抗体蛋白纯化的简介

抗体蛋白纯化的简介

单克隆和多克隆抗体是基础研究和新药发现的常用工具。抗体类生物制剂在新治疗制剂中的占比也在不断上升。利用蛋白A、蛋白G和蛋白L交联介质进行亲和色谱分析在实验室级、工艺级和工业级纯化蛋白分离和生产工作流程中发挥着重要作用。 

琼脂糖珠和亲和凝胶

琼脂糖珠和亲和凝胶可让蛋白A或蛋白G交联到琼脂糖珠上,从而纯化抗体。这类树脂适于各类大小规模的纯化,例如重力流柱纯化、批量低速离心处理以及低压色谱流程。EZview™亲和凝胶掺入了一种红色染料,让用户可以轻松区分沉淀物与上清液区,减少批量纯化过程中的蛋白质损失。免疫沉淀试剂盒包含亲和凝胶、微量离心柱和裂解试剂,专用于从免疫沉淀物中大程度回收蛋白质。

FAST FLOW SEPHAROSE™和FAST FLOW琼脂糖树脂

Fast Flow Sepharose™和Fast flow琼脂糖采用比标准琼脂糖珠树脂承压能力更高的高度交联琼脂糖珠或凝胶。非常适合快速液相色谱 (FPLC) 蛋白纯化方法,建议用于大中规模抗体纯化。

PUREPROTEOME™ 磁珠系统

PureProteome™蛋白A、蛋白G和蛋白A / G磁珠可用于从血清、血浆或细胞培养上清液样品等复杂基质中快速、可重现地纯化免疫球蛋白。只需利用磁力架或磁力平台从洗涤和洗脱成分中分离磁珠,即可纯化出蛋白。此系统同时适合单微量离心管的低通量应用或全自动的高通量应用。

CYTIVA™ AMERSHAM色谱柱和填料

现有多种Cytiva™ Amersham色谱填料可从不同来源纯化单克隆和多克隆抗体。

  • GraviTrap™色谱柱是填料重力流色谱柱,可从细胞培养上清液及生物体液中快速、高效地手动纯化单克隆和多克隆抗体及抗体片段。

  • SpinTrap™ 色谱柱是一次性填料离心色谱柱,用于简单的小规模抗体纯化或特定蛋白质富集。

  • HiTrap™ HP色谱柱预填料蛋白A或蛋白G Sepharose™高效树脂,适用于常规制备级纯化各类单克隆和多克隆抗体(如人IgG)。HiTrap™ MabSelect 色谱柱预填料MabSelect树脂(生物工艺填料),可从大量样品中捕获单克隆抗体 (Mabs)。

  • MultiTrap™ 96孔滤板可采用适合离心或真空过滤、手动或自动化系统的96孔过滤板,快速、可靠地小规模纯化抗体或富集目标蛋白。

  • HiScreen™ Capto L色谱柱预填料Capto L(生物工艺亲和色谱树脂),可用于捕获抗体和抗体片段,如Fab片段、单链可变区片段(scFv)和结构域抗体 (Dabs)。HiScreen™ Capto L色谱柱可用于工艺开发平台。这类色谱柱是方法优化和参数筛选的选择。

  • HiScreen™ MabSelect™ 色谱柱预填料MabSelect™树脂,是来自Cytiva的工艺开发平台的一部分。MabSelect™树脂是一种生物工艺树脂,可从大量样品中捕获单克隆抗体。这类色谱柱是单克隆抗体捕获方法优化和参数筛选的选择。

  • Protein A和 Protein G Mag Sepharose™填料由基于琼脂糖的磁珠组成,可通过免疫沉淀或pull-down作用简化目标蛋白富集,适于从血清和细胞上清液中快速、小规模纯化和筛选单克隆和多克隆抗体。

  • GammaBind和GammaBind Plus Sepharose™是蛋白G亲和色谱树脂,可纯化各物种的免疫球蛋白(IgGs),适于从任意生物体液或细胞培养基中分析和纯化各类和亚类免疫球蛋白,以及免疫球蛋白片段。这种树脂非常适合免疫沉淀程序。

  • Protein A和Protein G Sepharose™、Sepharose™ Fast Flow、Capto L和MabSelect™树脂也可单独用于除垢程序。

QEDbioscience抗体:抗内毒素抗体Anti-Endotoxin Antibody15309


QEDbioscience抗体:抗内毒素抗体Anti-Endotoxin Antibody

简要描述:QEDbioscience抗体:抗内毒素抗体Anti-Endotoxin Antibody

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品牌 其他品牌 货号 15309
供货周期 现货 应用领域 医疗卫生,化工,生物产业,制药

