anogen:多重人细胞因子 ELISA 试剂盒EM10002


anogen:多重人细胞因子 ELISA 试剂盒

简要描述:anogen:多重人细胞因子 ELISA 试剂盒
用于同时定量测定 M1/M2/MDSC 细胞因子,包括粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、干扰素-γ、白细胞介素-4、白细胞介素-6、白细胞介素-10、白细胞介素-12、单核细胞趋化激活因子和肿瘤坏死因子-α , 在细胞培养上清液和其他生物样品中

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应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,制药

anogen:多重人细胞因子ELISA 试剂盒(M1/M2/MDSC 细胞因子),96 孔

用于同时定量测定 M1/M2/MDSC 细胞因子,包括粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、干扰素-γ、白细胞介素-4、白细胞介素-6、白细胞介素-10、白细胞介素-12、单核细胞趋化激活因子和肿瘤坏死因子-α , 在细胞培养上清液和其他生物样品中

骨髓源性抑制细胞 (MDSC) 是能够负调节 T 细胞免疫的骨髓细胞。在恶性肿瘤、移植、慢性感染和炎症等病理状况中发现 MDSC 数量增加。 MDSC 不能通过标准白细胞谱系标记进行分类,因为 MDSC 由各种未成熟状态的骨髓来源细胞组成,包括骨髓祖细胞、未成熟单核细胞、树突状细胞和粒细胞。人类 MDSC 被广泛定义为 lin(-/low)CD33(+) HLA-DR(-)CD11b(+) 细胞,其酶和细胞因子谱以及免疫抑制功能发生改变。 CD33 (+) 和 CD11b (+) 表示人类的骨髓起源,而 Gr-1(+) 和 CD11b (+) 则定义小鼠 MDSC 的骨髓起源。

在癌症引起的慢性炎症中,肿瘤细胞和 MDSC 之间的相互作用导致 MDSC 扩张并增加其抑制 T 细胞的潜力 (Sevko et al. 2013)。 MDSC 已被认为是肿瘤逃避宿主免疫的主要机制之一,最近被评估为癌症治疗的靶点(Sinha 等,2005)。

细胞因子被认为在 MDSC 的发育和分化中发挥着关键作用。  GM-CSF 和 IL-6 已被证明可以在体内和体外刺激 MDSC 扩增((Lechner et al. 2010, Morales et al. 2010)。T 辅助细胞 2 细胞因子 IL-4 和 IL-13 是MDSC 分化为更具 T 细胞抑制性的 M2 表型的主要极化信号(Bronte 等人,2003 年 Sinha 等人, 2005 年。此外,白细胞介素 4 受体 α (IL-4Ra)(IL-4 和 IL-13 的常见受体)被发现在 MDSC 中表达上调(Mandruzzato 等人,2009)。 M2 MDSC 的主要特征之一是 IL-10 上调和 IL-12 下调(Bunt et al. 2007)。 IL-10通过减少T辅助1型细胞因子的分泌以及MHC II类抗原和共刺激分子的表达来抑制细胞免疫。还假设 M2 MDSC 介导的 T 细胞抑制是 MDSC 产生精氨酸酶和活性氧物质增加的结果(Zea 等,2005;Rodriguez 等,2005)。 2006),MDSC 分泌的酶会阻断 T 细胞受体复合物中 zeta 链的合成并隔离胱氨酸,并限制 T 细胞对半胱氨酸的利用。通过钙结合蛋白 S100A8/A9 以及信号转导和转录激活因子 (STAT) 进行的信号转导可能与 MDSC 活性有关(Zhao 等人,2012)。 

M2 MDSC 抑制效应 T 细胞,但促进调节 T 细胞。肿瘤微环境中细胞因子和趋化因子如VEGF、MCP-1和MIF表达的增加被认为可以促进MDSC的浸润并刺激肿瘤血管生成和转移(Bellamy et al. 2001, Huang et al. 2007, and Simpson et al.)等人,2013)。

IFN-γ 是 MDSC 发展成更具杀伤肿瘤和杀病毒作用的 M1 表型的有效激活剂。 IFN-g 和其他 M1 极化信号上调 M1 MDSC 中的 IL-12 和 TNF-α。   M1 极化的MDSC表达升高的特征标记,例如诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)、一氧化氮 (NO)、TNF-α IFN  γ(Yang 等人,2013)。一氧化氮 (NO) 和 TNF-α 在清除细菌、某些真菌、病毒和寄生虫入侵以及特定肿瘤和一氧化氮 (NO) 坏死方面发挥着重要作用。

