标签归档：流式细胞

capricobio 荧光团分类

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capricobio 荧光团分类

荧光团

荧光团是一种荧光化学物质，在激发时可以重新发光。荧光团可与蛋白质或寡核苷酸缀合以产生用于检测蛋白质和核酸表达的荧光标记。荧光标记在功能上接受给定波长的光能（例如，来自激光）并以更长的波长重新发射能量。这两个过程称为激发和发射。根据仪器设置（参见图 1 中的激光器和检测通道）、荧光团的特征以及一定面板（例如四色、六色或十色面板）所需的标记，流式细胞术中使用不同类型的荧光团。

capricobio 荧光团分类

图 1 流式细胞仪的品牌名称及其激光和通道设置。

capricobio 荧光团分类

图 2 Caprico Biotechnologies 的 10 种颜色面板以及常用荧光团的光谱。

FITC、PE、APC 和 PerCP 等染料多年来已成为标准。串联染料由与较大荧光团共价耦合的小荧光团组成，可最大限度地利用特定设备，增加每个激光器的检测通道，并为有价值的（有时非常有限的）样品生成更多信息。用于表面或细胞内表位检测的常用荧光团如图 2 所示。许多荧光团在流式细胞术中具有潜在的应用。 Alexa Fluor、iFluor 和 mFluor 等新一代小分子荧光团正在迅速取代许多传统荧光团，为用户提供更高的光稳定性和更明亮的荧光。 CBI 提供这些高性能荧光染料：iFluor™ 和 mFluor™ 系列。

iFluor™ 荧光团

iFluor™ 荧光团针对强荧光、高光稳定性和 pH 独立性进行了优化，并且可覆盖整个紫外-可见-红外光谱。 iFluor™ 488 的光谱特性与 Alexa Fluor® 488 基本相同。iFluor™ 488 缀合物使用高度纯化的单一罗丹明异构体制备，可显着提高批次间的一致性。 iFluor™ 647 染料在光谱上与 Alexa Fluor® 647 和 DyLight™ 650 染料相似。

mFluor™ 荧光团

mFluor™ 荧光团专为流式细胞术应用而开发，可实现最佳的多色检测。这些染料表现出大的斯托克斯位移和优异的水溶性。 mFluor™ 染料跨越整个紫外-可见光谱，旨在最大限度地提高流式细胞仪中主要光源之一的激发效率，例如紫色激光 (405 nm) 或蓝色激光 (488 nm)。它们是基于藻蛋白的串联染料的替代品，而藻蛋白串联染料很难与抗体或其他生物分子偶联。查看比较数据请点击此处。 Caprico 生产RUO和ASR流式细胞术试剂。凭借在生物偶联方面的丰富专业知识，Caprico 的科学家还提供 20 多种不同类型荧光团的抗体偶联服务，包括 FITC、R-PE、PerCP、APC、PerCP-Cy5.5、PE-Cy5、PE-Cy7、APC- Cy7、生物素、mFluor450、mFluor540、iFluor488、iFluor594、iFluor647、iFluor680、iFluor700、iFluor790、PE-iFluor594、APC-iFluor700。

流式细胞术固定/透化试剂盒23006

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流式细胞术固定/透化试剂盒

简要描述：流式细胞术固定/透化试剂盒，产品编码：23006。品牌：biotium
Flow Cytometry Fixation/Permeabilization Kit
一种包含固定和透化缓冲液的试剂盒，用于流式细胞术对细胞内抗原进行染色。

详细介绍

产品咨询

品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合

流式细胞术固定/透化试剂盒，产品编码：23006。品牌：biotium

流式细胞术固定/透化试剂盒，Flow Cytometry Fixation/Permeabilization Kit

产品描述：

包含最佳配方的缓冲液，用于细胞的固定和透化，用于细胞内抗原的免疫荧光染色，以便通过流式细胞术进行分析。

特征

  • 固定和透化细胞以进行细胞内染色

  • 用于流式细胞术染色方案

  • 基于甲醛的固定

套件组件

  • 流式细胞术固定缓冲液

  • 流式细胞术透化缓冲

注意：本试剂盒中的固定缓冲液由甲醇稳定的甲醛制备。有关不含甲醇的固定剂，请参阅我们的多聚甲醛，PBS 中的 4%，即用型固定剂 （22023）。

上海金畔生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理，进口货物，最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式，为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源，加强网络建设，提高公司内部运作效率，为客户提供方便、快捷的服务。

