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Rosetta (DE3) Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞

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Rosetta (DE3) Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞

货号： MF2333-5000UL 品牌： Jinpan 标签： 分子生物学

描述

Rosetta (DE3) Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞

 

产品标签：

BL21 (DE3)；Rosetta (DE3)；Rosetta (DE3)；表达感受态细胞；pET表达载体；IPTG诱导；

 

产品订购：更大包装或产品技术问题，请来电/在线咨询，电话：021-50837765 。

货号 产品名称 规格 价格（元）   
MF2333-1000UL     Rosetta (DE3) Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞    10×100μl         280
MF2333-5000UL Rosetta (DE3) Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 50×100μl 1280

【好消息】：见我司的感受态细胞促销活动。买感受态细胞得京东卡，发表使用评论，赢红包，双重惊喜，行动起来啦。

 

产品组分：

组分编号           组分名称

货号（规格）
MF2333-1000UL        MF2333-5000UL      
MF2333-A Rosetta (DE3) Competent Cell            10×100μl 50×100μl
MF2333-B Control Plasmid puC19, 0.1ng/μl 10μl 10μl

 

菌株描述

Rosetta宿主菌是BL21衍生菌，特别设计用于提高含大肠杆菌稀有密码子的真核蛋白的表达水平，这些菌株补充6种大肠杆菌缺乏的稀有密码子（AGG, AGA, AUA, CUA, CCC, GGA）对应的tRNA，位于兼容的氯霉素抗性质粒上，正因如此，Rosetta菌株提供“通用型”的翻译特征，而不限于大肠杆菌可利用的密码子。tRNA基因由天然启动子所启动。DE3命名表明该菌株染色体上整合λ噬菌体DE3溶原体（携带lacUV5启动子调控的T7 RNA聚合酶基因）。这种菌株适用于目的基因克隆在pET载体上的蛋白生产，由IPTG诱导表达。

Rosetta (DE3)菌株基因型：F-ompThsdSB(rB-mB-)galdcm(DE3)pRARE(CamR)

产品描述

本品是大肠杆菌Rosetta (DE3)菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。经pUC19质粒检测转化效率可达107 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。

 

保存与运输条件：

保存：-80℃保存，六个月有效。

运输：干冰运输。

 

注意事项

1）   感受态细胞必须用干冰运输。感受态细胞应在-80℃保存，不可反复冻融且放置时间过长，否则会减低感受态细胞的转化效率。

2）   最好在冰上融化感受态细胞。

3）   进行转化操作时，需在相应温度及无菌条件下进行。

4）   为防止转化实验不成功，可保留部分连接反应液以重新转化，将损失降到最低。

5）   产品包装内含质粒pUC19 DNA(0.1ng/μl)，供对照实验用。

6）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】

1）   取感受态细胞置于冰浴中，如需分装可将刚刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管内，置于冰浴中。【注意：一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl，可以根据实际情况分装使用。需注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。】

以下实验以50 μl感受态细胞为例。

2）   待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴静置30min。

3）   42℃热击45s，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3min。此过程不要摇动离心管。

4）   向每个离心管中加入450 μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃ 摇床，150 rpm振荡培养45min，目的使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。

5）   根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于室温（或37℃）直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16h。

【注意】：

a）涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；反之，若转化的DNA总量较少，可取200-300 μl转化产物涂布平板。若预计的克隆较少，可通过离心（4,000 rpm，2min）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。

b）新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。c）涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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MF2335-1000UL BL21 Star (DE3) pLysS Competent Cell大肠杆菌感受态细胞    10×100μl
JP0021-10G Chloramphenicol, USP Grade氯霉素 10g
JP0018-10G Ampicillin, Sodium Salt氨苄青霉素钠 10g
JP0017-5G Carbenicillin, Disodium Salt羧苄青霉素二钠盐 5g
JP0023-25G Streptomycin Sulfate, USP Grade硫酸链霉素 25g
JP0019-10G Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 10g
JP0014-1G Rifampicin, USP Grade利福平 1g