该 ELISA 测定是一种 3.5 小时固相免疫测定,可轻松用于测量细胞培养上清液和其他生物液体中与 MDSC 生成和分化相关的八种细胞因子的水平。它与其他蛋白质没有交叉反应。

该 M1/M2/MDSC 细胞因子多重 ELISA 试剂盒设计用于半定量同时测定与骨髓源性抑制细胞 (MDSC) 增殖及其向 M1 或 M2 表型分化相关的细胞因子。该试剂盒可同时测定粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、干扰素-γ(IFN-γ)白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)、细胞培养上清液和其他生物样品中的白介素-12 (IL-12)、单核细胞趋化激活因子 (MCAF,也称为 MCP-1) 和肿瘤坏死因子-α (TNF-α)。与其他 Anogen 定量细胞因子 ELISA 试剂盒结合使用,M1/M2/MDSC细胞因子多重ELISA试剂盒有望用于研究各种疾病模型中细胞因子表达与MDSC诱导的免疫抑制的关系。  

该试剂盒仅供实验室研究使用,不得用于任何诊断或治疗程序。 

上海金畔生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理,进口货物,最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 质量保证,所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式,为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源,加强网络建设,提高公司内部运作效率,为客户提供方便、快捷的服务。

人白细胞介素 10(IL-10)ELISA试剂盒简介

人白细胞介素 10(IL-10)ELISA试剂盒简介

 用于人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素 10(IL-10)测定。

作原理

本试盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法 (ELISA) 测定样品中 人白细胞介素 10(IL-10)水平。向预先包被了白细胞介素 10(IL-10)单克隆抗 的酶标孔中加入白细胞介素 10(IL-10),温育;温育后,加入生物素标记的 IL-10 抗。再与链霉亲和素HRP 结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤, 去除未结合的酶,然后加入底物 AB,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终 的黄色。颜色的深浅与样品中白细胞介素 10(IL-10)的浓度呈正相关。

试剂盒组成

试剂盒组成

48 孔配置

96 孔配置

说明

1

1

封板膜

2 (48)

2 (96)

封袋

1

1

标包被板

1 ×48

1 ×96

2-8℃保存

标准品 400 ng/L

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8℃保存

准品稀释液

3ml×1

6ml×1

2-8℃保存

霉亲和素HRP

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

物素标记的抗 IL10 抗体

0.5ml×1

1 ml×1

2-8℃保存

显色剂 A

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

色剂 B

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

止液

3ml×1

6ml×1

2-8℃保存

浓缩洗涤液

(20ml×20 ) × 1

(20ml×30 ) × 1

2-8℃保存





















需要而未提供的试剂和器材

1  37℃恒温箱。

2.  标准规格酶标仪

3.  精密移液器及一次性吸头

4.  蒸馏水,

5  一次性试管

6  吸水纸

意事项

1.  从 2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少 30 分钟。酶标包 板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2  各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差

3. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

4  为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。

5.  不用的其试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

6.  底物 B 对光敏感,避免长时间暴露于光下。

板方法

工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下 用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少 0.35ml注入孔内,浸泡 1-2 分钟。根据需 要,重复此过程数次

洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中

标本要求


1不能检测含NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的 (HRP) 活性。

2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实 验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

作程序

1. 标准品的稀释: (本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小

试管中进行稀释。)

200 ng/L

5 号标准品

120 μ l 的原倍标准品加入 120 μ l 标准品稀释液

100 ng/L

4 号标准品

120 μ l 的 5 号标准品加入 120 μ l 标准品稀释液

50 ng/L

3 号标准品

120 μ l 的 4 号标准品加入 120 μ l 标准品稀释液

25ng/L

2 号标准品

120 μ l 的 3 号标准品加入 120 μ l 标准品稀释液

12.5 ng/L

1 号标准品

120 μ l 的 2 号标准品加入 120 μ l 标准品稀释液

2. 根据代测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空 孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。

3. 样:1) 空白孔,空白对照孔不加样品,生物素标记的抗 IL-10 抗体,链 亲和素HRP,只加显色剂 A&B 和终止液,其余各步操作相同2) 标准品 孔:标准品 50ul,链霉亲和素HRP50ul(标准品中已事先整合好生物素 抗体,故不加);3) 代测样品孔:加入样本 40ul,然后各加入 IL-10 抗体 10ul链霉亲和素HRP50ul,盖上封板膜,轻轻震荡混匀,37℃温育 60 分 钟。

 4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后 弃去,如此重复 5 次,拍干。

6. 显色:每孔先加入显色剂A50ul,再加入显色剂 B50 μ l,轻轻震荡混匀,37℃ 避光显色 15 分钟.