Caprico Biotechnologies流式细胞抗体该如何选择？

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Caprico Biotechnologies流式细胞抗体该如何选择？

　　Caprico Biotechnologies流式细胞抗体本身也是抗体，所以选择流式抗体一定要满足抗体选择最基本的条件：目标蛋白特异性，反应种属以及应用实验。在流式实验过程中，尽量减少实验工序和过程，以保证实验的真实和准确性。因此在条件允许的范围内，建议尽量用直接标记的抗体进行实验而不去做间接标记。
 
　　由于在流式细胞实验过程中，荧光抗体对单细胞悬液的标记效果直接影响实验的数据质量。因此，需要考虑各种影响流式抗体品质及检测效果的因素，例如抗体特异性、荧光素信号强弱、荧光素标记方式、同型对照等。
 
　　流式抗体的选择： 
　　1、流式抗体本身也是抗体，所以选择流式抗体一定要满足抗体选择最基本的条件：目标蛋白特异性，反应种属以及应用实验。
 
　　2、流式抗体荧光标记的方式包括直接标记和间接标记两种。在流式实验过程中，尽量减少实验工序和过程，以保证实验的真实和准确性。因此在条件允许的范围内，建议尽量用直接标记的抗体进行实验而不去做间接标记。
 
　　3、流式抗体荧光标记的选择：如果实验中检测单一指标：不同荧光标记在不同的仪器上强度不同。FACS Calibur仪器为例：PE >APC >PE-Cy5 >PerCP >FITC >PerCP-Cy5.5，通常来说，PE强，适用于弱表达抗原。FITC强度较弱，适用于强表达抗原，使用范围比较广。用户需根据检测的目标蛋白进行具体选择。
 
　　如果同时检测多个指标：确认流式细胞仪能检测多少个通道：流式抗体每个通道只能选择1种荧光素。各个通道之间的荧光素可以随意搭配。如：实验者同时检测三个指标，可以在图1中绿色、黄色和红色三个通道中各选一个适当的荧光素标记，FITC、PE和PE-cy5。切忌所有指标选择同一个通道的荧光标记，以防止荧光的重叠和相互干扰，影响最后结果。因此，流式细胞仪的通道越多，同一份样本能同时做的表面/胞内标志就越多。常用荧光标记包括FITC, PE, PEcy5, PEcy5.5, APC等。
 
　　同型对照的选择： 
　　流式细胞实验和其他抗体相关实验有点不同的就是需要选择同型对照。同型对照，是用于消除由于抗体非特异性结合到细胞表面而产生的背景染色，相当于实验的阴性对照。同型对照选择与标记抗体同种属来源，同亚型，同荧光标记的抗体。比如：抗人的CD3的PE标记的抗体，小鼠的IgG2a。同型对照选择PE标记的小鼠的IgG2a。

AMCA ANTI-HUMAN IgG LAMBDA CHAIN (MADE IN GOAT) (0.5mg)

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AMCA ANTI-HUMAN IgG LAMBDA CHAIN (MADE IN GOAT) (0.5mg) 货号： CI-3070-0.5 品牌： Vectorlabs 标签： 免疫学研究

描述

标记为山羊抗人类κ链抗体的AMCA（7-氨基-4-甲基香豆素-3-乙酸）是一种链特异性抗体，可区分目标免疫球蛋白的链或类别。该λ链特异性抗体实际上与其他免疫球蛋白类别或其他重链或轻链没有交叉反应。

特征：

  • 经AMCA最佳标记，可为荧光显微镜提供最亮的标记  
  • 可用于流式细胞术或用于组织染色 
  • 解决方案中提供
  • 激发光：350 nm 
  • 发射：450 nm
  • 颜色：蓝色