 

 

 

 

规格信息

品牌：

Jinpan
CAS:

N/A
规格：

50×100μl
货期：

咨询客服

Rosetta (DE3) Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞

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Rosetta (DE3) Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞

货号： MF2333-1000UL 品牌： Jinpan 标签： 分子生物学

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Rosetta (DE3) Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞

 

产品标签：

BL21 (DE3)；Rosetta (DE3)；Rosetta (DE3)；表达感受态细胞；pET表达载体；IPTG诱导；

 

产品订购：更大包装或产品技术问题，请来电/在线咨询，电话：021-50837765 。

货号 产品名称 规格 价格（元）   
MF2333-1000UL     Rosetta (DE3) Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞    10×100μl         280
MF2333-5000UL Rosetta (DE3) Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 50×100μl 1280

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MF2333-1000UL        MF2333-5000UL      
MF2333-A Rosetta (DE3) Competent Cell            10×100μl 50×100μl
MF2333-B Control Plasmid puC19, 0.1ng/μl 10μl 10μl

 

菌株描述

Rosetta宿主菌是BL21衍生菌，特别设计用于提高含大肠杆菌稀有密码子的真核蛋白的表达水平，这些菌株补充6种大肠杆菌缺乏的稀有密码子（AGG, AGA, AUA, CUA, CCC, GGA）对应的tRNA，位于兼容的氯霉素抗性质粒上，正因如此，Rosetta菌株提供“通用型”的翻译特征，而不限于大肠杆菌可利用的密码子。tRNA基因由天然启动子所启动。DE3命名表明该菌株染色体上整合λ噬菌体DE3溶原体（携带lacUV5启动子调控的T7 RNA聚合酶基因）。这种菌株适用于目的基因克隆在pET载体上的蛋白生产，由IPTG诱导表达。

Rosetta (DE3)菌株基因型：F-ompThsdSB(rB-mB-)galdcm(DE3)pRARE(CamR)

产品描述

本品是大肠杆菌Rosetta (DE3)菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。经pUC19质粒检测转化效率可达107 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。

 

保存与运输条件：

保存：-80℃保存，六个月有效。

运输：干冰运输。

 

注意事项

1）   感受态细胞必须用干冰运输。感受态细胞应在-80℃保存，不可反复冻融且放置时间过长，否则会减低感受态细胞的转化效率。

2）   最好在冰上融化感受态细胞。

3）   进行转化操作时，需在相应温度及无菌条件下进行。

4）   为防止转化实验不成功，可保留部分连接反应液以重新转化，将损失降到最低。

5）   产品包装内含质粒pUC19 DNA(0.1ng/μl)，供对照实验用。

6）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】

1）   取感受态细胞置于冰浴中，如需分装可将刚刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管内，置于冰浴中。【注意：一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl，可以根据实际情况分装使用。需注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。】

以下实验以50 μl感受态细胞为例。

2）   待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴静置30min。

3）   42℃热击45s，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3min。此过程不要摇动离心管。

4）   向每个离心管中加入450 μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃ 摇床，150 rpm振荡培养45min，目的使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。

5）   根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于室温（或37℃）直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16h。

【注意】：

a）涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；反之，若转化的DNA总量较少，可取200-300 μl转化产物涂布平板。若预计的克隆较少，可通过离心（4,000 rpm，2min）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。

b）新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。c）涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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JP0014-1G Rifampicin, USP Grade利福平 1g

 

 

 

规格信息

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Jinpan
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N/A
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10×100μl
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BL21 (DE3) Chemically Competent Cell

大肠杆菌化学感受态细胞

 

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BL21 (DE3)；BL21 (DE3) pLysS；Rosetta (DE3)；表达感受态细胞；非毒性蛋白表达；pET表达载体；

 

