标签归档：潮霉素

提供PhytoTech潮霉素B-特价促销

发表于由

促销时间：2014-6-3至2014-7-31
更多优惠与惊喜请致电上海金畔进行咨询，热线021-50837765.
中文名称：潮霉素B
英文名称：Hygromycin B
CAS：31282-04-9
潮霉素B(Hygromycin B) 是一种由吸水链霉菌（Streptomyces hygroscopicus）产生的抗生素，是氨基糖苷类抗生素之一，为微黄褐色粉末。潮霉素B可通过抑制细菌、真菌和一些高等真核生物细胞内的蛋白质生物合成来杀死这些生物。[1]潮霉素B可溶于甲醇、乙醇和水，但在乙醚、氯仿或苯中都几乎不溶。
作用机理
潮霉素B与大多数氨基糖苷类抗生素一样，通过抑制蛋白质的合成来阻止微生物生长。它可以稳定核糖体大亚基上的tRNA结合位点，导致空载tRNA不能脱离核糖体，抑制了翻译的继续进行，潮霉素的抑制作用对于原核细胞与真核细胞的核糖体都是有效的。
在研究中的用途
在实验室中，潮霉素B被用于选择和保持拥有潮霉素抗性基因的原核和真核细胞。潮霉素抗性基因编码一个激酶（潮霉素激酶），它通过磷酸化潮霉素B使其失活。自从潮霉素的抗性基因被发现以来，潮霉素B就被用来作为转基因实验中的标准筛选方法。目前植物组织培养中常用潮霉素B进行筛选。

促销时间：2014-6-3至2014-7-31
更多优惠与惊喜请致电上海金畔进行咨询，热线021-50837765.
中文名称：潮霉素B
英文名称：Hygromycin B
CAS：31282-04-9
潮霉素B(Hygromycin B) 是一种由吸水链霉菌（Streptomyces hygroscopicus）产生的抗生素，是氨基糖苷类抗生素之一，为微黄褐色粉末。潮霉素B可通过抑制细菌、真菌和一些高等真核生物细胞内的蛋白质生物合成来杀死这些生物。[1]潮霉素B可溶于甲醇、乙醇和水，但在乙醚、氯仿或苯中都几乎不溶。
作用机理
潮霉素B与大多数氨基糖苷类抗生素一样，通过抑制蛋白质的合成来阻止微生物生长。它可以稳定核糖体大亚基上的tRNA结合位点，导致空载tRNA不能脱离核糖体，抑制了翻译的继续进行，潮霉素的抑制作用对于原核细胞与真核细胞的核糖体都是有效的。
在研究中的用途
在实验室中，潮霉素B被用于选择和保持拥有潮霉素抗性基因的原核和真核细胞。潮霉素抗性基因编码一个激酶（潮霉素激酶），它通过磷酸化潮霉素B使其失活。自从潮霉素的抗性基因被发现以来，潮霉素B就被用来作为转基因实验中的标准筛选方法。目前植物组织培养中常用潮霉素B进行筛选。

产品名称

货号

规格

原目录价

促销价格

HYGROMYCIN B‐‐50 mg/mL PBS 潮霉素B

H370

10×1ML

2155

1213

HYGROMYCIN B‐‐1000 UNIT POWDER潮霉素 B

H397

1G

1523

1033
Phytotech作为美国第一，全球第二的植物组培试剂生产商，公司从1997 年成立不断发展壮大，服务于全世界各研究院所，生产研发企业等。
主要优势有：
1. 全球很早通过ISO 9001:2000 质量体系认证的组培试剂生产商；
2. 拥有超过30 年的植物组培产品开发经验；
3. 全部产品通过植物组培验证；
4. 近千种产品供选择，满足组培的各种需求；
5. 部分产品直供Sigma，远销全球。
主要产品有：
培养基：应用于水稻、玉米、大豆、木本及兰花等专用培养基，如MS、B5、N6、WPM、LS 等;
植物凝胶：不同级别的琼脂、结冷胶、卡拉胶，还有Phytotech 专利产品Agargellan，满足客户更高实验要求；
植物生长调节剂： IAA、NAA、2,4-D、6-BA，玉米素、激动素、赤霉素系列、表油菜素内酯等；
抗生素/抗性筛选试剂：头孢噻圬钠、羧苄青霉素、G418、特美汀等；
植物组培相关仪器与耗材：灭菌器、培养瓶、镊子等。
特殊培养基定制服务
上海金畔作为Phytotech在中国的代理，从2006年开始一直未中国地区客户提供优质便捷的服务，让您在使用质量产品的同时，也享有低廉的价格。

Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B（50 mg/ml）

发表于由

Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B（50 mg/ml）

货号： JP0003-20ML 品牌： Jinpan 标签： 生化试剂

描述

Hygromycin B 潮霉素B

产品标签

Hygromycin B  潮霉素B；50mg/ml；Hph潮霉素磷酸转移酶；遗传霉素G418；Blasticidin S 杀稻瘟菌素（灭瘟散）；Zeocin 博莱霉素；CAS：31282-04-9

产品信息

产品名称                                                                 产品编号               规格              价格（元）  
Hygromycin B 潮霉素B（冻干粉）  JP0003-1G  1g  600
Hygromycin B 潮霉素B（冻干粉）  JP0003-5G  5g  2400
Hygromycin  B潮霉素B（冻干粉）  JP0003-10G  10g  3840
Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B（50 mg/ml）  JP0003-20ML  20ml  720

产品描述

潮霉素B（Hygromycin B），从吸水链霉菌（Streptomyces hygroscopicus）分离到的一种氨基糖苷类抗生素。通过与30S核糖体亚基结合，诱导对mRNA模板的错读且抑制易位，从而以阻止蛋白合成。潮霉素B能杀死细菌、真菌和高等真核细胞。主要用来筛选和维持培养稳定转染Hph载体的原核细胞或真核细胞（植物细胞和哺乳动物细胞）。

对潮霉素B（Hygromycin B）的抗性来源于大肠杆菌潮霉素抗性基因（hph或hyg），该基因能编码潮霉素磷酸转移酶（hygromycin phosphotransferase），使得潮霉素B发生磷酸化从而失去活性。目前Hph抗性基因主要有两种来源，最初来源是大肠杆菌（Escherichia coli），另一来源是潮霉素B产生菌吸水链霉菌（Streptomyces hygroscopicus）。如今，携带Hph抗性的载体大多来自大肠杆菌。

我司提供两种产品形式的潮霉素B。

一种以冻干粉形式提供，货号分别为：JP0003-1G，JP0003-5G，JP0003-10G。需要配制成储存液后备用。

一种以溶于PBS的无菌液体形式提供，货号为JP0003-20ML，使用更简单方便。

产品特性

1）化学名：O-6-Amino-6-deoxy-L-glycero-D-galacto-heptopyranosylidene-(1-2-3)-O-β-D-talopyranosyl(1-5)- 2-deoxy-N3-methyl-D-streptamine

2）同义名：Hygromycin B, from Streptomyces hygroscopicus潮霉素质B，来源于吸水链霉菌

3）CAS NO：31282-04-9

4）分子式：C20H37N3O13

5）分子量：527.53g/mol

6）  外观：类白色至白色粉末

7）纯度：≥90%（HPLC）

8）效价：≥1050 U/mg

9）化学结构：Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B（50 mg/ml）

保存与运输方法

保存：粉末-20℃干燥保存，2年有效。溶液2-8°C避光保存，1年有效。

运输：冰袋运输。

使用方法

1. 储存液制备

1）潮霉素B（粉末形式）：称取适量粉末溶于1×PBS配制成50mg/ml溶液，用0.22μm滤膜过滤除菌，置于2-8°C避光保存。

2）潮霉素B（溶液形式）：已是无菌储存液，直接用细胞培养液稀释到工作浓度即可使用。

2. 建议工作浓度

潮霉素B用来筛选稳定转染细胞株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化。

1）哺乳动物细胞使用浓度为50-1000 μg/ml，常用筛选浓度为200 μg/ml，最佳浓度需要杀灭曲线来确定。

2）植物细胞常用浓度：20-200 μg/ml；

3）细菌常用浓度：20-200 μg/ml；

4）真菌常用浓度：200-1000 μg/ml；

3. 杀灭曲线的建立

建议初次实验一定要建立杀灭曲线（kill curve），至少设立5个浓度，筛选到适合自身实验体系的最佳浓度。

1）将未转化细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，铺足够的孔以保证后续的梯度实验。37℃培养过夜；【注意】：对于需要更高密度以保证活力的细胞，增加接种量。

