小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体——Iba1抗体,兔(免疫组化) Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)

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小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体——Iba1抗体,兔(免疫组化)小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体——Iba1抗体,兔(免疫组化)                              Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)

Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)


小胶质细胞标记抗体(免疫染色用)

产品编号

产品名称【中文名称】

规格

包装

019-19741

Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)

【抗Iba1,兔(免疫细胞化学)】

免疫化学用

50 μg

抗体信息

抗原名

Iba1

适用

实验

免疫

染色

同种型

IgG

免疫染色图像

小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体——Iba1抗体,兔(免疫组化)                              Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)

抗原信息

Iba1C末端序列肽

物种交叉反应性

人,小鼠,大鼠

标签

非标签

抗原别名

AIF-1, IRT1, Protein G1

免疫

动物

克隆号


(多克隆抗体)

详细信息

Iba1是与巨噬细胞/小胶质细胞特异性表达,分子量17000的钙结合蛋白。近年来,小胶质细胞除了对神经营养·保护作用以外,产生的NO、TNF- α、IL-1 β对神经伤害作用很受关注。

本产品是与小胶质细胞特异性反应的兔多克隆抗体,适用于与星形胶质细胞特异性GFAP单克隆抗体的双重染色。

使用文献

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[2] Gibson,et al.(2014).Science344(6183),1252304.

[3] Yan,et al. (2018).Cell, S009286741830285X.

[4] Pil,et al. (2018). Nature Medicine.

欲了解相关资料请点击文字:

Wako神经生物学抗体清单

巨噬细胞/小胶质细胞Iba1抗体

◆相关资料


Iba1抗体选择指南


小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体——Iba1抗体,兔(免疫组化)                              Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)

Iba1抗体系列

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Without Nuclear Loss-of-Function of FUS

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
019-19741 Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry) 
抗Iba1,兔(免疫细胞化学)
50 μg 免疫化学用

ELISA的实验原理和操作步骤

ELISA的实验原理和操作步骤

一、实验原理

ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体—聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。

 

二、实验材料

1、试剂

(1)包被缓冲液(PH9.6 0.05M碳酸盐缓冲液):

NaCO3:1.59克、NaHCO3:2.93克,加蒸馏水至1000ml

(2)洗涤缓冲液(PH7.4 PBS):0.15M KH2PO4 0.2克 Na2HPO4·12H2O 2.9克 NaCl  8.0克KCl 0.2克 Tween-20 0.05% 0.5ml 加蒸馏水至1000ml

(3)稀释液:牛血清白蛋白(BSA) 0.1克 加洗涤缓冲液至100ml 或以羊血清、兔血清等 血清与洗涤液配成5~10%使用。

(4)终止液(2M H2SO4):蒸馏水178.3ml,逐滴加入浓硫酸(98%)21.7ml。

(5)底物缓冲液(PH5.0磷酸棗柠檬酸):0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml 0.1M 柠檬酸(19.2克/L) 24.3ml 加蒸馏水50ml。

(6)TMB(四甲基联苯胺)使用液:TMB(10mg/5ml无水乙醇) 0.5ml底物缓冲液(PH5.5) 10ml 0.75% H2O232μl

(7)ABTS使用液:ABTS 0.5mg 底物缓冲液(PH5.5) 1ml 3% H2O2 2μl

(8)抗原、抗体和酶标记抗体。

(9)正常人血清和阳性对照血清。

2、器材:

(1)聚苯乙烯塑料板(简称酶标板)40孔或96孔,ELISA检测仪,50μl及100μl加样器,塑料滴头,小毛巾,洗涤瓶。

(2)小烧杯、玻璃棒、试管、吸管和量筒等。

(3)4℃冰箱,37℃孵育箱。


三、实验步骤

)用于检测未知抗原的双抗体夹心法:

1、包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。

2、加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。

3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。

4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。

5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-“号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

用于检测未知抗体的间接法:

用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。

 

四、注意事项

1.正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。

2.在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:

