2bscientific：β 淀粉样蛋白 1-42 寡聚物概述

β 淀粉样蛋白 1-42 寡聚物

货号：SPR-488

附加名称：Abeta 寡聚物、Abeta 肽、淀粉样蛋白 β 肽寡聚物、β 淀粉样肽寡聚物、淀粉样蛋白 β 前体蛋白肽寡聚物、APP

应用：基于细胞的/功能测定，蛋白质印迹

介绍：我们的淀粉样蛋白 Beta 1-42 (AB Beta42) 寡聚物是由用 1,1,1,3,3,3-6氟-2-丙醇 (HFIP) 预处理的淀粉样蛋白β肽 1-42 生成的，如之前发布的 (1, 2）。我们的 AB Beta42 寡聚物在 TEM 和 AFM 下观察时呈球状寡聚物，并且在使用抗淀粉样蛋白 β 抗体的蛋白质印迹上具有二聚体/三聚体和寡聚物信号。我们的 AB Beta42 寡聚物也被证明对原代大鼠皮质神经元具有剂量依赖性毒性。在大脑中，淀粉样β肽（AB Beta）是由淀粉样前体蛋白（APP）的蛋白酶裂解产生的，它在神经退行性疾病中聚集成寡聚体、原纤维、原纤维并最终形成斑块。 AB Beta 斑块在大脑中的积累被认为是阿尔茨海默病 (AD) 的标志，过去 20 年来，大多数针对 AD 进行测试的药物都针对淀粉样蛋白 β 的积累 (3)。从 AD 患者大脑或体外生成的大脑中分离出的可溶性 AB Beta 寡聚物会严重损害突触结构和功能 (4)。体外生成的 AB Beta 寡聚物对 PC12 细胞 (5) 和 SH-SY5Y 细胞 (6) 有毒。 AB Beta 被证明与 tau蛋白病相互作用，影响 AD 患者的神经变性 (7)，并且 AB Beta 的积累被证明与帕金森病痴呆患者的较低存活率相关 (8)。

分子量：4.5kDa

纯度：>95%

顺序：DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA

运输条件：干冰

储存条件：-70°C

类型：蛋白质、肽、小分子和其他生物分子：合成

阿尔茨海默病的 7 个阶段及其症状

阿尔茨海默氏病是痴呆症最常见的病因，以德国精神病学家和神经bing理学家阿洛伊修斯·阿尔茨海默博士的名字命名。 1 1901 年，阿尔茨海默氏博士在法兰克福精神病院观察了一位名叫奥古斯特·德特 (Auguste Deter) 的 51 岁女性患者，并描述其患有一种奇特的疾病。大脑皮层疾病与痴呆有关。德特夫人后来成为第一个被诊断患有阿尔茨海默病的人。 1906 年她走后，阿尔茨海默博士对她的大脑进行了研究，并发现了淀粉样斑块和神经原纤维缠结。这些大脑异常成为阿尔茨海默病的两个病理标志：

• 1.含有β淀粉样蛋白（也称为Abeta或β淀粉样蛋白）的神经炎斑块

• 2. 含有过度磷酸化 tau 蛋白聚集体的神经原纤维缠结。

Tau 蛋白聚集体也称为 tau 蛋白配对螺旋丝 (PHF)。 PHF 除了阿尔茨海默病有，也见于其他神经退行性疾病，如进行性核上性麻痹、结节性硬化症和铅性脑病。

阿尔茨海默病是一种进行性神经退行性疾病，与认知技能恶化、行为改变和日常生活技能丧失相关。大脑皮层wei缩，大脑各个部位（包括颞叶皮层和海马体）形成斑块和缠结。随之而来的是神经元的损失，导致神经递质（例如乙酰胆碱）水平降低，而乙酰胆碱对于学习和形成记忆至关重要。认知功能和记忆的逐渐丧失分为七个阶段。3

阿尔茨海默病的基本病理原因和机制仍有待充分阐明。例如，我们不了解大脑中β淀粉样蛋白沉积导致形成斑块的β淀粉样蛋白肽块或神经原纤维缠结形成的确切机制。此外，关于斑块或缠结是否是阿尔茨海默病的主要原因，或者其中之一是否具有更多的外围作用，仍然存在争议。

人们提出了 许多假设1来帮助阐明阿尔茨海默病的发病机制，包括：

• 1.淀粉样蛋白级联假说

• 2. 线粒体级联假说

• 3.Tau假说

淀粉样蛋白 β 42 (abeta42) 肽的积累和沉积到神经炎斑块中是淀粉样蛋白级联假说中阿尔茨海默病的基本病理学。 Abeta42 肽由淀粉样前体蛋白 (APP) 通过 β 分泌酶和 γ 分泌酶连续裂解而形成。 Abeta42 肽不溶，会快速聚集形成寡聚体、原纤维和原纤维，从而形成神经炎淀粉样蛋白斑。

斑块会引起氧化损伤和炎症，导致神经元细胞死亡。一些家族遗传形式的阿尔茨海默病的 APP 基因存在病原体突变，会增加 Abeta42 斑块形成的风险。在淀粉样蛋白级联假说中，tau 蛋白的过度磷酸化和随后的 tau 聚集体的形成被认为是继发于淀粉样蛋白沉积的。

