Cell Biolabs彗星实验试剂盒

由于环境因素和细胞内的正常代谢过程造成的DNA损伤,每个细胞每天都会发生1,000到1,000,000个。虽然这些只占人类基因组约60亿个碱基中的一小部分,但如果关键基因损伤未及时修复,可能会阻碍细胞的正常生理功能,进而增加癌变可能。彗星实验,或称单细胞凝胶电泳(Single cell gel electrophoresis,SCGE),是一种测量单个细胞DNA损伤的常用技术。其原理很简单,即在电泳场中,将受损细胞DNA(包含片段和链断裂)与完整的DNA分离,通过显微镜可观察到损伤细胞呈现出典型的彗星状尾巴,然后通过测量计算彗尾大小对比出细胞DNA损伤的程度。因为彗星实验的特点,该方法几乎被用来评估任何类型的真核细胞的 DNA 修复能力,包括双、单链断裂的不同的 DNA 损伤情况。是一种能快速、大通量检测真核细胞DNA损伤进而判别遗传毒性的技术。

Cell Biolabs彗星实验试剂盒

彗星实验结果图

彗星实验原理虽简单,但操作繁琐,需要丰富的实验经验和技巧,尤其常常出现的“脱胶”问题,困扰了许多科研人员。除此之外,有时为了跑出完美的“彗星”图案放在paper里,还需要重复做许多次实验,费时费力。为了解决上述问题,我们推荐CellBiolabs的OxiSelectTMComet Assay Kit即彗星实验试剂盒来检测细胞的DNA损伤。该试剂盒不仅能让彗星实验化繁为简,还有两种不同规格(3孔和96孔)的细胞电泳凝胶板供选择,让少量样本和大量样本的DNA损伤检测通通轻松hold住。用该试剂盒做彗星实验流程如下图。

Cell Biolabs彗星实验试剂盒

除了操作简便,OxiSelectTMComet Assay Kit还有以下优点:

1)      适用于各种DNA损伤检测,是一款非常好用的DNA损伤检测筛选工具;

2)      试剂盒中的载玻片经过特殊处理以粘附低熔点琼脂糖,避免“脱胶”问题出现;

3)      采用特殊的DNA荧光染料,能有效降低背景干扰,更加方便读取实验结果。


彗星实验试剂盒信息:

品名

货号

规格

说明

OxiSelectTM Comet Assay Kit (3-Well Slides)

STA-350

15 assays

试剂盒内有5张3孔载玻片和彗星实验所需的低熔点琼脂糖、裂解液及DNA荧光染料等,共可检测15个样品。

OxiSelectTM Comet Assay Kit (3-Well Slides)

STA-351

75 assays

试剂盒内有25张3孔载玻片和彗星实验所需的低熔点琼脂糖、裂解液及DNA荧光染料等,共可检测75个样品。

OxiSelectTM Comet Assay Kit (96-Well Slides)

STA-355

96 assays

试剂盒内有1张96孔载玻片和彗星实验所需的低熔点琼脂糖、裂解液及DNA荧光染料等,共可检测96个样品。

为了满足客户更多样的实验需求,彗星实验试剂盒内特殊处理电泳载玻片还可以单独购买,详情如下:

品名

货号

规格

产品图片

Comet Assay Slides, 3-Well

STA-352

5 slides

Cell Biolabs彗星实验试剂盒

STA-353

25 slides

Comet Assay Slides, 96-Well

STA-356

1 slides

Cell Biolabs彗星实验试剂盒

STA-356-5

5 slides

产品部分发表文献:

