Bst DNA Polymerase 链置换酶

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Bst DNA PolymeraseBst  DNA Polymerase                              链置换酶

链置换酶


◆产品说明


  本产品具有5’→ 3’DNA聚合酶活性与链置换活性,是一款自动从模板双链DNA的氢键解离,然后后合成新DNA链的酶。由于其特性,耐热性链置换DNA聚合酶无需DNA的双链解离,即可在恒定温度下合成DNA,且合成不受DNA二级结构的抑制。



特点


●  具有5’→ 3’DNA聚合酶活性与链置换活性

●  可在恒定温度下合成DNA

●  适用于合成GC含量高的DNA链

●  合成不受DNA二级结构抑制


应用


●  利用链置换活性的应用(等温基因扩增法等)



 Bst DNA Polymerase


 理想反应温度

 60°C~65°C

 失活时间*1

 80°C、5 min

*1 将酶原液直接热变性时的失活温度



 来源

 Geobacillus stearothermophilus

 活性

 8 units/μL

 单位定义

 1 unit指以小牛胸腺DNA为引物/模板,在65°C,30 min的条件下将10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物的酶量。

 储存液成分

 10 mmol/L Tris-HCl(pH 7.5), 1 mmol/L DTT, 0.1% Tween 20, 0.1 mmol/L EDTA, 50% Glycerol

 酶反应条件

 随酶附带10×的酶反应专用缓冲液(0.5 mL×1)。如反应总体积为50 μL,添加5 μL的酶反应专用缓冲液



◆产品组成


Bst DNA Polymerase(1,600 units)


产品组分

容量

保存

Bst DNA Polymerase(8 units/μL)

200 μL × 1

-20°C

10 × Bst Reaction Buffer(80 mmol/L Mg2+)

500 μL × 1

-20°C



◆应用实例


实验案例1  LAMP法中的运用


LAMP法 反应条件


Bst  DNA Polymerase                              链置换酶

  3.0% Agarose 21

  TAE凝胶电泳

  EtBr染色

 

  M:Gene Ladder Wide 1

  1:A 公司Bst DNA Polymerase

  2:本公司Bst DNA Polymerase

 Candidatus Liberibacter asiaticus DNA

1 × 10copies

 FIP*

40 pmol

 BIP*

40 pmol

 F3 Primer*

5 pmol

 B3 Primer*

5 pmol

 Loop Primer F*

20 pmol

 Loop Primer B*

20 pmol

 dNTPs Mixture

1.4 mM each

 10 × Bst Reaction Buffer

2.5 μL

 Bst DNA Polymerase

8 units

 Total

25 μL

Bst  DNA Polymerase                              链置换酶

反应


 65°C

 60 min


*引物序列


FIP: 5'-GCATGCCGAGGATCAATGCCTTGCTTAAAGAGCGTGCTACG-3'

BIP: 5'-TATGCCTAATGGCACGGGGGTAAGCTTCATCCGCCTTCGA-3'

F3 Primer: 5'-TGGGTTAAGTGATGCTGTGG-3'

B3 Primer: 5'-CAACAATATCAGCCCCTGCT-3'

Loop Primer F: 5'-TCTCAACTGTTTCATCAAACCTAGC-3'

Loop Primer B: 5'- CGTGGCGGTTTTTGCTACA-3'



实验案例2  RCA法评估Bst DNA Polymerase的耐热性与理想反应温度


Bst  DNA Polymerase                              链置换酶


RCA法 反应溶液组成


 M13mp18 single strand DNA

40 ng

 Universal primer

50 mM

 dNTPs Mixture

1.4 mM each

 Tris-HCl (pH 8.8 at 25°C)

20 mM

 KCl

10 mM

 (NH4)2SO4

10 mM

 MgSO4

8 mM

 Tween 20

0.10%

 Betaine

0.8 M

 Bst DNA Polymerase

4 units

 Total

20 μL

Bst  DNA Polymerase                              链置换酶

反应条件


 各个温度下

 30 min


结果


Bst  DNA Polymerase                              链置换酶


条带


M: Gene Ladder Wide 1 (产品编号313-06961)

