Cal-590 Potassium Salt 钙离子荧光探针

Cal-590 Potassium Salt 钙离子荧光探针 货号: JP4574-250UG 品牌: Jinpan 标签: 标记物及染料, 荧光探针

描述

Cal-590 Potassium Salt

钙离子荧光探针

产品信息

产品名称

产品编号 规格 价格(元)
Cal-590 Potassium Salt钙离子荧光探针 JP4574-250UG 5×50μg

3383

产品描述

钙离子测定在各种生理活动中发挥着重要作用,与钙离子结合从而表现出光谱反应的荧光探针使得研究人员能够观察胞内游离钙离子水平变化,通过荧光显微镜、流式细胞仪、荧光光度计和荧光酶标板来检测。
新一代钙离子荧光探针:Cal-520,Cal-590和Cal-630是最强大且均一的细胞内钙流(Calcium mobilization)测定用荧光探针,与传统的钙离子探针(比如:Fluo-3 AM、Fluo-4 AM和Rhod-2 AM)相比,具有明显改善的信噪比和细胞内滞留性。
Cal-520 AM,Cal-590 AM和Cal-630 AM具有细胞膜渗透性,能够预加载进入细胞。一旦进入细胞候,亲脂阻断基团AM被酯酶裂解,产生带负电荷的荧光染料,留在细胞内部。一旦与钙离子结合后,它们的荧光显著加强。当细胞被激动剂刺激后,受体发出细胞内钙释放的信号,从而使得Cal-520,Cal-590和Cal-630的荧光增加。Cal-520 AM,Cal-590 AM和Cal-630 AM的高灵敏度以及>100倍的荧光增强使其成为胞内钙离子测定的理想探针。高信噪比和更加的胞内滞留性使其成为评估GPCR和钙离子通道靶标以及筛选对应激动剂和拮抗剂的优秀工具。

Cal-520,Cal-590和Cal-630基本定位在细胞质,不像Rhod-2主要定位在线粒体。Cal-590和Cal-630的长激发/发射波长使其为完美的钙离子探针,能够与绿色荧光蛋白(GFP)标记细胞兼容多色检测。另外,Cal-520,Cal-590和Cal-630也与绝大多数现存的荧光仪器兼容。Cal-520在488nm处被良好激发,用FITC滤片检测;Cal-590经优化在555nm处被良好激发,用TRITC/Cy3滤片检测;Cal-630经优化在594nm处被良好激发,用Texas Red滤片检测;

Cal-590 Potassium Salt是钾盐形式的Cal-590,不具有细胞膜渗透性,溶于水。可通过微注射、膜片电极、划痕标记等方式加载进入细胞,从而检测胞内钙水平。

产品特征

同义名:Cal-590钾盐 分子量:1123.03
解离常数:Kd=561 nM 溶解性:H2O
Ex/Em:574/588 Cal-590 Potassium Salt  钙离子荧光探针

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,有效期至少1年。 

运输:冰袋运输。

注意事项

1) 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

附录ICal-520,Cal-590或Cal-630钙离子探针的波长和钙离子结合特性

产品名称 产品编号 激发波长(nm) 发射波长(nm) 解离常数Kd(nM)
Cal-520 JP4537-50UG 492 514 320
Cal-590 JP4535-50UG 558 584 561
Cal-630 JP4536-50UG 607 623 792

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货号 名称 规格
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JP4537-50UG Cal-520 AM, Cell Permeant钙离子荧光探针 50μg
JP4535-50UG Cal-590 AM, Cell Permeant钙离子荧光探针 50μg
JP4536-50UG Cal-630 AM, Cell Permeant钙离子荧光探针 50μg
JP4573-500UG Cal-520 Potassium Salt钙离子荧光探针 10×50μg
JP4574-250UG Cal-590 Potassium Salt钙离子荧光探针 5×50μg
JP4575-250UG Cal-630 Potassium Salt钙离子荧光探针 5×50μg

 

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

N/A

规格:

5×50μg

货期:

