5-Trifluoromethyl-4H-1,2,4-triazole-3(2H)thione(CAS:68744-64-9)

5-Trifluoromethyl-4H-1,2,4-triazole-3(2H)thione(CAS:68744-64-9)

5-Trifluoromethyl-4H-1,2,4-triazole-3(2H)thione (cas# 68744-64-9) is a compound useful in organic synthesis.

货号: T791900 品牌: TRC 标签: 生化试剂;金畔生物;有机试剂;

规格信息

品牌:

TRC

CAS:

68744-64-9

规格:

500mg

货期:

国外现货,4-5周

支原体检测——AppliChem支原体污染PCR检测试剂盒

针对支原体检测,有多种方案可供选择,包括直接培养法、DNA荧光染色法等。前者是直接培养支原体于培养基中,观察其生长及菌落生成。该方法是目前最直接与灵敏的步骤,但是缺点也很明显,首先培养时间长,须3-5星期才能判断。而且有些支原体不能在培养基中培养出来,并且需要同时培养阳性支原体株作为对照,可能会造成污染。DNA荧光染色法则是利用荧光染剂检测支原体污染。荧光染剂会结合到DNA富含AT区域,因为支原体DNA中A-T含量较大,所以可将其染色而侦测。被支原体污染之细胞经染色后,在细胞核外与细胞周围可看到许多大小均一之荧光小点,即为支原体DNA,证明有支原体之污染。该法较直接培养法快,但也需要约一星期才能获得结果,而且检测时仍会有荧光背景,影响判读。

支原体检测——AppliChem支原体污染PCR检测试剂盒当然还有一些采用免疫学特异抗体的支原体检测方案,但在经济性上不是最优选择。其实就支原体污染的检测,最简单有效的方案不外乎是使用PCR方法检测。即以支原体16S-23S之间极为保守的rRNA序列设计引物,经由PCR反应扩增其16S rRNA片段。该法非常灵敏(e.g. 0.1-1.6 CFU/5 ul 样品) 。由于引物的特殊性,不会导致培养细胞或其他细菌的序列的假性扩增。方法便捷,只需不到一天时间,并且无需支原体或细胞的培养过程,避免了可能的污染。

AppliChem推出的PCR Mycoplasma Kit(货号:A3744)是一个即用型支原体检测试剂盒,无需支原体培养,只需要从培养细胞液中取上清,离心后获得可能含有支原体的沉淀,用50ul Kit内提供的缓冲液重悬后,95℃热支原体检测——AppliChem支原体污染PCR检测试剂盒击3分钟后即可作为PCR模板,加入Kit内提供的PCR反应液,并配成50ul PCR反应体系后即可按照Protocal提供的PCR设置进行PCR反应(如左图所示)。同时该支原体检测Kit内提供阳性对照,可完成20次检测。

上海金畔生物科技有限公司向您推荐AppliChem完整的细胞支原体污染解决方案,PCR Mycoplasma Test Kit能通过高度灵敏的支原体基因保守序列,提供给你即用型的PCR Mix试剂盒,能快速检测您的细胞或者样品是否被含有支原体;支原体的预防则针对细胞培养过程中各个可能支原体的污染源进行消毒的产品,如针对CO2培养箱的喷雾消毒产品、培养箱内的水源消毒溶液以及水浴箱等设备的消毒试剂;如果您的细胞已经被支原体污染,那么我们推荐您使用Myco系列挽救您的珍贵细胞。上海金畔生物科技有限公司为您提供一站式的支原体解决方案!如果你对上述AppliChem的支原体检测、消毒及清除产品感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询支原体相关的最优解决方案,或索取最新的艾普力(Applichem)产品目录。我们会为您做的更多!

CFDA, SE 细胞增殖示踪荧光探针

CFDA, SE 细胞增殖示踪荧光探针

货号: JP3009-5MG 品牌: Jinpan 标签: 细胞生物学研究

描述

CFDA, SE细胞增殖示踪荧光探针

产品关键词:

CFDA, SE (CFSE);Calcein AM钙黄绿素;活细胞染色探针;Fluorescein diacetate (FDA);PKH26;CAS NO:150347-59-4;

产品信息

产品名称 产品编号 规格 价格(元)
CFDA, SE 细胞增殖示踪荧光探针 JP3009-5MG 5mg 580
CFDA, SE 细胞增殖示踪荧光探针 JP3009-25MG 25mg 1520

【温馨提示】:见我司集奇生物(maokangbio)提供的CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit 细胞增殖与示踪检测试剂盒(#JP3010-500T)。