D: 模板 DNA (M13mp8 single strand, 产品编号319-00841)

 

引物序列(Universal Primer)


5'-GTTTTCCCAGTCACGACGTTGTA-3'

 

电泳条件


0.7% Agarose S / TAE凝胶电泳

EtBr染色

使用不含SDS的Loading Buffer

 

备注


  本实验为比较两种Bst DNA Polymerase,使用相同的反应液组成进行反应。在RCA法中使用各种酶配套的专用缓冲液时,须进行预实验探究反应体系。


 

◆相关信息


备注


●  本产品为实验研究用试剂。不可作为医药品使用。

●  检测Candidatus Liberibacter asiaticus的LAMP引物组合是国立研究开发法人 农业、食品产业技术综合研究机构 九州冲绳农业研究中心灵活运用先进技术,在农林水产研究高度化事业“抑制顽固性疾病柑橘绿化病传播的技术开发”中开发的产品。

 

License


●  LAMP(Loop-mediated Isothermal Amplification)法由荣研化学株式会社持有专利权。

 


◆产品列表


产品编号

产品名称

包装

311-07481

Bst DNA Polymerase

1600 units



◆相关产品


产品编号

产品名称

包装

319-07281

Csa DNA Polymerase

1600 units

319-07301

96-7 DNA Polymerase

1600 units

312-07271

dNTPs Mixture(25 mM each)

400 μL

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级

其他化学试剂Carboxyrhodamine 110-AzideAZ105


其他化学试剂Carboxyrhodamine 110-Azide

简要描述:其他化学试剂Carboxyrhodamine 110-Azide销售:试剂click chemistry tools供应。
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品牌 Click Chemistry tools 供货周期 两周
应用领域 医疗卫生,化工,生物产业,石油,制药

其他化学试剂Carboxyrhodamine 110-Azide销售

上海金畔生物科技有限公司 是一家专注于分子生物学、细胞生物学、细菌学、遗传学、免疫学、生物化学、蛋白质学、细胞治疗、临床应用等领域,以销售为主的生物技术公司。销售的产品涉及,细胞株和菌株、胎牛血清、生化试剂、ELISA试剂盒、抗体和抗原、细胞因子、技术服务、实验耗材和消耗品、仪器设备等。


点击化学(Click chemistry)—蛋白质组学研究和新药研发的理想技术。美国一家小众里生物公司,国内通常称呼为CCT,生产有浓缩介质,代谢标记试剂,生物素标记试剂,荧光染料以及交联剂.“点击化学”的基本思想就是利用碳-杂原子成键反应快速实现分子多样性,一般由叠氮化物(azide)和炔烃(alkyne)作用形共价键,具有稳定,高特异性等优点。反应不受PH影响,能在常温条件下的水中进行,甚至能在活细胞中进行。


5(6)-Carboxyrhodamine 110 Azide(也称为罗丹明绿)是一种光稳定的绿色荧光探针,可通过铜催化的点击反应 (CuAAC) 与末端炔烃发生反应。它还通过无铜“点击化学”反应与应变的环辛炔反应形成稳定的三唑,并且不需要铜催化剂或高温。

5(6)-Carboxyrhodamine 110(也称为罗丹明绿)是 Alexa Fluor® 488 染料的非磺化类似物,激发/发射最大值约为 502/527 nm。Carboxyrhodamine 110 对 pH 4 至 pH 10 染料具有明亮的光稳定性和 pH 不敏感性。该探头可与 488 nm 氩离子激光器和标准 FITC 滤光片组一起使用。

