新型专利植物组培抗菌保护剂——Plant Preservative Mixture(PPM)

植物组培广泛应用于植物科研:如模式植物,作物育种等;工厂化生产:如观赏花卉植物,中药材生产,园林园艺等,但是组培过程中种苗的污染,尤其是真菌和内生菌的污染是广大工作者最头疼的问题。美国Plant Cell Technology(简称PCT)专门为植物组织培养而研发的专利产品——PPMTM,可以有效抑制由于空气、灭菌不彻底、交叉污染、外植体消毒等各种原因导致的植物组培苗的细菌、真菌和农杆菌污染清除与预防。

产品特点:

  1. 无毒性——PPMTM是一种热稳定的抗菌剂,用于植物组织培养中植物的微生物污染防治与清除。在合理的使用剂量下,不会对植物的生长(如种子萌发,愈伤增殖、再生等)产生任何影响,可视为培养基标准配方成份;
  2. 作用效果好——PPMTM主要用于预防和消除来自空气、水源或者人体接触等外界因素导致的植物组培过程中的微生物污染,同时,对于植物内生菌也同样具有非常好的抑制效果;
  3. 适用物种广泛——PPMTM广泛适用于绝大多数被子植物和裸子植物;
  4. 使用方便——PPMTM具有热稳定性,能直接加入培养基高温灭菌而不会影响使用效果,使用更加方便;
  5. 性价比高——PPMTM 相对于常规抗生素而言,用量低,性价比更高。

相对抗生素的优势:

  1. PPM TM能广泛抑制和清除细菌和真菌的污染,并防止真菌孢子的萌发;
  2. PPM TM是通过抑制多种酶的活性而达到抑菌效果,从而能避免耐药突变体的发生;
  3. PPM TM具有热稳定性,无需过滤灭菌,能直接加入培养基高温灭菌而不会影响使用效果,使用更加方便;
  4. PPM TM性价比更高,可更加广泛的应用于更多的科学研究、作物育种、组培苗工厂化生产中。

使用方法:
以下使用指南是针对大多数情况下的常规使用说明,特殊情况可做适当调整。

使用指南

污染预防

消毒灭菌

抑制农杆菌

浓度 (v/v)

0.05 – 0.2%

5.0% (see note)

0.05%

处理时间

持续

4 – 12 hours

持续

说明

1. 具体使用浓度根据处理样本有所不同;
2.原生质体和愈伤组织处理浓度建议为0.05%;

1. 将组织加入到含5%PPM™的3X MS*盐溶液中,搅拌4-12小时;
2. 处理过程中无需其他灭菌方法同时使用,不能添加酸碱试剂,调节pH,也不要加入Tween20等;
3.处理完成以后将组织转移到含0.05% PPM的培养基中;

与其他抗生素配合使用效果更佳

*说明:MS盐溶液是泛指,如样本的培养基盐溶液不是MS盐,以具体适用的培养基盐溶液为准;
更多详细使用问题,可咨询全国客服热线021-50837765

产品专利说明:

PPMTM – Plant Preservative Mixture是专利产品,其商品名称,配方及使用方法等都受专利保护,专利号5,750,402。

Nature Methods推荐PCR污染清除方法——来自德国AppliChem DNA-ExitusPlus

聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)简称PCR,是一种选择性体外扩增核酸片段的方法,经过循环复制,扩增产量是指数上升,所以具有极高的灵敏度,被广泛应用于生物和医学的科研,临床各种研究中,是目前应用最为广泛的分子生物学方法之一。

但也正是由于PCR具有极高的灵敏度,微量的核酸污染便会导致假阳性扩增结果而导致实验结果不准确,这也是广大实验者最头痛的问题,如果形成气溶胶污染扩散,则可引起整个PCR实验室的污染,处理起来非常棘手,严重的甚至要关闭实验室。环境中的核酸是主要的污染源,常见的污染源有:

1. 模板提取时真空抽干装置;
2. 超净台;
3. 电泳装置;
4. 紫外分析仪;
5. 剪刀、镊子、刀片、移液器等器械;
6. 离心机;
7. 冰箱门把手,冷冻架,门把手或实验台面等;
8. 气溶胶;
9. 高压灭菌装置;