技术指标

更多信息
单位大小 0.5毫克
应用领域 免疫荧光，流式细胞仪/细胞分离
浓度 1.0 mg活性缀合物/ ml
推荐储存 2-8°摄氏度
解 10 mM HEPES，0.15 M NaCl，pH 7.5、0.08％叠氮化钠。
最大排放 448-454纳米。
最大激励 345-355 nm
推荐用法 推荐的使用浓度范围是5-20 µg / ml。如果要在可能包含交叉反应内源性免疫球蛋白的组织中使用该抗体，可以在含有2％正常血清的缓冲液中稀释该抗体，该血清来自与组织相同的物种。
目标物种 人的
共轭 AMCA
荧光色 蓝色
寄主物种 山羊
格式 集中

技术信息

通过以产生高亲和力抗体的方式对动物进行超免疫来制备山羊抗人Ig抗体。然后通过亲和色谱法将其纯化，该亲和色谱法旨在去除可能存在的任何低亲和力抗体。固相吸附技术去除了可能干扰特定标记的交叉反应性。然后对最终产品进行严格的质量控制测定，包括免疫扩散，固相酶免疫测定，凝胶电泳和固相结合测定。在制备标记的抗体时，要格外小心以确保最大程度的标记，而不会改变抗体的特异性和亲和力。然后，标记的抗体会经历一系列的质量控制测定，包括免疫组织化学分析。 

规格信息

品牌：

Vectorlabs
CAS：

N/A
规格：

0.5mg
货期：

现货3天 期货30天

高效实现细胞表面与胞内蛋白共染的流式细胞处理方法

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在科研和临床诊断中，因流式细胞术可以对细胞内的生物标志物进行免疫染色和鉴定，其在鉴定细胞表型和功能中的应用已越来越重要。在细胞表型鉴定工作中，由于一些典型的膜分子定位在细胞质内，如未分化白细胞的CD3和CD22定位在细胞质中，因此除了对细胞表面分子的染色，细胞内生物分子的免疫染色是必不可少的。

高效实现细胞表面与胞内蛋白共染的流式细胞处理方法

为了使细胞内生物分子的免疫染色达到更好的效果，Nordic-MUbio推出了一款适用于流式细胞固定和通透的试剂盒FIX&PERM®，该试剂盒可以同时对细胞表面和细胞内的生物标志物进行免疫染色，将整个流式细胞免疫染色时间缩短到1h以内，为细胞内生物分子的鉴定提供了一种更好、更高效的选择。有研究者使用FIX&PERM®试剂盒，对多种细胞表面CD分子和细胞内Ki-67（一种细胞内的增殖标志物）进行双重染色，通过流式分析增殖细胞（Ki-67阳性）数量，来证明疾病状态之间存在着显著差异。

FIX&PERM®试剂盒由A液和B液两个试剂构成，其中A液能够温和地固定细胞，B液则起到通透细胞膜的作用。FIX&PERM®试剂盒的独特配方能有效地降低背景，把通透液和抗体一起加入细胞，还能让抗体更高效地穿过细胞膜，与细胞内生物分子结合（如细胞质或核酶、癌蛋白、细胞因子、免疫球蛋白等）。

FIX&PERM® Cell Fixation and Permeabilization Kit

货号: GAS-002

规格：8 x 5ml

应用：Flow Cytometry

FIX&PERM®优势特点：

  • 固定细胞更加温和，保持细胞在流式细胞仪中的分散性；
  • 可同时对细胞内和细胞表面的生物分子进行双重染色；
  • 用时更短——-整个处理过程可在1h内完成，处理后的细胞可以立即检测，也可以暂时保存后检测（不超过24h）；
  • 质控更严格——每个批次产品都要用已标定的血液样本检测，通过比较获得的白细胞分散性特征来确保不同批次试剂盒的一致性和稳定性。
  • FIX&PERM®试剂盒还可搭配Nordic-MUbio的细胞内生物标志物抗体，使流式检测效果更佳。