产品订购：更大包装或产品技术问题，请来电/在线咨询，电话：021-50837765 。网站：www.maokangbio.com。

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菌株描述

BL21 (DE3)菌株来源于大肠杆菌B/r菌株，特别构建适用于重组蛋白的高水平表达。DE3命名表明该菌株染色体上整合λ噬菌体DE3溶原体（其上携带lacUV5启动子调控的T7 RNA聚合酶基因），IPTG能诱导T7 RNA聚合酶的表达。BL21 (DE3)特别适合于噬菌体T7启动子为基础的表达系统（比如，pRSET，pCR T7和pET）。特别适合非毒性蛋白的表达。

BL21 (DE3)菌株基因型：F-ompThsdSB(rB-mB-)galdcm(DE3)

产品描述

本品是大肠杆菌BL21(DE3)菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。经pUC19质粒检测转化效率可达107 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。

 

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组分编号 组分名称

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保存与运输条件：

保存：-80℃保存，6个月有效。

运输：干冰运输。

 

注意事项

1）   感受态细胞必须用干冰运输。感受态细胞应在-80℃保存，不可反复冻融且放置时间过长，否则会减低感受态细胞的转化效率。

2）   最好在冰上融化感受态细胞。

3）   进行转化操作时，需在相应温度及无菌条件下进行。

4）   为防止转化实验不成功，可保留部分连接反应液以重新转化，将损失降到最低。

5）   产品包装内含质粒pUC19 DNA(0.1ng/μl)，供对照实验用。

6）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】

1）   取感受态细胞置于冰浴中，如需分装可将刚刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管内，置于冰浴中。【注意：一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl，可以根据实际情况分装使用。需注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。】

以下实验以50 μl感受态细胞为例。

2）   向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴静置30min。

3）   42℃热击45s，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3min。此过程不要摇动离心管。

4）   向每个离心管中加入450 μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃ 摇床，150 rpm振荡培养45min，目的使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。

5）   根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于室温（或37℃）直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16h。

【注意】：

a）涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；反之，若转化的DNA总量较少，可取200-300 μl转化产物涂布平板。若预计的克隆较少，可通过离心（4,000 rpm，2min）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。

b）新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。c）涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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MF2333-1000UL Rosetta (DE3) Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2334-1000UL BL21 Star (DE3) Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2335-1000UL BL21 Star (DE3) pLysS Competent Cell大肠杆菌感受态细胞         10×100μl
JP0021-10G Chloramphenicol, USP Grade氯霉素 10g
JP0018-10G Ampicillin, Sodium Salt氨苄青霉素钠 10g
JP0017-5G Carbenicillin, Disodium Salt羧苄青霉素二钠盐 5g
JP0019-10G Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 10g
JP0014-1G Rifampicin, USP Grade利福平 1g

 

 

 

 

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CAS:

N/A
规格：

50×100μl
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货号： MF2331-1000UL 品牌： Jinpan 标签： 分子生物学

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BL21 (DE3) Chemically Competent Cell

大肠杆菌化学感受态细胞

 

产品标签：

BL21 (DE3)；BL21 (DE3) pLysS；Rosetta (DE3)；表达感受态细胞；非毒性蛋白表达；pET表达载体；

 

产品订购：更大包装或产品技术问题，请来电/在线咨询，电话：021-50837765 。网站：www.maokangbio.com。

货号 产品名称 规格 价格（元）     
MF2331-1000UL    BL21 (DE3) Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞     10×100μl          280
MF2331-5000UL BL21 (DE3) Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 50×100μl 1280

【好消息】：见我司的感受态细胞促销活动。买感受态细胞得京东卡，发表使用评论，赢红包，双重惊喜，行动起来啦。

【好消息】：见我司整理的BL21系列表达感受态细胞常见问题。

 

菌株描述

BL21 (DE3)菌株来源于大肠杆菌B/r菌株，特别构建适用于重组蛋白的高水平表达。DE3命名表明该菌株染色体上整合λ噬菌体DE3溶原体（其上携带lacUV5启动子调控的T7 RNA聚合酶基因），IPTG能诱导T7 RNA聚合酶的表达。BL21 (DE3)特别适合于噬菌体T7启动子为基础的表达系统（比如，pRSET，pCR T7和pET）。特别适合非毒性蛋白的表达。

