抗体稀释液试剂盒

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抗体稀释液试剂盒（货号：TBS5012） 

抗体稀释缓冲液用于免疫组织化学实验。它可以用多种抗体进行出色的染色。这种稀释剂可以改善IHC信号和背景；然而，它并不与Tribioscience推荐用于免疫组织化学检测的所有产品兼容。请查阅抗体数据表，确定是否为您感兴趣的产品推荐抗体稀释剂。

使用说明:

在ELISA或免疫组织化学分析中用作抗体稀释剂。按照抗体数据表上的指示，在抗体稀释液中稀释一抗、二抗以及一些检测试剂。

储存条件:

作为工作溶液提供，大小为5x 25mL毫升。储存在4℃下。用这些缓冲液稀释的抗体可以在4℃保存6个月而不降低结合活性。

Tribioscience是一家专注于为生命科学研究实验室和公司提供试剂的生物技术公司，是一家私人控股的生物技术公司，由斯坦福大学的一群科学家于2010年创立。公司专注于为分子生物学、生物化学、免疫学、传染病、基因治疗、神经科学、动物实验和药物开发领域的生命科学研究实验室和生物技术公司提供高质量的产品。产品涵盖抗体、生化测试、ELISA试剂盒、PCR及相关试剂等。我们还为生物技术行业和学术界提供CRO（研究合同组织）服务。我们的动物建模服务已被用于动物模型开发和活泼的高排名大学的评估。

抗体稀释液试剂盒（货号：TBS5012）

蛋白质印迹 (WB) – 实验方案

蛋白质印迹是一种常用的分子生物学技术，用于分析样品中感兴趣的蛋白质。细胞裂解物由细胞培养物裂解产生，并在凝胶电泳 (SDS-PAGE) 中按重量分离。然后这些蛋白质从凝胶转移到膜上，在膜上它们被封闭并用特异性抗体探测以检测感兴趣的蛋白质。借助灵敏且特异的抗体，可以轻松检测小样品中的修饰蛋白质或未修饰蛋白质。

协议：

1. 在封闭液（TBST 中的 5% 脱脂牛奶（50mM Tris、100mM NaCl、0.05% Tween-20，pH 7.6）中振荡孵育 1 小时，封闭膜。

注意：对于磷酸化特异性抗体，使用封闭液中的 5% BSA。

2. 在封闭液中以适当的稀释度稀释一抗。

3. 将膜与稀释的一抗在 40°C 下搅拌孵育过夜。

4. 去除抗体溶液。室温下在 TBST（50mM Tris、100mM NaCl、0.05% Tween-20、pH 7.6）中摇动洗涤膜 3 次，每次 5-10 分钟。

注意：将 Tween-20 浓度增加至 0.1% 可降低背景并提高特异性，但会降低灵敏度。

5. 将膜与在封闭液中稀释（根据制造商说明）的二级 AP 或 HRP 缀合物一起在室温下振荡孵育 1 小时。

6. 按照步骤 4 清洗膜。

7. 在进行化学发光反应之前，用 TBS 清洗膜 2-5 分钟。

8. 根据制造商的说明制备和使用化学发光底物（用于 AP 或 HRP）。

9. 立即包裹膜并在 X 射线胶片下曝光 10 秒至 1 小时。暴露时间可能根据抗体和抗原的量而变化。或者放入成像仪中并进行相应调整。