QEDbioscience抗体:抗内毒素抗体Anti-Endotoxin Antibody

QED Bioscience为学术、生物技术、诊断和制药研究客户开发新型单克隆和多克隆抗体产品。提供数千种单克隆和多克隆抗体,用于癌症研究、神经科学、信号转导、传染病和许多其他研究领域的研究、发现和诊断应用。我们在抗体生产方面的能力使我们只能提供最高质量的抗体。

产品名称:抗内毒素抗体(15309)
描述:抗内毒素-革兰氏阴性小鼠单克隆抗体
目标:内毒素
物种反应性:E. COLI J5, K. PNEUMONIAE, E. AEROGENES, S. MARCESCENS, P. MIRABILIS, P. VULGARIS, A. CALCOACETICUS, PS. AERUGINOSA
应用程序:酶联免疫吸附测定
HOST:老鼠
Clonality:单克隆的
Clone ID:IVEC9-220.1
IsotypeIgM
免疫原E. coli O111 B4 J5 cells

上海金畔生物科技有限公司

1.国内试剂耗材经销代理,

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QEDbioscience抗体:抗内毒素抗体Anti-Endotoxin Antibody

检测抗体的通用 ELISA 程序(滴定)

检测抗体的通用 ELISA 程序(滴定)

注意事项

1 该 ELISA 程序适用于针对纯化抗原(蛋白质或肽)产生的抗体的定性检测。这并不是为了测量血清或其他液体中的抗体浓度而设计的。

2 该程序假设一抗是在兔子中产生的。如果使用其他宿主动物,则需要使用适当的第二抗体。  

涂层

1. 配制 1-10 ug/ml 溶液。包被缓冲液中的抗原(肽或蛋白质)(不储存稀释的抗原)。

2. 分配 100 ul 抗原溶液,包被高结合 ELISA 条板(目录号 80112)。每口井。用粘合膜覆盖板。在室温下孵育 2-6 小时或在 4°C 下孵育过夜,同时轻轻摇动轨道。

3. 吸出溶液并用洗涤缓冲液洗涤板 2 次。

封闭

1. 通过从储备液中稀释来制备封闭缓冲液。每孔分配 300 ul,将板在室温下孵育 2-6 小时或在 4°C 下轻轻混合过夜。

2 吸出封闭缓冲液。并轻拍纸巾以除去所有溶液。该板可直接用于测定或在密封袋中保存在 4oC 下以备将来使用。

抗体测定

1. 用抗体/结合物稀释液稀释免疫前血清和免疫血清(连续稀释 1:100、1:1K、1:10K、1:100K)。将 100 ul 每种抗体和免疫前稀释液分配到抗原包被的孔中。