(1)固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。

(2)包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。

(3)酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。

(4)酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。


单克隆抗体的制造

单克隆抗体的制造

单克隆抗体 (mAb或MoAbs)是1975年发现的免疫系统蛋白质,是一种高度特异性的靶向分子 – 它将以高特异性与其靶分子结合。它可以将大量药物或药剂运送到目标。由于其特异性,单克隆抗体在医学科学中可用于治疗多种疾病,包括某些类型的癌症、心血管疾病、类风湿性关节炎等自身免疫性疾病、多发性硬化症、系统性红斑狼疮、克罗恩病和牛皮癣,并最大限度地减少或消除移植排斥的风险。 

此外,单克隆抗体治疗目前正在用于对抗SARS-CoV-2病毒。在这种情况下,mAb治疗有助于降低病毒载量,从而降低症状的严重程度以及住院或死于疾病的风险。

单克隆抗体:它们是如何制造的?

科学家可以创建各种工具, 生产和纯化 mAb通过引入对合适的实验动物(小鼠或兔)产生特异性抗体的人类基因。在这个过程中,研究人员确定要攻击哪种特定抗原,然后将其注射到合适的实验室动物中。然后,它们收集动物产生的针对特定抗原的免疫细胞,并将它们与人类细胞融合,允许它们增殖。 

基本上,有四种方法可以创建mAb。

  • 小鼠单克隆抗体 仅由小鼠蛋白制成

  • 嵌合单克隆抗体 由小鼠和人类蛋白质的组合制成

  • 人源化单克隆抗体 来自附着在人类蛋白质上的小鼠蛋白质的一小部分

  • 人单克隆抗体 是由人类蛋白质产生的蛋白质

它们是如何工作的?

单克隆抗体通过恢复、增强或模仿免疫系统的作用起作用,并根据其作用机制分为靶向治疗或免疫治疗。 

大多数用于癌症治疗的单克隆抗体通过寻找并附着在靶细胞上来帮助免疫系统识别和破坏癌细胞,而其他单克隆抗体则干扰促进肿瘤细胞在全身生长和扩散的蛋白质。 

一些mAb还通过阻止血管的形成或肿瘤生长所必需的某些激素的产生来起作用,而其他mAb则用于将化疗药物或放射性颗粒输送到癌细胞以促进细胞死亡。

根据美国国立卫生研究院网站,单克隆抗体结合 卡西利单抗和伊德维单抗预防了无症状和有症状感染 在家庭接触SARS-CoV-2感染者中,高达66.4%。对于那些被感染的人来说,它通过减少高病毒载量和有症状疾病的持续时间来降低住院和死亡的风险。

有副作用吗?

副作用可能取决于几个因素,包括患者在治疗前的健康状况、癌症类型、所用单克隆抗体的类型和剂量以及患者身体对治疗的反应。通常,单克隆抗体治疗可能引起针头部位反应(疼痛、发红、酸痛、肿胀、瘙痒和皮疹)和流感样症状(头痛、肌肉酸痛和疼痛、疲劳、发烧、发冷、腹泻、呕吐等)。 

虽然与化疗药物相比,严重的副作用较少,但一些单克隆抗体,如贝伐珠单抗(阿瓦斯汀),可能会导致一些患者的高血压、出血、伤口愈合不良、血栓和肾脏损伤,而有些人在接受西妥昔单抗(Erbitux)治疗时会出现严重的皮疹。 

其他严重的副作用包括过敏反应、贫血、毛细血管渗漏综合征(可能导低血压和多器官衰竭)、甲状腺功能亢进、炎症性肺病、充血性心力衰竭和心脏病发作。

植物内参-抗Rubisco内参抗体

在Western Blotting实验中,除了需要进行蛋白抽提、蛋白定量、等量蛋白上样电泳、转膜、靶蛋白抗体孵育、显色等步骤以外,还需要使用内参抗体对内参进行检测,以校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差,保证实验结果的准确性。然而常用的GAPDH、Beta-Actin以及Tubulin等抗体通常是作为动物细胞的内参使用,针对植物蛋白,则需要植物内参-抗Rubisco内参抗体选择合适的植物内参抗体。