  • Wang, T. et al. (2021). The effects of glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency on benzene-induced hematotoxicity in mice. Ecotoxicol Environ Saf. 226:112803. doi: 10.1016/j.ecoenv.2021.112803.
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  • Lammert, C.R. et al. (2020). AIM2 inflammasome surveillance of DNA damage shapes neurodevelopment. Nature. doi: 10.1038/s41586-020-2174-3.
  • Shibayama, Y. et al. (2020). Aberrant (pro)renin receptor expression induces genomic instability in pancreatic ductal adenocarcinoma through upregulation of SMARCA5/SNF2H. Commun Biol. 3(1):724. doi: 10.1038/s42003-020-01434-x.
  • Han, J. et al. (2020). Elevated CXorf67 Expression in PFA Ependymomas Suppresses DNA Repair and Sensitizes to PARP Inhibitors. Cancer Cell. doi: 10.1016/j.ccell.2020.10.009.
  • Hays, E. et al. (2020). The SWI/SNF ATPase BRG1 stimulates DNA end resection and homologous recombination by reducing nucleosome density at DNA double strand breaks and by promoting the recruitment of the CtIP nuclease. Cell Cycle. doi: 10.1080/15384101.2020.1831256.
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  • Klotz-Noack, K. et al. (2020). SFPQ Depletion Is Synthetically Lethal with BRAFV600E in Colorectal Cancer Cells. Cell Rep. 32(12):108184. doi: 10.1016/j.celrep.2020.108184.
  • Ito, S.S. et al. (2020). Inhibition of the ATR kinase enhances 5-FU sensitivity independently of non-homologous end-joining and homologous recombination repair pathways. J Biol Chem. doi: 10.1074/jbc.RA120.013726.
  • Klak, M. et al. (2020). Irradiation with 365 nm and 405 nm wavelength shows differences in DNA damage of swine pancreatic islets. PLoS One. 15(6):e0235052. doi: 10.1371/journal.pone.0235052.
  • Khalil, A.M. et al. (2020).  Association between Mobile Phone Using and DNA Damage of Epithelial Cells of the Oral Mucosa. J Biotechnol Biomed. 3(2020): 50-66. doi: 10.26502/jbb.2642-91280027.
  • Wang, Y. et al. (2020). Targeting therapeutic vulnerabilities with PARP inhibition and radiation in IDH-mutant gliomas and cholangiocarcinomas. Sci Adv. doi: 10.1126/sciadv.aaz3221.
  • Fang, Y. et al. (2020). Epigenetic dysregulation of Mdr1b in the blood-testis barrier contributes to dyszoospermia in mice exposed to cadmium. Ecotoxicol Environ Saf. 190:110142. doi: 10.1016/j.ecoenv.2019.110142.
  • Cupello, S. et al. (2019). Distinct roles of XRCC1 in genome integrity in Xenopus egg extracts. Biochem J. 476(24):3791-3804. doi: 10.1042/BCJ20190798.
  • Naci, D. et al. (2019). Cell adhesion to collagen promotes leukemia resistance to doxorubicin by reducing DNA damage through the inhibition of Rac1 activation. Sci Rep. 9(1):19455. doi: 10.1038/s41598-019-55934-w.
  • Lu, S. et al. (2019). Additive effects of a small molecular PCNA inhibitor PCNA-I1S and DNA damaging agents on growth inhibition and DNA damage in prostate and lung cancer cells. PLoS One. 14(10):e0223894. doi: 10.1371/journal.pone.0223894.

Cell Biolabs彗星实验试剂盒

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细胞氧化应激检测

氧化应激是指机体在遭受各种有害刺激时,体内高活性分子如活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)和活性氮自由基(reactive nitrogen species,RNS)产生过多,氧化程度超出氧化物的清除,氧化系统和抗氧化系统失衡,从而导致组织损伤。在氧化应激过程中,由于受到自由基的氧化胁 迫,构成细胞组织的各种物质如脂质、糖类、蛋白质、脱氧核糖核酸(DNA)等所有的大分子物质,都会发生各种程度的氧化反应,引起变性、交联、断裂等氧化 损伤,进而导致细胞结构和功能的破坏以及机体组织的损伤和器官的病变,甚至癌变等。

Cell BioLabs细胞氧化应激损伤检测全方案:
  • 蛋白质氧化损伤检测
  • 脂质过氧化检测分析
  • 核酸DNA/RNA损伤分析
  • 活性氧基和抗氧化剂分析

氧化应激的定量评价方法大致分做三类:1)测定由活性氧修饰的化合物;2)测定活性氧消除系统酶和抗氧化物质的量;3)测定含有转录因子的氧化应激 指示物。而根据氧化应激的物质种类,又可主要分为蛋白质氧化损伤标志物检测、脂质过氧化标志物检测、核酸DNA/RNA损伤检测以及活性氧消除系统酶和抗 氧化物质检测等。