患有唐氏综合症的人有早发阿尔茨海默氏病的风险，为淀粉样蛋白级联假说提供了进一步的支持。 APP 基因位于 21 号染色体上，患有唐氏综合症的人有一条额外的 21 号染色体。大多数唐氏综合症患者到了 40 多岁时，都具有阿尔茨海默氏病的病理特征、β 淀粉样斑块和 tau 蛋白缠结。许多（但不是全部）患有唐氏综合症的人会患上阿尔茨海默病。他们患阿尔茨海默病的风险较高，被认为与 21 号染色体的额外拷贝有关，这会导致大脑中 APP 的产生和积累增加。

线粒体级联假说的前提是线粒体生物能量功能受损会导致阿尔茨海默病。这一假设提出，线粒体处理活性氧（ROS）等自由基的能力降低是阿尔茨海默病的关键起始步骤。

tau 假说源于对淀粉样蛋白沉积水平与认知能力下降程度之间缺乏相关性的观察。此外，淀粉样蛋白级联假说并不能充分解释阿尔茨海默病的散发病例。 tau 假说提出，tau 沉积和含有 tau 聚集体的神经原纤维缠结的形成是阿尔茨海默病的基本病理，其次是淀粉样蛋白沉积。

阿尔茨海默病和其他形式的痴呆症的风险随着年龄的增长而增加。全球范围内的人口老龄化和寿命的延长使得人们需要更好地了解痴呆症的病理学和机制，以期减轻这种疾病。尽管年龄是罹患痴呆症的最大风险因素，但痴呆症并不是衰老过程中不可避免的一部分。其他因素包括遗传、病史和生活方式因素。

市售即用型试剂的不断增加对于推动痴呆症研究至关重要。 MyBioSource 是一家全球研究试剂公司，为研究阿尔茨海默病和其他形式的痴呆症提供广泛的产品组合。产品包括 ELISA 和 CLIA 检测、抗体、重组蛋白以及来自阿尔茨海默病患者的组织微阵列和基因组 DNA。

用于阿尔茨海默病研究的产品：

• 人磷酸化 Tau (PT) ELISA 试剂盒（目录号 #MBS9343770）

• 人类 β 淀粉样蛋白 (Abeta42) CLIA 试剂盒（目录号 #MBS2533168）

• 人 β 淀粉样前体蛋白 (betaAPP)，ELISA 试剂盒（产品目录号 #MBS269761）

• β 淀粉样蛋白多克隆抗体对（目录号 #MBS7041908）

• 重组人 β 淀粉样蛋白（目录号 #MBS960834）

• 阿尔茨海默病，脑组织微阵列（目录号#MBS639489）

• 阿尔茨海默病，脑基因组 DNA（目录号 #MBS654365）

人β淀粉样蛋白1-40 (Aβ1-40)酶联免疫检测试剂盒简介

用    途：用于人血清、血浆及相关液体样本中β淀粉样蛋白1-40 (Aβ1-40)测定。

工作原理

本试剂盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定样品中人β淀粉样蛋白1-40 (Aβ1-40)水平。向预先包被了人β淀粉样蛋白1-40 (Aβ1-40)单克隆抗体的酶标孔中加入人β淀粉样蛋白1-40 (Aβ1-40)，温育；温育后，加入生物素标记的抗β淀粉样蛋白1-40 (Aβ1-40)抗体。再与链霉亲和素-HRP结合，形成免疫复合物，再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入底物A、B，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中人β淀粉样蛋白1-40 (Aβ1-40)的浓度呈正相关。

试剂盒组成

需要而未提供的试剂和器材

1． 37℃恒温箱。

2． 标准规格酶标仪。

3． 精密移液器及一次性吸头

4． 蒸馏水，

5． 一次性试管

6． 吸水纸

注意事项

1． 从2-8℃取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差

3． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

4． 为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和封板膜。

5． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

6． 底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

洗板方法

手工洗板方法：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。

自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中

标本要求

1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

2．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

操作程序

1. 标准品的稀释：(本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。)

                                                                                                                                                                                                                2. 根据代测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

3. 加样：1）空白孔，空白对照孔不加样品，生物素标记的抗β淀粉样蛋白1-40 (Aβ1-40)抗体，链霉亲和素-HRP，只加显色剂A&B和终止液，其余各步操作相同；2）标准品孔：加入标准品50ul，链霉亲和素-HRP50ul(标准品中已事先整合好生物素抗体，故不加)；3）代测样品孔：加入样本40ul，然后各加入抗β淀粉样蛋白1-40 (Aβ1-40)抗体10ul、链霉亲和素-HRP50ul，盖上封板膜，轻轻震荡混匀，37℃温育60分钟。

4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 显色：每孔先加入显色剂A50ul，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

7. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

8. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后10分钟以内进行。

9. 根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。

操作程序总结：

1.准备试剂，样品和标准品

2.加入准备好的样品和标准品，生物素标记的二抗和酶标试剂，37℃反应60分钟

3.洗板5次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟

4.加入终止液

5.10分钟内读OD值

6.计算

检测范围：100 pg/ml→4000 pg/ml。

保存：2-8℃。

有效期：6个月(2-8℃)。