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琼脂糖结合番茄（番茄）凝集素（LEL，TL）

发表于由

琼脂糖结合番茄（番茄）凝集素（LEL，TL） 货号： AL-1173-2 品牌： Vectorlabs 标签： 免疫学研究

描述

Agarose bound Lycopersicon Esculentum (Tomato) Lectin (LEL, TL)

琼脂糖结合番茄（番茄）凝集素（LEL，TL）

 

基本信息

琼脂糖结合番茄（番茄）凝集素（LEL，TL）

产品特征
  基质是热稳定的，交联的4％琼脂糖小珠，分子溶出度约为2×10 7道尔顿
  磁珠直径范围为45-165微米
  基质在pH 3-11的溶液以及许多有机溶剂中均稳定
  使用亲和纯化的凝集素制备固定化的凝集素
  共价连接可保留凝集素活性并最大程度减少可能导致非特异性或疏水相互作用的构象变化
  将亲水性间隔臂插入凝集素和基质之间
  Tris或其他常规使用的缓冲液不会将结合的蛋白质从微珠上浸出
  共轭后无残留电荷。这将与基质的非特异性结合减至最少
  产品以1：1悬浮液的形式提供在缓冲液中
  2 mg凝集素/ ml凝胶
  抑制/洗脱糖：几丁质水解产物或糖蛋白洗脱溶液（ES-5100）

 

更多信息
番茄凝集素是一种非常稳定的单一亚基糖蛋白，含有约50％的阿拉伯糖和半乳糖，并可能在溶液中形成多聚体聚集体。番茄凝集素尽管与马铃薯凝集素，曼陀罗凝集素和小麦胚芽凝集素具有某些特异性，但据报道在许多方面都不同。LEL与糖蛋白和Tamm-Horsfall糖蛋白结合良好，已被有效地用于标记啮齿动物的血管内皮。

琼脂糖结合*番茄凝集素是使用我们的亲和纯化的凝集素制备的。分子量排阻极限为约2×10 7道尔顿的热稳定的交联的4％琼脂糖珠粒用作凝集素共价偶联的固相基质。严格控制凝集素在珠子上的附着，以保持凝集素活性并使结合的凝集素的构象变化最小化，这可能导致非特异性离子或疏水相互作用。我们开发的将凝集素与琼脂糖珠偶联的技术在凝集素和基质之间插入了亲水性间隔臂。

与传统的溴化氰步骤相比，这种偶联方法具有以下优点：

  保留了偶联凝集素的最大碳水化合物结合活性
  链接在一定的pH值范围内是稳定的
  Tris或其他常规使用的缓冲液不会将结合的蛋白质从微珠上浸出
  结合后不存在残余电荷。这使与基质的非特异性结合最小化。

Vector的琼脂糖结合的凝集素以每毫升沉降珠的恒定浓度的凝集素提供。选择每种凝集素的浓度以达到珠中存在的每毫克凝集素的最高糖缀合物结合能力。使用已知结合凝集素的糖蛋白测试每批的结合能力。这为用户提供了指南，并确保了我们的琼脂糖结合凝集素的质量。

规格信息

品牌：

Vectorlabs
CAS：

N/A
规格：

2ml
货期：

现货3天 期货30天

AGAROSE ERYTHRINA CRISTAGALLI LECTIN (2ml) Erythrina Cristagalli凝集素（ECL，ECA）

发表于由

AGAROSE ERYTHRINA CRISTAGALLI LECTIN (2ml) Erythrina Cristagalli凝集素（ECL，ECA） 货号： AL-1143-2 品牌： Vectorlabs 标签： 免疫学研究

描述

用4％琼脂糖珠制备琼脂糖结合的赤藓菌（Erythrina cristagalli）凝集素。 Erythrina cristagalli lectin由大约28 kDa和26 kDa的两个不同的亚基组成。ECL所结合的碳水化合物结构经常在哺乳动物来源的膜和血清糖蛋白中发现。特征