2天

Cal-520 Potassium Salt 钙离子荧光探针

Cal-520 Potassium Salt 钙离子荧光探针 货号: JP4573-500UG 品牌: Jinpan 标签: 标记物及染料, 荧光探针

描述

Cal-520 Potassium Salt

钙离子荧光探针

 

产品信息

产品名称

产品编号 规格 价格(元)
Cal-520 Potassium Salt钙离子荧光探针 JP4573-500UG 10×50μg

5093

产品描述

钙离子测定在各种生理活动中发挥着重要作用,与钙离子结合从而表现出光谱反应的荧光探针使得研究人员能够观察胞内游离钙离子水平变化,通过荧光显微镜、流式细胞仪、荧光光度计和荧光酶标板来检测。

新一代钙离子荧光探针:Cal-520,Cal-590和Cal-630是最强大且均一的细胞内钙流(Calcium mobilization)测定用荧光探针,与传统的钙离子探针(比如:Fluo-3 AM、Fluo-4 AM和Rhod-2 AM)相比,具有明显改善的信噪比和细胞内滞留性。

Cal-520 AM,Cal-590 AM和Cal-630 AM具有细胞膜渗透性,能够预加载进入细胞。一旦进入细胞候,亲脂阻断基团AM被酯酶裂解,产生带负电荷的荧光染料,留在细胞内部。一旦与钙离子结合后,它们的荧光显著加强。当细胞被激动剂刺激后,受体发出细胞内钙释放的信号,从而使得Cal-520,Cal-590和Cal-630的荧光增加。Cal-520 AM,Cal-590 AM和Cal-630 AM的高灵敏度以及>100倍的荧光增强使其成为胞内钙离子测定的理想探针。高信噪比和更加的胞内滞留性使其成为评估GPCR和钙离子通道靶标以及筛选对应激动剂和拮抗剂的优秀工具。

Cal-520,Cal-590和Cal-630基本定位在细胞质,不像Rhod-2主要定位在线粒体。Cal-590和Cal-630的长激发/发射波长使其为完美的钙离子探针,能够与绿色荧光蛋白(GFP)标记细胞兼容多色检测。另外,Cal-520,Cal-590和Cal-630也与绝大多数现存的荧光仪器兼容。Cal-520在488nm处被良好激发,用FITC滤片检测;Cal-590经优化在555nm处被良好激发,用TRITC/Cy3滤片检测;Cal-630经优化在594nm处被良好激发,用Texas Red滤片检测;

Cal-520 Potassium Salt是钾盐形式的Cal-520,不具有细胞膜渗透性,溶于水。可通过微注射、膜片电极、划痕标记等方式加载进入细胞,从而检测胞内钙水平。

产品特征

同义名:Cal-520钾盐 分子量:921.08
解离常数:Kd=320nM 溶解性:H2O
Ex/Em:493/515 Cal-520 Potassium Salt  钙离子荧光探针

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,有效期至少1年。 

运输:冰袋运输。

注意事项

1) 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

附录ICal-520,Cal-590或Cal-630钙离子探针的波长和钙离子结合特性

产品名称 产品编号 激发波长(nm) 发射波长(nm) 解离常数Kd(nM)
Cal-520 JP4537-50UG 492 514 320
Cal-590 JP4535-50UG 558 584 561
Cal-630 JP4536-50UG 607 623 792

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JP4574-250UG Cal-590 Potassium Salt钙离子荧光探针 5×50μg
JP4575-250UG Cal-630 Potassium Salt钙离子荧光探针 5×50μg

 

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

N/A

规格:

10×50μg

货期:

2天

CoroNa Green, Cell Impermeant   钠离子指示探针

CoroNa Green, Cell Impermeant   钠离子指示探针 货号: JP4586-1MG 品牌: Jinpan 标签: 标记物及染料, 细胞生物学研究, 荧光探针