核酮糖二磷酸缩化酶(Rubisco),是植物组织中广泛存在的一种高丰度蛋白,低等的细菌到高等的被子植物中都有其同源蛋白。该酶催化光合作用过程中二氧化碳固定的最有一个限速反应。该酶是双功能酶,在CO2浓度高的环境中,使RUBP进行羧化反应,起羧化酶的作用,形成磷酸甘油酸;在O2浓度高的环境中,使RUBP进行氧化反应,起加氧酶的作用,形成磷酸乙醇酸和磷酸甘油酸。

针对植物学研究中,需要对蛋白样品进行标准化定量或者使用蛋白内参对免疫学结果进行参照,上海金畔生物科技有限公司向您推荐Agrisera最全面的植物蛋白内参及定量方案。有抗Rubisco植物内参抗体(产品又包括抗Rubisco大亚基抗体、抗Rubisco小亚基抗体等),还有用于定量的Rubisco重组蛋白以及定量试剂盒。

货号 产品名称 宿主 检测物种 应用 规格
AS03 037 Rubisco large subunit, form I and form I Rb 拟兰芥/各种藻类等 WB/IF/IL 100μl

产品说明:瑞典Agrisera原装进口Rubisco大亚基抗体,兔源多抗,已检测种属为拟兰芥、各种藻类、藻类等,100μl包装,浓度为1µg/µl,免疫原KLH偶联的高等植物、蓝细菌、藻类等RbcL多肽,WB推荐稀释度为1:5000-1:10000。更多该产品详情请点击:Rubisco大亚基抗体说明书。【该抗体特别适合作为植物、藻类等Rubisco的定量

AS07 259 RbcS(Rubisco small subunit) Rb 拟兰芥/大麦/等 WB 200μl
产品说明:瑞典Agrisera原装进口Rubisco小亚基抗体,兔源多抗,已检测种属为拟兰芥、大麦等,预计能与双子叶植物如大豆、烟草以及单子叶植物包括水稻、玉米、地钱以及绿藻等有交叉反应,200μl包装,免疫原KLH偶联的单子叶植物以及双子叶植物如拟兰芥等RbcS多肽,WB推荐稀释度为1:5000。更多该产品详情请点击:Rubisco小亚基抗体说明书
更多核内参抗体请来电垂询,价格可能有调整,及时报价请使用货号在本站右侧产品查询栏内查询。

上海金畔生物科技有限公司还向您推荐Rubisco quantitation kit即Rubisco定量试剂盒,该试剂盒通过免疫印迹的定量分析能对植物及藻类样本中的Rubisco蛋白进行定量。试剂盒内包括了抗Rubisco大亚基(RbcL)抗体(100 µg可完成100次WB分析)、作为标准品的Rubisco大亚基重组蛋白(250 µl的0.15 pmoles/µl重组蛋白,可进行85次标准曲线的分析实验)以及Agrisera专用于定量用的蛋白裂解液PEB缓冲液(3 x 2 ml的4倍贮液,可进行48次植物样本蛋白的提取或120次藻类样本蛋白提取)。

产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
Rubisco quantitation kit AS09 409 Rubisco植物蛋白定量试剂盒

作为多家国际知名抗体公司的中国一级及一级代理商,上海金畔生物科技有限公司致力于为客户提供最具性价比的常规免疫学试剂,产品包括各种标签抗体、内参抗体、常规一抗以及全系列二抗,抗体检测底物以及相关试剂盒等。针对植物内参蛋白的检测及植物抗体,上海金畔生物科技有限公司能为您提供最全面的植物蛋白内参及定量方案。有抗Rubisco植物内参抗体(产品又包括抗Rubisco大亚基抗体、抗Rubisco小亚基抗体等),还有用于定量的Rubisco重组蛋白以及定量试剂盒。另外,还有几百种植物、模式生物及藻类等稀有生物抗体供您选择。如果您对上述产品感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询相关的产品信息及完整实验解决方案。

