Zymolyase-20T from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌

Zymolyase-20T from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌

货号: MF0212-1G 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学

描述

Zymolyase-20T from Arthrobacter luteus

酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌

温馨提示

见我司(金畔生物)整理的Zymolyase®酵母细胞壁溶解酶(酵母裂解酶)产品专题。

产品标签

Zymolyase® 酵母细胞壁溶解酶;Yeast lytic enzyme 酵母裂解酶;Lyticase;Glusulase;Protoplast 原生质体;Spheroplast 原生质球;

产品信息

产品名称 产品编号 规格    价格(元)      
Zymolyase-20T from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌             MF0212-200MG       200mg             980
MF0212-1G 1g 3680
MF0212-10G 10g 23680

产品描述

Zymolyase®-20T是藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus)深层发酵产生并通过硫酸铵沉淀纯化获得的一种新型酶制品,具有强烈的酵母菌活细胞壁溶解活性,产生各种酵母细胞株的原生质体或原生质球。本酶制品决定酵母细胞壁溶解活性的必需酶是β-1,3-葡聚糖昆布五糖水解酶(β-1,3-glucan laminaripentaohydrolase),该酶水解β-1,3-连接的线性化葡萄糖聚合物,释放出特异性的昆布五糖(也是最主要和最小的水解产物单元)。Zymolyase®-20T的溶解范围根据酵母类型、酵母生长周期或培养条件有所变化。

本品以冻干粉形式提供,酶比活力为20,000 units/g,易溶于水,适用于原生质体/原生质球制备、酵母细胞融合、酵母细胞转化和酵母遗传学研究。

产品规格

来源 藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus)
外观 冻干粉
纯化方式 硫酸铵沉淀
比活力 20,000 units/g
必需酶 β-1,3-葡聚糖昆布五糖水解酶
含有的其他活性酶* β-1,3-葡聚糖酶 约1.5 x 106units/g
蛋白酶 约1.0 x 104units/g
甘露聚糖酶 约1.0 x 106units/g
污染酶 淀粉酶,木聚糖酶,磷酸酶 微量
最佳pH和温度 pH7.5, 35°C(裂解活酵母细胞);pH6.5, 45°C(水解酵母葡聚糖)
稳定pH范围 pH 5-10
热稳定性 60°C,5min酶活性完全损失
激活剂 巯基化合物比如半胱氨酸,β-巯基乙醇或DTT
特异性(溶解范围) Ashbya, Candida, Debaryomyces, Eremothecium, Endomyces, Hansenula, Hanseniaspora, Kloeckera, kluyveromyces, Lipomyces, Metschnikowia, Pichia, Pullularia, Torulopsis, Saccharomyces, Saccharomycopsis, Saccharomycodes, Schwanniomyces, etc.
[*]:参考文献Kitamura, K., Kaneko, T., Yamamoto, Y., Appl. Microbiol., 18, 57 (1972)进行各种酶活力定义。

 

活力测定

1. 单位定义:在以下反应条件的反应体系中吸光值A800下降30%定义为一个酶活力单位(unit)。

2. 反应体系

底物                       3ml 啤酒酵母细胞悬液(2mg干重/ml)
缓冲溶液 5ml 1/15M磷酸盐缓冲液, pH 7.5
酶溶液 1ml Zymolyase®-20T Solution: 0.05-0.1mg/ml       
去离子水 1ml
总体积 10ml

3. 反应程序

25°C孵育2h后轻轻混匀体系,于800nm处测定吸光值。以1ml去离子水替代酶溶液的混合液作为对照。

4. 计算酶活力

A800降低百分比=(对照组A800-反应组A800)×100/对照组起始A800

当A800吸光度减少60%,相当于2 units。此时反应体系中啤酒酵母细胞完全裂解,意味着1 unit Zymolyase®-20T能裂解3mg干重啤酒酵母。

保存与运输方法

保存:2-8℃干燥保存,至少1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1. Zymolyase®-20T冻干粉置于30℃,3个月酶活力损失约70%。