描述

CoroNa Green, Cell Impermeant

钠离子指示探针

产品关键词

CoroNa Green, AM;Sodium indicator 钠离子指示剂(荧光探针);SBFI AM;Asante NaTrium Green-2 AM;APG-2 AM;PBFI AM;Fluo-4am;钾离子荧光探针;Gramicidin短杆菌肽;

产品信息

产品名称

产品编号 规格 价格(元)
CoroNa Green钠离子指示探针 JP4586-1MG 1mg

15983

产品描述

CoroNa Green是一种钠离子指示探针,一旦与Na+结合,绿色荧光明显增强,但波长发生很少变化(见附图I)。与其他Na+指示探针SBFI(JP4533、JP4509)和ENG-2(JP4514、JP4534)一样,当存在生理浓度的其他单价阳离子时,CoroNa Green允许从时间和空间上来选择性分辨Na+浓度的变化。分子量更小的CoroNa Green(586),相比较于其他大分子量的Na+指示探针ENG-2(1087),在同等条件下,其膜渗透性的衍生物能更好的加载进入胞内。CoroNa Green能响应更广泛的Na+浓度范围(见附图II),Kd~80mM。不同于传统的SBFI,与Na+结合后的CoroNa Green的最大吸收和发射波长分别是492nm和516nm,因此,兼容于任何能检测荧光素(Fluorescein)的仪器。CoroNa Green不具有膜渗透性,可通过显微注射、膜片移液器或胞饮细胞上样剂进行上样,测定胞内的钠离子水平[1-2]。

产品特征

1) 纯度:≥90%(HPLC)

2) 外观:固体

3) 最大吸收/发射波长:492/516nm

4) 解离常数(Kd):~80mM

5) 溶解性:DJPO

保存与运输方法

保存:≤-20ºC避光干燥保存,至少1年有效。 

运输:冰袋运输。

注意事项

1) 整个染色过程中需注意避光。

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

参考文献

[1] Naumann G, Lippmann K, Eilers J. Photophysical properties of Na+ -indicator dyes suitable for quantitative two-photon fluorescence-lifetime measurements. J Microsc. 2018 Nov;272(2):136-144. doi: 10.1111/jmi.12754. Epub 2018 Sep 7. PMID: 30191999.

[2] Sediqi H, Wray A, Jones C, Jones M (2018) Application of Spectral Phasor analysis to sodium microenvironments in myoblast progenitor cells. PLoS ONE 13(10): e0204611. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0204611

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货号 名称 规格
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JP0079-1MG Gramicidin A短杆菌肽A 1mg

​ 

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

N/A

规格:

1mg

货期:

3天

10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP) 过氧化氢探针

10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP) 过氧化氢探针

货号: JP5203-25MG 品牌: Jinpan 标签: 细胞生物学研究

描述

10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP) 过氧化氢探针

(Amplex® Red H2O2 probe 过氧化氢探针)

 

搜索关键词:

10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP);Amplex®Red; Resorufin 试卤灵;过氧化氢探针;Ampliflu™ Red;CAS NO:119171-73-2;

 

基本介绍:

10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP),中文名10-乙酰基-3,7-二羟基吩嗪,以商标名Amplex®Red在市场上销售。ADHP是一种高度灵敏和稳定的过氧化物酶底物,选择性检测过氧化氢(H2O2)。存在辣根过氧化物酶(HRP)的体系中,这一基本无色和非荧光的ADHP与H2O2以1:1的化学定量比反应,生成强红色荧光的试卤灵(Resorufin)(Ex/Em= 571/585nm),可通过荧光光度计和酶标仪分析结果。许多酶反应能产生H2O2,因此,ADHP能够用在偶联酶促反应中检测许多不同酶的生物活性。

 

工作原理:

10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP) 过氧化氢探针

Fig 1. 使用ADHP进行偶联酶促反应的工作原理。葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化生成过氧化氢(H2O2),通过辣根过氧化物酶(HRP)催化ADHP反应生成强荧光试卤灵(Resorufin)。

 

产品应用:

10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP)是目前位置最灵敏和稳定的荧光探针用来检测HRP和H2O2。