美国著名细胞产品公司Cell BioLabs为您提供完备的细胞氧化应激分析解决方案,其产品包含蛋白质羰基化、硝基化损伤及晚期氧化蛋白产物(AOPP)分析,脂质过氧化的标志物壬 烯(HNE)和丙二醛(MDA)以及8-异前列腺素F2a快速检测试剂盒,核酸DNA/RNA的常规损伤分析如8-OHdG/8-OHG和AP位点检测, 还包括细胞水平的彗星分析和DNA双链断裂分析试剂盒;除此之外,还有多种抗氧化物的活性检测方案供您选择,如过氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶 (CAT)及ORAC指标(氧基抗氧化能力)和HORAC指标(羟基抗氧化能力)等。细胞氧化应激检测

  • 蛋白质氧化损伤分析
  • 脂质过氧化分析
  • 核酸DNA/RNA损伤分析
  • 活性氧基团和抗氧化剂分析

蛋白质氧化损伤分析(Assay for Oxidative Protein Damage)

在氧化应激过程中,自由基对蛋白质的作用包括蛋白质肽链断裂、蛋白质分子相互间交联聚合、蛋白质氨基酸发生氧化脱氨反应、氧自由基攻击蛋白质还原性 基团、脂类氧化裂解所产生的丙二醛与蛋白质上的氨基产生分子间的交联等。目前对于蛋白质氧化损伤的检测指标主要有两个,分别是蛋白羰基生成(羰基化)和二 酪氨酸的生成(蛋白质中酪氨酸硝基化)。

Cell BioLabs为您提供完整的蛋白质氧化损伤检测方案,其OxiSelect™ Protein Carbonyl Assay Kits(蛋白质糖基化分析试剂盒)专门用于快速检测蛋白质发生氧化应激后,其羰基化程度;OxiSelect™ Protein Nitration (Nitrotyrosine) Assay Kits(蛋白质硝基化分析试剂盒)为检测细胞内蛋白质是否发生硝基化反应提供了便捷的解决方案;而OxiSelect™ AOPP Assay Kits(晚期氧化蛋白产物分析试剂盒)则能快速的检测蛋白氧化后的损伤后果。

产品名称(蛋白质羰基化损伤) 货号 产品说明
OxiSelect™ Protein Carbonyl ELISA Kit STA-310 蛋白质羰基化氧化损伤ELISA分析试剂盒,96孔板分析
OxiSelect™ Protein Carbonyl Spectrophotometric Kit STA-315 蛋白质羰基化氧化损伤分光光度计检测试剂盒,40次分析
OxiSelect™ Protein Carbonyl Immunoblot Kit STA-308 蛋白质羰基化氧化损伤免疫印迹/ECL显色分析,10次
OxiSelect™ Protein Carbonyl Immunoblot (Carbonyl-BSA) STA-309 蛋白质羰基化氧化损伤免疫印迹/ECL显色对照
产品名称(蛋白质硝基化损伤) 货号 说明
Nitrotyrosine ELISA Kit STA-305 蛋白质硝基化(二酪氨酸)氧化损伤ELISA分析,96孔板
Nitrotyrosine Immunoblot Kit STA-303 蛋白质硝基化(二酪氨酸)氧化损伤免疫印迹/ECL显色分析,10次
Protein Tyrosine Nitration Control (Nitrotyrosine-BSA) STA-304 蛋白质硝基化(二酪氨酸)氧化损伤免疫印迹/ECL对照
产品名称(AOPP分析) 货号 说明
OxiSelect AOPP™分析试剂盒 STA-318 晚期氧化蛋白产物(AOPP)分光光度计分析,200次分析
AOPP-Human Serum Albumin STA-319 晚期氧化蛋白产物(AOPP)分光光度计分析阳性对照用

脂质过氧化分析(Assay for Lipid Peroxidation)

脂质过氧化现象在动物和植物中都会发生,并且已经被用作细胞和组织氧化应激下的反应标志物。脂质过氧化为ROS与生物膜的磷脂、酶和膜受体相关的多不饱和脂肪酸的侧链及核酸等大分子物质起脂质过氧化反应,形成脂细胞氧化应激检测质 过氧化产物(lipid peroxide, LPO)如丙二醛 (MDA)和4-羟基壬烯醛(HNE),从而使细胞膜的流动性和通透性发生改变,最终导致细胞结构和功能的改变。4-羟基壬烯醛(HNE)和丙二醛 (MDA)是两个强毒力的脂质过氧化终产物,常常是作为判断脂质过氧化的指标。