2. 当需要制备无菌酶溶液,可用除硝酸纤维素膜之外的滤膜过滤除菌。

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品

货号 名称 规格
MF0209-3KU Lyticase (10U/μl) 酵母溶壁酶 3KU
MF0210-5KU Lyticase fromArthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌 5KU
MF0212-200MG       Zymolyase-20T fromArthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌 200mg         
MF0211-500MG Zymolyase-100T fromArthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌      500mg
MF0401-15KU DNase I from Bovine Pancreas 脱氧核糖核酸酶I,来源于牛胰腺 15KU
MF0203-100MG RNase A from Bovine Pancreas 核糖核酸酶A,来源于牛胰腺 100mg

 

近期有很多客户使用我司(金畔生物)的Zymolyase-20T(酵母裂解酶,酵母溶壁酶)(Cat#:MF0212),经常问到产品如何溶解,使用剂量等问题,现对以下问题做出描述。有更多的问题,请和我司联系,或发邮件到tech@maokangbio.com

 

常见问题(Frequently asked questions):

产品如何保存?

答复:本品以冻干粉形式提供,收到产品需2-8℃干燥保存。本品置于30℃,3个月酶活力损失约70%。本品溶于缓冲液配制成储存液后,短期置于2-8℃保存,约2周稳定。长期请置于-20℃保存,约数月稳定。

冻干粉如何溶解?

答复:本品易溶于水。建议用1/15M phosphate buffer(pH 7.5)溶解,或用自己实验体系相关缓冲液来溶解。储存液的制备方法比较多,主要根据自身的实验体系,或参考文献来操作。短期置于2-8℃保存,约2周稳定。长期请置于-20℃保存,约数月稳定。

如何制备无菌酶溶液?

答复:若需要制备无菌酶溶液,请用除硝酸纤维素膜之外的0.22µm孔径的滤膜过滤除菌。

酶的比活力是多少?

答复:Zymolyase-20T指的是酶的比活力约20,000 units/g (20 Ku/mg),具体批次酶的比活力是有变化的,详细请见产品标签或质检报告。

Zymolyase适用于哪些菌株类型?

答复:该酶的裂解谱(lytic spectrum)包含以下菌属:Ashbya(阿舒囊霉属), Candida(假丝酵母菌属), Debaryomyces(德巴利(氏)酵母属), Eremothecium(假囊酵母属), Endomyces(内孢霉), Hansenula(汉逊氏酵母), Hanseniaspora(孢汉逊酵母属), Kloeckera(克勒克酵母属), kluyveromyces(克鲁维酵母属), Lipomyces(油脂酵母属), Metschnikowia(梅奇酵母属), Pichia(毕赤酵母属), Pullularia(芽霉菌属), Torulopsis(球拟酵母菌), Saccharomyces(酵母属), Saccharomycopsis(复膜酵母菌属), Saccharomycodes(类酵母属), Schwanniomyces(许旺酵母菌属),等等。其他未罗列在内的菌属请查阅文献或和我司联系是否有相关应用数据。

Zymolyase适用于丝状真菌吗?

答复:该酶主要用于酵母细胞壁的裂解,对于丝状真菌,虽然与酵母细胞壁在结构上有很多相似,但裂解效果因菌株类型有差异。建议用复合酶的形式来特异裂解丝状真菌,或选用我司(金畔生物)提供的真菌溶壁酶(Cat#:JP7356)。

酶的工作浓度一般是多少?

不同的酵母菌株对酶的敏感性会有差异,请参阅文献或根据实际的裂解经验来设定合适的工作浓度。操作方法可参考下方流程。

 

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

N/A

规格:

1g

货期:

咨询客服

Zymolyase-20T from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌

Zymolyase-20T from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌

货号: MF0212-200MG 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学

描述

Zymolyase-20T from Arthrobacter luteus

酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌

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Zymolyase® 酵母细胞壁溶解酶;Yeast lytic enzyme 酵母裂解酶;Lyticase;Glusulase;Protoplast 原生质体;Spheroplast 原生质球;

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产品名称 产品编号 规格    价格(元)      
Zymolyase-20T from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌             MF0212-200MG       200mg             980
MF0212-1G 1g 3680
MF0212-10G 10g 23680

