ludger 2-AB 聚糖标记试剂盒

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ludger  2-AB 聚糖标记试剂盒   产品代码：LT-KAB-A2

2-AB（2-氨基苯甲酰胺）是糖基化分析中使用广泛的荧光标记之一。 LudgerTag 2-AB 标记试剂盒包含标记多达 24 个聚糖样品所需的所有试剂。

有两种套件可供选择，其所提供的还原剂类型有所不同：氰基硼qing化na或无毒的 2-甲基吡啶硼*。

部件号 还原剂
LT-KAB-A2 氰基硼qing化钠 – 24 个样品
LT-KAB-VP24 2-甲基吡啶*烷 – 24 个样品

用于用 2-氨基苯甲酰胺酸 (2-AB) 标记游离聚糖。氰基*氢hua钠还原剂。套件足以容纳 24 个样品。

产品规格

应用：用于用 2-氨基苯甲酰胺酸 (2-AB) 标记游离聚糖。

描述：该试剂盒包含通过还原胺化反应将染料缀合至聚糖的游离还原端的试剂。

传统的 2-AA 和 2-AB 标记试剂盒在聚糖标记过程中使用氰基硼氢hua钠作为还原剂。该试剂有毒，因此在操作过程中应使用通风柜。为了符合新兴的健康和安全法规，我们现在将其替换为新的 VP 聚糖套件，该套件使用甲基吡啶*烷，这是一种明显更安全的还原剂。

2-AB 标记试剂盒包含两套以下试剂（每套 15 个样品），装在玻璃安瓿中，在纯氮气下密封：

LT-KAB-A2
2-氨基苯甲酰胺（2-AB 染料）
二甲亚砜 (DMSO)乙酸…

LT-KAB-VP24
2-氨基苯甲酰胺（2-AB 染料）
二甲基亚砜 (DMSO) / 乙酸溶液
2-甲基吡啶硼*

样品数量一个 2-AB 标记套件包含可标记多达 30 个独立分析样品的试剂

HPLC 测定染料纯度>99%

分子量137

Lambda-Ex 250 nm

Λ-Em 428 nm

样品量每个样品含有 25 pmol 至 25 nmol 聚糖。

合适的样品任何具有游离还原末端的纯化聚糖都可以被标记。

结构完整性未检测到（< 2 摩尔%）唾液酸、岩藻糖、硫酸盐或磷酸盐的损失。

标记效率通常 > 85 %（取决于样品）。

标记选择性本质上是化学计量标记。

方案
1. 纯化聚糖：LudgerClean EB10 柱 (LC-EB10-A6) 设计用于从蛋白质、盐和洗涤剂中纯化聚糖。

2. 将样品转移到反应瓶中：对于从典型糖蛋白获得的聚糖库，样品量应在 100 皮摩尔 – 50 纳摩尔范围内。使用单个纯聚糖，只需 5 皮摩尔即可在后续 HPLC 分析中进行标记和检测。合适的反应瓶包括小型聚丙烯微量离心管和用于 PCR 工作的管。

3. 干燥样品：如果样品体积超过10 μL，则干燥样品。
如果样品需要干燥，则应使用离心蒸发器来完成。如果不可能，则可以谨慎使用冷冻干燥（冻干）（特别是确保样品在小瓶底部干燥成小而致密的物质）。请勿将样品置于高温 (>28°C) 或一定 pH 条件下，因为这些条件会导致酸催化的唾液酸损失（高温、低 pH 值）或聚糖还原末端的差向异构化（高 pH 值）。
样品干燥后，将聚糖重新溶解在 10 μL 水中。

4.（仅限 LT-KAB-A2）制备 DMSO-乙酸混合物：将 150 μL 冰乙酸添加到 DMSO 瓶中，并通过移液器动作混合。

5. 添加染料：将 DMSO-乙酸混合物添加到装有 2-AB（2-氨基苯甲酰胺酸）染料的小瓶中，并混合直至染料溶解。

6. 添加还原剂：将溶解的染料添加到装有氰基硼氢hua钠或甲基吡啶甲硼*的小瓶中，并通过移液器动作混合直至还原剂全溶解，制成最终的标记试剂。

7. 将标记试剂添加到样品中：将标记试剂添加到每个干燥的聚糖样品中，盖上微管，充分混合。

8. 孵育：将反应瓶放入加热块、沙盘或设定为 65°C 的干燥箱中，孵育 3 小时。在大多数情况下，孵育时间可以缩短至 2 小时或延长至 4 小时，而不会显着改变标记反应的结果。

9. 离心并冷却：孵育期结束后取出样品，短暂离心微管，然后让其冷却至室温。

10. 样品清理：建议进行标记后样品清理，以去除多余的染料和其他标记试剂。

Ludger 提供全系列的产品和耗材，用于使用液相色谱 (LC)、质谱 (MS)、LC-MS 或毛细管电泳 (CE) 等分析平台进行糖基化样品制备、表征和分析。这包括用于释放和标记单糖或唾液酸的试剂盒、N-或O-聚糖标记试剂盒以及聚糖清理/纯化和富集系统。我们还提供系统适用性标准品、定性和定量控制、高效液相色谱 (HPLC) 和超高效液相色谱 (uHPLC) 色谱柱和缓冲液，为您的所有聚糖分析需求提供一站式服务！

ludger  2-AB 聚糖标记试剂盒   产品代码：LT-KAB-A2