N-(6-Phenylhexyl)-5-chloro-1-naphthalenesulfonamide(CAS:102649-78-5)

N-(6-Phenylhexyl)-5-chloro-1-naphthalenesulfonamide(CAS:102649-78-5)

Activates protein kinase C in a Ca2+-dependent manner, via a mechanism similar to that of phosphatidylserine.

货号: P330000 品牌: TRC 标签: 生化试剂;金畔生物;有机试剂;

规格信息

品牌:

TRC

CAS:

102649-78-5

规格:

5mg

货期:

国外现货,4-5周

Y2HGold Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌

Y2HGold Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌

货号: MF2351-300UL 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学

描述

Y2HGold Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌

温馨提示

见我司(金畔生物)整理的酵母双杂交(Yeast two-hybrid assay)产品专题。

产品标签

Matchmarker GAL4双杂交系统;Y2HGold;pGBKT7;Y187;pGADT7;AUR1-C;Aureobasidin A(AbA);金担子素;

产品信息

    产品名称     产品编号     规格                 价格(元)     
    Y2HGold Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌          MF2351-300UL           300μl

    750

产品描述

酵母双杂交系统是用于体内研究蛋白相互作用的一种非常便利的工具,常用的如GAL4为基础的双杂交系统,使用酵母转录因子GAL4来检测转录激活后的蛋白相互作用。工作原理为:一个完整的酵母转录因子GAL4由两个可以分开,功能上相互独立的结构域组成,N端有一个147个氨基酸组成的DNA结合域(DNA- BD),C端有一个由113个氨基酸组成的转录激活域(AD)。DB可以识别并结合上游激活序列(UAS),而AD能激活UAS下游基因进行转录,单独的BD或AD不能激活基因转录。正常情况,BD和AD不会结合,将待检测的蛋白质分别与BD和AD融合,形成诱饵融合蛋白(bait-DNA)和诱捕融合蛋白(prey-DNA),只有当诱饵和诱捕蛋白发生相互作用,促使BD和AD的相互接近,形成完整的GAL4,从而激活报告基因的转录。

Y2HGold是GAL4系统酵母双杂交用实验菌株,能直接转化质粒或与MATα型酵母菌株Y187通过接合(mating)操作进行蛋白相互作用验证或双杂交文库筛选和构建。Y2HGold-GAL4酵母双杂交系统需要两种质粒配套使用,分别为pGBKT7和pGADT7。前者筛选标志为Trp,用于表达DNA-BD与诱饵蛋白(bait)的融合蛋白;后者筛选标志为Leu,用于表达AD与诱捕蛋白(prey)的融合蛋白。Y2HGold有四个报告基因:AUR1-C,HIS3, ADE2, MEL1,分别由三个完全异源的Gal4反应启动元件-G1,G2,M1调控,这三种启动子只有GAL4识别的17bp核心区相同,其余部分都不同。这一特征有效缩减假阳性发生的概率。因为,任何诱捕蛋白单独结合引起假阳性都需要识别3个不同序列,激活4个报告基因表达。另外,新报告基因AUR1-C与以往的营养缺陷报告基因相比,其筛选抗生素-金担子素(Aureobasidin A,AbA)可以有效杀死非抗性克隆,大大降低背景克隆的生长。具有更低背景,这一优势也可降低酵母双杂交假阳性发生的概率。

基因型

MATa, trp1-901, leu2-3, 112, ura3-52, his3-200, gal4Δ, gal80Δ, LYS2::GAL1UAS-Gal1TATA-His3, GAL2UAS-Gal2TATA-Ade2 URA3::MEL1UAS-Mel1TATAAUR1-C MEL1

基本信息

培养基:YPDA

培养条件:28℃,YPDA,有氧培养

保存方式:30%甘油,-20℃保存

转化方式:PEG/LiAC;电激;

基本应用:酵母双杂交实验

保存与运输方法

保存:-20℃保存,一年有效。

运输:干冰运输。

使用说明

金畔生物提供的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品三个月内通知我司。收到甘油菌后,请及时在固体平板上划线培养,挑取单菌落接种到液体培养基中,震荡培养后使用并保存新的甘油菌。

注意事项

1.使用甘油菌时可不完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂布固体琼脂平板即可;也可完全融解后使用,但随着冻融次数的增加,菌株的活力会逐渐下降。

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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货号 名称 规格
MF2351-300UL           Y2HGold Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 300μl
MF2352-1000UL Y2HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞     10×100μl       
MF2353-300UL Y187 Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 300μl
MF2354-1000UL Y187 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2355-300UL AH109 Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 300μl
MF2356-1000UL AH109 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2501-200T Yeast Transformation Kit 酵母转化试剂盒 200T
JP6303-350G YPDA Agar Medium YPDA琼脂培养基 350g
JP6304-250G YPDA Medium YPDA液体培养基 250g

