同仁化学BAPTA-AM试剂货号:B018 CAS号:126150-97-8| 日本DOJINDO

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BAPTA-AM试剂货号:B018
O,O’-Bis(2-aminophenyl)ethyleneglycol-N,N,N’,N’-tetraacetic acid, tetraacetoxymethyl ester
CAS号:126150-97-8
商品信息
储存条件:-20度保存
运输条件:室温
分子式:

C34H40N2O18

分子量:

764.68

特点:

 

● 螯合率高于EGTA

● 可螯合细胞内的钙离子

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选择规格:
25mg

现货 

 
荧光探针检测方案

性质
参考文献
规格性状

性质

BAPTA-AM是BAPTA羧基的乙酰氧基甲基酯化产物,可以很容易地吸收到细胞中。 该酯被细胞内酯酶分解,显示出主体在细胞中作为BAPTA的功能。 生成的BAPTA保留在细胞内部。

参考文献

1) R. Y. Tsien, “New Calcium Indicators and Buffers with High Selectivity against Magnesium and Protons: Design, Synthesis, and Properties of Prototype Structures”, Biochemistry198019 (11), 2396.
2) R. Y. Tsien, “A Non-disruptive Technique for Loading Calcium Buffers and Indicators into Cells”, Nature1981290, 527.
3) J. I. Korenbrot, D. L. Ochs, J. A. Williams, D. L. Miller and J. E. Brown, “The Use of Tetracarboxylate Fluorescent Indicators in the Measurement and Control of Intracellular Free Calcium Ions”, Soc. Gen. Physiol. Ser.198640, 347.
4) S. M. Harrison and D. M. Bers, “The Effect of Temperature and Ionic Strength on the Apparent Ca-affinity of EGTA and the Analogous Ca-chelators BAPTA and Dibromo-BAPTA”, Biochim. Biophys. Acta1987925, 133.
5) E. W. Gelfand and R. K. Cheung, “Dissociation of Unidirectional Influx of External Ca2+ and Release from Internal Stores in Activated Human T Lymphocytes”, Eur. J. Immunol.199020, 1237.
6) J. P. Kao, J. M. Alderton, R. Y. Tsien and R. A. Steinhardt, “Active Involvement of Ca2+ in Mitotic Progression of Swiss 3T3 Fibroblasts”, J. Cell Biol.1990111, 183.
7) M. L. Schubert and J. Hightower, “Functionally Distinct Muscarinic Receptors on Gastric Somatostatin Cells”, Am. J. Physiol.1990258, G982.
8) Y. Tojyo and Y. Matsumoto, “Inhibitory Effects of Loading with the Calcium-chelator 1, 2-Bis(o-aminophenoxy)ethane-N,N,N’,N’-tetraacetic acid (BAPTA) on Amylase Release and Cellular ATP Level in Rat Parotid Cells”, Biochem. Pharmacol.199039(11), 1775.

规格性状

规格性状:

该产品为无色液体。

纯度(HPLC):98.0%以上

处理条件

1.危险物第4类,第3石油类,危险等级Ⅲ 2.无火 3.储存方法:冷冻,避光

同仁化学ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red试剂盒货号:EX05 外泌体蛋白质染色-红色| 日本DOJINDO

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ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red
商品信息
储存条件:0-5度保存,防潮
运输条件:室温

特点:

 

● 特异性外泌体定位,细胞外不聚集

● 回收率高

● 多种颜色可供选择

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外泌体宣传资料

选择规格:
5samples

现货

多种荧光可选

外泌体的标记和纯化一步到位

ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red试剂盒货号:EX05 外泌体蛋白质染色-红色

ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red试剂盒货号:EX05 外泌体蛋白质染色-红色

试剂盒内含
概述
特点
实验例
常见问题Q&A

试剂盒内含

ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red试剂盒货号:EX05 外泌体蛋白质染色-红色

概述

近年来研究发现,外泌体作为细胞外囊泡(Extracellular vesicle; EV)的一种,与癌症的恶化与转移密切相关, 外泌体相关的研究也逐渐成为了关注的热点。为了研究通过外泌体的细胞间通信,细胞摄入外泌体时的示踪技术非 常重要,然而目前广泛使用的磷脂双分子层的荧光染料存在明显的缺点(1. 染色后外泌体粒径增大。2. 荧光染料自身形成粒子,造成背景增高)。本产品是为了解决这些问题而开发的新型荧光染料,并且有 Green, Red, Deep Red 三种颜色,可满足多重染色在内的各种实验需求。

ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red试剂盒货号:EX05 外泌体蛋白质染色-红色

特点

特点1:外泌体的标记和纯化一步到位 

 

ExoSparkler系列已经对外泌体标记的最佳条件进行摸索并做成了操作手册,试剂盒内包含纯化所需的过滤管,可以简单快捷的进行外泌体的标记和纯化。

ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red试剂盒货号:EX05 外泌体蛋白质染色-红色

 