A)  ADHP普遍用来检测许多免疫实验中的HRP;

B)  ADHP用来检测微量的H2O2;

Zhou, M.等研究表明ADHP(Amplex®Red)检测过氧化物酶活性,最少能检测1×10−5U/mL HRP;或H2O2,最少能检测50nM H2O2。【文献来源:Zhou M et al. A stable nonfluorescent derivative of resorufin for the fluorometric determination of trace hydrogen peroxide: applications in detecting the activity of phagocyte NADPH oxidase and other oxidases. Anal Biochem. 1997 Nov 15;253(2):162-8.】

 

基本特性:

1)   CAS NO.:119171-73-2

2)   化学名:1-(3,7-dihydroxy-10H-phenoxazin-10-yl)-ethanone; 10H-Phenoxazine-3,7-diol, 10-acetyl-;

3)   同义名:N-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine N-乙酰基-3,7-二羟基吩嗪;ADHP;Amplex®Red Reagent;A 6550;Ampliflu™ Red 荧光红染料;

4)   分子式:C14H11NO4

5)   分子量:257.25

6)   纯度:≥98%

7)   摩尔消光系数(ε):54,000 (Resorufin)

8)   Ex/Em:571/585nm (pH 9.0, Resorufin)

9)   溶解性:溶于DJPO、DMF

10)  化学结构式:10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP) 过氧化氢探针 

 

ADHP的应用实例:

文献来源:Summers FA et al. Photooxidation of Amplex Red to resorufin: implications of exposing the Amplex Red assay to light. Methods Enzymol. 2013;526:1-17.

实验1)Amplex Red Assay

Reactions containing 50 µM Amplex Red reagent, 0.1 U/mL HRP, H2O2 and 0.5 U/mL catalase in 50 mM sodium phosphate buffer, pH 7.4, as indicated in the figure legends, were prepared in a darkroom under a red light. White ELISA plates containing the samples (100 µL/well) in triplicate were either kept in the dark for 30 and 60 min or under ambient laboratory light. The fluorescence (excitation 535 nm, emission 595 nm) was measured on a GENios platereader (Tecan, Durham, NC, USA).

实验2)Cell Culture Assay

HaCaT keratinocytes were incubated with 50 µM Amplex Red in PBS for 1 h at 37°C in the dark, then cells were irradiated using UVA (315–400 nm) from four fluorescent PUVA lamps (Houvalite F20T12BL-HO; National Biological Co., Twinsburg, OH) for 15 minutes (3.75 J/cm2) and 30 minutes (7.5 J/cm2). Control cells were treated with the same conditions. After exposure, the fluorescence (excitation 535 nm, emission 595 nm) was recorded using a plate reader.

产品订购:进口原料,现货供应,欢迎来电咨询021-50837765,或QQ:2971634497,1563822900。

货号 产品名称 规格           价格(元) 
JP5203-1MG      10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP) 过氧化氢探针 1mg 339
JP5203-5MG 10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP) 过氧化氢探针    5mg 1429
JP5203-25MG 10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP) 过氧化氢探针 25mg 4489

 

注意事项

1)   ADHP的使用比较方便,可配制10-20mM DJPO储存液,之后用反应缓冲液比如PBS,Tris buffer稀释到50-200µM工作浓度用于检测。最佳的工作浓度需根据自身实验需求进行优化。

2)   Amplex®Red是Life Technologies公司的注册商标名。

3)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

 

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

119171-73-2

规格:

25mg

货期:

咨询客服

CoroNa Green, AM, Cell Permeant 钠离子指示探针

CoroNa Green, AM, Cell Permeant 钠离子指示探针 货号: JP4585-500UG 品牌: Jinpan 标签: 标记物及染料, 细胞生物学研究, 荧光探针

描述

CoroNa Green, AM, Cell Permeant 钠离子指示探针

 