上海金畔生物科技有限公司向您推荐美国著名细胞试剂专家Cell BioLabs的细胞氧化压力检测全套方案,该方案中包括的脂质过氧化分析检测试剂除包括经典的脂质过氧化指标4-羟基壬烯醛(HNE)和丙二醛 (MDA)的快速ELISA检测和基于TBRS(硫代巴比妥酸反应物)的MDA定量分析,还有在动脉粥样化形成、风湿性关节炎以及癌变的过程中脂质过氧化 重要检测指标8-异前列腺素F2a的ELISA分析试剂盒。

产品名称(4-羟基壬烯醛HNE分析) 货号 产品说明
OxiSelect™ HNE-His Adduct ELISA Kit STA-334 脂质过氧化指标指标4-羟基壬烯醛(HNE)ELISA试剂盒,96孔板分析
产品名称(8-异前列腺素F2α分析) 货号 说明
OxiSelect™ 8-iso-Prostaglandin F2α ELISA Kit STA-337 脂质过氧化重要检测指标8-异前列腺素F2a的ELISA分析试剂盒,96孔板分析
产品名称(丙二醛MDA分析) 货号 说明
OxiSelect™ TBRS Assay Kit (MDA Quantitation) STA-330 基于硫代巴比妥酸与MDA以2:1的比例形成络合物的分析,小于30min,样品需求量少,无需试管等器材、荧光分析仪或ELISA获取数据
OxiSelect™ MDA (Malondialdehyde) Assays STA-331/STA-332 比TBRS更直接和准确的检测方案,使用MDA抗体进行免疫反应(包括免疫印迹和ELISA两种检测手段)

DNA & RNA损伤分析(Assays for DNA & RNA Damage)

活性氧(ROS)自由基可以直接攻击生物大分子DNA/RNA诱发DNA/RNA氧化损伤。在各种氧化损伤中,以鸟嘌呤8位碳原子氧化后形成8-羟 基-[脱氧]鸟嘌呤(8-OHdG/8-OHG)最为常见。还有一些嘌呤或者嘧啶碱基直接脱去的反应,这样也就形成了核酸中无嘌呤(apurinic)和 脱嘧啶(apyrimidinic)位点,统简称AP位点。除了上述氧化损伤外,DNA双链断裂(DSBs)是细胞内多种类型的DNA损伤中最危险、最严 重的一种。

OxiSelect™ Oxidative DNA / RNA Damage ELISA Kits (8-OHdG or 8-OHG Quantitation)提供了快速高效检测核酸中8-OHG或8-OHdG含量的实验方案,而OxiSelect™ Oxidative DNA Damage Quantitation Kit (AP Sites)则专门为AP位点的高灵敏检测而定制,可用于细胞、组织等来源的基因组样品。针对于DNA双链断裂的检测,OxiSelect™ DNA Double-Strand Break Assay则可以让用户能在3小时内在荧光显微镜下观察到DNA断裂的实验结果。

产品名称(8-OHdG/8-OHG定量) 货号 产品说明
OxiSelect™ Oxidative DNA Damage ELISA Kit (8-OHdG Quantitation) STA-320 DNA氧化过程中鸟嘌呤8位碳原子氧化后形成8-羟基-[脱氧]鸟嘌呤(8-OHdG)定量,96孔板分析
OxiSelect™ Oxidative RNA Damage ELISA Kit (8-OHG Quantitation) STA-325 RNA氧化过程中鸟嘌呤8位碳原子氧化后形成8-羟基-鸟嘌呤(8-OHG)定量,96孔板分析
产品名称(DNA断裂AP位点) 货号 说明
OxiSelect™ Oxidative DNA Damage Quantitation Kit (AP Site) STA-324 DNA氧化损伤过程中导致嘌呤或者嘧啶碱基脱去的位点,即无嘌呤和无嘧啶AP位点定量,50次分析
产品名称(DNA双链断裂分析) 货号 说明
OxiSelect™ DNA Double-Strand Break Staining Kit STA-321 通过免疫方法检测DNA双链断裂后的产物H2AX的量以分析DNA双链断裂状况,100次分析

