Chicken IgY Purification Kit (10 Egg yolks)

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Chicken IgY Purification Kit (10 Egg yolks)，产品型号：IGY-1910。

Chicken IgY Purification Kit (10 Egg yolks)，

储藏条件 

所有试剂在 4oC 下可稳定保存长达 1 年。 

 一般建议

1. 鸡蛋可在 4°C 下长期保存，但建议在使用本试剂盒分离 IgY 之前将鸡蛋打碎。分离后的蛋黄可在 4°C 的 0.05% 中储存数天，而 IgY 回收率不会有任何明显损失。不应将蛋黄冷冻储存以用于此试剂盒。

2. 蛋黄中的脂质含量差异很大，有时破损步骤不会产生清澈的上清液。在这种情况下，可以添加更多体积的试剂 A 以破坏蛋黄。

IgY 纯化试剂盒 – 如何从蛋黄中纯化 IgY 抗体

IGY 的分离和纯化步骤很简单，在室温下进行。

1. 使用蛋黄分离器将新鲜鸡蛋打碎并分离蛋黄。蛋黄被刺破释放出蛋黄内容物，可以使用牙签轻松去除膜。

2. 对于新鲜蛋黄，在持续搅拌下加入 5 倍体积的试剂 A 的蛋黄重量。注意：如果蛋黄放置 3 天或以上且未冷冻，建议使用 6 倍体积的试剂 A。不建议使用此试剂盒使用冷冻蛋黄。

3. 加入所有试剂后，会形成浓稠的黄色沉淀。继续搅拌 10 分钟，并将内容物在 4 ° C 下孵育过夜。沉淀物将沉淀下来，1-2 小时内可以看到澄清的上清液。

4. 将内容物在冷摇摆式离心机中于 4 ° C以 3500-4000Xg 离心 30 分钟。

5. 将澄清的上清液倒入预冷的烧杯中，并在不断搅拌下缓慢加入等体积的试剂 B。继续搅拌 10 分钟，并将混合物在 4 ° C 下放置 2-4 小时至过夜。1-2 小时内，底部会出现透明的白色沉淀物。

6. 将内容物在 4°C 下以 4000xg 离心 20 分钟以收集白色沉淀物。

7.  小心去除所有液体，并使用以下公式在抗体重组缓冲液中重组白色颗粒。对于 10 克蛋黄，添加 2 至 2.5 毫升的抗体重组缓冲液。

8. 通过在 280 处测量 1:20 稀释的 OD，按内容量化 IgY。 

9. 总 IgY 可按 1:1 的比例保存在抗体稳定缓冲液中，可在 -40°C 或以下长期保存。 

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