2）第二日，用含梯度浓度潮霉素B的培养基替换旧培养基。比如，哺乳动物细胞常用浓度为50-1000μg/ml，可设50, 100, 250, 500, 750, 1000μg/m这6个浓度，各3个平行。同时设置一阴性对照，3个平行。

3）接下来每3-4日更换新鲜的含抗生素培养基。

4）按照固定周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转化细胞生长的恰当浓度。选择在理想天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的最低浓度为稳定转染细胞筛选所需的工作浓度。

4、稳转细胞的筛选

1）转染48h后，用含最佳筛选浓度潮霉素B的培养基进行细胞传代。【注意】：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤效果最好。当细胞密度过高，筛选效率会降低。为了得到较好的筛选效果，建议将细胞稀释至丰度不超过25%。

2）每3-4日更换新鲜的含抗生素培养基。

3）筛选7天后观察并评估细胞集落的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这些取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。

4）挑取5-10个抗性克隆到35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5）之后换用正常培养基培养即可。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 — — Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/JP金畔所有】

 

规格信息

品牌：

Jinpan
CAS:

31282-04-10
规格：

20ml
货期：

咨询客服

Hygromycin B 潮霉素B（冻干粉）

发表于由

Hygromycin B 潮霉素B（冻干粉）

货号： JP0003-10G 品牌： Jinpan 标签： 生化试剂

描述

Hygromycin B 潮霉素B

产品标签

Hygromycin B  潮霉素B；50mg/ml；Hph潮霉素磷酸转移酶；遗传霉素G418；Blasticidin S 杀稻瘟菌素（灭瘟散）；Zeocin 博莱霉素；CAS：31282-04-9

产品信息

产品名称    产品编号   规格    价格（元）  
Hygromycin B 潮霉素B（冻干粉）  JP0003-1G  1g  600
Hygromycin B 潮霉素B（冻干粉）  JP0003-5G  5g  2400
Hygromycin  B潮霉素B（冻干粉）  JP0003-10G  10g  3840
Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B（50 mg/ml）  JP0003-20ML  20ml  720

产品描述

潮霉素B（Hygromycin B），从吸水链霉菌（Streptomyces hygroscopicus）分离到的一种氨基糖苷类抗生素。通过与30S核糖体亚基结合，诱导对mRNA模板的错读且抑制易位，从而以阻止蛋白合成。潮霉素B能杀死细菌、真菌和高等真核细胞。主要用来筛选和维持培养稳定转染Hph载体的原核细胞或真核细胞（植物细胞和哺乳动物细胞）。

对潮霉素B（Hygromycin B）的抗性来源于大肠杆菌潮霉素抗性基因（hph或hyg），该基因能编码潮霉素磷酸转移酶（hygromycin phosphotransferase），使得潮霉素B发生磷酸化从而失去活性。目前Hph抗性基因主要有两种来源，最初来源是大肠杆菌（Escherichia coli），另一来源是潮霉素B产生菌吸水链霉菌（Streptomyces hygroscopicus）。如今，携带Hph抗性的载体大多来自大肠杆菌。

我司提供两种产品形式的潮霉素B。

一种以冻干粉形式提供，货号分别为：JP0003-1G，JP0003-5G，JP0003-10G。需要配制成储存液后备用。

一种以溶于PBS的无菌液体形式提供，货号为JP0003-20ML，使用更简单方便。

产品特性

1）化学名：O-6-Amino-6-deoxy-L-glycero-D-galacto-heptopyranosylidene-(1-2-3)-O-β-D-talopyranosyl(1-5)- 2-deoxy-N3-methyl-D-streptamine