Abs/Em 最大值
501/523 纳米
消光系数
74,000
流式细胞术激光线
488 纳米
显微镜激光线
488 纳米
光谱相似染料
荧光素、Alexa Fluor® 488、DyLight® 488
分子量
575.59
中国科学院
不适用
溶解度
二甲基亚砜、二甲基甲酰胺
纯度
>95%(高效液相色谱法)
外貌
红色固体
储藏条件
-20°C
运输条件
环境温度


试剂click chemistry tools供应 其他化学试剂Carboxyrhodamine 110-Azide销售

FD Cresyl Violet Solution™ Regular StrengthPS102-01


FD Cresyl Violet Solution™ Regular Strength

简要描述:FD Cresyl Violet Solution™ Regular Strength,产品型号:PS102-01。
运输信息:
重量1.8磅
方面8 × 7 × 7 英寸

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品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合

FD Cresyl Violet Solution™ Regular Strength,产品型号:PS102-01 。

FD Cresyl Violet Solution™ Regular Strength,描述:

FD Cresyl Violet Solution™ 由经 BIOLOGICAL STAIN COMMISSION 认证的醋酸甲酚紫制成,瓶子上印有逐步使用手册,专为所有类型的实验室轻松使用而设计。该溶液经过配制并针对神经组织的染色进行了广泛测试。甲酚紫赋予核染色质和尼氏物质紫罗兰色。该解决方案非常适合可视化神经元细胞体和神经胶质细胞核。

尺寸:500 毫升

上海金畔生物科技有限公司

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OPD Tablet(o-Phenylenediamine . 2HCl 13mg/Tablet) OPD片剂(邻苯二胺,HCl 13mg /片) 品牌:Wako CAS No.:615-28-1


品牌:Wako
CAS No.:615-28-1
储存条件:2-10℃
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

158-01671

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jembio:DNA 连接酶(大肠杆菌)


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简要描述:DNA 连接酶(大肠杆菌) DNA 连接酶(大肠杆菌)催化双链 DNA 中并置的 5′ 磷酸盐和 3′ 羟基粘性末端之间磷酸二酯键的形成。 jembio:DNA 连接酶(大肠杆菌)

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品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,化工,生物产业,制药,综合

jembio:DNA 连接酶(大肠杆菌)

DNA 连接酶(大肠杆菌)   DNA 连接酶(大肠杆菌)催化双链 DNA 中并置的 5' 磷酸盐和 3' 羟基粘性末端之间磷酸二酯键的形成。  

 描述:

 • 催化具有粘性末端的双链DNA 片段之间磷酸二酯键的形成。 

• 5'-磷酰基与相邻的3'-羟基的缩合与NAD+的水解相结合。

 • 适用于全长cDNA 的高效克隆(1, 2)。 

单位定义:1 个单位定义为 lambda DNA 的 Hind III 片段产生 50% 连接所需的酶量。在 20 µl 检测混合物中于 16°C 下孵育,DNA 末端浓度为 0.02 µM (50 µg/ml)。  储存条件:储存于-20oC。   反应缓冲液:30 mM Tris-HCl(22°C 时 pH 8.0)、1 mM 二硫苏糖醇、4 mM MgCl2、26 µM NAD+、50 µg/ml 牛血清白蛋白。 最佳连接温度为 16°C。   

储存缓冲液:10 mM Tris-HCl(22°C 时 pH 7.4)、50 mM KCl、0.1 mM EDTA、10 mM 硫酸铵、1 mM 二硫苏糖醇和 50% (v/v) 甘油。   

质量控制:所有制剂均经过核酸内切酶和核酸外切酶污染活性测试,以及连接反应中的功能测试。 连接测定条件:30 mM Tris-HCl(22°C 时 pH 8.0)、4 mM MgCl2、1.2 mM EDTA、1 mM 二硫苏糖醇、0.026 mM NAD+、50 µg/ml 牛血清白蛋白和 lambda DNA 的 Hind III 片段。 16°C 孵育 30 分钟。  

jembio:DNA 连接酶(大肠杆菌)