BL21 (DE3)菌株基因型：F-ompThsdSB(rB-mB-)galdcm(DE3)

产品描述

本品是大肠杆菌BL21(DE3)菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。经pUC19质粒检测转化效率可达107 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。

 

产品组分：

组分编号 组分名称

货号（规格）
MF2331-1000UL      MF2331-5000UL    
MF2331-A      BL21 (DE3) Competent Cell 10×100μl 50×100μl
MF2331-B Control Plasmid puC19, 0.1ng/μl        10μl 10μl

 

保存与运输条件：

保存：-80℃保存，6个月有效。

运输：干冰运输。

 

注意事项

1）   感受态细胞必须用干冰运输。感受态细胞应在-80℃保存，不可反复冻融且放置时间过长，否则会减低感受态细胞的转化效率。

2）   最好在冰上融化感受态细胞。

3）   进行转化操作时，需在相应温度及无菌条件下进行。

4）   为防止转化实验不成功，可保留部分连接反应液以重新转化，将损失降到最低。

5）   产品包装内含质粒pUC19 DNA(0.1ng/μl)，供对照实验用。

6）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】

1）   取感受态细胞置于冰浴中，如需分装可将刚刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管内，置于冰浴中。【注意：一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl，可以根据实际情况分装使用。需注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。】

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2）   向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴静置30min。

3）   42℃热击45s，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3min。此过程不要摇动离心管。

4）   向每个离心管中加入450 μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃ 摇床，150 rpm振荡培养45min，目的使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。

5）   根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于室温（或37℃）直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16h。

【注意】：

a）涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；反之，若转化的DNA总量较少，可取200-300 μl转化产物涂布平板。若预计的克隆较少，可通过离心（4,000 rpm，2min）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。

b）新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。c）涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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JP0021-10G Chloramphenicol, USP Grade氯霉素 10g
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JP0017-5G Carbenicillin, Disodium Salt羧苄青霉素二钠盐 5g
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AGL1 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞

发表于由

AGL1 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞

货号： MF2310-0500UL 品牌： Jinpan 标签： 分子生物学

描述

AGL1Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞

AGL1 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞

 

产品标签：

AGL1菌株；农杆菌感受态细胞；Rifampicin（Rif） 利福平；Kanamycin（kan）卡那霉素； EHA101；LBA4404；GV3101；植物转基因研究；

 

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货号 产品名称 规格 价格（元）  
MF2310-0500UL   AGL1 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞     10×50μl      600
MF2310-2500UL AGL1 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞 50×50μl 2400

 

产品描述：

AGL1菌株的染色体背景为C58，RecA，核基因含利福平抗性基因rif和羧苄青霉素抗性基因carb，为了便于转化操作，此菌株携带一无自身转运功能的琥珀碱型Ti质粒pTiBo542DT-DNA，此质粒含有vir基因（vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件，pTiBo542DT-DNA质粒自身的T-DNA转移功能虽被破坏，但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移）。AGL1菌株适用于拟南芥、水稻、杨树等植物的转基因操作。

我司金畔生物提供的AGL1电转感受态细胞经特殊工艺制作，特别适合大质粒的转化。基因型C58 RecA (rifR/carbR) Ti pTiBo542DT-DNA Succinamopine，经pCAMBIA2301质粒检测转化效率>105cfu/μg DNA。

 

产品组分：

组分编号         组分名称

货号（规格）
MF2310-0500UL      MF2310-2500UL   
MF2310-A AGL1 Electrocompetent cell 10×50μl 50×50μl
MF2310-B pCAMBIA2301 Control Vector (10ng/μl)      10μl 10μl

 

保存与运输条件：

保存：-80℃保存，6个月有效。

运输：干冰运输。

 

