病毒高效转染试剂和用于包装重组逆转录病毒的包装细胞系等，几乎覆盖反转录病毒研究中的所有技术环节。如果您对上述逆转录病毒包装细胞系感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

慢病毒载体与其他表达载体相比，较大的优势是它们能感染分裂和非分裂的细胞。这对于众多干细胞和难转染细胞的研究者而言，可谓是一根及时的救命稻草，能解决令人头疼的转染效率低的问题。然而慢病毒本身的转染效率也不是很高。对于一些特殊的细胞类型，一般的转导方法效率是比较低的，甚至于无法实现成功转导。比如干细胞、原代培养细胞等等。由于这样的细胞很难获得，或者非常珍贵，因此在进行基因转导的时候，高效的病毒转导是最优的选择。

在慢病毒转染细胞的过程中最重要的一步是融合，只有一小部分慢病毒载体才能转导进细胞，因此，病毒颗粒的吸附是慢病毒转染的限速步骤。在慢病毒的转染试验中，多聚阳离子，如聚凝胺®（Polybrene®）由于被发现能促进转染的效率被应用于慢病毒的转染，其作用机理可能是通过中和细胞与病毒颗粒之间的静电排斥而促进它们之间的贴附。然而即使采用聚凝胺®（Polybrene®）作为慢病毒转染试剂，在一些细胞类型中的转染效率也不甚理想。

美国著名细胞产品公司Cell BioLabs为慢病毒研究人员提供完备的重组慢病毒表达系统及其相关产品和服务，产品包括慢病毒的最新一代表达系统，针对慢病毒滴度低的软肋而专门设计的慢病毒浓缩纯化试剂盒，慢病毒的滴度滴定及定量，以及慢病毒高效转染试剂和慢病毒宿主细胞等，几乎覆盖慢病毒研究中的所有技术环节。其ViraDuctin™ 慢病毒高效转染试剂（ViraDuctin™ Lentivirus Transduction Kit）能大大提高慢病毒转染效率，比Polybrene（聚凝胺）效率提高2-6倍，对于难转染的细胞，如原代细胞和干细胞效果良好。

该慢病毒转染试剂分40和200次两种包装规格（以24孔板内一个孔为一次），独有的慢病毒高效转染技术，使用了Cocktail的组合试剂能有效的去除慢转录病毒上清中降低转染效率的抑制物。能有效的提高转染效率，适用于原代细胞和干细胞。该Kit也能应用于逆转录病毒的转染。

美国著名细胞学试剂专家Cell BioLabs为您提供全套的慢病毒技术解决方案，ViraSafe™ 最新一代慢病毒表达系统有多种样式供您选择，ViraBind™ 慢病毒浓缩&纯化试剂盒采用了专利技术能让你获得更高滴度和纯度的慢病毒，QuickTiter™ 慢病毒系列提供传统和专利技术的p24不同ELISA检测方法，同时还有采用OD260方法快速定量慢病毒的方案；Cell BioLabs还有专为慢病毒载体用的293LTV细胞及高效转染试剂供您选择，如果您对慢病毒产品感兴趣，请请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询慢病毒相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。