细胞氧化应激检测彗 星实验(Comet Assay)是近年发展起来的在单细胞水平上定量检测DNA损伤的灵敏方法。经过不断改进和完善,用该方法检验的基因损伤已成为鉴别遗传毒性物质的敏感标 记物,在致癌作用机制、环境污染监测评价等研究中,均发挥了重要作用。但是传统的实验室方法步骤繁琐,需要单独配置裂解试剂,需要提前对样品DNA进行处 理,且每次检测样品有限,染色过程中需要EB等致癌染料。

OxiSelect™ Comet Assays (Single Cell Gel Electrophoresis)彗星分析克服了上述障碍,可以一次进行多个样品的处理,解决了由于处理时间不同而导致的实验结果差异;并且使用一站式试 剂盒,简单快捷,直接使用细胞进行实验;另外在检测时,也可以试验结果可以直接在免疫荧光显微镜下观察。

产品名称(4-羟基壬烯醛HNE分析) 货号 产品说明
OxiSelect™ 3-Well Comet Assay Kit STA-350/STA-351/STA-352/STA-353 多种分析样式供您选择,请联系我们问询
OxiSelect™ 96-Well Comet Assay Kit STA-355/STA-356 多种分析样式供您选择,请联系我们问询

活性氧自由基和抗氧化剂分析(Assays for Reactive Oxygen Species and Antioxidants)

需氧细胞在代谢过程中产生一系列活性氧簇(reactive oxygen species, ROS),细胞内存在各种活性酶及抗氧化剂以维持氧化和抗氧化的平衡,这其中多种氧自由基酶类发挥了重要的作用。SOD(过氧化物歧化酶)主要存在于胞液 和线粒体基质中,是防御生物体氧化损伤的一种十分重要的酶。它的作用底物是超氧阴离子自由基O2-·,可将其催化歧化为氧气和过氧化氢。CAT(过氧化氢酶)是过氧化物酶体的标志酶,存在于红细胞及某些组织内的过氧化体中,它的主要作用就是催化H2O2分解为H2O与O2,使得H2O2不致于与O2在铁螯合物作用下反应生成非常有害的-OH。

OxiSelect™ Superoxide Dismutase Activity Assay(过氧化物歧化酶活性分析)和OxiSelect™ Catalase Activity Assay Kit(过氧化氢酶活性分析)试剂盒为氧化应激研究中,细胞内两种重要的过氧化物酶的检测提供了快捷的检测方案。

产品名称(活性氧自由基和抗氧化剂分析) 货号 产品说明
OxiSelect™ Superoxide Dismutase Activity Assay STA-340 ELISA检测过氧化物歧化酶活性,简单快捷,包括阳性对照,可做100次分析
OxiSelect™ Catalase Activity Assay Kit STA-341 过氧化氢酶ELISA活性检测,只需30分钟,包括阳性对照,可做96次分析
OxiSelect™ ORAC Activity Assay Kit STA-345 2小时内完成相应氧基抗氧化能力的检测,并能通过荧光分析仪读取数据
OxiSelect™ HORAC Activity Assay Kit STA-346 2小时内完成相应羟基抗氧化能力的检测,并能通过荧光分析仪读取数据

另外,在细胞分子水平上检测细胞内生物大分子的抗氧化能力,可由ORAC指标(氧基抗氧化能力)和HORAC指标(羟基抗氧化能力)反应出来。 OxiSelect™ ORAC and HORAC Activity Assay Kits试剂盒能在2小时内完成相应活力的检测,并能通过荧光分析仪读取数据。

美国著名细胞产品公司Cell BioLabs为您提供完备的细胞氧化应激分析解决方案,其产品包含蛋白质羰基化、硝基化损伤及晚期氧化蛋白产物(AOPP)分析,脂质过氧化的标志物壬 烯(HNE)和丙二醛(MDA)以及8-异前列腺素F2a快速检测试剂盒,核酸DNA/RNA的常规损伤分析如8-OHdG/8-OHG和AP位点检测, 还包括细胞水平的彗星分析和DNA双链断裂分析试剂盒;除此之外,还有多种抗氧化物的活性检测方案供您选择,如过氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶 (CAT)及ORAC指标(氧基抗氧化能力)和HORAC指标(羟基抗氧化能力)等。如果您对以上产品感兴趣,请请致电 021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询氧化应激及损伤相关的实验解决方案,或索取最新的Cell BioLabs产品资料。