注意事项

1）   感受态细胞应保存在-80℃，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。

2）   整个转化操作，严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3）   加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染，会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。

4）   为确保最高转化效率，整个操作过程应尽量轻柔，并保持低温。

5）   转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6）   平板上克隆密度过大时，由于营养不足，克隆生长变慢，菌落变小。为获得大菌落，应减少质粒用量。

7）   利福平浓度应≤25μg/ml，过高浓度不利于农杆菌生长，会降低其生长速度和转化效率。我司EHA101感受态计算转化效率时所用平板只含50μg/ml卡那霉素，若所用平板含20μg/ml 利福平，则转化效率降低到1/2。

8）   培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌；根据所用菌株抗性加入Ti质粒筛选抗生素可防止Ti质粒丢失，但这些筛选抗生素不利于农杆菌的转基因操作，所以一般培养农杆菌时不考虑这些筛选抗生素，因Ti质粒丢失的概率极低（基本可以忽略）。

9）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1)    将0.1 cm电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净吸水纸上5min，待其沥干水分，正置5min，使乙醇充分挥发干净，立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面0.5cm以方便盖上杯盖，冰中静置5min使其充分降温。

2)   取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化，达到冰水混合状态时插入冰浴中使其完全融化。

3)    往50μl感受态细胞悬液中加入0.01~1μg（体积不大于6μl）质粒DNA，用手拨打管底使其混匀，立即插入冰中。用枪轻轻吹打混匀感受态细胞-质粒之后快速转移到电击杯中，盖上杯盖，空管保留待用【注意：由于感受态转化效率较高，第一次使用最好做预试验确定最佳的质粒用量】。

4)    启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 ohm，V=2400 V（此参数参考Bio-rad，具体使用请参考电转仪推荐步骤来操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。

5)    加入700 μl无抗生素的LB并转移到感受态空管中，于28℃振荡培养2~3h。

6)   6,000rpm离心1min，吸掉600ul上清，之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的LB或YEB平板上，用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min，待液体被吸收后，倒置平板，28℃培养2-3天。【注意：当平板只含转化所用双元载体抗生素时，28℃培养48h即可；当平板中加入双元载体抗生素的同时，再加入20μg/ml 利福平时，需28℃培养60h；若使用的平板含50μg/ml 利福平，需在28℃培养72-90h。】

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JP0017-25G Carbenicillin, Disodium Salt 羧苄青霉素二钠盐 25g
JP0019-10G Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素 10g
JP0019-25G Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素 25g
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JP0023-25G Streptomycin Sulfate, USP Grade 硫酸链霉素 25g

 

附表1 固体和液体LB培养基配方

组分Component                   LB（液体）/升           LB（固体）/升             
胰蛋白胨Tryptone 10g 10g
酵母提取物Yeast extract 5g 5g
氯化钠NaCl 10g 10g
1N NaOH 调整pH至7.0 调整pH至7.0
琼脂Agar / 15g

附表2 固体和液体YEB培养基配方

组分Component                   YEB（液体）/升         YEB（固体）/升           
胰蛋白胨Tryptone 5g 5g
酵母提取物Yeast extract 1g 1g
牛肉浸膏Beef Extract 5g 5g
蔗糖Sucrose 5g 5g
七水硫酸镁MgSO4·7H2O 0.49g 0.49g
1N NaOH 调整pH至7.0 调整pH至7.0
琼脂Agar / 15g

附表3 常见农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株  羧苄（carb）   链霉素（strep）  利福平（rif）    庆大霉素（gent） 卡那霉素（kan）
EHA101 S S R S R
EHA105 S S R S S
LBA4404 S R R S S
GV3101 S S R R S
AGL1 R S R S S
【备注】：S代表敏感，R代表抗性。

 

 

 — — Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/JP金畔所有】

 

规格信息

品牌：

Jinpan
CAS:

N/A
规格：

10×50μl
货期：

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