  • 基质是热稳定的，交联的4％琼脂糖小珠，分子溶出度约为2×10 7道尔顿
  • 磁珠直径范围为45-165微米
  • 基质在pH 3-11的溶液以及许多有机溶剂中均稳定
  • 使用亲和纯化的凝集素制备固定化的凝集素
  • 共价连接可保留凝集素活性并最大程度减少可能导致非特异性或疏水相互作用的构象变化
  • 将亲水性间隔臂插入凝集素和基质之间
  • Tris或其他常规使用的缓冲液不会将结合的蛋白质从微珠中浸出
  • 共轭后无残留电荷。这样可以最大程度地减少与基质的非特异性结合
  • 产品以1：1悬浮液的形式提供在缓冲液中
  • 抑制/洗脱糖：200 mM乳糖或糖蛋白洗脱溶液（ES-1100）

技术指标

更多信息
单位大小 2毫升
应用领域 糖生物学，亲和色谱
推荐的存储 2-8°C请勿冻结
解 的10mM HEPES，pH 7.5中，0.15M的NaCl，0.1mM的氯化钙2，20mM的乳糖，0.08％叠氮化钠
推荐用法 使用前，用缓冲液彻底清洗凝胶，以除去添加的稳定凝集素的糖。洗脱与该琼脂糖凝集素结合的糖缀合物的推荐产品：糖蛋白洗脱液，目录 第ES-2100号。或者，可以使用0.2 M乳糖。使用后，用数倍柱体积的缓冲盐水洗涤凝胶，然后将凝胶重悬在含有0.08％叠氮化钠的缓冲盐水中进行保存。
矩阵共轭 凝集素
糖特异性 半乳糖，N-乙酰半乳糖，乳糖
共轭 琼脂糖

技术信息

在该结构上的唾液酸取代似乎阻止了凝集素结合。这种特异性为利用琼脂糖结合的ECL分离或分离哺乳动物糖蛋白提供了机会。据报道该凝集素可用于通过负选择淘选技术（协议可根据要求或在我们的网站上获得）分离人自然杀伤（NK）细胞。人NK细胞似乎缺乏结合ECL所需的可及的表面碳水化合物结构，并且与其他单核细胞不同，它们不粘附于ECL包被的培养皿。由于此过程涉及负选择淘选技术，因此可以获得高回收率的存活NK细胞。贴壁细胞也可以通过在半乳糖或乳糖中孵育来回收。使用我们的亲和纯化的凝集素可制备琼脂糖结合*的刺桐（Erythrina cristagalli）凝集素。具有约2×10 7道尔顿的分子量排除极限的热稳定的交联的4％琼脂糖珠粒用作凝集素共价偶联的固相基质。严格控制凝集素在珠子上的附着，以保持凝集素的活性并使结合的凝集素的构象变化最小化，这可能导致非特异性离子或疏水相互作用。我们开发的将凝集素与琼脂糖珠偶联的技术在凝集素和基质之间插入了亲水性间隔臂。* 3 mg凝集素/ ml凝胶与传统的溴化氰步骤相比，这种偶联方法具有以下优点：

  • 保留了偶联凝集素的最大碳水化合物结合活性
  • 链接在一定的pH值范围内是稳定的
  • Tris或其他常规使用的缓冲液不会将结合的蛋白质从微珠中浸出
  • 共轭后不存在残余电荷。这使与基质的非特异性结合最小化。

我们的琼脂糖结合凝集素以每毫升沉降珠恒定浓度的凝集素提供。选择每种凝集素的浓度以达到珠中存在的每毫克凝集素的最高糖缀合物结合能力。使用已知结合凝集素的糖蛋白测试每批次的结合能力。这为用户提供了指南，并确保了我们的琼脂糖结合凝集素的质量。