产品描述

Zymolyase®-20T是藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus)深层发酵产生并通过硫酸铵沉淀纯化获得的一种新型酶制品,具有强烈的酵母菌活细胞壁溶解活性,产生各种酵母细胞株的原生质体或原生质球。本酶制品决定酵母细胞壁溶解活性的必需酶是β-1,3-葡聚糖昆布五糖水解酶(β-1,3-glucan laminaripentaohydrolase),该酶水解β-1,3-连接的线性化葡萄糖聚合物,释放出特异性的昆布五糖(也是最主要和最小的水解产物单元)。Zymolyase®-20T的溶解范围根据酵母类型、酵母生长周期或培养条件有所变化。

本品以冻干粉形式提供,酶比活力为20,000 units/g,易溶于水,适用于原生质体/原生质球制备、酵母细胞融合、酵母细胞转化和酵母遗传学研究。

产品规格

来源 藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus)
外观 冻干粉
纯化方式 硫酸铵沉淀
比活力 20,000 units/g
必需酶 β-1,3-葡聚糖昆布五糖水解酶
含有的其他活性酶* β-1,3-葡聚糖酶 约1.5 x 106units/g
蛋白酶 约1.0 x 104units/g
甘露聚糖酶 约1.0 x 106units/g
污染酶 淀粉酶,木聚糖酶,磷酸酶 微量
最佳pH和温度 pH7.5, 35°C(裂解活酵母细胞);pH6.5, 45°C(水解酵母葡聚糖)
稳定pH范围 pH 5-10
热稳定性 60°C,5min酶活性完全损失
激活剂 巯基化合物比如半胱氨酸,β-巯基乙醇或DTT
特异性(溶解范围) Ashbya, Candida, Debaryomyces, Eremothecium, Endomyces, Hansenula, Hanseniaspora, Kloeckera, kluyveromyces, Lipomyces, Metschnikowia, Pichia, Pullularia, Torulopsis, Saccharomyces, Saccharomycopsis, Saccharomycodes, Schwanniomyces, etc.
[*]:参考文献Kitamura, K., Kaneko, T., Yamamoto, Y., Appl. Microbiol., 18, 57 (1972)进行各种酶活力定义。

 

活力测定

1. 单位定义:在以下反应条件的反应体系中吸光值A800下降30%定义为一个酶活力单位(unit)。

2. 反应体系

底物                       3ml 啤酒酵母细胞悬液(2mg干重/ml)
缓冲溶液 5ml 1/15M磷酸盐缓冲液, pH 7.5
酶溶液 1ml Zymolyase®-20T Solution: 0.05-0.1mg/ml       
去离子水 1ml
总体积 10ml

3. 反应程序

25°C孵育2h后轻轻混匀体系,于800nm处测定吸光值。以1ml去离子水替代酶溶液的混合液作为对照。

4. 计算酶活力

A800降低百分比=(对照组A800-反应组A800)×100/对照组起始A800

当A800吸光度减少60%,相当于2 units。此时反应体系中啤酒酵母细胞完全裂解,意味着1 unit Zymolyase®-20T能裂解3mg干重啤酒酵母。

保存与运输方法

保存:2-8℃干燥保存,至少1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1. Zymolyase®-20T冻干粉置于30℃,3个月酶活力损失约70%。

2. 当需要制备无菌酶溶液,可用除硝酸纤维素膜之外的滤膜过滤除菌。

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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MF0211-500MG Zymolyase-100T fromArthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌      500mg
MF0401-15KU DNase I from Bovine Pancreas 脱氧核糖核酸酶I,来源于牛胰腺 15KU
MF0203-100MG RNase A from Bovine Pancreas 核糖核酸酶A,来源于牛胰腺 100mg

 

近期有很多客户使用我司(金畔生物)的Zymolyase-20T(酵母裂解酶,酵母溶壁酶)(Cat#:MF0212),经常问到产品如何溶解,使用剂量等问题,现对以下问题做出描述。有更多的问题,请和我司联系,或发邮件到tech@maokangbio.com

 

常见问题(Frequently asked questions):

产品如何保存?

答复:本品以冻干粉形式提供,收到产品需2-8℃干燥保存。本品置于30℃,3个月酶活力损失约70%。本品溶于缓冲液配制成储存液后,短期置于2-8℃保存,约2周稳定。长期请置于-20℃保存,约数月稳定。

冻干粉如何溶解?

