X-α-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷

货号： MF2003-25MG 品牌： Jinpan 标签： 分子生物学

描述

X-α-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷

产品标签

X-α-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷；α-半乳糖苷酶 a-galactosidase；MEL1基因；GAL4酵母双杂交系统；蓝白斑筛选；CAS：107021-38-5；

产品信息：【高纯度进口原料，≥98%（TLC），现货供应，国内各科研单位不二的选择】。

产品描述

X-α-Gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷，CAS：107021-38-5），一种用来检测α-半乳糖苷酶（也称为蜜二糖酶，α-D-半乳糖苷半乳糖水解酶，EC 3.2.1.22）活性的显色底物。X-α-Gal的使用，避开双杂交分析中β-半乳糖苷酶溶液制备和滤膜提升实验（filter-lift assay）的繁琐操作，只需直接添加在培养基上，通过蓝色沉淀的生成与否，即可用来检测双杂交相互作用。X-α-Gal可用来区分肠杆菌科内的不同物种以及划分乳酸菌和双歧杆菌。组织学研究中，X-α-Gal还可借助光学显微镜来检测组织的α-半乳糖苷酶活性。

利用α-半乳糖苷酶水解二糖-蜜二糖作为碳源，酵母菌得以正常生长或进行发酵。酿酒酵母菌内，该酶由几种GAL基因调控的MEL1基因所编码。一旦GAL4激活，α-半乳糖苷酶分泌，之后水解培养基上的X-α-Gal，使得菌落产生蓝斑。酵母双杂交研究用的工程菌包括AH109，PJ69-2A，Y190和Y187。

我司提供两种形式的产品，达分子生物学级，高纯（＞98%TLC）：

一种以冻干粉形式提供，货号为：MF2003-25MG，MF2003-100MG和MF2003-500MG。

一种以溶于DMF的储存液形式提供，浓度为20mg/ml，货号为：MF2003-1ML。

产品特性

1）CAS NO：107021-38-5

2）化学名：5-Bromo-4-chloro-3-indoxyl-α-D-galactopyranoside5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷；X-α-D-Galactoside X-α-D-半乳糖苷；

3）分子式：C14H15BrClNO6

4）分子量：408.64g/mol

5）纯度：≥98%（TLC）

6）外观：白色或近白色结晶粉末

7）溶解性：溶于DMF（20 mg/ml）

8）化学结构式：

保存与运输方法

保存：粉末-20℃避光干燥保存，2年有效。

运输：冰袋运输。

使用方法

方法1：直接倒入固体培养基

1. 溶解60mgX-α-gal于3ml DMF得20mg/ml储存液，马上使用或者避光储存于-20℃，6个月稳定；
2. 将高压灭菌好的琼脂培养基于室温冷却至50℃；
3. 按照每升培养基加入1ml 20mg/mlX-α-gal储存液的用量，直接加入冷却好的琼脂培养基；【若有需要，此时也可加入筛选用的抗生素】；
4. 倒平板，使用前必须让培养基室温凝固（通常至少需30min）。

方法2：涂布于预制培养平板上

1. 溶解24mg X-α-gal于6ml DMF得4mg/ml储存液，马上使用或者避光储存于-20℃，6个月稳定；
2. 超净工作台内放置已经倒好的固体培养基，使其表面干燥；
3. 吸取200μl (15cm平板) 或100μl（10cm平板）4mg/ml X-α-gal 储存液于预制培养平板上，并涂布使其均匀分散在表面【注意：平板边缘通常很难得以充分涂布，可能导致假阳性克隆生成。建议条件可能下，于平板中央挑取克隆】。
4. 使用前将上述涂布好的筛选平板于超净工作台内，至少晾干30min；
5. 将转化好的细菌或酵母涂于平板上，分别置于37℃或30℃倒置培养，直至蓝色菌落出现。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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 — — Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/JP金畔所有】

规格信息

X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷

货号： MF2001-5G 品牌： Jinpan 标签： 分子生物学

描述

X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷

搜索关键词：

X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷，IPTG，β-半乳糖苷酶（β-gal，beta-gal），蓝白斑筛选，CAS：7240-90-6