产品关键词

CoroNa Green, AM;Sodium indicator 钠离子指示剂(荧光探针);SBFI AM;Asante NaTrium Green-2 AM;APG-2 AM;PBFI AM;Fluo-4 am;钾离子荧光探针;Gramicidin 短杆菌肽;CCCP;

产品信息

产品名称

产品编号 规格            价格(元)

CoroNa Green, AM, Cell Permeant钠离子指示探针

JP4585-100UG 2×50μg 2143
CoroNa Green, AM, Cell Permeant钠离子指示探针 JP4585-250UG 5×50μg

5143

CoroNa Green, AM, Cell Permeant钠离子指示探针 JP4585-500UG 10×50μg

9143

产品描述

CoroNa Green, AM是一种具细胞膜渗透性的钠离子(Na+)指示探针。一旦进入细胞后,经非特异性酯酶水解生成不具有膜渗透性的CoroNa Green,一旦与Na+结合,绿色荧光明显增强,但波长发生很少变化(见附图I)。与其他Na+指示探针SBFI(JP4533、JP4509)和ENG-2(JP4514、JP4534)一样,当存在生理浓度的其他单价阳离子时,CoroNa Green允许从时间和空间上来选择性分辨Na+浓度的变化。分子量更小的CoroNa Green(586),相比较于其他大分子量的Na+指示探针ENG-2(1087),在同等条件下,其膜渗透性的衍生物能更好的加载进入胞内。CoroNa Green能响应更广泛的Na+浓度范围(见附图II),Kd~80mM。不同于传统的SBFI,与Na+结合后的CoroNa Green的最大吸收和发射波长分别是492nm和516nm,因此,兼容于任何能检测荧光素(Fluorescein)的仪器,包括:流式细胞仪、荧光显微镜、共聚焦显微镜、荧光酶标仪和荧光光度计。CoroNa Green是一款有价值的工具,用来分析细胞外和细胞内的钠离子水平[1-2]。

产品特征

1)   同义名:CoroNa Green acetoxymethyl (AM) ester

2)   分子量:657.62 g/mol

3)   纯度:≥90%(HPLC)

4)   外观:固体

5)   最大吸收/发射波长:492/516nm

6)   解离常数(Kd):~80mM

7)   溶解性:DJPO

保存与运输方法

保存:≤-20ºC避光干燥保存,至少1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   整个染色过程中需注意避光。

2)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法(活细胞成像分析)

以下步骤仅做参考,具体请根据实际情况或参考文献资料来调整。

1.1   储存液准备:于实验前,将低温保存的CoroNa Green AM从冰箱取出平衡至室温(至少20min),低速离心后再开盖,直接往管内加入高质量的无水DJPO配制成1-10mM储存液,比如:往50μg CoroNa Green, AM固体(Mw:657.62)加入15μl DJPO,充分溶解后配制成5mM储存液。≤-20ºC分装干燥冻存,避免反复冻融。

1.2   工作液准备:于实验前,用生理缓冲液比如:HHBS(JP3510-500ML)、HBSS(JP3505-500ML)或无血清培养基稀释一定量的储存液,使其工作浓度在0.5-10µM,初次使用务必摸索几个梯度浓度的探针,以确认适宜的工作浓度。工作液必须现配现用。

1.3   染色步骤:

1.4   荧光检测

应用示例(来自文献,仅做参考)

1)   文献来源:Fujishima A, Takahashi K, Goto M, Hirakawa T, Iwasawa T, Togashi K, Maeda E, Shirasawa H, Miura H, Sato W, Kumazawa Y, Terada Y. Live visualisation of electrolytes during mouse embryonic development using electrolyte indicators. PLoS One. 2021 Jan 29;16(1):e0246337. doi: 10.1371/journal.pone.0246337. PMID: 33513193; PMCID: PMC7845971.