答复:本品易溶于水。建议用1/15M phosphate buffer(pH 7.5)溶解,或用自己实验体系相关缓冲液来溶解。储存液的制备方法比较多,主要根据自身的实验体系,或参考文献来操作。短期置于2-8℃保存,约2周稳定。长期请置于-20℃保存,约数月稳定。

如何制备无菌酶溶液?

答复:若需要制备无菌酶溶液,请用除硝酸纤维素膜之外的0.22µm孔径的滤膜过滤除菌。

酶的比活力是多少?

答复:Zymolyase-20T指的是酶的比活力约20,000 units/g (20 Ku/mg),具体批次酶的比活力是有变化的,详细请见产品标签或质检报告。

Zymolyase适用于哪些菌株类型?

答复:该酶的裂解谱(lytic spectrum)包含以下菌属:Ashbya(阿舒囊霉属), Candida(假丝酵母菌属), Debaryomyces(德巴利(氏)酵母属), Eremothecium(假囊酵母属), Endomyces(内孢霉), Hansenula(汉逊氏酵母), Hanseniaspora(孢汉逊酵母属), Kloeckera(克勒克酵母属), kluyveromyces(克鲁维酵母属), Lipomyces(油脂酵母属), Metschnikowia(梅奇酵母属), Pichia(毕赤酵母属), Pullularia(芽霉菌属), Torulopsis(球拟酵母菌), Saccharomyces(酵母属), Saccharomycopsis(复膜酵母菌属), Saccharomycodes(类酵母属), Schwanniomyces(许旺酵母菌属),等等。其他未罗列在内的菌属请查阅文献或和我司联系是否有相关应用数据。

Zymolyase适用于丝状真菌吗?

答复:该酶主要用于酵母细胞壁的裂解,对于丝状真菌,虽然与酵母细胞壁在结构上有很多相似,但裂解效果因菌株类型有差异。建议用复合酶的形式来特异裂解丝状真菌,或选用我司(金畔生物)提供的真菌溶壁酶(Cat#:JP7356)。

酶的工作浓度一般是多少?

不同的酵母菌株对酶的敏感性会有差异,请参阅文献或根据实际的裂解经验来设定合适的工作浓度。操作方法可参考下方流程。

 

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

N/A

规格:

200mg

货期:

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Zymolyase-100T from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌

Zymolyase-100T from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌

货号: MF0211-5G 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学

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Zymolyase-100T from Arthrobacter luteus

酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌

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Zymolyase® 酵母细胞壁溶解酶;Yeast lytic enzyme 酵母裂解酶;Lyticase;Glusulase;Protoplast 原生质体;Spheroplast 原生质球;

产品信息

产品名称 产品编号 规格                  价格(元)        
Zymolyase-100T from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌        MF0211-500MG          500mg             13880        
MF0211-5G 5g 89280

产品描述

Zymolyase®-100T是藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus)深层发酵产生并通过亲和色谱法部分纯化获得的一种新型酶制品,具有强烈的酵母菌活细胞壁溶解活性,产生各种酵母细胞株的原生质体或原生质球。本酶制品决定酵母细胞壁溶解活性的必需酶是β-1,3-葡聚糖昆布五糖水解酶(β-1,3-glucan laminaripentaohydrolase),该酶水解β-1,3-连接的线性化葡萄糖聚合物,释放出特异性的昆布五糖(也是最主要和最小的水解产物单元)。Zymolyase®-100T的溶解范围根据酵母类型、酵母生长周期或培养条件有所变化。

本品以冻干粉形式提供,酶比活力为100,000 units/g,适用于原生质体/原生质球制备、酵母细胞融合、酵母细胞转化和酵母遗传学研究。

产品规格

来源 藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus)
外观 冻干粉
纯化方式 亲和色谱纯化
比活力 100,000 units/g
必需酶 β-1,3-葡聚糖昆布五糖水解酶
含有的其他活性酶* β-1,3-葡聚糖酶 约1.0 x 107units/g
蛋白酶 约1.7 x 104units/g
甘露聚糖酶 约6.0 x 104units/g
污染酶 淀粉酶,木聚糖酶,磷酸酶 未检测到
最佳pH和温度 pH7.5, 35°C(裂解活酵母细胞);pH6.5, 45°C(水解酵母葡聚糖)
稳定pH范围 pH 5-10
热稳定性 60°C,5min酶活性完全损失
激活剂 巯基化合物比如半胱氨酸,β-巯基乙醇或DTT
特异性(溶解范围) Ashbya, Candida, Debaryomyces, Eremothecium, Endomyces, Hansenula,

Hanseniaspora, Kloeckera, kluyveromyces, Lipomyces, Metschnikowia, Pichia,

Pullularia, Torulopsis,Saccharomyces, Saccharomycopsis, Saccharomycodes, Schwanniomyces, etc.

