从细胞或组织中提取纯化蛋白时需要破碎细胞,此时蛋白酶就会被释放出来或被激活,降解蛋白质,最终影响试验结果。为了避免这些情况的出现,建议在样品制备时尽可能在低温下进行。此外,许多蛋白酶在pH9以上就失活了,因此Tris碱,碳酸钠或碱性载体两性电解质往往能抑制蛋白水解。但是有些蛋白酶在上述条件下仍然保持着活性,此时应当使用蛋白酶抑制剂。因此,选择有效的蛋白酶抑制剂对于蛋白纯化路线设计来讲显得尤为重要。
蛋白酶抑制剂种类繁多,通常使用许多化学物质作为蛋白酶抑制剂,如PMSF 和Leupeptin。而且由于一种蛋白酶抑制剂只对某一类蛋白酶起作用,因此通常建议复合使用蛋白酶抑制剂,如广谱蛋白酶抑制剂“鸡尾酒”,即Protease Inhibitor Cocktail。德国AppliChem提供一系列的蛋白酶抑制剂Protease Inhibitor Cocktail产品,适用于细胞裂解,蛋白提取和多种生化反应。根据不同的样本来源和实验要求,又分为5种Cocktail套装供您选择。这包括了专门用于细胞蛋白提取的Cocktail 1,多用途的蛋白提取Cocktail 2,专用于细菌蛋白提取的Cocktail 3,适用于组织、细胞核细菌蛋白提取的Cocktail 4,通用的细胞组织蛋白提取的Cocktail 5以及专用于细胞中His标签蛋白的提取纯化的Cocktail 6。
上海金畔生物科技有限公司提供的原装进口Protease Inhibitor Cocktail 2 MultiPurpose(蛋白酶抑制剂混合物2)是一种通用/广谱的蛋白酶抑制剂混合物,适用于各种样本的裂解液的制备,如细胞裂解液、组织裂解液等。由AEBSF、Aprotinin、E-64、EDTA及Leupeptin等组成,可以广泛抑制各种蛋白酶,如丝氨酸蛋白酶、金属蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、类胰蛋白酶以及酯酶等。可以广泛抑制各种蛋白酶,如丝氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、金属蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶以及类胰蛋白酶等。 其中AEBSF是AppliChem独有的蛋白酶抑制剂,其通过磺酰化蛋白酶活性中心的一个基团,不可逆地抑制凝血酶thrombin和其他一些丝氨酸蛋白酶(chymotrypsin, kallikrein, plasmin, proteinase K, trypsin)。AEBSF是PMSF和DFP的低毒替代品,具有较高的水溶性,溶液状态的pH为酸性,且稳定性较高。EDTA能很好的通过螯合作用抑制金属蛋白酶的活性。
产品名称 | 货号 | 产品说明(点击查看说明书) |
Protease Inhibitor Cocktail 2 MultiPurpose(蛋白酶抑制剂混合物2) | A7719_0001 | 冻干粉形式,用1ml H2O复溶后可得100×浓缩液 |
上海金畔生物科技有限公司向您推荐德国AppliChem原装进口的Protease Inhibitor Cocktail 2 MultiPurpose(蛋白酶抑制剂混合物2)产品-20°C稳定保存3年以上。用1ml H2O复溶后可得100X浓缩液,溶解后于冷冻保存一个月。
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