产品信息：

产品描述：

X-Gal，英文全名5-Bromo-4-chloro-3-indoxyl-beta-D-galactopyranoside，中文全名5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷，CAS NO：7240-90-6，是β-半乳糖苷酶（β-gal，beta-gal）的组织化学显色底物，能被水解生成半乳糖和5-溴-4-氯-3-羟基吲哚。5-溴-4-氯-3-羟基吲哚是一种可溶、无色的吲哚水解产物，随后通过二聚合和氧化反应，被转化为一不可溶蓝色产物-5,5’-二溴-4,4’-二氯靛蓝。

X-Gal是分子生物克隆实验中用来检测β-gal活性的一种主流试剂，可用来检测外源DNA是否插入质粒DNA的lacZ区。当外源DNA成功插入lacZ区，会破坏β-gal的α-互补，导致其活性丧失，则无法水解X-Gal使得菌落呈白色。而保留β-gal正常活性的细菌能产生蓝色菌落。许多其它应用也常将X-Gal用作底物来检测β-gal活性，这些应用包括：1）β-gal-抗体连接的免疫分析和免疫组化；2）基于β-gal诱导的大肠杆菌噬菌体检测；3）肿瘤进展微转移形成的检测。

X-Gal常常与IPTG（货号：MF2002-5G）联合使用进行蓝白斑克隆筛选。本品达分子生物学级别。

基本特性：

1）CAS NO：7240-90-6

2）英文同义名：5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactoside; X-b-D-Galactoside; BCIG;X-Gal;

3）分子式：C14H15BrClNO6 

4）分子量：408.63 g/mol

5）纯度：≥99%

6）外观：白色至类白色或无色粉末

7）溶解性：溶于DMF（20mg/ml），DJPO

8）化学结构： 

保存与运输方法

保存：-20℃避光干燥保存，2年有效。

运输：冰袋运输。

使用方法

1. X-Gal储存液配制

称取0.2g X-Gal装入15ml离心管，加入10ml DMF，震荡使其充分溶解。按照1ml/管分装，并用铝箔纸包裹离心管使其避光，置于-20℃冻存，正常情况下6-12个月稳定。

2. IPTG储存液配制

称取0.238g IPTG（货号：MF2002-5G）溶于10ml去离子水中，充分溶解混匀后，经0.22μm滤膜过滤除菌，即得到100mM（100×）的储存液。按照1ml/管分装，置于-20℃冻存，高达一年稳定。

3. 蓝白斑筛选方法

X-Gal常与IPTG联合使用进行蓝白斑克隆筛选。

方法1：X-Gal、IPTG加入固体培养基（推荐）

1）高压灭菌已加琼脂的培养基，并冷却到50℃左右；

2）每ml培养基内加入10μl 20mg/ml X-gal溶液、10μl 100mM IPTG（使其终浓度达到1mM）；

3）加入适量筛选抗生素如氨苄青霉素，卡那霉素，羧苄青霉素等；

4）混匀后倒板，置于无菌超净台内使培养基凝固（通常需要30min）。

【注意】：蓝白斑筛选用的平板请置于4℃避光保存，1周稳定。

5）将转化的感受态细胞涂布到上述平台，于37℃倒置培养过夜，观察蓝白斑情况。

方法2：X-Gal、IPTG直接涂布平板表面

1）于无菌超净台内干燥倒好的平板；

2）加120μl 20mg/ml X-gal溶液、40μl 100mM IPTG到平板表面，并涂布均匀覆盖整个平板；

3）于无菌超净台内干燥上述平板，至少需要30min；

4）将转化的感受态细胞涂布到上述平台，于37℃倒置培养过夜，观察蓝白斑情况。

注意事项

1）X-gal的首选溶剂为DMF。若使用DJPO作为溶剂，选择相对新鲜且高质量的DJPO极为重要，持续性的研究发现由于使用旧或低质量DJPO造成很多问题。建议大部分实验都用DMF作为溶剂。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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规格信息

