超氧化物歧化酶(SOD)活性分析——Cell BioLabs氧化损伤系列

在细胞由于自由基非常活泼,化学反应性极强,参与一系列的连锁反应,能引起细胞生物膜上的脂质过氧化,破坏了膜的结构和功能。它能引起蛋白质变性和交联,使体内的许多酶及激素失去生物活性,同时还能破坏核酸结构和导致整个机体代谢失常等,最终使机体发生病变。虽然自由基会对机体产生诸多危害,但是在一般的条件下人体细胞内也存在着清除自由基、抑制自由基反应的体系,它们有的属于抗氧化酶类,有的属于抗氧化剂。如超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)、过氧化氢酶(Catalase, CAT)等。

在细胞氧化损伤的研究中,对于细胞内活性氧基团和抗氧化剂的检测常常是一个非常重要的指标,因其直接反应细胞的状态。上海金畔生物科技有限公司向您推荐美国著名细胞试剂专家Cell Biolabs的相关产品,对于抗氧化酶和抗氧化剂的检测,其OxiSelect™ Superoxide Dismutase Activity Assay(过氧化物歧化酶活性分析)和OxiSelect™ Catalase Activity Assay Kit(过氧化氢酶活性分析)试剂盒为氧化应激研究中,细胞内两种重要的过氧化物酶的检测提供了快捷的检测方案。另外,在细胞分子水平上检测细胞内生物大分子的抗氧化能力,可由OxiSelect™ ORAC and超氧化物歧化酶(SOD)活性分析——Cell BioLabs氧化损伤系列 HORAC Activity Assay Kits通过ORAC指标(氧基抗氧化能力)和HORAC指标(羟基抗氧化能力)反应出来。

超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)又称过氧化物歧化酶。SOD属于金属酶,按照结合金属离子种类不同,该酶有以下三种:含铜与锌超氧化物歧化酶(CUZNSOD)、含锰超氧化物歧化酶(MN—SOD)和含铁超氧化物歧化酶(Fe—SOD)。SOD主要存在于胞液和线粒体基质中,是防御生物体氧化损伤的一种十分重要的酶。它的作用底物是超氧阴离子自由基O2-·,可将其催化歧化为氧气和过氧化氢。这种酶在保护生物细胞免受超氧自由基和由其形成的活性氧类(例如H2O2,·OH)的毒害方面起着重要作用。

该超氧化物歧化酶(SOD)活性分析试剂盒(货号:STA-340)通过使用黄嘌呤(Xanthine)/黄嘌呤氧化酶(XOD)体系生成超氧化物阴离子。加入发色基团,发色基团可被由上述体系产生的氧化物阴离子还原成为水溶性的黄色甲染料,这样SOD活性通过抑制发生基团的还原来测定。OxiSelect™ Superoxide Dismutase Activity Assay超氧化物歧化酶活性分析试剂盒(货号:STA-340)通过一个可信的方案快速检测,细胞裂解液、血浆、血清以及组织匀浆中的SOD活性。每个试剂盒内包含空白样、SOD标准对照,能完成100次检测。

产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
OxiSelect™ Superoxide Dismutase Activity Assay STA-340 比色法检测,100次分析

上海金畔生物科技有限公司向您推荐Cell BioLabs完整的细胞氧化损伤检测方案,其产品覆盖上述最重要的DNA/RNA损伤分析产品,为您提供最优的检测方案。除了常见的AP位点分析以及8-OHdG/8-OHG定量分析,还有基于单细胞水平的彗星分析和DNA双链断裂分析等。除了DNA/RNA损伤,还包括脂质过氧化过程中壬烯(HNE)、丙二醛(MDA)以及8-异前列腺素F2a(8-Isoprostane)ELISA分析检测试剂盒;对于蛋白质的羰基化、硝基化以及终末氧化蛋白产物分析等蛋白氧化损伤检测方案;针对活性氧基团和抗氧化剂的活力检测,也有多种试剂和试剂盒供您选择。如果您对以上产品感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询氧化应激及损伤相关的实验解决方案,或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