 7. 终止:每孔加终止液 50 μ l终止反应 (此时蓝色立转黄色)。

 8. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度 (OD 值) 。  测定应 在加终止液后 10 分钟以内进行。

 9. 根据标准品的浓度及对应的OD 值计算出标准曲线的直线回归方程,再根据 OD 值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软 来计算。

操作程序总结:

1.准备试剂,样品和标准品

2.加入准备好的样品和标准品,生物素标记的二抗和酶标试剂,37℃反应60分钟

3.洗板5次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟

4.加入终止液

5.10分钟内读OD值

6.计算

检测范围:6ng/L →200 ng/L

存:2-8℃。

有效期:6 个月(2-8℃)。

小鼠白细胞介素6(IL-6)酶联免疫检测试剂盒简介

小鼠白细胞介素6(IL-6)酶联免疫检测试剂盒简介

   用于小鼠血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素6(IL-6)测定。

工作原理

本试剂盒采用的生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法ELISA)测定样品中小鼠白细胞介素6(IL-6)水平。向预先包被了小鼠白细胞介素6(IL-6)克隆抗体的酶标孔中加入小鼠白细胞介素6(IL-6),温育;温育后,加入生物素标记的抗IL-6抗体。再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中小鼠白细胞介素6(IL-6)的浓度呈正相关。

试剂盒组成

试剂盒组成

48孔配置

96孔配置

保存

说明书

1

1

封板膜

2片(48

2片(96

密封袋

1

1

酶标包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

标准品:2400ng/L

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8℃保存

标准品稀释液

3ml×1

6ml×1

2-8℃保存

链霉亲和素-HRP

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

生物素标记的抗IL-6抗体

0.5ml×1

1 ml×1

2-8℃保存

显色剂A

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

显色剂B

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

终止液

3ml×1

6ml×1

2-8℃保存

浓缩洗涤液

20ml×20倍)×1

20ml×30倍)×1

2-8℃保存

需要而未提供的试剂和器材

1. 37恒温箱。

2. 标准规格酶标仪。

3. 精密移液器及一次性吸头

4. 蒸馏水,

5. 一次性试管

6. 吸水纸

注意事项

1. 2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差

3. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

4. 免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜

5. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

6. 底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。

洗板方法

手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。

自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中

标本要求

1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但避免反复冻融

操作程序

1. 标准品的稀释:(本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。)

1200 ng/L

5号标准品

120μl的原倍标准品加入120μl标准品稀释液

600 ng/L

4号标准品

120μl的5号标准品加入120μl标准品稀释液

300 ng/L

3号标准品

120μl的4号标准品加入120μl标准品稀释液

150 ng/L

2号标准品

120μl的3号标准品加入120μl标准品稀释液

75 ng/L

1号标准品

120μl的2号标准品加入120μl标准品稀释液

2. 根据代测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。

3. 加样:1)空白孔,空白对照孔不加样品,生物素标记的抗IL-6抗体,链霉亲和素-HRP,只加显色剂A&B和终止液,其余各步操作相同2)标准品孔:加入标准品50ul,链霉亲和素-HRP50ul(标准品中已事先整合好生物素抗体,故不加);3)代测样品孔:加入样本40ul,然后各加入IL-6抗体10ul、链霉亲和素-HRP50ul,盖上封板膜,轻轻震荡混匀,37℃温育60分钟

4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 显色:每孔先加入显色剂A50ul,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

7. 终止:每孔加终止50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)

8. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值) 测定应在加终止液后10分钟以内进行。

9. 根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。

操作程序总结:

1.准备试剂,样品和标准品

2.加入准备好的样品和标准品,生物素标记的二抗和酶标试剂,37℃反应60分钟

3.洗板5次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟

4.加入终止液

5.10分钟内读OD值

6.计算

检测范围:30ng/L→1200 ng/L

保存:2-8

有效期:6个月(2-8℃)。

人白细胞介素15检测试剂盒96T


人白细胞介素15检测试剂盒

简要描述:人白细胞介素15检测试剂盒,产品型号:96T。
灵敏度:1.8 pg/mL
检测范围:15.6 – 1,000 pg/mL
回收率范围:82-110%
保存方法:2-8℃

详细介绍

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品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合

人白细胞介素15检测试剂盒产品型号:96T。

人白细胞介素15检测试剂盒,灵敏度:1.8 pg/mL,检测范围:15.6 – 1,000 pg/mL,回收率范围:82-110%,保存方法:2-8℃。

产品名称:Human IL-15 ELISA Kit

描述:

检测原理:

本实验采用双抗体夹心 ELISA 法。抗人 IL-15单抗包被于微孔板上,样品和标 准品中的IL-15会与固定在板上的抗体结合,游离的成分被洗去;加入辣根过氧化酶标记的抗人 IL-15多抗,与结合在微孔板上的 IL-15结合而形成免疫复合物,游离的成 分被洗去;加入底物溶液(显色剂),溶液颜色逐渐变成蓝色,加入终止液溶液变黄并 且停止变化。用酶标仪测定吸光度。

检测类型:双抗夹心法

形式:预包被96孔板

检测样本类型:细胞上清液,血清,血浆

上样量:100 μl


上海金畔生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理,进口货物,最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 质量保证,所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式,为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源,加强网络建设,提高公司内部运作效率,为客户提供方便、快捷的服务。

山羊白细胞介素2(IL-2)酶联免疫试剂盒BS-3872


山羊白细胞介素2(IL-2)酶联免疫试剂盒

  • 产品型号:BS-3872
  • 简要描述:山羊白细胞介素2(IL-2)酶联免疫试剂盒金畔生物公司供应:ELISA试剂盒,分光光度计,血清,荧光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量离心管,进口冻存管,细胞培养皿,培养板,培养瓶,吸头,仪器及手套,色谱耗材,针头过滤器。
产品咨询在线客服
  • 产品简介

山羊白细胞介素2(IL-2)酶联免疫试剂盒金畔生物公司供应:ELISA试剂盒,动物血清,荧光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量离心管,进口冻存管,细胞培养皿,培养板,培养瓶,进口吸头,仪器及手套,色谱耗材,针头过滤器,分光光度计。

本试剂盒仅供研究使用

检测范围: 96T

0.5 ng/L – 8ng/L

使用目的:

本试剂盒用于测定ft羊血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素 2(IL-2)含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中ft羊白细胞介素 2(IL-2)水平。用纯化的ft羊白细胞介素 2(IL-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素 2(IL-2),再与 HRP 标记的白细胞介素 2(IL-2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素 2(IL-2)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中ft羊白细胞介素 2(IL-2)浓度。

试剂盒组成:

1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 ; 2 酶标试剂 6ml×1 瓶

3 酶标包被板 12 孔×8 条 ; 4 样品稀释液 6ml×1 瓶

5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 ; 6 显色剂B 液 6ml×1/瓶

7 终止液 6ml×1 瓶; 8 标准品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶

9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶; 10 说明书 1 份

11 封板膜 2 张; 12 密封袋 1 个

山羊白细胞介素2(IL-2)酶联免疫试剂盒

标本要求

1. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

2. 不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤

1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

60 ng/L5 号标准品150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液

30 ng/L4 号标准品150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

15 ng/L3 号标准品150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

7.5 ng/L2 号标准品150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

3.75 ng/L1 号标准品150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl,待测样品孔中先加样品稀释液 40µl,

然后再加待测样品 10µl(样品终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽

量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。

7. 温育:操作同 3。

8. 洗涤:操作同 5。

9. 显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

15 分钟.

10. 终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。

操作程序总结:

山羊白细胞介素2(IL-2)酶联免疫试剂盒BS-3872

计算:

以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,

即为样品的实际浓度。

注意事项

1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值大于标准品孔孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。

7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9. 本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

保存条件及有效期

1. 试剂盒保存:;2-8℃。

2. 有效期:6 个月

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