传统的PCR污染清除方法主要有:稀酸处理法、紫外照射法、尿嘧啶糖苷酶(UNG)法、酶解变性、酒精沉淀等几种方式,但仍然存在无法彻底破坏DNA分子、试剂具有腐蚀性或者毒性、小片段核酸无法清除等不足。

方式

原理

不足

修饰

标记遗传物质,阻止聚合酶与核酸的结合,从而抑制DNA扩增。

这种标记均为可逆反应,一旦发生去修饰反应即可被聚合酶结合;试剂可能具有腐蚀性。

酶解

酶可将长链的核酸分子降解成小片段。

降解的核酸中仍有大片段存在,具有完整的遗传信息,可通过PCR扩增出完整的片段。

高压变性

高压可将核酸降解成20~30bp的小片段。

仅适用于耐高压材料,更无法应用实验操作台和大型的实验设备。

紫外照射

PCR产物中嘧啶碱基会形成二聚体,延伸终止,

仅对500bp以上长片段有效,对短片段效果不大,且并不是DNA链中所有嘧啶均能形成二聚体,且UV照射还可使二聚体断裂

德国AppliChem独家研发的DNA-ExitusPlus是一种无腐蚀、无致癌性的核酸污染清除溶液,该产品可将裸露的核酸完全降解至无法作为扩增模板的小片段,无法被扩增,且无法恢复,从而彻底消除了PCR过程中由于环境污染而导致的假阳性扩增。

DNA-ExitusPlusTM特点:

1. 产品为非酶类试剂;
2. 产品中各组分协同作用,快速、非序列特异性的降解核酸污染;
3. 所有组分可生物降解、无毒无害;
4. 不含有机溶剂或者挥发性物质,不含无机酸或者碱性物质,不会对金属形成腐蚀;
5. 使用简单,喷洒或浸泡处理15分钟即可完成清除作用;
6. 升温至50度可提高反应速度。

产品参数:

性状:无色或者浅黄色液体
保存温度:常温
运输温度:常温
效期:12个月

产品信息

货号

品名

用途

规格

A7089

DNA-ExitusPlusTM

环境中核酸污染清除

250ml/500ml/1L/2.5L

A7409

DNA-ExitusPlusTM IF (indicator free)

250ml/500ml/1L/2.5L

A8740

Derma-ExitusPlusTM

处理手,手臂,手套等

250ml

A7600

Autoclave-ExitusPlus

高压灭菌装置中核酸污染清除

6x 1 L

使用方法:

1.  实验操作台表面
直接将DNA-ExitusPlusTM喷到操作台表面作用10~15分钟,无菌湿布擦拭后即可,无需用水冲洗;

2.  仪器表面
用布或纸巾蘸取适量 DNAExitusPlusTM擦拭仪器表面,充分作用后再用干净湿布擦一遍即可。一些小的部件可在DNA-ExitusPlusTM中浸泡10min左右,然后用清水冲洗、晾干;

3.  塑料及玻璃器皿
向容器中加入足量的DNA-ExitusPlusTM,摇晃以确保器皿内壁全部接触到溶液,充分作用后弃去溶液晾干,用蒸馏水冲洗干净晾干即可;

4.  移液器
遵照移液器说明拆取移液器的管嘴连件,于DNA-ExitusPlusTM中浸泡1min,然后用清水冲洗干净晾干便可安装到移液器上;

5.  解剖刀、镊子等实验器材
先用蘸有DNA-ExitusPlusTM的布擦拭一遍,然后将镊子等器材于DNA-ExitusPlusTM中浸泡10min以上,也可通过加热到50~60℃缩短处理时间;

6.  手臂、手套等
直接将Derma-ExitusPlus(A8740对准手臂或手套进行喷雾至全部湿润,作用3~4min即可)。

此产品与方法已得到全球知名杂志与科研工作者的认可:

(1) Esser, K.-H. et al. (2006) DNA decontamination: DNA-ExitusPlus in comparison with conventional reagents. Nature Methods 3, 151

(2) Arena, A. (2010) DNA exitus plus™ versus standard bleach solution for the removal of dna contaminants on work surfaces and tools. Investigative sciences journal 2, 20-29

如需更多产品信息可咨询AppliChem中国独家一级代理商——上海金畔生物科技有限公司

全国客服电话021-50837765

代理AppliChem支原体污染清除试剂Myco-3现货供应

实验过程中,无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等原因,极易造成支原体污染。支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达,又不能通过可视法对其进行检测,而且它对细胞的生长率影响较小,不易引起注意。在细胞培养过程中如果发现破碎的细胞甚多,培养细胞需要频繁改善营养环境才能支持长期传代培养时,应该怀疑支原体污染。

细胞若受到支原体污染后,能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达,但是细胞之外观较无明显变化,又不能通过可视法对其进行检测,不易引起注意,但是其污染会造成细胞之生长速率缓慢、细胞产生病变之型态改变等等变化,会严重的影响实验的结果。

素有小Sigma之称的欧洲生化试剂品牌AppliChem经过多年的潜心研究, 研制了抗支原体污染全系列产品Myco系列。作为新一代支原体专用抗生素Myco-3,专门抑制和杀灭细胞培养污染相关的支原体,而对细胞无毒副作用。其比市场上的支原体清除系列具有更好的支原体清除效果,同时对细胞自身的生长代谢影响降低。

产品信息:

品牌

货号

品名

规格

价格

AppliChem

A5240,0010

Myco-3(支原体污染清除试剂)

10ml

562

AppliChem

A5240,0020

Myco-3(支原体污染清除试剂)

20ml

1017

AppliChem

A5240,0100

Myco-3(支原体污染清除试剂)

100ml

4090

使用方法:

Myco-3主要成分为氟喹酮类的环丙沙星,100倍浓缩液直接加入培养基中,每2~3天换液一次,连续处理14天,可清除大多数支原体污染。用Myco-3无法清除的顽固支原体或停用后又出现支原体污染的情况建议使用Myco-1和Myco-2来处理。

查看Myco-3(支原体污染清除试剂)说明书请点击链接:http://www.applichem.com/fileadmin/produktinfo/a5240_en.pdf

上海金畔生物科技有限公司代理AppliChem试剂,向您推荐完整的细胞支原体污染解决方案,PCR Mycoplasma Test Kit能通过高度灵敏的支原体基因保守序列,提供给你即用型的PCR Mix试剂盒,能快速检测您的细胞或者样品是否被含有支原体;支原体的预防则针对细胞培养过程中各个可能支原体的污染源进行消毒的产品,如针对CO2培养箱的喷雾消毒产品、培养箱内的水源消毒溶液以及水浴箱等设备的消毒试剂;如果您的细胞已经被支原体污染,那么我们推荐您使用Myco系列挽救您的珍贵细胞。上海金畔生物科技有限公司为您提供一站式的支原体解决方案!

如果你对上述产品及相关技术信息感兴趣,请致电021-50837765 到上海金畔生物科技有限公司垂询相关的最优产品和解决方案,或索取相关手册和资料。我们会为您做的更多!

代理AppliChem专业二氧化碳培养箱水源消毒剂Incuwater-Clean

实验室里,细胞培养接触水源是支原体,细菌,真菌和病毒最容易传播和交叉污染的地方,也是实验室消毒最难处理的地方,包括细胞培养箱产生的气雾、培养箱内专用水源以及水浴锅等设备,易污染、难清除、危害大等问题是威胁细胞正常生长和表达的重要因素。

来自德国素有”小Sigma”之称的AppliChem,独创Myco支原体清除系列,能有效的清除细胞培养过程中的支原体污染,为广大科研工作者解决了困扰许久的难题,同时,也推出系列预防产品,以防止失而复得的细胞再次遭受污染之灾。德国AppliChem独创专门针对水池抗支原体污染的系列产品。产品应用于容器表面的消毒, 以及二氧化碳培养箱蓄水槽, 各种水箱, 及清洗用水池的消毒。