Cytiva思拓凡 多模式填料 RPN3006,印迹分析试剂盒

欢迎访问Cytiva思拓凡官网了解更多信息,上海金畔生物科技有限公司代理Cytiva思拓凡产品,欢迎咨询了解更多产品信息

印迹分析试剂盒

Cytiva 多模式填料 RPN3006

Cytiva思拓凡 多模式填料 RPN3006,印迹分析试剂盒
品牌 厂商性质 产地 货期
Cytiva 生产商 美国 现货

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产品参数
货号 规格 价格(元) 操作
RPN3006 ECL GOLD BUFFER 11786.00 询价
产品介绍

ECL直接核酸标记和检测系统基于在简单的20分钟化学反应中用辣根过氧化物酶(HRP)直接标记DNA或RNA探针。 得到的探针无需纯化即可使用。 通过HRP催化的鲁米诺分解产生光来实现检测。

每个试剂盒足以标记5至10μg核酸并检测2000至4000cm2的膜(取决于订购的产品),包括以下试剂,:标记试剂,交联剂,对照DNA,封闭剂,ECL检测试剂和ECL Gold杂交缓冲液。

Cytiva 多模式填料 RPN3006信息由上海金畔生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于Cytiva 多模式填料 RPN3006报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。

注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途

Collagenase III 胶原酶III型

Collagenase III 胶原酶III型

货号: JP1003-100MG 品牌: Jinpan 标签: 细胞生物学研究

描述

Collagenase III 胶原酶III型

 

产品标签

Collagenase III 胶原酶III;Collagenase NB 4 胶原酶NB4(标准级别);SERVA Electrophoresis;Dispase II 中性蛋白酶;Roche;CAS:9001-12-1;

产品信息

产品名称 产品编号 规格 价格(元)
Collagenase III 胶原酶III型 JP1003-100MG 100mg 740 629[促销]
Collagenase III 胶原酶III型 JP1003-1000MG 1g 3800

产品描述

胶原酶(Collagenase,CAS NO. 9001-12-1)是一种蛋白水解酶,常用来消化细胞外基质蛋白。作为一种肽链内切酶,胶原酶特异性识别Pro-X-Gly-Pro序列(高频出现在胶原collagen,很少在其他蛋白中发现)并切割氨基酸(X)和甘氨酸(Gly)之间的肽键。不同于其他蛋白酶,胶原酶是唯一一种可识别并降解具三股超螺旋结构的天然胶原纤维,这种胶原纤维广泛存在结缔组织。

商业化胶原酶来源于溶组织梭菌(Clostridium histolyticum),是一种酶粗提物,不仅含有梭菌蛋白酶A(Clostridiopeptidase A),能够降解天然胶原和网状纤维;还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等,分别用以水解存在结蹄组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白、多糖和脂质等。目前商业化的胶原酶因所含组分的差异分为五类,其在应用上具有一定区分,详见附录1

本品是III型胶原酶,活性≥100 units/mg冻干物,含较低的次级蛋白酶污染物水解活性,但具典型的胶原酶活性。常用于乳腺组织的原代细胞制备;

产品特性

1)EC NO:3.4.24.3

2)CAS NO:9001-12-1

3)酶活力单位定义:在37℃,pH7.5条件下,5h内水解胶原产生多肽相当于1µmol亮氨酸所需的酶量定义为1个活力单位。(One Unit releases one micromole of L-leucine equivalents from collagen in 5 hours at 37°C, pH 7.5.)

