同仁化学Maleimido-C3-NTA试剂货号:M035 N-[5-(3′-马来酰亚胺丙烷基氨基)-1-戊基羧基]亚氨基二乙酸, 二钠盐, 一水合物| 日本DOJINDO

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aleimido-C3-NTA试剂货号:M035
N-[5-(3′-马来酰亚胺丙烷基氨基)-1-戊基羧基]亚氨基二乙酸, 二钠盐, 一水合物
Maleimido-C3-NTA

商品信息

储存条件:0-5度保存,防潮
运输条件:室温
分子式:

C18H23N3Na2O9・H2O

分子量:

489.38

SDS下载

选择规格:
10mg

期货

 
蛋白抗体标记检测方案

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N-[5-(3′-马来酰亚胺丙烷基氨基)-1-戊基羧基]亚氨基二乙酸, 二钠盐, 一水合物
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rapp-polymere 氨基甲基树脂Aminomethyl Resins概述

rapp-polymere 氨基甲基树脂Aminomethyl Resins概述

氨基甲基化聚苯乙烯树脂是由交联聚苯乙烯根据高度优化的方案通过直接氨基甲基化反应在内部制备的。通过我们的工艺生产的树脂是化学定义的、均匀的,并且没有任何来自功能化工艺的额外交联。使用酰胺键形成的标准方法,氨基甲基化的聚苯乙烯树脂可以容易地用任何合适的含羧酸的连接体酰化,以提供用于固相有机合成的载体。

Aminomethylated polystyrene resins are prepared in-house from crosslinked polystyrenes by a direct aminomethylation reaction according to highly optimized protocols. Resins produced by our process are chemically defined, homogeneous and free from any additional crosslinking from the functionalization process. Aminomethylated polystyrene resins can easily be acylated with any appropriate carboxylic acid-containing linker using standard methods of amide bond formation to furnish supports for solid phase organic synthesis.

氨基-六聚乙二醇-羧酸(NH2-PEG6-COOH)简介

氨基-六聚乙二醇-羧酸(NH2-PEG6-COOH)简介

氨基-六聚乙二醇-羧酸 NH2-PEG6-COOH


  • CAS NO.: 905954-28-1


氨基-六聚乙二醇-羧酸(NH2-PEG6-COOH)简介
  • 中文别名:
    1-氨基-3,6,9,12,15,18-六氧杂二十一烷-21-酸

  • 英文别名:
    Amine-PEG6-COOH
    Amino-PEG6-acid
    1-Amino-3,6,9,12,15,18-hexaoxahenicosan-21-oic Acid
    alpha-Amine-omega-propionic acid hexaethylene glycol

  • 产品纯度:
    ≥95%

  • 分子式:
    C15H31NO8

  • 分子量:
    353.4

  • 推荐储存条件:
    -5°C 保存,干燥,避免阳光照射。

  • 用途:
    应用于医学研究、药物释放、纳米技术和新材料研究、细胞培养。在研究配体、多肽合成支持物、接枝高分子化合物、新材料以及聚乙二醇改性功能涂层等方面的活性化合物。

单分散胺-PEG6-酸 (NH2-PEG6-COOH) 是一种异双功能 PEG 连接体,含有氨基 (NH2) 基团和羧酸 (COOH)。胺基可以与羧酸、活化的NHS酯、羰基等反应,并且羧酸可以在活化剂存在下与氨基反应。

含有伯氨基的生物分子的 NHS 酯标记介绍

含有伯氨基的生物分子的 NHS 酯标记介绍

NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)酯和其他活化酯(磺基-NHS、磺基四氟苯基 – STP)是适合氨基修饰的反应性化合物。 NHS 是最常见的活化酯类型。

常见的修饰是荧光标记、荧光猝灭剂和其他报告基团。可以使用活化酯连接炔烃和叠氮基,以使生物分子适应点击化学。

尤其常见的是蛋白质和肽的修饰,因为它们几乎总是含有氨基。其他例子是氨基寡核苷酸的修饰、氨基修饰的DNA和含氨基的糖。

NHS 酯与氨基的反应强烈依赖于 pH 值:在低 pH 值下,氨基被质子化,并且不会发生修饰。在高于最佳 pH 值时,NHS 酯的水解速度很快,并且修饰分子的产率会降低。改性的最佳pH值为8.3-8.5。

水是用于溶解 NHS 酯以进行生物分子标记的常用溶剂。如果NHS酯难溶于水溶液,可首先将其溶解在 二甲基亚砜(DMSO)或二甲基甲酰胺(DMF)中,然后添加到pH 8.3-8.5缓冲液中的蛋白质溶液中。请注意,DMF 可以降解为二甲胺,二甲胺具有鱼腥味,并且能够与活化酯发生反应。因此,标记生物分子时,使用不含二甲胺、无鱼腥味的高质量DMF非常重要。

我们建议使用以下通用方案用Lumprobe 生产的NHS 酯标记生物分子:

  1. 使用下面的公式或我们的蛋白质标记计算器计算所需的 NHS 酯量

    NHS_酯_重量 [mg] = 8 × 氨基_化合物_重量 [mg] × NHS_酯_摩尔_重量 [Da] / 氨基_化合物_摩尔_重量 [Da]。

    8是摩尔过量的NHS酯。它是单标记的经验值,适用于许多常见的蛋白质和肽。然而,在某些情况下,使用更少或更多的 NHS 酯可以增加修饰生物分子的产量。它取决于蛋白质结构、标记所用试剂及其溶解度。 Lumiprobe 产品的摩尔重量可以在相应的产品页面上找到。

    例如,要使用 Cy5 NHS 酯(摩尔量 616 道尔顿)标记 3 mg BSA(摩尔量 66500 道尔顿),并获得单标记产物的最大产量,应使用 8 × 3 mg × 616 Da / 66500 Da = 0.22 毫克 Cy5 染料 NHS 酯。

  2. 计算反应混合物的体积。标记反应中的最佳生物分子浓度为1-10 mg/mL。标记可以在任何规模上进行,从纳摩尔到几十克。如果标记少量生物分子,请将反应混合物的体积保持在低水平 (10-20 uL)。

  3. 将 NHS 酯溶解在 1/10 反应体积的水、DMF 或 DMSO 中。不含二甲胺的DMF或水是优选的溶剂。溶解在 DMF 中的 NHS 酯可在 -20°C 下在溶液中保存 1-2 个月。 NHS酯的水溶液配制后应立即使用。

  4. 将生物分子溶解在 9/10 反应体积的 pH 8.3-8.5 缓冲液中。

    0.1 M 碳酸氢钠溶液具有适当的 pH 值。另一种选择是 0.1 M 磷酸盐缓冲液。请注意,pH 值是成功用 NHS 酯标记生物分子的最重要因素。避免使用含有胺的缓冲液(有时可以使用基于 Tris 的缓冲液,但不推荐使用。Tris 含有氨基,但对活化酯的亲和力较低)。

    在进行大规模标记(使用数百毫克 NHS 酯)时,请注意,由于 NHS 酯的水解,混合物会随着时间的推移而酸化。监测 pH 值,或使用浓度更高的缓冲液。

  5. 将 NHS 酯溶液添加到生物分子溶液中,并充分涡旋。在冰上放置过夜,或在室温下放置 1 至 4 小时。

  6. 使用适当的方法纯化缀合物:大分子凝胶过滤是最常见的。色谱法是另一种选择。对于蛋白质和核酸,可以使用乙醇或丙酮沉淀。有机杂质(如 N-羟基琥珀酰亚胺、NHS 酯和水解产生的酸)几乎总是可以通过这些方法轻松分离。