2）同义名：Hygromycin B, from Streptomyces hygroscopicus潮霉素质B，来源于吸水链霉菌

3）CAS NO：31282-04-9

4）分子式：C20H37N3O13

5）分子量：527.53g/mol

6）  外观：类白色至白色粉末

7）纯度：≥90%（HPLC）

8）效价：≥1050 U/mg

9）化学结构：Hygromycin B 潮霉素B（冻干粉）

保存与运输方法

保存：粉末-20℃干燥保存，2年有效。溶液2-8°C避光保存，1年有效。

运输：冰袋运输。

使用方法

1. 储存液制备

1）潮霉素B（粉末形式）：称取适量粉末溶于1×PBS配制成50mg/ml溶液，用0.22μm滤膜过滤除菌，置于2-8°C避光保存。

2）潮霉素B（溶液形式）：已是无菌储存液，直接用细胞培养液稀释到工作浓度即可使用。

2. 建议工作浓度

潮霉素B用来筛选稳定转染细胞株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化。

1）哺乳动物细胞使用浓度为50-1000 μg/ml，常用筛选浓度为200 μg/ml，最佳浓度需要杀灭曲线来确定。

2）植物细胞常用浓度：20-200 μg/ml；

3）细菌常用浓度：20-200 μg/ml；

4）真菌常用浓度：200-1000 μg/ml；

3. 杀灭曲线的建立

建议初次实验一定要建立杀灭曲线（kill curve），至少设立5个浓度，筛选到适合自身实验体系的最佳浓度。

1）将未转化细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，铺足够的孔以保证后续的梯度实验。37℃培养过夜；【注意】：对于需要更高密度以保证活力的细胞，增加接种量。

2）第二日，用含梯度浓度潮霉素B的培养基替换旧培养基。比如，哺乳动物细胞常用浓度为50-1000μg/ml，可设50, 100, 250, 500, 750, 1000μg/m这6个浓度，各3个平行。同时设置一阴性对照，3个平行。

3）接下来每3-4日更换新鲜的含抗生素培养基。

4）按照固定周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转化细胞生长的恰当浓度。选择在理想天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的最低浓度为稳定转染细胞筛选所需的工作浓度。

4、稳转细胞的筛选

1）转染48h后，用含最佳筛选浓度潮霉素B的培养基进行细胞传代。【注意】：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤效果最好。当细胞密度过高，筛选效率会降低。为了得到较好的筛选效果，建议将细胞稀释至丰度不超过25%。

2）每3-4日更换新鲜的含抗生素培养基。

3）筛选7天后观察并评估细胞集落的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这些取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。

4）挑取5-10个抗性克隆到35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5）之后换用正常培养基培养即可。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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规格信息

品牌：

Jinpan
CAS:

31282-04-10
规格：

10g
货期：

咨询客服

Hygromycin B 潮霉素B（冻干粉）

发表于由

Hygromycin B 潮霉素B（冻干粉）

货号： JP0003-5G 品牌： Jinpan 标签： 生化试剂

描述

Hygromycin B 潮霉素B

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Hygromycin B  潮霉素B；50mg/ml；Hph潮霉素磷酸转移酶；遗传霉素G418；Blasticidin S 杀稻瘟菌素（灭瘟散）；Zeocin 博莱霉素；CAS：31282-04-9

产品信息

产品名称    产品编号   规格    价格（元）  
Hygromycin B 潮霉素B（冻干粉）  JP0003-1G  1g  600
Hygromycin B 潮霉素B（冻干粉）  JP0003-5G  5g  2400
Hygromycin  B潮霉素B（冻干粉）  JP0003-10G  10g  3840
Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B（50 mg/ml）  JP0003-20ML  20ml  720

产品描述

潮霉素B（Hygromycin B），从吸水链霉菌（Streptomyces hygroscopicus）分离到的一种氨基糖苷类抗生素。通过与30S核糖体亚基结合，诱导对mRNA模板的错读且抑制易位，从而以阻止蛋白合成。潮霉素B能杀死细菌、真菌和高等真核细胞。主要用来筛选和维持培养稳定转染Hph载体的原核细胞或真核细胞（植物细胞和哺乳动物细胞）。

对潮霉素B（Hygromycin B）的抗性来源于大肠杆菌潮霉素抗性基因（hph或hyg），该基因能编码潮霉素磷酸转移酶（hygromycin phosphotransferase），使得潮霉素B发生磷酸化从而失去活性。目前Hph抗性基因主要有两种来源，最初来源是大肠杆菌（Escherichia coli），另一来源是潮霉素B产生菌吸水链霉菌（Streptomyces hygroscopicus）。如今，携带Hph抗性的载体大多来自大肠杆菌。