X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷

货号： MF2001-1G 品牌： Jinpan 标签： 分子生物学

描述

X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷

搜索关键词：

X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷，IPTG，β-半乳糖苷酶（β-gal，beta-gal），蓝白斑筛选，CAS：7240-90-6

产品信息：

产品描述：

X-Gal，英文全名5-Bromo-4-chloro-3-indoxyl-beta-D-galactopyranoside，中文全名5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷，CAS NO：7240-90-6，是β-半乳糖苷酶（β-gal，beta-gal）的组织化学显色底物，能被水解生成半乳糖和5-溴-4-氯-3-羟基吲哚。5-溴-4-氯-3-羟基吲哚是一种可溶、无色的吲哚水解产物，随后通过二聚合和氧化反应，被转化为一不可溶蓝色产物-5,5’-二溴-4,4’-二氯靛蓝。

X-Gal是分子生物克隆实验中用来检测β-gal活性的一种主流试剂，可用来检测外源DNA是否插入质粒DNA的lacZ区。当外源DNA成功插入lacZ区，会破坏β-gal的α-互补，导致其活性丧失，则无法水解X-Gal使得菌落呈白色。而保留β-gal正常活性的细菌能产生蓝色菌落。许多其它应用也常将X-Gal用作底物来检测β-gal活性，这些应用包括：1）β-gal-抗体连接的免疫分析和免疫组化；2）基于β-gal诱导的大肠杆菌噬菌体检测；3）肿瘤进展微转移形成的检测。

X-Gal常常与IPTG（货号：MF2002-5G）联合使用进行蓝白斑克隆筛选。本品达分子生物学级别。

基本特性：

1）CAS NO：7240-90-6

2）英文同义名：5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactoside; X-b-D-Galactoside; BCIG;X-Gal;

3）分子式：C14H15BrClNO6 

4）分子量：408.63 g/mol

5）纯度：≥99%

6）外观：白色至类白色或无色粉末

7）溶解性：溶于DMF（20mg/ml），DJPO

8）化学结构： 

保存与运输方法

保存：-20℃避光干燥保存，2年有效。

运输：冰袋运输。

使用方法

1. X-Gal储存液配制

称取0.2g X-Gal装入15ml离心管，加入10ml DMF，震荡使其充分溶解。按照1ml/管分装，并用铝箔纸包裹离心管使其避光，置于-20℃冻存，正常情况下6-12个月稳定。

2. IPTG储存液配制

称取0.238g IPTG（货号：MF2002-5G）溶于10ml去离子水中，充分溶解混匀后，经0.22μm滤膜过滤除菌，即得到100mM（100×）的储存液。按照1ml/管分装，置于-20℃冻存，高达一年稳定。

3. 蓝白斑筛选方法

X-Gal常与IPTG联合使用进行蓝白斑克隆筛选。

方法1：X-Gal、IPTG加入固体培养基（推荐）

1）高压灭菌已加琼脂的培养基，并冷却到50℃左右；

2）每ml培养基内加入10μl 20mg/ml X-gal溶液、10μl 100mM IPTG（使其终浓度达到1mM）；

3）加入适量筛选抗生素如氨苄青霉素，卡那霉素，羧苄青霉素等；

4）混匀后倒板，置于无菌超净台内使培养基凝固（通常需要30min）。

【注意】：蓝白斑筛选用的平板请置于4℃避光保存，1周稳定。

5）将转化的感受态细胞涂布到上述平台，于37℃倒置培养过夜，观察蓝白斑情况。

方法2：X-Gal、IPTG直接涂布平板表面

1）于无菌超净台内干燥倒好的平板；

2）加120μl 20mg/ml X-gal溶液、40μl 100mM IPTG到平板表面，并涂布均匀覆盖整个平板；

3）于无菌超净台内干燥上述平板，至少需要30min；

4）将转化的感受态细胞涂布到上述平台，于37℃倒置培养过夜，观察蓝白斑情况。

注意事项

1）X-gal的首选溶剂为DMF。若使用DJPO作为溶剂，选择相对新鲜且高质量的DJPO极为重要，持续性的研究发现由于使用旧或低质量DJPO造成很多问题。建议大部分实验都用DMF作为溶剂。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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