植物激素抗体-Agrisera植物抗体系列

植物激素(Planthormone)是植物体内合成的对植物生长发育有显著作用的几类微量有机物质,包括生长素(Auxin)、赤霉素(GA)、细胞分裂素(CTK)、脱落酸(ABA)、茉莉酸、激动素和乙烯(ETH)等。它们都是些简单的小分子有机化合物,但它们的生理效应却复杂多样。应用免疫学技术如放射免疫分析(RIA)和酶联吸附免疫分析(ELISA)可以对植物激素进行含量测定以及激素的植物组织定位。

但是由于植物激素分子较小,在制备相应的植物激素抗体时,不像植物体内的一些大分子物质如PEP羧化酶、ACC合成酶等那样经过纯化注入到动物体内即可引起免疫反应产生相应的抗体。相反,由于植物激素分子量较植物激素抗体-Agrisera植物抗体系列小,注入动物体内后不能引起免疫反应,缺乏免疫原性。因此在制备植物激素抗体时,需要将小分子物质连接到大分子物质,如牛血清血蛋白上后,再注入动物体内便能够引起免疫反应,产生相应的抗体。

瑞典Agrisera 公司成立于1980年,以致力于研发高品质的稀有单克隆及多克隆抗体,闻名于业界。由于其抗体主要涉及植物蛋白,因此Agrisera作为植物抗体品牌在全球具有较高的知名度。针对植物激素的定量、定位等免疫学方案,Agrisera为您准备了几十种植物激素抗体产品。

优良的实验结果依赖高特异性和灵敏度的抗体。上海金畔生物科技有限公司携手Agrisera公司为国内广大植物学科研工作者带来全面、优质的植物激素抗体,满足您各种植物免疫学实验的需要。

产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
rabbit polyclonal to BSA-conjugated abscisic acid(ABA) AS06 195 脱落酸大鼠多抗
rabbit polyclonal to BSA-conjugated synthetic IAA AS06 193 吲哚乙酸兔多抗
sheep polyclonal to salicylate AS09 412 水杨酸羊多抗
rabbit polyclonal BSA-conjugated N6-benzyladenosine AS09 438 苄基腺苷(6BA)兔多抗
rabbit polyclonal purified BSA-conjugated N6-isopentenyladenosine AS09 435 异戊烯基腺嘌呤(iPA)兔多抗
rabbit polyclonal purified BSA-conjugated cis-zeatin riboside AS09 431 顺玉米素兔多抗
rabbit polyclonal BSA-conjugated trans-zeatin riboside AS09 414 反玉米素兔多抗
rabbit polyclonal BSA-conjugated dihydrozeatin riboside AS09 437 二氢玉米素兔多抗
rabbit polyclonal BSA-conjugated kinetin AS09 444 激动素兔多抗
rabbit polyclonal purified BSA-conjugated meta-topolin AS09 440  meta-topolin兔多抗
rabbit polyclonal BSA-conjugated ortho-topolin AS09 442  ortho-topolin兔多抗

Agrisera的植物抗体种类齐全,从模式植物的拟兰芥到水稻、大豆等,都有相应的种属特异性抗体供应;而从抗体种类来看,除了光合作用(叶绿体),呼吸作用(线粒体)等相关蛋白外,蛋白酶、植物病理及发育相关抗体也备受瞩目。作为Agrisera的中国区域代理,上海金畔生物科技有限公司为您提供最专业和全面的植物免疫学产品及实验解决方案。

上海金畔生物科技有限公司携手Agrisera公司,为国内广大植物学科研工作者带来涵盖多个植物物种、满足不同科研需求的植物抗体,希望能帮助国内植物科学研究更上一层楼。如果您对上述植物蛋白抗体感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询相关产品资料。