我司提供两种产品形式的潮霉素B。

一种以冻干粉形式提供，货号分别为：JP0003-1G，JP0003-5G，JP0003-10G。需要配制成储存液后备用。

一种以溶于PBS的无菌液体形式提供，货号为JP0003-20ML，使用更简单方便。

产品特性

1）化学名：O-6-Amino-6-deoxy-L-glycero-D-galacto-heptopyranosylidene-(1-2-3)-O-β-D-talopyranosyl(1-5)- 2-deoxy-N3-methyl-D-streptamine

2）同义名：Hygromycin B, from Streptomyces hygroscopicus潮霉素质B，来源于吸水链霉菌

3）CAS NO：31282-04-9

4）分子式：C20H37N3O13

5）分子量：527.53g/mol

6）  外观：类白色至白色粉末

7）纯度：≥90%（HPLC）

8）效价：≥1050 U/mg

9）化学结构：Hygromycin B 潮霉素B（冻干粉）

保存与运输方法

保存：粉末-20℃干燥保存，2年有效。溶液2-8°C避光保存，1年有效。

运输：冰袋运输。

使用方法

1. 储存液制备

1）潮霉素B（粉末形式）：称取适量粉末溶于1×PBS配制成50mg/ml溶液，用0.22μm滤膜过滤除菌，置于2-8°C避光保存。

2）潮霉素B（溶液形式）：已是无菌储存液，直接用细胞培养液稀释到工作浓度即可使用。

2. 建议工作浓度

潮霉素B用来筛选稳定转染细胞株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化。

1）哺乳动物细胞使用浓度为50-1000 μg/ml，常用筛选浓度为200 μg/ml，最佳浓度需要杀灭曲线来确定。

2）植物细胞常用浓度：20-200 μg/ml；

3）细菌常用浓度：20-200 μg/ml；

4）真菌常用浓度：200-1000 μg/ml；

3. 杀灭曲线的建立

建议初次实验一定要建立杀灭曲线（kill curve），至少设立5个浓度，筛选到适合自身实验体系的最佳浓度。

1）将未转化细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，铺足够的孔以保证后续的梯度实验。37℃培养过夜；【注意】：对于需要更高密度以保证活力的细胞，增加接种量。

2）第二日，用含梯度浓度潮霉素B的培养基替换旧培养基。比如，哺乳动物细胞常用浓度为50-1000μg/ml，可设50, 100, 250, 500, 750, 1000μg/m这6个浓度，各3个平行。同时设置一阴性对照，3个平行。

3）接下来每3-4日更换新鲜的含抗生素培养基。

4）按照固定周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转化细胞生长的恰当浓度。选择在理想天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的最低浓度为稳定转染细胞筛选所需的工作浓度。

4、稳转细胞的筛选

1）转染48h后，用含最佳筛选浓度潮霉素B的培养基进行细胞传代。【注意】：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤效果最好。当细胞密度过高，筛选效率会降低。为了得到较好的筛选效果，建议将细胞稀释至丰度不超过25%。

2）每3-4日更换新鲜的含抗生素培养基。

3）筛选7天后观察并评估细胞集落的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这些取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。

4）挑取5-10个抗性克隆到35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5）之后换用正常培养基培养即可。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 — — Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/JP金畔所有】

 

规格信息

品牌：

Jinpan
CAS:

31282-04-10
规格：

5g
货期：

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Hygromycin B 潮霉素B（冻干粉）

发表于由

Hygromycin B 潮霉素B（冻干粉）

货号： JP0003-1G 品牌： Jinpan 标签： 生化试剂

描述

Hygromycin B 潮霉素B

产品标签

Hygromycin B  潮霉素B；50mg/ml；Hph潮霉素磷酸转移酶；遗传霉素G418；Blasticidin S 杀稻瘟菌素（灭瘟散）；Zeocin 博莱霉素；CAS：31282-04-9

产品信息

产品名称    产品编号   规格    价格（元）  
Hygromycin B 潮霉素B（冻干粉）  JP0003-1G  1g  600
Hygromycin B 潮霉素B（冻干粉）  JP0003-5G  5g  2400
Hygromycin  B潮霉素B（冻干粉）  JP0003-10G  10g  3840
Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B（50 mg/ml）  JP0003-20ML  20ml  720