规格信息

品牌：

Vectorlabs
CAS：

N/A
规格：

2ml
货期：

现货3天 期货30天

试剂怎么用——琼脂糖

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试剂怎么用——琼脂糖

试剂怎么用——琼脂糖




试剂怎么用——琼脂糖

即使是为同一目的所用的试剂种类繁多，同一物质也会有不同的浓度、纯度、规格。

因此，经常有研究人员向我们问到“不知道哪一种适合自己的实验”等。

为了解决这样的问题，小光老师将介绍一些正确区分使用FUJIFILM Wako品牌试剂的方法。

◆琼脂糖

应用于核酸电泳的琼脂糖是从石花菜、江蓠等红藻中所提取的高纯度琼脂。

琼脂糖虽在分子生物学实验中较为常见，但其实种类繁多。为选择适合实验目的的琼脂糖，需检查以下项目。


● 凝胶强度

琼脂糖凝胶破裂所需的载荷用（g/cm2）来表示。标准琼脂糖约为≧1,200 g/cm2（浓度1.5%，Nippon Gene Agarose S）。分离高分子核酸时，需要使用低浓度琼脂糖，因此使用高凝胶强度的琼脂糖可更有效地制备凝胶。反之，在分离低分子核酸时，则使用凝胶强度低的琼脂糖。


● 熔点

琼脂糖凝胶融化的温度。标准琼脂糖的熔点在90°C左右，可通过引入羟乙基来降低熔点。这种低熔点型琼脂糖比双链DNA的变性温度要低，加热至65°C左右即会熔化，因此应用于DNA回收等。低熔点琼脂糖的胶凝化温度也比其他琼脂糖低。


● 硫酸含量

应用于电泳的琼脂糖由琼脂糖和琼脂胶组成，杂质琼脂胶中含有硫酸基团。因此，琼脂糖标准品中的硫酸含量表示琼脂糖的纯化程度，高纯度琼脂糖的硫酸含量表示为≤0.1-0.2%。


● 电渗度

琼脂糖因带有硫酸基等而带负电，接触的缓冲液带正电，两者极性相反。在这种状态下进行电泳时，带正电的缓冲溶液向阴极移动。这种现象称为电渗，也是琼脂糖凝胶电泳中迁移缓慢的原因。因此，一般使用电渗度低的琼脂糖进行电泳。

Nippon Gene Agarose 产品系列及正确使用方法

产品名

产品编号

凝胶强度

熔点

胶凝温度

硫酸含量

电渗度

分离范围

使用浓度范围

用途

Agarose S

318-01195

≧1,200g/cm2

（1.5%）

≦90℃（1.5%）

37-39℃（1.5%）

≦0.1%

≦0.1

0.5-30kbp

0.5-2%

标准琼脂糖。可制备的凝胶浓度范围广，成本低。

Agarose HS

312-01431

≧1,600g/cm2

（1.5%）

≦93℃（1.5%）

37-39℃（1.5%）

≦0.1%

≦0.1

0.5-30kbp

0.5-2%

凝胶强度高，Southern印迹的理想选择。

Agarose H

312-01431

≧2,600g/cm2

（1.5%）

Boil（1.5%）

37-39℃（1.5%）

≦0.2%

≦0.2

1-200kbp

0.2-1%

可制备高凝胶强度、低浓度的凝胶。分离高分子量核酸的理想选择。

Agarose XP

316-06515

≧450g/cm2

（1.5%）

≦65℃（1.5%）

≦30℃（1.5%）

≦0.1%

≦0.1

0.01-20kbp

1-4%

低熔点琼脂糖。凝胶温度低，容易回收核酸。

Agarose 21

319-03244

≧800g/cm2

（3%）

≦85℃（3%）

34-38℃（3%）

≦0.1%

≦0.1

0.01-1.0kbp

2-5%

溶解性优异，可制备高浓度凝胶。分离小分子核酸的理想选择。

Agarose X

313-02681

≧1,200g/cm2

（4%）

≦92℃（4%）

31-39℃（4%）

≦0.15%

0.06-0.14

0.01-1.0kbp

2-6%

溶解性优异，可制备高浓度凝胶。凝胶强度高于Agarose   21。

【参考文献】


1）電気泳動学会 編：「新版 電気泳動実験法」（文光堂）（1989）．

2）大藤道衛 編：「電気泳動なるほどQ&A」（羊土社）（2007）．

3）Green, R. M. and Sambrook, J.： ”Molecular Cloning A Laboratory Manual, 4th ed.”, Cold Spring Harbor Laboratory Press（2012）．