[*]:参考文献Kitamura, K., Kaneko, T., Yamamoto, Y., Appl. Microbiol., 18, 57 (1972)进行各种酶活力定义。

活力测定

1. 单位定义:在以下反应条件的反应体系中吸光值A800下降30%定义为一个酶活力单位(unit)。

2. 反应体系

底物                  3ml 啤酒酵母细胞悬液(2mg干重/ml)
缓冲溶液 5ml 1/15M磷酸盐缓冲液, pH 7.5
酶溶液 1ml Zymolyase®-100T Solution: 0.012-0.024mg/ml
去离子水 1ml
总体积 10ml

3. 反应程序

25°C孵育2h后轻轻混匀体系,于800nm处测定吸光值。以1ml去离子水替代酶溶液的混合液作为对照。

4. 计算酶活力

A800降低百分比=(对照组A800-反应组A800)×100/对照组起始A800

当A800吸光度减少60%,相当于2 units。此时反应体系中啤酒酵母细胞完全裂解,意味着1 unit Zymolyase®-100T能裂解3mg干重啤酒酵母。

保存与运输方法

保存:2-8℃干燥保存,至少1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1. Zymolyase®-100T冻干粉置于30℃,3个月酶活力损失约90%。

2. 当需要制备无菌酶溶液,可用除硝酸纤维素膜之外的滤膜过滤除菌。

3. Zymolyase®-100T的溶解性很差,因此以悬浮液的形式使用。如果使用浓度高于0.5mg/ml的无菌酶溶液,用含50mg/ml葡萄糖的缓冲液(pH7.5)配置20mg/ml Zymolyase®-100T溶液,去除不容物质,用滤膜过滤除菌,之后用合适的缓冲液稀释到需要的浓度。具体的工作浓度可参考文献资料,自身实验目的,反应体系等来调整。

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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货号 名称 规格
MF0209-3KU Lyticase (10U/μl) 酵母溶壁酶 3KU
MF0210-5KU Lyticase fromArthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌 5KU
MF0212-200MG       Zymolyase-20T fromArthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌 200mg         
MF0211-500MG Zymolyase-100T fromArthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌      500mg
MF0401-15KU DNase I from Bovine Pancreas 脱氧核糖核酸酶I,来源于牛胰腺 15KU
MF0203-100MG RNase A from Bovine Pancreas 核糖核酸酶A,来源于牛胰腺 100mg

 

 

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

N/A

规格:

5g

货期:

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Zymolyase-100T from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌

Zymolyase-100T from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌

货号: MF0211-500MG 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学

描述

Zymolyase-100T from Arthrobacter luteus

酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌

温馨提示

见我司(金畔生物)整理的Zymolyase®酵母细胞壁溶解酶(酵母裂解酶)产品专题。

产品标签

Zymolyase® 酵母细胞壁溶解酶;Yeast lytic enzyme 酵母裂解酶;Lyticase;Glusulase;Protoplast 原生质体;Spheroplast 原生质球;

产品信息

产品名称 产品编号 规格                  价格(元)        
Zymolyase-100T from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌        MF0211-500MG          500mg             13880        
MF0211-5G 5g 89280

产品描述

Zymolyase®-100T是藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus)深层发酵产生并通过亲和色谱法部分纯化获得的一种新型酶制品,具有强烈的酵母菌活细胞壁溶解活性,产生各种酵母细胞株的原生质体或原生质球。本酶制品决定酵母细胞壁溶解活性的必需酶是β-1,3-葡聚糖昆布五糖水解酶(β-1,3-glucan laminaripentaohydrolase),该酶水解β-1,3-连接的线性化葡萄糖聚合物,释放出特异性的昆布五糖(也是最主要和最小的水解产物单元)。Zymolyase®-100T的溶解范围根据酵母类型、酵母生长周期或培养条件有所变化。

