(Phenylthio)methyltriphenylphosphonium Chloride(CAS:13884-92-9)
A Wittig reagent.
货号: P337000 品牌: TRC 标签: 生化试剂;金畔生物;有机试剂;
规格信息
品牌: |
TRC |
---|---|
CAS: |
13884-92-9 |
规格: |
250mg |
货期: |
国外现货,4-5周 |
(Phenylthio)methyltriphenylphosphonium Chloride(CAS:13884-92-9)
A Wittig reagent.
货号: P337000 品牌: TRC 标签: 生化试剂;金畔生物;有机试剂;
品牌: |
TRC |
---|---|
CAS: |
13884-92-9 |
规格: |
250mg |
货期: |
国外现货,4-5周 |
AH109 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞
货号: MF2356-1000UL 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学
AH109 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞
温馨提示
见我司(金畔生物)整理的酵母双杂交(Yeast two-hybrid assay)产品专题。
产品标签
Matchmarker GAL4双杂交系统;Y2HGold;pGBKT7;Y187;pGADT7;AUR1-C;Aureobasidin A(AbA);金担子素;
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
AH109 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 | MF2356-1000UL | 10×100μl | 290 |
MF2356-5000UL | 50×100μl | 1320 |
产品包装
组分编号 | 组分名称 | 保存 |
货号(规格) |
|
MF2356-1000UL | MF2356-5000UL | |||
MF2356-A | AH109 Chemically Competent Cell | -80℃ | 10×100μl | 50×100μl |
MF2356-B | pGADT7 Control Vector (10ng/μl) | -80℃ | 10μl | 10μl |
MF2356-C | Carrier DNA (5μg/μl) | -20℃ | 100μl | 500μl |
MF2356-D | PEG/LiAC Solution | +4℃ | 5ml | 25ml |
保存与运输方法
保存:其中感受态细胞按标签注明置于-80℃保存,三个月有效。其他组分按照标签注明保存,一年有效。
运输:干冰运输。
产品描述
酵母双杂交系统是用于体内研究蛋白相互作用的一种非常便利的工具,常用的如GAL4为基础的双杂交系统,使用酵母转录因子GAL4来检测转录激活后的蛋白相互作用。工作原理为:一个完整的酵母转录因子GAL4由两个可以分开,功能上相互独立的结构域组成,N端有一个147个氨基酸组成的DNA结合域(DNA- BD),C端有一个由113个氨基酸组成的转录激活域(AD)。DB可以识别并结合上游激活序列(UAS),而AD能激活UAS下游基因进行转录,单独的BD或AD不能激活基因转录。正常情况,BD和AD不会结合,将待检测的蛋白质分别与BD和AD融合,形成诱饵融合蛋白(bait-DNA)和诱捕融合蛋白(prey-DNA),只有当诱饵和诱捕蛋白发生相互作用,促使BD和AD的相互接近,形成完整的GAL4,从而激活报告基因的转录。
AH109是GAL4系统酵母双杂交用实验菌株,来源于PJ69-2A酵母菌株,引入lacZ报告基因从而产生AH109。AH109是MATa型,能直接转化质粒或与MATα型酵母菌株Y187通过接合(mating)操作进行蛋白相互作用验证或双杂交文库筛选和构建。AH109-GAL4酵母双杂交系统需要两种质粒配套使用,分别为pGBKT7和pGADT7。前者筛选标志为Trp,用于表达DNA-BD与诱饵蛋白(bait)的融合蛋白;后者筛选标志为Leu,用于表达AD与诱捕蛋白(prey)的融合蛋白。AH109有四个报告基因:lacZ,HIS3, ADE2, MEL1,分别由三个完全异源的Gal4反应启动元件-G1,G2,M1调控,这三种启动子只有GAL4识别的17bp核心区相同,其余部分都不同。这一特征有效缩减假阳性发生的概率。因为,任何诱捕蛋白单独结合引起假阳性都需要识别3个不同序列,激活4个报告基因表达。
本品为经特殊工艺制备的AH109酵母菌化学感受态细胞,用pGADT7质粒检测转化效率>104cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存三个月。
基因型
MATa, trp1-901, leu2-3, 112, ura3-52, his3-200, gal4Δ, gal80Δ, LYS2::GAL1UAS-Gal1TATA-His3, MEL1GAL2UAS-Gal2TATA-Ade2, URA3::MEL1UAS-MEL1TATA-lacZ
注意事项
1. 最好在冰上融化感受态细胞。
2. 转化高浓度质粒可相应减少用于涂板的菌量。同时转化2-3种质粒可适当增加质粒的用量。
3. AH109对高温敏感,最适生长温度为27-30℃,一旦高于31℃,生长速度和转化率都呈指数下降。