纯化方法(未反应染料的去除)的比较

ExoSparklar系列中用于除去未反应染料的过滤管,与以往使用的相同用途的凝胶过滤法相比,能够以更高的回收率纯化外泌体。

回收率
过滤管(本试剂盒) 50%
凝胶过滤法 10%
   ※本公司的实施例:通过NTA技术(纳米颗粒跟踪分析)比较提取前后的外泌体粒子数

关于使用过滤管进行纯化的有效性,常见问题是:标记后的纯化操作时,过滤膜上有颜色残留,能否确定未反应的染料彻底分离了?详见Q&A。

特点2:多种颜色选择 

 

ExoSparkler系列包括膜 (Mem Dye)和蛋白质 (Protein Dye)荧光染色试剂,各三种颜色 (Green, Red, Deep Red)。

■实验条件

超速离心法纯化的外泌体(蛋白质的量为10 μg)经过各试剂染色后,与HeLa细胞(1.25×104 cells)一起培养24 h,清洗后进行荧光观察。

ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red试剂盒货号:EX05 外泌体蛋白质染色-红色

■观察条件

Green:

Ex: 488 nm / Em: 490-540 nm

Red:

Ex: 561 nm / Em: 570-640 nm

Deep Red:

Ex: 640 nm / Em: 640-760 nm

实验例

实验例:确认外泌体的局部存在

将用ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Deep Red(产品名称:EX06,Protein Dye-Deep Red)或ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red(产品名称:EX02,Mem Dye-Red)染色的外泌体添加到HeLa细胞中,通过与溶酶体染色试剂(绿色)共染确认了外泌体在细胞内的定位。结果证实,用蛋白质或膜染色的外泌体均位于溶酶体中。

ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red试剂盒货号:EX05 外泌体蛋白质染色-红色

观察条件 

Protein Dye-Deep Red(紫):Ex:640 nm / Em:640-760 nm

Mem Dye-Red(红色):Ex:561 nm / Em:570-640 nm

溶酶体染色试剂(绿):Ex:488 nm / Em:490-540 nm

 

实验条件

将用超速离心法提取的外泌体(蛋白质量为5 µg)用每个外泌体染色试剂盒染色,添加到HeLa细胞(0.75×104cells)中,孵育3.5小时后对溶酶体进行染色,观察洗涤后的荧光图像。

 

产品名称 容量 货号
外泌体膜荧光染色试剂盒
(绿色)ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 5 samples EX01
(红色)ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red 5 samples EX02
(深红色)ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Deep Red 5 samples EX03
外泌体蛋白荧光染色试剂盒
(绿色)ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green 5 samples EX04
(红色)ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red 5 samples EX05
(深红色)ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Deep Red 5 samples EX06
*纯化的外泌体(超离心法),蛋白质:1-10 µg/sample,粒子数:10-100×10^8个/sample

常见问题Q&A

Q1:纯化外泌体建议用什么方法?
A1:一般我们推荐使用超速离心法纯化外泌体。但是,免疫沉淀法和磁珠法纯化的外泌体也有过成功染色的实例。
目前,聚合物沉淀法纯化的外泌体由于有聚合物的残留会影响外泌体的染色,所以无法使用本试剂盒。
Q2:细胞摄取外泌体时使用的是哪种培养基?
A2:我们公司在做染色后外泌体进入细胞的实验时,使用过MEM(Minimum Essential Medium)和DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium)。目前我们公司一直采用的含血清培养基进行外泌体实验,暂时无法推荐无血清培养基。
Q3:染色后的外泌体可以长期保存吗?
A3:染色后的外泌体不建议长期保存。染色后的外泌体最好尽快进行后续实验。
Q4:标记后的纯化操作时,过滤膜上有颜色残留,能否确定未反应的染料彻底分离了?
A5:虽然在过滤膜上可以观察到颜色的残留,但是我们公司通过下面的实验验证了过滤膜上的回收产物里不含未反应的染料。
<实验条件>
超速离心法纯化的①含有外泌体(蛋白质含量10 µg)的缓冲液和②单纯缓冲液,分别按照试剂盒说明书记载的步骤进行染色操作。染色后的产物加入到HeLa细胞中(1.25×10cells),4小时后进行荧光观察。
结果显示,单纯缓冲液染色后的回收产物加入到细胞后,没有观察到荧光,进而可证明回收产物中没有残留的染料。

ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red试剂盒货号:EX05 外泌体蛋白质染色-红色

① Exosome + Buffer

ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red试剂盒货号:EX05 外泌体蛋白质染色-红色

② Only Buffer

ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red试剂盒货号:EX05 外泌体蛋白质染色-红色

Fluorescent images at 4 h incubation

Detection conditions

Green:Ex 488 nm / Em 490 – 540 nm

Red :Ex 561 nm / Em 570 – 640 nm

Deep Red:Ex 640 nm / Em 640 – 760 nm

LuciPac W 40 LuciPac W检测棉棒40支装 品牌:Kikkoman CAS No.:


品牌:Kikkoman
CAS No.:
储存条件:2-10℃
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

308-95981

40 tests

LuciPac W 40                                                      LuciPac W检测棉棒40支装            品牌:Kikkoman  CAS No.:


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动,恕不另行通知,确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司客服。

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同仁化学GEDTA(EGTA)试剂货号:G002 CAS号: 67-42-5| 日本DOJINDO

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GEDTA(EGTA)试剂货号:G002
O,O’-Bis(2-aminoethyl)ethyleneglycol-N,N,N’,N’-tetraacetic acid
CAS号: 67-42-5
商品信息
储存条件:室温
运输条件:室温
分子式:

C14H24N2O10

分子量:

380.35

特点:

 

● 应用广泛

● 与钙离子结合后稳定

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选择规格:
100g

期货 

 
钙掩蔽

性质
参考文献
常见问题Q&A
规格性状

性质

  乙二醇醚二胺四乙酸(也缩写为EGTA)。 它比EDTA在有机溶剂(DMF)中的溶解度更高。 它的螯合形成常数与EDTA的螯合形成常数没有太大区别,但是由于它的特异性取决于金属,因此可以选择性地滴定Cd / Zn混合样品中Cd的选择性滴定或Ca和Mg共存的Ca的选择性滴定作为滴定度。试剂,可以。 此外,它还广泛用作电位滴定的生化试剂,此外还用作滤纸色谱中的显影液,酶活性,生物膜和肌肉生理机制的研究。

参考文献

1) C. L. Luke and M. E. Campbell, “Photometric Determination of Magnesium in Electronic Nickel”, Anal. Chem. , 1954, 26, 1778. 2) F. S. Sadek, R. W. Schmid and C. N. Reilley, “Visual EGTA Titration of Calcium in Thepresence of Magnesium”, Talanta, 1959, 2, 38.
3) R. A. Burg and H. F. Conaghan, “Chelometric Determination of Calcium and Magnesium in Minerals”, Chem. Anal. 196049, 100.
4) C. D. Dwivedi, K. N. Munshi and A. K. Dey, “Photometric Determination of Gallium, Indium, and Thallium Employing 4-(2-Pyridylazo)resorcinol”, Chem. Anal.1966, 55, 13.
5) F. W. Czech and M. J. McCarthy, “Determination of Acetyl Peroxide in Aqueous Systems Containig Peracetic Acid and Hydrogen Peroxide”, Chem. Anal., 196655, 11.
6) R. Pribil and V. Vesely, “Contributions to the Basic Problems of Complexometry-XX Determination of Calcium and Magnesium”, Talanta196613, 233.
7) 伊藤敦子, 上野景平, “ヒドロキシナフトールブルー(HNB)指示薬を用いるカルシウム、マグネシウムの連続キレート滴定”, Jpn. Anal.197019, 393.
8) 丸山工作, “筋収縮の研究とキレート剤の役割”, Dojin News198118, 1.
9) T. Tatsumi and H. Fliss, “Hypochlorous Acid Mobilizes Intracellular Zinc in Isolated Rat Heart Myocytes”, J. Mol. Cell. Cardiol.199426(4), 471.
10) H. Ohata, Y. Ujiki and K. Momose, “Confocal Imaging Analysis of ATP-Induced Ca2+ Response in Individual Endothelial Cells of the Artery in Situ“, Am. J. Physiol.,1997272(6), 1980.
11) I. Sakabe, S. Paul, W. Dansithong and T. Shinozawa, “Induction of Apoptosis in Neuro-2A Cells by Zn2+ Chelating”, Cell Struct. Funct.199823(2), 95.

常见问题Q&A

如何进行溶解?
由于该产品为游离酸形式,因此几乎不溶于水。可使用碱性水溶液(例如0.1N NaOH)溶解后,再配置为试剂水溶液并使用。

GEDTA会被碱中和并溶解。

1mol 的GEDTA会完全溶解于2mol 的碱中,此时的pH值约为5到6。

规格性状

性状:

本品为白色结晶性粉末,溶于碱。

纯度(滴定度):97.0%以上

碱溶性:测试合格

灼烧残渣(硫酸盐):0.10%以下

重金属(以铅计):0.001%以下

铁(Fe):0.001%以下

Nonane 壬烷 品牌:Wako CAS No.:111-84-2


品牌:Wako
CAS No.:111-84-2
储存条件:室温
纯度:98.0+% (Capillary GC)
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

142-07354

for Dioxins Analysis 100 ml 咨询


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


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