 

 

 

 

 

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

N/A

规格:

300μl

货期:

咨询客服

植物高尔基体提取试剂盒-非酶法BS-11086


植物高尔基体提取试剂盒-非酶法

  • 产品型号:BS-11086
  • 简要描述:植物高尔基体提取试剂盒-非酶法金畔生物公司供应:ELISA试剂盒,荧光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量离心管,进口冻存管,细胞培养皿,培养板,培养瓶,吸头,仪器及手套,色谱耗材,针头过滤器。
产品咨询在线客服
  • 产品简介

植物高尔基体提取试剂盒-非酶法

植物高尔基体提取试剂盒

试剂盒储存条件:

【注】:2-8℃ 保存。

试剂瓶开盖后各组份按要求条件保存。

拆封后请尽快使用完!

试剂盒组成:

产品组成 组份编号 有效期:

规格 50T 100T

试剂

A:高尔基体提取液A 25ml 40ml 36042A

试剂

B:高尔基体提取液B 25ml 50ml 36042B

试剂

C:试剂WT 1ml 1ml 36042C

试剂

D:高尔基体保存液D 10ml 20ml 36042D

使用说明书一年。

植物高尔基体提取试剂盒-非酶法

【注】:

有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。

试剂拆封后请尽快使用完!

注意事项:

1.正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,取得最佳实验效果。

2.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。

3.禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。

4.样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。

5.最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。

6.实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

产品简介:

试剂盒以外自备仪器和试剂耗材:

植物高尔基体提取试剂盒提供全套试剂,适用于从各种新鲜植物组织样本中提取高尔基体。

本试剂盒提取的高尔基体具有完整的活性和功能,可以用于各种下游应用。

除了高尔基体提取试剂盒,还有细胞核提取、线粒体提取等各种亚细胞结构的提取试剂盒以及相关的蛋白质提取试剂盒。

试剂盒以外自备仪器和试剂耗材:

植物高尔基体提取试剂盒提供全套试剂,适用于从各种新鲜植物组织样本中提取高尔基

体。

本试剂盒提取的高尔基体具有完整的活性和功能,可以用于各种下游应用。

除了高尔基体提取试剂盒,还有细胞核提取、线粒体提取等各种亚细胞结构的提取试剂

盒以及相关的蛋白质提取试剂盒。

仪器:

离心机

振荡器

涡旋混匀器

Dounce匀浆器

移液器

冰箱

冰盒

试剂:PBS (pH7.4,实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液(1X)) (phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS:约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mMNaCl和3mM KCl)

耗材: 离心管 吸头

使用方法:

使用注意事项:

旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液洒落。实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。最好使用 Dounce 匀浆器匀浆,如果没有 Dounce 匀浆器,用普通玻璃匀浆器匀浆也可,但是高尔基体回收率会下降。

1. 取 200-500mg 新鲜植物叶片组织样本,用 PBS 洗涤干净。

2. 用剪刀尽可能剪碎,用冷 PBS 洗涤两次。

植物高尔基体提取试剂盒-(非酶法

【注】:

也可用刀片将叶片样本切成小块。

3. 加入 500μl 冷的试剂 A,置冰上 10 分钟。

4. 用 Dounce 匀浆器充分匀浆 30-40 次。

【注】:

 每上下一个来回为一次。

 也可以用电动匀浆机充分匀浆。

5. 将匀浆液在 4℃,1000g 力条件下离心 10 分钟。弃沉淀,收集上清。

6. 将上清在 4℃,3000g 力条件下离心 10 分钟。弃沉淀,收集上清。

7. 将上清在 4℃,6000g 力条件下离心 10 分钟。弃沉淀,收集上清。

8. 在上清中加入 10ul 试剂WT,在 4℃,50000g 力条件下离心 20 分钟。

【注】:

 没有 50000g 离心条件,可以降低离心力。

 至少要保证 20000g 以上离心力。

 降低离心力后高尔基体回收率会下降。

9. 弃上清,在沉淀中加入 500μl 冷的试剂 B,混匀。

10. 在 4℃,50000g 力条件下离心 30 分钟。弃上清,收集沉淀。

【注】:

 没有 50000g 离心条件,可以降低离心力。

 至少要保证 20000g 以上离心力。

 降低离心力后高尔基体回收率会下降。

11. 沉淀用高尔基体保存液重悬保存或直接用于下游实验应用。

【注】:

可以不用试剂盒中提供的保存液。

根据实验需要用自己的其他缓冲液保存或直接用于下