FIX&PERM®使用方法

  1. 取50µl待测样品（如全血、骨髓或单核细胞悬液）于5ml离心管中；
  2. 加入100µl A液（固定液），室温孵育15min；
  3. 加入5ml PBS，300g离心5min；
  4. 移除上清，加入100µl B液（通透液）和20µl流式抗体，低速涡旋1-2s；
  5. 室温孵育15min；
  6. 参照第3步，用PBS再洗一遍细胞；
  7. 移除上清，用鞘液重悬细胞后做流式分析；如不能立即检测，可用0.5ml 1.0%甲醛重悬细胞，2-8℃避光保存，并在24h内检测。

Nordi-MUbio热销单克隆流式抗体

Nordic-MUbio还提供了一些列小鼠抗人PE/FITC耦连单克隆流式抗体，与FIX&PERM®试剂盒配合使用效果更佳。

抗原

克隆

IgG类型

抗体偶联物

规格

货号

CD3

UCHT1

IgG1

Purified

0.2 mg

GM-4011

FITC-labeled

100 tests

GM-4012

PE-labeled

100 tests

GM-4013

CD22

RFB4

IgG1

Purified

0.2 mg

GM-4051

FITC-labeled

100 tests

GM-4052

PE-labeled

100 tests

GM-4053

Lactoferrin

4C5

IgG1

Purified

0.2 mg

GM-4111

PE-labeled

100 tests

GM-4113

Myeloperoxidase

8E6

IgG1

Purified

0.2 mg

GM-4191

(MPO-C2)

FITC-labeled

100 tests

GM-4192

PE-labeled

100 tests

GM-4193

Lysozyme

LZ-2

IgG1

Purified

0.2 mg

GM-4131

FITC-labeled

100 tests

GM-4132

CD68

Ki-M7

IgG1

FITC-labeled

100 tests

GM-4152

IL-1 beta

FIB3

IgG1

FITC-labeled

100 tests

GM-4162

IFN-gamma

GZ4

IgG1

FITC-labeled

100 tests

GM-4172

Negative control

Vl-AP

IgG1

FITC-labeled

50 tests

GIC-201

PE-labeled

50 tests

–

Lysozyme

LZ-2

IgG1

FITC-labeled

50 tests

GIC-206

Lactoferrin

4C5

IgG1

PE-labeled

50 tests

–

Myeloperoxidase

8E6

IgG1

FITC-labeled

50 tests

GIC-212

Lactoferrin

4C5

IgG1

PE-labeled

50 tests

–

Myeloperoxidase

8E6

IgG1

FITC-labeled

50 tests

GIC-213

CD3

UCHT1

IgG1

PE-labeled

50 tests

–

Myeloperoxidase

8E6

IgG1

FITC-labeled

50 tests

GIC-214

CD22

RFB4

IgG1

PE-labeled

50 tests

高效实现细胞表面与胞内蛋白共染的流式细胞处理方法

图1  Flow cytrometric analysis of normal bone marrow (BM) after fixation and pemeabilization using GAS-002, followed by immunostaining for lactoferrin and MPO-C2.

图2  Immunostaining with Nordic-MUbio CD22-PE conjugate of undifferentiated leukemia cells of B-ALL type.

图3  Immunostaining with Nordic-MUbio CD3-PE conjugate of surface CD3-negative undifferentiated leukemia cells of T-ALL type.

上海金畔生物科技有限公司作为一站式生物试剂采购供应商，致力于整合全球优质资源，为生物研究领域客户提供丰富的产品与专业的服务。上海金畔是Nordic-MUbio品牌中国区一级代理，为客户提供完善的技术支持与售后服务。如对上述产品感兴趣，欢迎随时拨打上海金畔生物科技有限公司客服热线021-50837765或登录上海金畔生物科技有限公司官网www.jinpanbio.cn查询订购。

参考文献：

Nies KPH, Kraaijvanger R, Lindelauf KHK, Drent RJMR, Rutten RMJ, Ramaekers FCS, Leers MPG. Determination of the proliferative fractions in differentiating hematopoietic cell lineages of normal bone marrow. Cytometry A. (2018) 93, 1097-1105 . doi: 10.1002/cyto.a.23564.