保存与运输方法

保存:2-8℃干燥保存,2年有效。

运输:冰袋运输。

使用方法

一、储存液制备

1)直接往100mg胶原酶内加入100µl含钙镁的HBSS缓冲液,轻轻漩涡震荡确保完全溶解混匀。

2)根据具体批次的酶活力,用含钙镁的HBSS缓冲液调整酶浓度到100U/µl(1000×储存液),之后用低蛋白吸附滤膜过滤除菌。

3)立即使用或将储存液根据单次用量分装,置于-20℃避光保存。

4)使用前置于冰上融化,避免反复冻融。建议胶原酶的工作浓度范围50-200U/ml(或0.5-2.5mg/ml),具体使用浓度请根据具体消化对象或参考文献来调整。

二、组织分离

1)用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4mm小片,之后用含钙镁的HBSS缓冲液清洗组织片几次;

2)加足量含钙镁的HBSS缓冲液浸没组织片,之后按照50-200U/ml用量加入适量胶原酶;

3)37℃孵育4-18h,置于水平摇床并且孵育体系加入3mM CaCl2可提高消化效率。

4)将消化好的细胞混合物用无菌的不锈钢或尼龙网过筛。残留组织可再添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃孵育以进一步解离。

5)将过筛收集到的细胞用不含胶原酶的HBSS缓冲液清洗几遍。

6)低速离心,吸掉清洗液。最后用适当的细胞培养液重悬细胞,使用自动细胞计数器或手动法进行活细胞数检测。

三、器官灌注

1)将胶原酶加入37℃预热含钙镁的HBSS缓冲液,使其浓度为50-200U/ml,或根据具体实验体系调整;另加入3mM CaCl2可提高消化效率。

2)按照针对特定器官的预优化频率来进行灌注;

3)将收集到的细胞/组织混合碎片用无菌的不锈钢或尼龙网过筛。残留组织可再添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃孵育以进一步解离。

4)将过筛收集到的细胞用不含胶原酶的HBSS缓冲液清洗几遍。

6)低速离心,吸掉清洗液。最后用适当的细胞培养液重悬细胞,使用自动细胞计数器或手动法进行活细胞数检测。

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

附录1

表1 几种胶原酶特征和应用比较

胶原酶类型

组分特征和应用

I型胶原(Type 1) 相对均量的多种酶活(包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性);

通常用作上皮组织、肝、肺、脂肪和肾上腺组织的原代细胞制备。

II型胶原酶(Type 2) 含更高的梭菌蛋白酶活性;

通常用作心脏、骨、肝、胸腺、唾液腺和软骨等组织的原代细胞制备。

III型胶原酶(Type 3) 含较低的次级蛋白酶水解活性;常用于乳腺组织的原代细胞制备;
IV型胶原酶(Type 4) 含较低的胰酶活性;通常用于胰岛细胞制备,和维持受体完整性比较重要的其他研究。

也可用于髓系细胞制备。

V型胶原酶(Type 5) 部分纯化型,含更高的胶原酶和酪蛋白活性,更低胰酶水平以降低对膜蛋白和受体造成损伤。

适用于胰岛制备。

胶原酶NB(标准级别) 相对均量的多种酶活(包括胶原酶、梭菌蛋白酶、中性蛋白酶活性),作用温和。

广谱适用人和动物组织各种细胞的分离,可用作脂肪组织、软骨、皮肤、胎盘、

脐带组织和肺的原代细胞制备;也适用细胞传代,比如胚胎干细胞。

相关产品

产品编号 产品名称 规格 价格(元)
JP1001-100MG Collagenase I 胶原酶I型 100mg 280
JP1002-100MG Collagenase II 胶原酶II型 100mg 280
JP1003-100MG Collagenase III 胶原酶III型 100mg 740
JP1004-100MG Collagenase IV 胶原酶IV型 100mg 280
JP1005-100MG Collagenase V 胶原酶V型 100mg 520
JP1011-100MG Collagenase NB 4 Standard Grade 胶原酶NB4标准级别 100mg 280
JP1006-100MG Dispase II 分散酶II(中性蛋白酶) 100mg 480

— —Written/Edited by V. Shallan【版权归JP金畔所有】

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

9001/12/1

规格:

100mg

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