产品描述

潮霉素B（Hygromycin B），从吸水链霉菌（Streptomyces hygroscopicus）分离到的一种氨基糖苷类抗生素。通过与30S核糖体亚基结合，诱导对mRNA模板的错读且抑制易位，从而以阻止蛋白合成。潮霉素B能杀死细菌、真菌和高等真核细胞。主要用来筛选和维持培养稳定转染Hph载体的原核细胞或真核细胞（植物细胞和哺乳动物细胞）。

对潮霉素B（Hygromycin B）的抗性来源于大肠杆菌潮霉素抗性基因（hph或hyg），该基因能编码潮霉素磷酸转移酶（hygromycin phosphotransferase），使得潮霉素B发生磷酸化从而失去活性。目前Hph抗性基因主要有两种来源，最初来源是大肠杆菌（Escherichia coli），另一来源是潮霉素B产生菌吸水链霉菌（Streptomyces hygroscopicus）。如今，携带Hph抗性的载体大多来自大肠杆菌。

我司提供两种产品形式的潮霉素B。

一种以冻干粉形式提供，货号分别为：JP0003-1G，JP0003-5G，JP0003-10G。需要配制成储存液后备用。

一种以溶于PBS的无菌液体形式提供，货号为JP0003-20ML，使用更简单方便。

产品特性

1）化学名：O-6-Amino-6-deoxy-L-glycero-D-galacto-heptopyranosylidene-(1-2-3)-O-β-D-talopyranosyl(1-5)- 2-deoxy-N3-methyl-D-streptamine

2）同义名：Hygromycin B, from Streptomyces hygroscopicus潮霉素质B，来源于吸水链霉菌

3）CAS NO：31282-04-9

4）分子式：C20H37N3O13

5）分子量：527.53g/mol

6）  外观：类白色至白色粉末

7）纯度：≥90%（HPLC）

8）效价：≥1050 U/mg

9）化学结构：Hygromycin B 潮霉素B（冻干粉）

保存与运输方法

保存：粉末-20℃干燥保存，2年有效。溶液2-8°C避光保存，1年有效。

运输：冰袋运输。

使用方法

1. 储存液制备

1）潮霉素B（粉末形式）：称取适量粉末溶于1×PBS配制成50mg/ml溶液，用0.22μm滤膜过滤除菌，置于2-8°C避光保存。

2）潮霉素B（溶液形式）：已是无菌储存液，直接用细胞培养液稀释到工作浓度即可使用。

2. 建议工作浓度

潮霉素B用来筛选稳定转染细胞株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化。

1）哺乳动物细胞使用浓度为50-1000 μg/ml，常用筛选浓度为200 μg/ml，最佳浓度需要杀灭曲线来确定。

2）植物细胞常用浓度：20-200 μg/ml；

3）细菌常用浓度：20-200 μg/ml；

4）真菌常用浓度：200-1000 μg/ml；

3. 杀灭曲线的建立

建议初次实验一定要建立杀灭曲线（kill curve），至少设立5个浓度，筛选到适合自身实验体系的最佳浓度。

1）将未转化细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，铺足够的孔以保证后续的梯度实验。37℃培养过夜；【注意】：对于需要更高密度以保证活力的细胞，增加接种量。

2）第二日，用含梯度浓度潮霉素B的培养基替换旧培养基。比如，哺乳动物细胞常用浓度为50-1000μg/ml，可设50, 100, 250, 500, 750, 1000μg/m这6个浓度，各3个平行。同时设置一阴性对照，3个平行。

3）接下来每3-4日更换新鲜的含抗生素培养基。

4）按照固定周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转化细胞生长的恰当浓度。选择在理想天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的最低浓度为稳定转染细胞筛选所需的工作浓度。

4、稳转细胞的筛选

1）转染48h后，用含最佳筛选浓度潮霉素B的培养基进行细胞传代。【注意】：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤效果最好。当细胞密度过高，筛选效率会降低。为了得到较好的筛选效果，建议将细胞稀释至丰度不超过25%。

2）每3-4日更换新鲜的含抗生素培养基。

3）筛选7天后观察并评估细胞集落的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这些取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。

4）挑取5-10个抗性克隆到35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5）之后换用正常培养基培养即可。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 — — Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/JP金畔所有】

 

规格信息

品牌：

Jinpan
CAS:

31282-04-10
规格：

1g
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