本品以冻干粉形式提供,酶比活力为100,000 units/g,适用于原生质体/原生质球制备、酵母细胞融合、酵母细胞转化和酵母遗传学研究。

产品规格

来源 藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus)
外观 冻干粉
纯化方式 亲和色谱纯化
比活力 100,000 units/g
必需酶 β-1,3-葡聚糖昆布五糖水解酶
含有的其他活性酶* β-1,3-葡聚糖酶 约1.0 x 107units/g
蛋白酶 约1.7 x 104units/g
甘露聚糖酶 约6.0 x 104units/g
污染酶 淀粉酶,木聚糖酶,磷酸酶 未检测到
最佳pH和温度 pH7.5, 35°C(裂解活酵母细胞);pH6.5, 45°C(水解酵母葡聚糖)
稳定pH范围 pH 5-10
热稳定性 60°C,5min酶活性完全损失
激活剂 巯基化合物比如半胱氨酸,β-巯基乙醇或DTT
特异性(溶解范围) Ashbya, Candida, Debaryomyces, Eremothecium, Endomyces, Hansenula,

Hanseniaspora, Kloeckera, kluyveromyces, Lipomyces, Metschnikowia, Pichia,

Pullularia, Torulopsis,Saccharomyces, Saccharomycopsis, Saccharomycodes, Schwanniomyces, etc.

[*]:参考文献Kitamura, K., Kaneko, T., Yamamoto, Y., Appl. Microbiol., 18, 57 (1972)进行各种酶活力定义。

活力测定

1. 单位定义:在以下反应条件的反应体系中吸光值A800下降30%定义为一个酶活力单位(unit)。

2. 反应体系

底物                  3ml 啤酒酵母细胞悬液(2mg干重/ml)
缓冲溶液 5ml 1/15M磷酸盐缓冲液, pH 7.5
酶溶液 1ml Zymolyase®-100T Solution: 0.012-0.024mg/ml
去离子水 1ml
总体积 10ml

3. 反应程序

25°C孵育2h后轻轻混匀体系,于800nm处测定吸光值。以1ml去离子水替代酶溶液的混合液作为对照。

4. 计算酶活力

A800降低百分比=(对照组A800-反应组A800)×100/对照组起始A800

当A800吸光度减少60%,相当于2 units。此时反应体系中啤酒酵母细胞完全裂解,意味着1 unit Zymolyase®-100T能裂解3mg干重啤酒酵母。

保存与运输方法

保存:2-8℃干燥保存,至少1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1. Zymolyase®-100T冻干粉置于30℃,3个月酶活力损失约90%。

2. 当需要制备无菌酶溶液,可用除硝酸纤维素膜之外的滤膜过滤除菌。

3. Zymolyase®-100T的溶解性很差,因此以悬浮液的形式使用。如果使用浓度高于0.5mg/ml的无菌酶溶液,用含50mg/ml葡萄糖的缓冲液(pH7.5)配置20mg/ml Zymolyase®-100T溶液,去除不容物质,用滤膜过滤除菌,之后用合适的缓冲液稀释到需要的浓度。具体的工作浓度可参考文献资料,自身实验目的,反应体系等来调整。

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

N/A

规格:

500mg

货期:

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Lyticase from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌

Lyticase from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌

货号: MF0210-25KU 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学

描述

Lyticase from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌

温馨提示

见我司(金畔生物)整理的Zymolyase®酵母细胞壁溶解酶(酵母裂解酶)产品专题

产品标签

Lyticase 溶壁酶;Zymolyase® 酵母细胞壁溶解酶;Yeast lytic enzyme 酵母裂解酶;Glusulase;Protoplast 原生质体;Spheroplast 原生质球;

产品信息

    产品名称 产品编号 规格             价格(元)   
    Lyticase from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌     MF0210-25KU 255KU 855
MF0210-100KU    100KU 3210

产品描述

Lyticase,中文名细胞壁溶解酶,溶壁酶,能水解聚β(1→3)-葡萄糖(poly-β(1→3)-glucose)比如酵母细胞壁葡聚糖。酵母细胞很难破坏,因为细胞壁可能形成荚膜或耐性孢子。通过使用裂解酶比如溶壁酶(lyticase)、几丁质酶(chitinase)、细胞壁溶解酶(zymolyase)和葡聚糖酶(gluculase)诱导部分原生质球形成,然后接下来酵母细胞被裂解释放DNA。溶壁酶(lyticase)更适合用于消化酵母细胞壁和产生转化用真菌来源的原生质球。本品以冻干粉形式供应,比活力≥200 units/mg solid。