实验目的(Na+imaging):胚胎(从桑椹胚至孵化期)用0.5µM CoroNa Green AM加载,37℃孵育30min。之后,用LSM780共聚焦显微镜来测定胞内和/或囊胚腔的荧光强度。激发和发射波长分别是488nm和510-520nm,相同实验至少重复3次。CoroNa Green, AM, Cell Permeant 钠离子指示探针

2)   文献来源:Fu T, Xu C, Li H, Wu X, Tang M, Xiao B, Lv R, Zhang Z, Gao X, Liu B and Yang C (2022) Salinity Tolerance in a Synthetic Allotetraploid Wheat (SlSlAA) Is Similar to Its Higher Tolerant Parent Aegilops longissima (SlSl) and Linked to Flavonoids Metabolism. Front. Plant Sci. 13:835498. doi: 10.3389/fpls.2022.835498

实验目的(Na+imaging):小麦种子水培10天后,暴露于150mM NaCl溶液7天。之后加入CoroNa Green AM来观察小麦根部细胞内的Na+分布。小麦根部用含探针的染色工作液(20 μM CoroNa Green AM, 5 mM KCl, 5 mM Ca2+-MES, pH 6.1)避光孵育1h。用蒸馏水清洗染色部位。使用共聚焦成像仪(激发:488nm,发射:505-525nm)来观察根部的分生组织区和成熟区。

CoroNa Green, AM, Cell Permeant 钠离子指示探针

Fig. Effects of salinity stress on Na+ and K+ homeostasis in a synthetic tetraploid wheat line and its diploid parents. (A,B) Na+ distribution in root cell indicated by CoroNa Green AM under salinity stress. (C–F) Na+ and K+ concentration. The seedlings were exposed to 150 mM NaCl for 7 days. The values are the mean (± SD) of three biological replicates. Different letters above the bar showed significant differences among wheat lines and treatments according to t-test (P < 0.05).

3)   文献来源:Bortner, C.D., Oakley, R.H. & Cidlowski, J.A. Overcoming apoptotic resistance afforded by Bcl-2 in lymphoid tumor cells: a critical role for dexamethasone. Cell Death Discov. 8, 494 (2022).

实验目的(Determination of intracellular potassium, sodium, and calcium):于检测前1h,取 2 ul 的2.5 mM CoroNa Green-AM (Na+) or PBFI-AM (K+) 储存液加入1ml细胞溶液中,使其终浓度为5 uM。于检测前30min,取4 ul的1mM Fluo-4加入1ml细胞溶液中。于37 °C, 7% CO2 中孵育细胞. 于流式分析前再加入PI使其工作浓度为10 ug/ml. 用装有FACSDiVa 软件的LSRII流式细胞仪进行数据分析。仅将碘化丙啶染色阴性的细胞进行相对的胞内离子浓度分析。

CoroNa Green, AM, Cell Permeant 钠离子指示探针

参考文献

[1] Naumann G, Lippmann K, Eilers J. Photophysical properties of Na+ -indicator dyes suitable for quantitative two-photon fluorescence-lifetime measurements. J Microsc. 2018 Nov;272(2):136-144. doi: 10.1111/jmi.12754. Epub 2018 Sep 7. PMID: 30191999.

[2] Sediqi H, Wray A, Jones C, Jones M (2018) Application of Spectral Phasor analysis to sodium microenvironments in myoblast progenitor cells. PLoS ONE 13(10): e0204611. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0204611

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JP4509-100UG SBFI AM ( Na+Indicator)钠离子指示探针 2×50μg
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JP4533-1MG-B SBFI Potassium Salt ( Na+Indicator)钠离子指示探针 20×50μg
JP4534-500UG-B Enhanced NaTRIUM Green-2 TMA+ Salt钠离子指示探针 10×50μg
JP4585-100UG CoroNa Green, AM, Cell Permeant钠离子指示探针 2×50μg
JP4586-1MG CoroNa Green, Cell Impermeant 钠离子指示探针 1mg
JP0078-50MG Gramicidin短杆菌肽 50mg
JP0079-1MG Gramicidin A短杆菌肽A 1mg

 

其他信息

品牌:

Jinpan

CAS:

N/A

规格:

10×50μg

货期:

3天