2. 用粘合膜覆盖板。在室温下孵育 30 分钟,并轻轻摇动轨道。

3. 吸出溶液并用洗涤缓冲液洗涤板 5 次(每次洗涤应使用 200-300 ul 洗涤缓冲液;洗涤不当会导致高背景)。

4. 用抗体缀合物稀释剂稀释抗兔 IgG-HRP 缀合物 (1:5K-1:20K)。每孔分配 100 ul 结合物(结合物稀释不当可能导致颜色过低或背景过高)。

5. 用粘合膜覆盖板。在室温下孵育 30 分钟,并轻轻摇动轨道。

6. 吸出板并用洗涤缓冲液洗涤板 5 次。轻拍纸巾以除去所有溶液。

7. 每孔分配 100 ul 的即用型 TMB 底物溶液。

8. 用粘合膜覆盖板。在室温下孵育长达 15 分钟,并轻轻摇动轨道。阳性孔中会出现蓝色。

9 分配 100 ul 稀释溶液。每口井。蓝色将变成黄色。

10. 读取 450 nm 处的吸光度。  

注意:所有试剂必须使用新的吸头和试剂储液器进行分配。 ELISA 所需的所有试剂(除特定抗原或抗体外)都可以方便地以试剂盒形式购买。  

目录# 产品描述

80150 ELISA 试剂盒,用于检测血清中的小鼠抗体,75 分钟

80155 ELISA 试剂盒,用于检测血清中的大鼠抗体,75 分钟

80160 ELISA 试剂盒,用于检测血清中的兔抗体,75 分钟

80165 ELISA 试剂盒,用于检测血清中的山羊抗体,75 分钟

80166 ELISA 试剂盒,用于检测血清中的绵羊抗体,75 分钟

80170 ELISA 试剂盒,用于检测血清中的人抗体,75 分钟

80171 ELISA 试剂盒,用于检测血清中的 G. Pig 抗体,75 分钟

80175 ELISA 试剂盒,用于检测血清中的猴抗体,75 分钟

80176 ELISA 试剂盒,用于检测血清中的鸡抗体,75 分钟

80180 ELISA 试剂盒,用于检测血清中的仓鼠抗体,75 分钟

80185 ELISA 试剂盒,用于检测血清中的牛抗体,75 分钟

80186 ELISA 试剂盒,用于检测血清中的猪抗体,75 分钟

80187 ELISA 试剂盒,用于检测血清中的火鸡抗体,75 分钟

该试剂盒包含所有试剂,包括包被缓冲液、洗涤缓冲液、抗体/缀合物稀释剂。 TMB 底物、终止液、抗兔 IgG-HRP 缀合物;提供足够的试剂进行 1000-2000 次测试或 10-20 ELISA 板)。请根据一抗宿主获取试剂盒。上述试剂盒可用于测定针对给定抗原的抗体滴度。它们不适合测定血清中的抗体(IgG、IgA 或 IgM)浓度。

什么是蛋白质印迹?

什么是蛋白质印迹?

蛋白质印迹是研究蛋白质结构和功能的常用技术。通常,蛋白质样品在 SDS 凝胶上进行电泳,然后转移到固相支持物(硝基纤维素或 PVDF 膜)上,以便随后用特异性抗体进行探测。与 RNA/DNA 印迹技术的进步不同,剥离抗原/抗体并重复使用印迹是很困难的。


印迹的回收具有许多优点:

  • 有效利用数量有限的样品。

  • 比较在同一印迹中使用不同抗体获得的图像。

  • 使用相同或不同的抗体确认结果。

  • 重复使用印迹更加经济且耗时更少。

重复使用蛋白质印迹的想法源于这样的事实:抗原-抗体复合物(例如,免疫亲和柱)可以被破坏并且免疫亲和柱可以多次重复使用。然而,免疫亲和技术中常用的洗脱条件(低或高 pH、使用离液剂)并不能有效地从蛋白质印迹中剥离抗体。

ADI 现在开发了专门配制的解决方案,可以在温和的条件下有效且几乎定量地剥离抗体。它具有以下优点:新型抗体条解决方案的优点

  1. 1. 室温剥离抗体(无需加热)。
  2. 2.无刺激性气味,巯基乙醇。
  3. 3. Strip 溶液为 10X 溶液,可立即使用。只需将印迹浸泡在溶液中 10-15 分钟即可。
  4. 4. 在封闭缓冲液(试剂盒中提供)中短暂孵育后,印迹可在 15-60 分钟内重复使用。

抗体稀释液试剂盒TBS5012


抗体稀释液试剂盒

简要描述:抗体稀释液试剂盒(货号:TBS5012) :上海金畔生物科技有限公司专业提供一站式实验产品,欢迎咨询!

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品牌 其他品牌 货号 TBS5012
供货周期 现货

抗体稀释液试剂盒(货号:TBS5012) 

抗体稀释缓冲液用于免疫组织化学实验。它可以用多种抗体进行出色的染色。这种稀释剂可以改善IHC信号和背景;然而,它并不与Tribioscience推荐用于免疫组织化学检测的所有产品兼容。请查阅抗体数据表,确定是否为您感兴趣的产品推荐抗体稀释剂。

使用说明:

在ELISA或免疫组织化学分析中用作抗体稀释剂。按照抗体数据表上的指示,在抗体稀释液中稀释一抗、二抗以及一些检测试剂。

储存条件:

作为工作溶液提供,大小为5x 25mL毫升。储存在4℃下。用这些缓冲液稀释的抗体可以在4℃保存6个月而不降低结合活性。

Tribioscience是一家专注于为生命科学研究实验室和公司提供试剂的生物技术公司,是一家私人控股的生物技术公司,由斯坦福大学的一群科学家于2010年创立。公司专注于为分子生物学、生物化学、免疫学、传染病、基因治疗、神经科学、动物实验和药物开发领域的生命科学研究实验室和生物技术公司提供高质量的产品。产品涵盖抗体、生化测试、ELISA试剂盒、PCR及相关试剂等。我们还为生物技术行业和学术界提供CRO(研究合同组织)服务。我们的动物建模服务已被用于动物模型开发和活泼的高排名大学的评估。

抗体稀释液试剂盒(货号:TBS5012)