4. 菌落变粉红色并不是污染,而是酵母细胞生长中的一种常见现象。当酵母细胞在平板上培养几天,将平板内的腺嘌呤消耗殆尽,那时酵母试图通过自身代谢途径合成腺嘌呤以供利用。然而,某些菌株ADE2基因被破坏,腺嘌呤合成受阻。且ADE4,5,6,7,8基因均正常。由此,造成中间产物P-ribosylamino imidazole(AIR)在细胞的积累使得菌落变为粉红色。
5. 酵母菌在缺陷培养基上生长速度比YPDA培养基慢,营养缺陷成分越多,生长越慢,以转化涂板为例:涂YPDA平板于29℃,48h培养可见直径1mm克隆;涂SD单缺平板于29℃,48-60h培养可见直径1mm克隆;涂SD双缺平板于29℃,60-80h培养可见直径1mm克隆;涂SD三缺或四缺平板于29℃,80-90h培养可见直径1mm克隆;
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 取100 µl冰上融化的AH109化学感受态细胞,依次加入预冷的目的质粒2-5 µg,Carrier DNA(95-100℃孵育5 min,快速冰浴。重复一次。)10 µl,PEG/LiAc 500µl,用枪吹打几次充分混匀,30℃水浴30 min(在15min时翻转6-8次混匀)。
2. 之后将管子放42℃水浴15 min(在7.5min时翻转6-8次混匀)。
3. 5000 rpm离心40s弃上清,用400 µl ddH2O重悬沉淀,离心30s弃上清。
4. 用50 µl ddH2O重悬,涂板,放入29℃培养48-96 h。
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品牌: |
Jinpan |
---|---|
CAS: |
N/A |
规格: |
10×100μl |
货期: |
咨询客服 |
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货号: 16350 品牌: AAT Bioquest 标签: 有机试剂
品牌: |
AAT Bioquest |
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CAS: | |
规格: |
200 Tests |
货期: |
5-7天(参考) |
ImmPRESS? Duet Kit (Anti-Mouse IgG/Anti-Rabbit IgG) (15ml) 货号: MP-7724-15 品牌: Vectorlabs 标签: 免疫学研究
品牌: |
Vectorlabs |
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CAS: |
N/A |
规格: |
15ml |
货期: |
现货3天 期货30天 |
核酸提取耗材/PCR管/PCR板系列/PCR单管上海金畔生物科技有限公司供应:移液器吸嘴,ELISA试剂盒,动物血清,全系荧光定量PCR耗材,产品包括:PCR单管、八联管、96孔板、384孔板。
PCR耗材容量有0.1ml和0.2ml两种,颜色有透明和白色两种,型号有单管、8联管、12联管,适用普通PCR和qPCR反应
【产品特点】
无DNA酶和RNA酶,无DNA和RNA
顶级高精度模具充分保证管壁超薄均匀及产品的均一性,并具备的热传导效应,使管内反应液以最快的速度达到目标温度,促进样品扩增
15.4mm矮管设计降低由冷凝液造成的污染,锥形管的凸边设计有效地保证密封性,预防交叉污染
优质材料和先进处理工艺制造,平盖光损极低,适用于荧光定量PCR
无热解析出物,无内毒素
适用于大多数自动化实验仪器
有方向孔,易于辨别方向
产品编号 | 颜色 | 尺寸 | 产品名称 | 包装规格 | 适配机型 |
203001 | 透明 | 15.7+0.8 | 0.1mlPCR8联管&光学平盖 | 125条/盒,10盒/箱,1250条/箱 | ABI 7500 Fast/Stepone, Bio-Rad CFX96 Roche 480,Roche Nano |
203011 | 白色 | 15.7+0.8 | 0.1mlPCR8联管&光学平盖 | 125条/盒,10盒/箱,1250条/箱 | ABI 7500 Fast/Stepone, Bio-Rad CFX96 Roche 480,Roche Nano |
204001 | 透明 | 20.7+0.8 | 0.2mlPCR8联管&光学平盖 | 125条/盒,10盒/箱,1250条/箱 | ABI 7500/7900,Bio-Rad iQ5, Stratagene Mx3000PTM/ Mx3005PTM |
204011 | 白色 | 20.7+0.8 | 0.2mlPCR8联管&光学平盖 | 125条/盒,10盒/箱,1250条/箱 | ABI 7500/7900,Bio-Rad iQ5, Stratagene Mx3000PTM/ Mx3005PTM |
CP4000 | 透明 | 15.8+0.8 | 0.1mlPCR12联管&光学平盖 | 125条/盒,10盒/箱,1250条/箱 | |
CP4001 | 白色 | 15.8+0.8 | 0.1mlPCR12联管&光学平盖 | 125条/盒,10盒/箱,1250条/箱 | |
CP4010 | 透明 | 20.7+0.8 | 0.2mlPCR12联管&光学平盖 | 125条/盒,10盒/箱,1250条/箱 | |
CP4011 | 白色 | 20.7+0.8 | 0.2mlPCR12联管&光学平盖 | 125条/盒,10盒/箱,1250条/箱 |
核酸提取耗材/PCR管/PCR板系列/PCR单管金畔一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。金畔!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。
温馨提示:不可用于临床治疗。