Incuwater-Clean 主要用于细胞培养箱内的水源消毒,为100X浓缩液,直接加入灭菌水中,使用方便,该试剂高效无毒,无挥发性,并且不会腐蚀金属表面。建议培养箱中每2-4周更换一次灭菌水,并加入Incuwater-Clean。

订购信息:

品牌

产品货号

品名

规格

目录价

AppliChem

A5219

Incuwater-Clean

100ml

498

更多信息可登陆官网查看

http://www.applichem.com/en/products/biochemica/mycoplasma-decontamination/

另外还有用于CO2培养箱消毒剂Incubator-Clean喷雾消毒剂和水浴锅消毒剂Aquabator-Clean,消毒彻底,安全无毒,使用方便,这一系列预防污染产品全方位为您的细胞保驾护航。

如有任何问题或者咨询更多产品信息欢迎致电AppliChem中国一级代理商上海金畔生物科技有限公司,全国客服热线021-50837765

支原体抗生素——支原体污染的清除

   细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%,支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达,又不能通过可视法对其进行检测,而且它对细胞的生长率影响较小,不易引起注意。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。

   支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,它不同于细胞,也不同于病毒。支原体最突出的结构特征是没有细胞壁,一般来讲,对作用于细胞壁生物合成的抗生素,如β-内酰胺类、万古霉素等完全不敏感;对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体最有抑制活性及常用于支原体感染治疗的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些氟喹诺酮;其他类抗生素如氨基糖苷类、氯霉素对支原体有较小抑制作用,所以常不用来作为支原体感染的化学治疗剂。

    很多实验室都曾遇到过细胞培养的支原体污染,也都曾试用过多种抗生素。考虑到支原体肺炎的首选药是红霉素和支原体抗生素——支原体污染的清除四环素,有实验人员试用了红霉素。红霉素确实具有一定的抑制支原体的效果。使用一段时间后,细胞状态明显好转。但红霉素不能完全根治支原体感染,停药后一段时间支原体又复发了。用四环素也遇到了类似的问题,不能根治。因为支原体对氨基甙类有中度敏感,因此这类抗生素也曾被考虑使用,其代表抗生素庆大霉素和卡那霉素对于抑制支原体的生长具有一定的效用,但是效果不是很明显,毕竟氨基甙类不能完全的抑制甚至杀灭支原体。

   实验室的主要工作抗生素不外乎以上几类,对于支原体污染的清除效果上也有限制,其实一些在兽医和医药上已经被广泛使用的支原体抗生素,可能比以上的广谱或较为广谱性的抗生素在支原体的处理上具有更好的效果,如泰妙菌素和米诺环素。泰妙菌素是一种双萜类动物专用抗生素,主要用于防治家畜家禽呼吸系统疾病和动物促生长。作为世界十大兽用抗生素之一,泰妙菌素对革兰氏阳性菌、支原体、猪胸膜肺炎放线杆菌有较强的抗菌作用,特别是支原体。而米诺环素(盐酸二甲胺四环素,美满霉素),其抗菌谱与四环素相似,但是对于支原体的抑制效果更好,一般来说,这两种抗生素的联合使用会起到很好的支原体清除效果。

   Applichem的Myco系列专门针对细胞实验室支原体污染。其Myco-1和Myco-2系列在泰妙菌素和米诺环素的基础上进行了修饰优化,进一步提高了其清除支原体的能力;同时对其联合使用的配比也进行了优化,使其比市场上的支原体清除系列具有更好的支原体清除效果,同时对细胞自身的生长代谢影响降到了最低。据一些使用者反映,其联合使用的效果比目前市场上新一代支原体专用抗生素(如Applichem的Myco-3系列)单独使用的效果更好,特别是针对顽固支原体,通过Myco-1和Myco-2的联合使用,可有效清除被污染细胞内的支原体,拯救珍贵细胞。

   如果你对Myco系列支原体检测、消毒及清除产品感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询支原体相关的最优解决方案,或索取最新的艾普力(Applichem)产品目录。