• 预包被 96 孔微孔板

• 标准

• 标准稀释缓冲液

• 洗涤缓冲液

• 检测试剂A

• 检测试剂B

• 稀释剂A

• 稀释液B

• TMB底物

• 停止解决方案

• 封板机

• 37°C培养箱

• 多道和单道移液器以及无菌移液器吸头

• 喷射瓶或自动微孔板清洗机

• 1.5毫升管

• 蒸馏水

• 吸附滤纸

• 100 毫升和 1 升量筒

• 酶标仪（波长：450 nm）

• ELISA 摇床

• 1) 标准品：用推荐体积的标准品稀释缓冲液配制标准品，制成标准品溶液。然后按照实验方案中的说明，使用标准稀释缓冲液对标准溶液进行系列稀释。

• 2) 洗涤缓冲液：按照实验方案中的说明，用蒸馏水稀释浓缩的洗涤缓冲液。

• 3) 检测试剂配制：计算所需工作液的总体积。分别用稀释液A和稀释液B按1:100稀释检测试剂A和检测试剂B。

• 1) 设置标准品、测试样品和对照孔。

• 2) 将 50 µl 稀释标准品等分到标准孔中。

• 3) 将 50 µl 标准稀释缓冲液等分到对照（零）孔中。

• 4) 将 50 µl 稀释样品等分到样品孔中。

• 5) 立即向每个孔中分装 50 µl 检测试剂 A。 37°C 孵育 1 小时。

• 6）洗涤3次。

• 7) 将 100 µl 检测试剂 B 分装到每个孔中。 37°C 孵育 30 分钟。

• 8）洗涤5次。

• 9) 将 90 µl TMB 底物等分到每个孔中。 37°C 孵育 10-20 分钟。

• 10) 等分 50 µl 终止液。

• 11) 测量 450 nm 处的 OD。

• 使用前将套件组件和样品平衡至室温 (18 – 25 °C)。建议为每次测试绘制标准曲线。

• 1. 在预涂板上分别设置标准孔、测试样品孔和对照（零）孔，然后记录它们的位置。建议测量每个标准品和样品至少一式两份。

• 2. 将 50 µL 每种标准品、对照品和样品添加到相应的孔中。

• 3. 取下盖子并倒掉液体。

• 4. 立即分装 50 µl 检测试剂 A 工作溶液。用盖子密封板并在 37°C 下孵育 1 小时。

• 5. 取下盖子并丢弃溶液。用 1X 清洗缓冲液清洗板 3 次。

• 6. 每孔加入100 µL 检测试剂B 工作液，密封并在37°C 下孵育30 分钟。

• 7. 弃去溶液并按照上一步骤中的说明用洗涤缓冲液洗涤板 5 次。

• 8. 将 90 µl TMB 底物等分到每个孔中。用盖子密封板并在 37°C 下孵育 10-20 分钟。避免暴露在光线下。孵育时间仅供参考，最佳时间应由最终用户确定。不要超过 30 分钟。

• 9. 在每个孔中添加 50 µL 终止溶液。立即在 450 nm 处读取。

范围和灵敏度可能会发生变化。请联系我们获取最新的产品信息。为了获得准确的结果，样品浓度必须稀释至试剂盒的中间范围。如果您需要特定范围，请提前联系我们或在订单备注中写下您的要求。

请注意，我们的 ELISA 和 CLIA 试剂盒针对天然样品而非重组蛋白的检测进行了优化。我们无法保证重组蛋白的检测，因为它们可能与天然蛋白具有不同的序列或三级结构。