产品描述

CFDA, SE,英文全名5(6)-Carboxyfluorescein diacetate N-succinimidyl ester,CAS NO. 150347-59-4,是一种稳定的、细胞膜渗透性的非荧光染料,由两个醋酸基团和一个琥珀酰亚胺酯(SE)官能团组成的一个荧光分子。一旦主动扩散进入细胞,其醋酸基团被胞内酯酶切割,生成荧光素酯CFSE。CFSE具有高度荧光,且能通过其琥珀酰亚胺酯基团共价结合到细胞内的蛋白氨基基团。正是这个共价偶联反应,CFSE能够极其长期的保留在细胞内,长达数个月。另外,归因于这一稳定连接,一旦染料进入细胞,不会转移到邻近细胞。无活力细胞仍然是非荧光。而活细胞一旦分化,CFSE能够很均匀的分散到子细胞中,每分裂一次子代细胞约能得到亲本细胞1/2的荧光强度,因此,通过流式细胞仪对荧光强度的检测,能够依次分选出未分裂细胞,分裂一次的细胞(1/2荧光强度),分裂两次的细胞(1/4荧光强度),分裂三次的细胞(1/8荧光强度),以及以此类推其他分裂次数的细胞。CFSE可以检测分裂多达8次或更多次数的细胞增殖。

CFDA, SE 细胞增殖示踪荧光探针

CFSE广泛用于细胞增殖和体内细胞示踪研究。CFSE的最大激发和发射波长分别为492nm和517nm,标记细胞后呈绿色荧光。使用流式细胞仪检测可用FL1检测通道。也能用荧光显微镜观察,使用FITC滤片。

产品特性

1) CAS NO.:150347-59-4

2) 化学名:3′,6′-bis(acetyloxy)-3-oxo-2,5-dioxo-1-pyrrolidinyl ester-spiro[isobenzofuran-1(3H),9′-[9H]xanthene] -ar-carboxylic acid

3) 同义名:5(6)-Carboxyfluorescein diacetate N-succinimidyl ester, 5(6)-CFDA N-succinmidyl ester, CFDA-SE

4) 分子式:C29H19NO11

5) 分子量:557.46

6) 纯度:≥94%(HPLC)

7) Ex/Em:492/517nm

8) 外观:近乎白色至黄色粉末或结晶

9) 溶解性:溶于DJPO,DMF

10)化学结构式:CFDA, SE 细胞增殖示踪荧光探针CFDA, SE 细胞增殖示踪荧光探针

保存与运输方法

保存:-20ºC避光干燥保存,至少2年有效。

运输:冰袋运输。

使用方法

1. 储存液制备

将低温保存的冻干粉产品置于室温回温至少20min,之后短暂低速离心,让所有粉末都掉落至管底。称取适量粉末用高质量无水DJPO溶解配制10mM储存液。比如5mg CFDA, SE(Mw: 557.46)用897μl DJPO充分溶解即得到10mM储存液。根据单次用量分装,置于≤-20℃避光干燥保存,避免反复冻融。储存液最好是一个月内用完,最多不超过三个月。

2. 工作液制备

于正式实验前,用HHBS缓冲液或其他生理缓冲液(pH 7.0)稀释储存液到1-10μM工作浓度,涡旋混匀。

【注意事项】:

1) CFDA, SE是胺反应性。CFDA, SE标记步骤不可使用含首胺的缓冲液,比如,HHBS或PBS是推荐的CFDA, SE稀释缓冲液。

2) CFDA, SE的染色浓度需要根据使用的细胞类型和实验目的来进行优化调整。比如,如果用于细胞增殖的荧光逐渐稀释分析,相对高浓度的CFDA, SE染色工作液比较理想;如果仅是用来标记细胞用作另外一种荧光标志探针的复染剂,相对低浓度的CFDA, SE染色工作液比较理想,能够良好的防止不同滤片设置间的荧光溢出。

3. 染色步骤

此染色步骤仅做指导,具体实验步骤可根据实际情况来做适当调整。

3.1 室温300×g离心细胞5min,吸掉上清。

3.2 用预热的无菌HHBS,PBS或其他生理缓冲液清洗细胞以去除任何残留的血清蛋白。之后同上离心细胞,吸掉上清。

3.3 用上述配制好的CFDA, SE染色工作液重新悬浮细胞,制备成1-3 x 107cells/mL的单细胞悬液。

3.4 室温或37℃避光孵育15~30min。中间可偶尔的轻轻颠倒混匀使得细胞均匀接触到染料。

3.5 加入5倍原始染色体积的细胞培养液(含10% FBS)来淬灭染色过程,轻轻颠倒几次混匀。

3.6 室温300×g离心细胞5min,吸掉上清。再用10ml完全细胞培养液清洗细胞一次。

3.7 再用10ml完全细胞培养液重新悬浮细胞,37℃孵育5min,以促进CFDA, SE在细胞内的充分反应和未反应的CFDA, SE重新回到完全细胞培养液中。离心去上清,完成最后一次清洗。

3.8 之后用完全细胞液重悬细胞,此时可用荧光显微镜或流式细胞仪来观察标记效果。或开始用药物刺激处理或继续常规培养。经适当时间后用流式细胞仪检测细胞增殖,或用于特定目的的细胞示踪。标记细胞也可用于活体动物的移植,并用荧光进行示踪。

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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产品编号 产品名称 规格
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JP3011-50UG Calcein, AM, Ultra Pure Grade 钙黄绿素(绿色) 50μg

 

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

150347-59-4

规格:

5mg

货期:

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