产品特性

1)CAS NO:37340-57-1

2)来源:藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus)

3)外观:冻干粉

4)同义名:Lyticase;酵母细胞壁溶解酶;酵母细胞壁溶解酵素;溶壁酶;破壁酶;

5)作用谱:报道显示lyticase有效溶解以下菌株包括 Ashbya, Candida, Debaryomyces, Eremothecium, Endomyces, Hansenula, Hanseniaspora, Kloeckera, Kluyveromyces, Lipomyces, Metschikowia, Pichia, Pullularia, Torulopsis, Saccharomyces, Saccharomycopsis, Saccharomycodes, and Schwanniomycesspecies.

6)比活力:≥200 units/mg solid

7)单位定义:3ml反应混合液中以酵母细胞悬液为底物,于25 °C,pH 7.5条件下,每分钟使得ΔA800发生0.001变化所用的酶量即为一个酶活力单位(unit)。

8)溶解性:易溶于水

酶活力测定方法

1. 实验试剂制备

1.1  超纯水(≥18 MΩxcm resistivity at 25 °C)

1.2  磷酸缓冲液(67mM磷酸钾缓冲液,pH 7.5,25℃):用超纯水配制9.1mg/ml磷酸二氢钾溶液,用1M KOH调整pH至7.5(25 °C)。

1.3  底物(0.4% w/v啤酒酵母(酿酒酵母)悬浮液)

a)使用研钵和研杵研磨适量酵母菌以得到超过800mg的酵母粉。研细的粉末粒径需在25-35网目尺寸。

b)用超纯水加入酵母粉制备4mg/ml酵母溶液。

c)室温条件300rpm搅拌酵母溶液~2h。【注意】:更高速度搅拌会引起酵母细胞的过早裂解;

d)2h后停止搅拌,使得更大沉淀静置下去。小心吸取上方2/3的悬浮液到一个新的烧杯内。去除更大沉淀能够在进行分光光度计读数时,降低信噪比。

e)进行实验前需要确定底物浓度。测定酵母混合液和超纯水的A800,吸光度比值在0.6-1.0之间。如有必要,通过改变酵母粉量或超纯水来调整吸光度比值。

f)室温条件300rpm混匀底物,能稳定保存高达8h。

1.4  酶溶液

使用前,用冰超纯水配置500 units/ml溶壁酶溶液。【注意】:对一些粗制酶(lyticase)可能需要超过15min使其溶解。短时间超声1-15s能够促进酶溶解,但不会影响酶活性。

2. 反应程序

3ml反应体系中,各组分最终浓度是34 mM磷酸钾,~0.12%(w/v)啤酒酵母,25-35 units溶壁酶

2.1  按下表吸取各组溶液到5ml离心管内,

试剂

测试组T1(ml)

测试组T2(ml)

测试组T3(ml)

空白组(ml)

超纯水

0.55

0.54

0.53

0.60

磷酸缓冲液

1.50

1.50

1.50

1.50

底物

0.90

0.90

0.90

0.90

2.2  颠倒混合上述各管溶液,并于25 °C平衡5min。然后加入酶溶液。

试剂

测试组T1(ml)

测试组T2(ml)

测试组T3(ml)

空白组(ml)

酶溶液

0.050

0.060

0.070

2.3  立即颠倒混匀上述各管溶液,记录下~10min后下降后的A800。非常重要的是要即刻混匀所有比色皿试剂,并依此测定各管A800。

2.4  以2min为检测时间段,记录下每个测试组的最大线性比率ΔA800/min。每个测试组的最大线性比率需要用空白组来校正。校正后的ΔA800/min应在0.025-0.035范围内,才能保证后续结果的可靠性。如果不在此范围内,可通过调整适当酶溶液并重复读数。

3.  测定结果

3.1 计算1:

Lyticase from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌

3.2 计算2:

Lyticase from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌

保存与运输方法

保存:-20℃干燥保存,至少1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

37340-57-1

规格:

25KU

货期:

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